Abstrakt

Bakgrund/Mål:Hyaluronan (HA) oligosackarider är involverade i flera biologiska processer, främst kollagenombyggnad och sårläkning. Kollagenremodellering är försenad i åldrande hud och orsakar rynkor. Denna studie syftade till att utvärdera effekten av 2-kDa HA-oligosackarider (HA2k) på rynkor genom genomträngning genom stratum corneum och främjande av kollagenombyggnad.

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en stark rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranets funktion. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en god renande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenerationen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinacoside i Cistanche en betydande förmåga att avlägsna DPPH-fria radikaler och har förmågan att avlägsna reaktiva syrearter och förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning, och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tymin-fria radikaler.

Klicka för att se antioxidantprodukter

【För mer information: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Metoder:En 3D-hudmodell och utskuren mänsklig hud användes för att utvärdera genomträngningen av fluoresceinmärkt HA2k. Effekten av HA2k på kollagenmetabolism utvärderades genom att mäta proteinnivån för typ 1 pro-kollagen (COL1A1) och matrismetalloproteinas-1 (MMP-1) i 3D-hudmodellen. 0.1 procent HA2k-lösning och vehikelkontroll applicerades på den mänskliga underarmen i 8 veckor för att utvärdera dermal kollagendensitet. För att utvärdera effekten av HA2k på djupet av ansiktsrynkor genomfördes en randomiserad kontrollerad studie med 0.1 procent HA2k-lotion och fordonslotion under 8 veckor.

Resultat:HA2k bekräftades tränga igenom stratum corneum genom fluorescerande mikroskopi. Både COL1A1 och MMP-1 uppreglerades av HA2k-applikation i en 3D-hudmodellkultur. Kollagendensiteten var högre för den HA2k-behandlade underarmen än för den vehikelkontrollbehandlade underarmen efter 4 veckor. De maximala rynkdjupen i nasolabialvecket och kråkfötsområdet var signifikant grundare i HA2k-lotiongruppen än i kontrollgruppen.

Slutsats:HA2k genomsyrade stratum corneum, aktiverade kollagensyntes och nedbrytning samtidigt, och förbättrade rynkor.

NYCKELORD

anti-aging, cellodling, kollagenombyggnad, mänsklig studie, hyaluronan

1|INTRODUKTION

Den extracellulära matrisen (ECM) är en sammansättning av makromolekyler, inklusive proteiner och glykosaminoglykaner, som ger mekaniskt stöd till omgivande celler. I dermal vävnad bidrar ECM till hudens fysiska egenskaper. Till exempel bidrar kollagen, den primära komponenten i dermal ECM, till hudens integritet, elasticitet och jämnhet.1 Fysiologiskt upprätthålls hudkollagen genom nedbrytning av gammalt kollagen och återsyntes av nytt kollagen i en process som kallas kollagen remodeling.2 Emellertid kan cykeln av kollagen ommodellering försenas i åldrande hud, vilket resulterar i rynkor, slapphet och minskad elasticitet.3 Dessa problem är signifikant relaterade till en persons högre upplevda ålder än faktiska ålder. Därför är kollagenombyggnad ett lovande mål för anti-aging. Ett tillvägagångssätt som potentiellt riktar sig mot ECM kan vara bättre för att hantera dessa problem eftersom ytliga tillvägagångssätt inte påverkar ECM. Micro-needling är ett sätt som riktar in sig på ECM för att främja dermal kollagenombyggnad; det är dock en relativt invasiv metod.

