Ett bivalent levande försvagat vaccin mot influensavirus skyddar mot avdrivna H1N2 och H3N2 kliniska isolat hos svin del 2

2.5. Enzym-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

För att göra beläggningsantigener förökades SD435 och SD467 i MDCK-celler och renades med hjälp av sackarosgradient-ultracentrifugering. Inaktivering av virusen skedde genom att tillsätta 97 procent -propiolakton till viruset i en koncentration av 1:1000 (v/v) (Thermo Fisher Scientific, AAB2319703). Denna blandning skakades vid 4 ◦C över natten, inkuberades vid 37 ◦C i två timmar för att underlätta hydrolys av -propiolakton, förvarades sedan vid -80 ◦C fram till användning.

Antigener och immunitet är oskiljaktiga. Antigen hänvisar till vilken substans som helst som kan kännas igen av immunsystemet och orsaka ett immunsvar, inklusive bakterier, virus, tumörceller, etc., medan immunitet hänvisar till kroppens förmåga att svara på dessa antigener.

Sambandet mellan antigener och immunitet kan illustreras med en enkel metafor: Precis som att träna kräver tillräcklig träning och kosttillskott, är förbättring av immuniteten också beroende av upprepad kontakt med antigener och motsvarande immunceller och immunmolekyler. producera. När immunsystemet möter ett antigen angriper det genom att producera specifika antikroppar, eller immunceller, tillsammans med minnesceller för att skydda oss från återinfektion.

Vetenskapen har bekräftat att utveckling av bra levnads- och matvanor kan bidra till att förbättra immuniteten. Till exempel kan hålla ren, inte röka, måttlig träning och sömnvanor bidra till att minska invasionen av antigener som bakterier och virus. Samtidigt kan äta vissa livsmedel rika på antioxidanter, vitaminer och mineraler, såsom grönsaker och frukt, fullkorn och fisk, också bidra till att förbättra immuniteten.

Kort sagt, förhållandet mellan antigen och immunitet är mycket nära. Endast genom upprepad kontakt med antigener och korrekta levnadsvanor kan immuniteten kontinuerligt förbättras, och olika sjukdomar kan förebyggas och behandlas. Därför bör vi behålla en positiv attityd och utveckla goda levnadsvanor för att skydda oss mot sjukdomar. Det kan ses att vi behöver förbättra vår immunitet. Cistanche kan hjälpa oss att förbättra vår immunitet, eftersom Cistanche är rik på en mängd olika antioxidantämnen, såsom vitamin C, karotenoider, etc. Dessa ingredienser kan rensa fria radikaler och minska oxidativ stress, Förbättra immunsystemets motståndskraft.

Klicka cistanche deserticola tillägg

För att mäta de swIAV-specifika IgG-nivåerna inducerade av vaccination och utmaning togs griserum efter den första (dag 20) och andra (dag 30) vaccinationerna och före obduktion (dag 36).

Renade -propiolaktoninaktiverade virus SD435 (1 µg/ml) och SD467 (2 µg/ml), utspädda i karbonat/bikarbonatbeläggningsbuffert, (pH 9,6) applicerades på Immulon-2 96-brunnsplattor vid 1{{ 12}}0 µL/brunn (Thermo Labsystems, Ottawa, ON, Kanada, 3655) och inkuberades över natten vid 4 ◦C. Efter inkubation över natten tvättades de belagda plattorna fyra gånger med TBST (0,1 M Tris, 0,17 M NaCl och 0,05 procent Tween 20), till vilka fyrfaldiga serieutspädningar av serumet eller BALF sattes till plattan i duplikat, följt av en två timmar lång inkubation vid rumstemperatur. Serum tillsattes vid en startspädning av 1:10 och BALF tillsattes outspädd. Prover av tidigare definierade positiva kontrollsera och lämpliga negativa kontroller, serum och BALF från ovaccinerade grisar i en tidigare studie kördes på varje platta [14].

Plattorna tvättades fyra gånger med TBST, varefter get-anti-svin IgG (H plus L) fosfatasmärkt affinitetsrenad antikropp (1:5000) (Sigma Aldrich, SAB3700435) eller mus-anti-gris IgA (Serotec, MCA658) ( 1:300) utspädd i TBST tillsattes och fick inkuberas vid rumstemperatur under en timme. IgA ELISA utvecklades genom tillsats av biotinylerade get anti-mus IgG (H plus L) antikroppar (CALTAG, Burlingame, CA, USA, M30015) och streptavidin alkalisk fosfataslösning (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) båda under en timme vid rumstemperatur.