Hyaluronan (HA), en biologiskt härledd polysackarid, är också en komponent i ECM. HA upptäcktes först i ögats glaskropp och senare i ledvätskan, navelsträngen och huden. Molekylvikten för HA skiljer sig beroende på typ av vävnad och dess biologiska tillstånd, från 1 kDa till 3000 kDa.4 HA i huden finns i allmänhet i ett högmolekylärt tillstånd, och på grund av dess höga viskoelasticitet och vatten- HA fungerar som en kudde, smörjmedel och fuktighetskräm. HA med hög molekylvikt används därför inom kosmetika för att upprätthålla vattenhalten i stratum corneum. Eftersom makromolekyler har mycket begränsad permeabilitet genom huden har det gjorts några försök att förbättra HA-permeabiliteten genom att bryta ned HA till små fragment, som har bekräftats tränga igenom stratum corneum.5

Förutom fysisk funktion har den biologiska funktionen av HA varit ett aktuellt forskningsämne. Några anmärkningsvärda rapporter har publicerats om HA:s biologiska funktion som en del av stamcellsnisch6 och den extraordinära livslängden hos nakna mullvadsråttor. Molekylvikten för HA måste beaktas när dess biologiska funktioner diskuteras. HA i huden finns i allmänhet i ett högmolekylärt tillstånd och upprätthåller enligt uppgift vävnadsstabilitet. Däremot aktiverar HA med låg molekylvikt flera biologiska processer.7 I tidigare rapporter uppreglerade HA-tetrasackarid syntesen av HA och typ I-kollagen i samodlade keratinocyter och fibroblaster,8 inducerade differentieringsmarkörer i keratinocyter,9 och förbättrade skadorna i en ultraviolett-A-bestrålad mus.5 Speciellt främjar oligosackarider under 10 kDa primärt sårläkningsprocesser, såsom ECM-syntes,9 angiogenes, cellulär migration och proliferation. Sårläkning och kollagenombyggnad är nära besläktade, och en 12-mer (dvs cirka 2 kDa) av HA uppreglerar kollagen typ I och matrismetalloproteinas 1 (MMP-1) samtidigt i odlade fibroblaster, men effekten på människor återstår att klargöra.

Det har förekommit några rapporter om HA-kosmetika som visade anti-rynkeffekter. En hudkräm med 50-kDa HA förbättrade rynkdjupet hos kvinnliga försökspersoner i åldern 30–60 år i en randomiserad halvsidesjämförelsestudie.10 En öppen studie visade att mimikroniserad HA-kräm applicerades topiskt på 35 –65-åriga försökspersoner, vilket resulterade i en förbättring av frågeformulärpoängen på rynkdjup.11 I dessa studier föreslogs den höga permeabiliteten hos lågmolekylärt HA vara en verkningsmekanism, även om det hade inga data om mänsklig hud. Dessutom återstår effekten av HA-fragment på kollagentätheten hos människor att klargöras.

Vi antog att HA-oligosackarider tränger igenom stratum corneum, främjar kollagenombyggnad och förbättrar rynkor som en anti-aging effekt. Denna studie syftade till att utvärdera effekterna av 2-kDa HA (HA2k) på kollagenombyggnad och hudtillstånd via in vitro- och in vivo-studier. Först utvärderades permeation av HA2k i en rekonstituerad hudmodell och human utskuren hud. Därefter utvärderades effekterna på kollagenombyggnad in vitro och humana försökspersoner. Slutligen utfördes en randomiserad halvsidesjämförelse av HA2k-innehållande hudlotion och kontrolllotion bland 21 försökspersoner för att bedöma effekterna på hudrynkor.

2|MATERIAL OCH METODER

Denna studie genomfördes av Helsingforsdeklarationen och godkändes av Medical Ethics Committee of Kewpie Corp. och DERMAPRO Ltd. Institutional Review Board, med godkännandenummer 17–4 respektive 1-220 777-AN-02-DICN18228 . Denna studie genomfördes med försökspersonernas frivilliga samtycke.

2.1|Reagens

HAbooster™, ett HA2k-reagens av kosmetisk kvalitet, erhölls från Kewpie Corp. (Japan).

2.2|Hudgenomträngning av HA2k i tredimensionell odlad mänsklig epidermis och utskuren mänsklig hud

Permeation av HA2k utvärderades genom att använda en diffusionscell av Franz-typ, enligt en tidigare rapport.12 Fluoresceinmärkta (Fl-) HA-prover preparerades kl.<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|Utvärdering av kollagenmetabolism i en 3D-hudmodell och utskuren mänsklig hud

En 3D-hudmodell användes för att utvärdera effekterna av HA2k på kollagenmetabolism.13 I korthet odlades en fulltjockleksmodell (EFT-412, Mat Tek) innefattande keratinocyter och fibroblaster i en 8 ug/ml HA2k- innehållande medium. Efter 48 timmar samlades det konditionerade mediet och enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) nivåerna av typ 1 pro-kollagen (COL1A1) och MMP-1 mättes. Vävnaden bearbetades för immunhistologisk analys. Kollagen i vävnader bedömdes genom att använda COL1A1 immunhistokemisk färgning på vävnadsglasen av formalinfixerade paraffininbäddade sektioner. Sektionerna behandlades med proteinas K under 10 minuter vid 37 grader för att återvinna antigen. Efter blockering inkuberades de anti-COL1A1 monoklonala antikropparna (Abcam,) vid 4 grader över natten. Objektglasen inkuberades sedan med Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Rabbit IgG (Abcam) vid rumstemperatur i 2 timmar. Kärnan motfärgades med propidiumjodid. Sektionerna observerades under ett fluorescerande mikroskop.

2.4|Utvärdering av hudens kollagendensitet, fukt och tomografi hos människor

HA2k applicerades topiskt på mänsklig hud för att utvärdera dess funktion som en aktiv ingrediens. Åtta försökspersoner (två kvinnor och sex män; ålder 26–39 år) deltog frivilligt i studien. Deras underarmar delades upp i två områden som mätte 2 cm × 2 cm för att proverna skulle appliceras två gånger om dagen. 0,1 procent av HA2k-lösningen och fordonskontrollen applicerades separat på de två områdena. Vid 0, 4 och 8 veckor utvärderades kollagenpoängen, hudens fuktighet och hudens strävhet. Försökspersonerna acklimatiserades under en kontrollerad atmosfär vid 23 grader ± 1 grad och en relativ fuktighet på 55 procent ± 2 procent under 20 minuter. Denna acklimatiseringsperiod följdes av mätning.

2.5|Utvärdering av kollagenpoäng

Ultraljud användes för att mäta hudens kollagendensitet (DermaLab, Cortex Technology, Danmark).14 Sonden applicerades på HA2k-lotionen och vehikelkontrollställena för att mäta kollagenpoängen. Totalt fem punkter, bestående av de fyra hörnen och mitten av varje plats, mättes och medelvärdet beräknades.

2.6|Utvärdering av hudens fuktighet

Hudens fukt mättes med hjälp av impedansmetoden (SKICON, Yayoi,).15 Sonden applicerades på utvärderingsstället för att mäta hudens fuktighet. Totalt fem punkter vid de fyra hörnen och mitten mättes. Medelvärdet beräknades.

2.7|Utvärdering av hudens grovhet

Hudens grovhet mättes genom visuell analys (VisioScan, Courage plus Khazaka Electronic, Tyskland).16 Bilder togs i de fyra hörnen och analyserades av programvaran. Medelvärdet beräknades.