Efter inkubation tvättades både IgG- och IgA-plattor fyra gånger med TBST, till vilket p-nitrofenylfosfatsubstrat (PNPP) [10 mg/ml p-nitrofenylfosfat di(tris) salt kristallint (Sigma-Aldrich) 1% dietanolamin (Sigma-Aldrich), 0,5 mg/ml MgCl2 och pH 9,8] (1 mg/ml) tillsattes och inkuberades vid rumstemperatur under två timmar.

Reaktionen stoppades genom tillsats av 0.3 M etylendiamintetraättiksyra (EDTA), och plattorna avlästes i en spektrofotometer vid 405 nm med en referens på 490 nm. Provets titer definierades som den högsta utspädningen vid vilken provets OD var högre än den definierade cutoff (medelvärdet för OD för ett känt negativt prov plus två gånger standardavvikelsen).

2.6. Virusneutraliseringsanalys (VN).

MDCK-celler (3,5 x 104) ströks ut i 96-brunnsplattor. Serum och BALF värmeinaktiverades vid 56 ◦C i 30 min. Tvåfaldiga utspädningar av serumet och BALF sattes till plattan i fyrdubbla exemplar och 60 µL utspätt serum eller BALF inkuberades med en lika stor volym SD435 eller SD456 innehållande 100 TCID50 vid 37 ◦C under 1 timme. 100 µL av blandningen sattes sedan till MDCK-cellerna och den cytopatogena effekten (CPE) dokumenterades 48 timmar och 72 timmar efter infektion (pi). Neutralisationsantikroppstitern var den högsta utspädningen av varje serumprov som fullständigt skyddade cellerna från CPE i minst 2 av 4 brunnar.

2.7. Viral bestämning

Efter insamling placerades lungproverna omedelbart på is och frystes vid -80 ◦C tills bearbetning. För bearbetning vägdes varje lungvävnad och en koncentration på 10 procent (vikt/volym) av MEM kompletterat med 1 x antibiotika-antimykotikum (Thermo Fisher Scientific, 15240-062) tillsattes. Lungvävnad homogeniserades i TissueLyser II (Qiagen, Hilden, Tyskland) vid 30 Hz under 5 minuter, följt av centrifugering vid 5000 × g under 10 minuter vid 4 ◦C. Den homogeniserade supernatanten samlades upp och lagrades vid -80 ◦C tills vidare analys. Näspinnarna virvlades i 15 sekunder och centrifugerades vid 1600 x g under 25 minuter vid 4 ◦C. Supernatanterna samlades upp och förvarades vid -80 ◦C tills vidare analys. De virala titrarna bestämdes med TCID50-analys för lungan och kvantitativ RT-PCR för näsproverna.

2.8. RNA-extraktion och kvantitativ RT-PCR (qRT-PCR)

För att bestämma virala RNA-nivåer av SD467 och SD435 i näsproverna efter provokation, utfördes qRT-PCR. En standardkurva gjordes med användning av RNA extraherat från SD435 och SD467 med en känd titer. Kortfattat användes RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, Toronto, ON, Kanada, 74136) för att extrahera vRNA från 200 µL nästvätt. RNA omvandlades till cDNA med användning av den universella influensaprimern Uni12 och SuperScript III Transcriptase (Invitrogen, Burlington, ON, Kanada) [19]. qPCR utfördes i triplikat på ett StepOnePlusTM Real-Time PCR-system (Applied Biosystems, CA, USA) med Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems), 5 µL cDNA och 1 µL 10 µM framåt- och bakåtprimrar. PCR-reaktioner kördes vid en glödgningstemperatur av 58 ◦C under 40 cykler. Alla sekvenser av qPCR-primrar är tillgängliga på begäran.

2.9. Statistisk analys

Statistisk analys utfördes med hjälp av programvaran GraphPad Prism 8. Mann-Whitney och Kruskal-Wallis icke-parametriska tester användes. Signifikanta skillnader betecknas med * (p < 0.05), ** (p < 0.01), *** (p < 0,001) , eller **** (p < 0,0001). ns=inte signifikant.