2.8|Utvärdering av hudens rynkor, slapphet och elasticitet hos människor

Med tanke på att dermalt kollagen rapporteras vara associerat med rynkor, slapphet och elasticitet i huden, utvärderades appliceringen av HA2K i kosmetiska produkter. Tjugoen försökspersoner registrerades enligt följande kriterier: friska kvinnor med milda till måttliga rynkor genom visuell och fotobedömning från rynkor 1–3 enligt Japanese Cosmetic Science Societys riktlinjer för rynkgradering, med nasolabialveck, varken gravida inte ammande, och inte ha känslig eller överkänslig hud. Under denna testperiod använde försökspersonerna inga kosmetiska produkter, skönhetsverktyg eller hudvårdsprocedurer förutom testartikeln. Provprodukterna som tillhandahålls som lotion applicerades två gånger dagligen (morgon och kväll). Formuleringarna av lotionerna visas i tabell 1. Efter ansiktstvätt applicerades lotionerna, följt av en avsedd mjölkig lotion och kräm, om nödvändigt. HA2k-lotion applicerades på ena sidan och kontrollprodukten applicerades på den andra sidan. Försökspersonerna undersöktes med ett 3D-bildanalyssystem för att bedöma kråkfötter, nasolabialveck, slapp hud och elasticitet vid baslinjen (0 veckor), 4 veckor och 8 veckor efter behandling. Alla mätningar utfördes under en given relativ temperatur (20 grader –24 grader) och luftfuktighet (45 procent –55 procent).

2.9|Mätning av rynkparametrar

Skrynkparametrarna för kråkfötterna och nasolabialvecket utvärderades genom visuell analys (PRIMOS® Premium and Lite, GFMesstechnik,).17 Bilden analyserades i samma område vid baslinjen, 4 och 8 veckor efter behandling med hjälp av programvara (Primos) 5.8 E ver.).

2.10|Mätning av hudens elasticitet

Hudens elasticitet mättes med sugmetoden (Cutometer® MPA580, Courage plus Khazaka electronic,) enligt en tidigare rapport.18 Kortfattat drogs huden in i sondens öppning vid 450 bar under 2 sekunder. Därefter stängdes undertrycket av i 2 s och huden fick återgå till sin ursprungliga form. Tre repetitioner i en mätcykel utfördes. Hudens elasticitet på kinden analyserades med R2-parametrar vid baslinjen, 4 och 8 veckor efter behandling.

2.11|Mätning av slapp hud

Hudslappning på kinden utvärderades genom att använda Moire-topografimetoden (F-ray®, Beyoung,),19 som är en tredimensionell morfometrisk metod där konturkartor framställs från de överlappande interferensfransar som skapas när ett objekt belyses av sammanhängande ljus. Moire-mönstret på kinden togs och vinkeln som skapades genom att rita två linjer i slutet av näsan analyserades med hjälp av programvara (Image-Pro Plus®, MediaCybernetics,) vid baslinjen, 4 och 8 veckor efter behandlingen.

2.12|Statistisk analys

Statistisk analys utfördes med hjälp av SPSS®-programvaran (IBM,). Mann-Whitney U-testet utfördes för att utvärdera effekten av HA2k på kollagenombyggnad in vitro. Effekten av HA2k på kollagen hos människor analyserades genom att använda det parade t-testet. I humanstudier som utvärderade effekten av HA2k på rynkor, slapphet och elasticitet i huden, användes Shapiro–Wilks-testet eller kurtosis och skevhet för normalitetstestning. Statistisk analys av parametriska variabler utfördes genom att använda upprepade mätningar ANOVA. Om värdet var icke-parametriskt jämfördes alla initialt med Wilcoxon signed-rank test med Bonferroni-korrigering. Statistisk analys för jämförelse mellan platser utfördes genom upprepade åtgärder ANOVA eller ANCOVA med användning av variationsvärdet från baslinjen till 4 och 8 veckor efter behandling. Ett p-värde på<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|RESULTAT

3.1|Hudgenomträngning av HA2k

I en 3D-hudmodell passerade fluoresceinmärkt HA2k genom stratum corneum (Figur 1), medan 8-kDa HA inte gjorde det. I mänsklig hud penetrerade fluoresceinmärkt HA2k dermis. 1000- kDa HA passerade inte genom stratum corneum. Dessa resultat indikerar att jämfört med HA med högre molekylvikt hade HA2k hög dermal permeabilitet.

3.2|Effekt av HA2k på kollagenmetabolism

I en 3D-hudmodell uppreglerades proteininnehållet i både COL1A1 och MMP-1 i det konditionerade mediet genom HA2k-tillsats (Figur 2). Därför antogs HA2k samtidigt främja produktionen av COL1A1 och MMP-1.