3. Resultat

3.1. Vaccination med det bivalenta vaccinet gav skydd mot nya kliniska isolat

Vi mätte det fysiska svaret på utmaningsvirus såväl som viral replikation i luftvägarna för att bedöma det skydd som det bivalenta vaccinet ger mot dessa nya kliniska isolat. Temperaturen registrerades dagligen under fem dagar efter viral utmaning i alla grupper. Grisar som låtsasvaccinerades och utmanades med SD435 (H3N2) (MEM/SD435) eller SD467 (H1N2) (MEM/SD467) visade en typisk temperaturökning på dag 1 post-viral utmaning, med mediantemperaturer på 40,6 ◦C och 41,1 ◦ C, respektive. Denna spik sågs inte i de vaccinerade grupperna som utmanades med SD435 (Bivalent/SD435) eller SD467 (Bivalent/SD467), som hade mediantemperaturer på 39,4 ◦C respektive 39,6 ◦C. Dag 2–5 efter utmaningen hade både vaccinerade och ovaccinerade grupper temperaturer runt 39 ◦C (Figur 2A).

Fem dagar efter utmaning obducerades alla grisar, med lungorna borttagna i sin helhet och analyserades för att kvantifiera mängden närvarande lesioner. Bivalent/SD435-gruppen visade minimala eller inga lesioner, med en median på 0,65 procent av totala lungskador. MEM/SD435-gruppen hade signifikant högre lesioner än sin vaccinerade motsvarighet, med en median på 5,1 procent (p=0.0025) (Figur 2B). I gruppen Bivalent/SD467 hade fem av sju grisar låga mängder lesioner (<2%), one had minor lesions (3.75%), and one outlier had high lesions (31%), with a group median of 1.9%. Compared with the vaccinated group, the MEM/SD467 group had a higher degree of lesions with a median of 4.55% (p = 0.0417) (Figure 1C).

I lungorna hade grupperna Bivalent/SD435 och Bivalent/SD467 båda låga titrar av viruset, med medelvärden på 8,6 PFU/mL/gr respektive 3,0 PFU/mL/gr. Omvänt hade grupperna MEM/SD435 och MEM/SD467 högre mängder virus, med medelvärden på 656,1 respektive 9118,2 PFU/mL/gr (p=0.0025 för båda) (Figur 3A, B). Liknande trender sågs i näsproverna. I Bivalent/SD435-gruppen var nasala titrar låga dag 1, 3 och 5 efter utmaning (dpc), medan titer i MEM/SD435-gruppen var något förhöjda och ökade allteftersom dagarna fortskred (ns) (Figur 3C). I gruppen Bivalent/SD467 var nasala titrar också låga, i genomsnitt under 5 PFU/mL dag 1 och 5, och 10,0 PFU/mL dag 3 efter utmaning. Titrarna var högre i MEM/SD467-gruppen varje dag, i genomsnitt 4123,6 PFU/mL/gr på 1dpc (p=0.0278), 77233.1 PFU/mL/gr (p=0.0009) på 3dpc och 65,2 PFU/ml/gr på 5dpc (ns) (Figur 3D).

Sammantaget tyder dessa resultat på att det bivalenta vaccinet erbjöd en betydande grad av skydd mot utmaningsstammar, vilket minskade lungskador och virusreplikation kopplat till infektion med dessa två swIAV-isolat i lungorna och näspassagerna.