3.3|Effekt av HA2k på kollageninnehåll och hudstatus hos människor

I humanstudier var dermala kollagenpoäng högre efter 4 veckor på platsen där 0,1 procent HA2k-lösning hade applicerats än på platsen där kontrolllösningen hade applicerats (Figur 3). Dessutom var statusen för hudens vattenhalt och hudens strävhet bättre efter 8 veckor på platsen som behandlades med HA2k-lösningen än på platsen som behandlades med kontrolllösningen. Därför föreslogs det att HA2k främjar kollagenproduktionen i mänsklig hud och förbättrar dess tillstånd.

3.4|Effekt av HA2k på hudens rynkor, slapphet och elasticitet hos människor

I det mänskliga testet var det maximala djupet av kråkfötter och nasolabialrynkor lägre efter 4 veckor och 8 veckor på den sida som behandlades med 0.1 procent HA2k-lotion än på den sida som behandlades med kontrolllotionen (Figur 4) . Hudens slapphet förbättrades på sidan som behandlades med HA2k-lotionen efter 4 veckor än vid baslinjen. Hudens elasticitet förbättrades efter 4 och 8 veckor på den sida som behandlades med HA2k-lotionen, medan den förbättrades först efter 8 veckor på den sida som behandlades med kontrolllotionen. Dessa resultat indikerar att HA2k-lotionen förbättrade hudens rynkor, slapphet och elasticitet.

4|DISKUSSION

Det har rapporterats att nasolabialvecket är en av de starkaste faktorerna som påverkar gapet mellan en persons faktiska ålder och upplevda ålder. Fyllmedelsinjektion är ett vanligt sätt att förbättra nasolabialvecket; dock beror effekten och säkerheten på läkarnas teknik. Vissa allvarliga biverkningar av injektion orsakade av vaskulär ocklusion som leder till hudnekros och blindhet har rapporterats.20 HA2k är ett säkrare och mindre invasivt alternativ för att förbättra nasolabialvecket. Dessutom testades HA2k som en formulerad lotion i denna studie och var tänkt att vara en mer praktisk aktiv kosmetisk ingrediens (ACI).

Nasolabialvecket orsakas av åldrande i dermis, och det är svårt att förbättra genom att bara närma sig det övre lagret av epidermis. För att leverera ACI till djupare lager, såsom epidermis och dermis, är det nödvändigt att tränga igenom stratum corneum. Tidigare,<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

Vissa rapporter har konstaterat att ACI uppreglerar kollagensyntesen. Vi har tidigare rapporterat om sådana ACI, inklusive HA-tetrasackarider, 8 sojabönpeptider och kollagenpeptider. HA2k är unik eftersom det uppreglerar kollagensyntes och nedbrytning samtidigt. Det finns ett behov av att klargöra mekanismen för uppreglering av COL1A1 och MMP-1 i framtida studier.

Lågmolekylär HA har rapporterats inducera inflammation i huden23; verkningsmekanismen är dock fortfarande kontroversiell. En annan studie med en rekonstituerad epidermis rapporterade att en lågmolekylär HA var inflammatorisk.24 I vår mänskliga studie observerades inga biverkningar, inklusive inflammatoriska symtom. Lågmolekylär vikt kan ha inducerat inflammatorisk signalering endast in vitro, utan dermis. Under mer komplexa förhållanden, såsom de i mänsklig hud, sker överhörning mellan olika celler i vävnader, och den inflammatoriska signaleringen avbryts. Det är anmärkningsvärt att en nyligen genomförd studie visade att endogen HA-fragmentering inducerade inflammatoriska svar, medan exogena lågmolekylära HA (2800– 60 000 Da) inte gjorde det.25

Koncentrationen av HA2k som användes i denna humanstudie var 0,1 procent, men dess optimala dos återstår att klargöra. HA2k kan användas mer allmänt om lägre doser är effektiva. Dessutom, i kombination med HA med högre molekylvikt, skulle det möjliggöra utvecklingen av effektivare kosmetika för anti-aging eftersom större HA är bättre fuktgivande krämer.4 HA2k är fortfarande ett relativt kostnadseffektivt material för att förbättra rynkor eftersom det inte administreras intravenöst av en läkare.

5|SLUTSATS

I denna studie undersökte vi effekten av HA2k på att förbättra hudrynkor genom topisk applicering på mänsklig hud. Nasolabialvecket och kråkfötterna förbättrades avsevärt med en 0,1 procent HA2k-lotion. Det första steget i den föreslagna mekanismen är genomträngningen av HA2k genom stratum corneum, vilket vi bekräftade genom att utföra ett genomträngningsexperiment i en 3D-hudmodell och mänsklig utskuren hud. Det andra steget i mekanismen är aktiveringen av kollagenombyggnad av HA2k, vilket vi demonstrerade genom att utföra en ELISA på COL1A1 och MMP-1 i en 3D-hudmodell och genom ultraljudsanalys av kollagendensitet i en pilotstudie på människor ämnen. Sammantaget är HA2k en lovande ingrediens för antiaging kosmetika.

FÖRFATTARBIDRAG

YA och YT designade forskning. YA, HK och MK utförde experiment. YA och SS analyserade data och SS skrev manuskriptet övervakat av TY. Alla författare har läst och godkänt det slutliga manuskriptet.

BEKRÄFTELSE

Vetenskaplig skrivhjälp gavs av Crimson Interactive Pvt. Ltd.

INTRESSEKONFLIKT 

YT och MK förklarar att de inte har några konkurrerande intressen. YA, SS och HK är anställda i Kewpie Corporation, en leverantör av HA.

DATA TILLGÄNGLIGHET

Data som stöder resultaten av denna studie är tillgängliga från motsvarande författare på rimlig begäran.

ETISKT GODKÄNNANDE

Denna studie genomfördes av Helsingforsdeklarationen och godkändes av Kewpie Corp.s medicinska etiska kommitté och DERMAPRO Ltd. Institutional Review Board, med godkännandenummer 17-4 och 1-220777-AN-02-DICN18228 , respektive

REFERENSER

1. Arseni L, Lombardi A, Orioli D. Från struktur till fenotyp: påverkan av kollagenförändringar på människors hälsa. Int J Mol Sci. 2018;19:1407.

2. Page-McCaw A, Ewald AJ, Werb Z. Matrix metalloproteinaser och reglering av vävnadsremodellering. Nat Rev Mol Cell Biol. 2007;8:221-233.

3. Lee DH, Oh JH, Chung JH. Glykosaminoglykan och proteoglykan vid åldrande av huden. J Dermatol Sci. 2016;83:174-181.

4. Fraser JR, Laurent TC, Laurent UB. Hyaluronan: dess natur, distribution, funktioner och omsättning. J Intern Med. 1997;242:27-33.

5. Kage M, Tokudome Y, Hashimoto F. Permeation av hyaluronantetrasackarider genom hårlös mushud: en in vitro- och in vivo-studie. Arch Dermatol Res. 2013;305:69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF, Sun M, Coulson-Thomas YM, et al. Hyaluronanrik mikromiljö i den limbala stamcellsnischen reglerar limbal stamcellsdifferentiering. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2017;58:4407-4421.

7. Kavasi RM, Berdiaki A, Spyridaki I, et al. HA-metabolism i hudhomeostas och inflammatorisk sjukdom. Food Chem Toxicol. 2017;101:128-138.

8. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Uttryck av hyaluronansyntas och kollagen typ I mRNA av hyaluronantetrasackarider i normala humana dermala fibroblaster. J Japanese Cosmet Sci Soc. 2013;37:1-5.

9. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Effekt av hyaluronantetrasackarider på epidermal differentiering i normala humana epidermala keratinocyter. Int J Cosmet Sci. 2014;36:109- 115.

10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P, et al. Effekten av krämbaserade nya formuleringar av hyaluronsyra med olika molekylvikter i anti-rynkbehandling. J Drugs Dermatol. 2011;10:990-1000.

11. Lubart R, Yariv I, Fixler D, Lipovsky A. Aktuell ansiktskräm med hyaluronsyra med ny mikroniserad molekylteknologi penetrerar effektivt och förbättrar ansiktets hudkvalitet: resultat från in vitro, ex-vivo och in vivo (öppen etikett ) studier. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:39-44.

12. Kano S, Todo H, Sugie K, et al. Användning av rekonstruerade odlade mänskliga hudmodeller som alternativ hud för permeationsstudier av kemiska föreningar. Altern Animal Test Exp. 2010;15:61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. Totalförsvar plus reparation: ett nytt koncept inom solskydd och hudföryngring. J Drugs Dermatol. 2015;14:s3-s11.

14. Vitral GLN, Aguiar RAPL, de Souza IMF, Rego MAS, Guimarães RN, Reis ZSN. Hudtjocklek som en potentiell markör för graviditetsålder vid födseln trots olika fostertillväxtprofiler: en genomförbarhetsstudie. PLoS One. 2018;13:e0196542.

15. Clarys P, Clijsen R, Taeymans J, Barel AO. Hydrationsmätningar av stratum corneum: jämförelse mellan kapacitansmetoden (digital version av Corneometer CM 825) och impedansmetoden (Skicon-200EX). Skin Res Technol. 2012;18:316- 323.

16. Li X, Yuan C, Xing L, Humbert P. Topografisk mångfald av vanlig hudmikroflora och dess samband med hudmiljötyp: en observationsstudie hos kinesiska kvinnor. Sci Rep. 2017;7:18046.

17. Roques C, Téot L, Frasson N, Meaume S. PRIMOS: ett optiskt system som producerar tredimensionella mätningar av hudytor. J Sårvård. 2003;12:362-364.

18. Matsunaga Y, Fujiwara S, Mori Y, et al. Utveckling av självupplösande mikronålar bestående av hyaluronsyra som antirynkbehandling. IFSCC Magazine. 2012;15:73-78.

19. Borkow G, Elías AC. Lyftande och ljusare ansiktshud efter sömn på kuddfodral som innehåller kopparoxid. Kosmetika. 2016;3:24.

20. Sito G, Manzoni V, Sommariva R. Vaskulära komplikationer efter ansiktsfyllmedelsinjektion: en litteraturöversikt och metaanalys. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:E65-E72.

21. Essendoubi M, Gobinet C, Reynaud R, Angiboust JF, Manfait M, Piot O. Mänsklig hudpenetrering av hyaluronsyra med olika molekylvikter som undersökts av Raman-spektroskopi. Skin Res Technol. 2016;22:55-62.

22. Tokudome Y, Komi T, Omata A, Sekita M. En ny strategi för passiv hudtillförsel av nanopartikelformig hyaluronsyra med hög molekylvikt framställd med en polyjonkomplexmetod. Sci Rep. 2018;8:2336.

23. Jiang D, Liang J, Noble PW. Hyaluronan är en immunregulator vid mänskliga sjukdomar. Physiol Rev. 2011;91:221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T, et al. Femtio kDa hyaluronsyra uppreglerar vissa epidermala gener utan att ändra TNF-uttryck i den rekonstituerade epidermis. Skin Pharmacol Physiol. 2011;24:210-217.

25. Takabe P, Kärnä R, Rauhala L, Tammi M, Tammi R, PasonenSeppänen S. Fragmentering av melanocythyaluronanhölje förstärker UVB-inducerad TLR-4-receptorsignalering och uttryck av proinflammatoriska mediatorer IL6, IL8, CXCL10 och CXCL1 via NF-kappaB-aktivering. J Invest Dermatol. 2019;139:1993-2003.

【För mer information: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】