3.2. Det bivalenta vaccinet inducerar immunsvar mot utmaningsstammar

Vi mätte antikroppssvaret i serumet och lungspecifikt för båda utmaningsstammarna efter prime-boost-vaccination med det bivalenta vaccinet. Serum samlades in från grisar efter det första vaccinet (dag 20) och efter det andra vaccinet (dag 30). Utmaningsvirus SD435 (H3N2) och SD467 (H1N2) användes som infångningsantigener för att mäta det virusspecifika IgG-antikroppssvaret i serumet. Med SD435 fanns det ingen signifikant skillnad mellan antikroppstitrar i MEM och de bivalenta vaccinerade grupperna efter den första vaccinationen (dag 20). Mot SD467 var antikroppstitrarna dock signifikant högre i den vaccinerade gruppen på dag 20 (p=0.0321). Efter det andra vaccinet (dag 31) var antikroppstitrarna signifikant högre i den vaccinerade gruppen mot både SD435 och SD467 än i MEM skenvaccingrupperna (p < 0,0001) (Figur 4A, B). Specifikt, mot infångningsantigen SD435, var serum-IgG-titer i den MEM-mockvaccinerade gruppen i genomsnitt 52 på dagarna 20 och 30, medan de var 311 (dag 20) och 4852 (dag 30) i den bivalenta vaccingruppen (Figur 3A). Mot SD467 var serum-IgG-titer i den skenvaccinerade MEM-gruppen 39 (dag 20) och 38 (dag 30), medan de i den bivalenta vaccingruppen var 219 (dag 20) och 3509 (dag 30) (Figur 3B).

Liknande trender sågs när neutraliserande antikroppstitrar mättes i serumet mot de två utmaningsstammarna. Återigen fanns det ingen signifikant skillnad mellan de neutraliserande antikroppstitrarna i MEM och bivalent vaccinerade grupper mot SD435 efter en dos av vaccin (dag 2 0) ​​(Figur 5A, B). Mot SD467 var antikroppsnivåerna signifikant högre på dag 2 0, efter ett vaccin (p=0.0069). Mot båda virusen skedde en ökning av antikroppstitrar i de bivalenta vaccingrupperna efter den andra dosen dag 30) (p < 0,0001). Titrar i den MEM-mock-vaccinerade gruppen utmanades med SD435 i genomsnitt 1 (dag 20) och 3 (dag 30), medan titrar i den bivalenta gruppen var i genomsnitt 10 (da20) och 77 (dag 30) (Figur 5A). Titrar i den MEM-mock-vaccinerade gruppen utmanad med SD467 var i genomsnitt 0 (dag 20) och 2 (dag 30), medan titrar i den bivalenta vaccingruppen var i genomsnitt 10 (dag 20) och 54 (dag 30) (Figur 5B).

Vid obduktion (dag 36) samlades BALF från var och en av grisarna så att antikroppsnivåer kunde mätas i lungorna. Utmaningsvirus SD435 och SD467 användes som infångningsantigener för att mäta det virusspecifika IgA- och IgG-svaret. Mot SD435 var IgA-nivåerna i MEM-mock-vaccingrupperna i genomsnitt 17, medan titrarna i den bivalenta vaccingruppen var signifikant högre, i genomsnitt 95 (p=0.0014) (Figur 6A). För SD467 var IgA-nivåerna i genomsnitt 18 i skenvaccingruppen och var signifikant högre vid 158 i den bivalenta vaccingruppen (p=0.0185) (Figur 6B). När det gäller IgG var titrarna mot SD435 i MEM-mock-vaccingruppen i genomsnitt 3, medan de i den bivalenta gruppen var signifikant högre vid ett genomsnitt av 138 (p < 0,0001) (Figur 6C). IgG-antikroppar mot SD467 var i genomsnitt 16 i MEM-mock-vaccingrupperna, medan de i den bivalenta vaccingruppen var signifikant högre, med ett genomsnitt på 259 (p < 0,0001) (Figur 6D).

När det gäller neutraliserande antikroppar i BALF, liknade trenderna de som sågs i IgA- och IgG-ELISA. Mot SD435 var neutraliserande antikroppstitrar odetekterbara i MEM-mock-vaccingrupperna, och de var i genomsnitt signifikant högre vid 13,2 i den bivalenta vaccingruppen (p < 0.0001) (Figur 7A). På liknande sätt var antikroppstitrar specifika för SD467 i genomsnitt 0,7 i MEM-mock-vaccingrupperna och var signifikant högre i den bivalenta vaccingruppen med en genomsnittlig titer på 10,9 (p=0.0002) (Figur 7B). Sammantaget visar dessa data att två doser av det bivalenta vaccinet inducerar ett potent systemiskt humoralt svar, såväl som ett lokalt immunsvar i lungan mot dessa två icke-homologa kliniska isolat.

4. Diskussion

Vi har tidigare visat att elastasberoende virus SD191-R342V och SD69.K345V var helt försvagade och icke-virulenta hos grisar och att två vaccinationer med denna bivalenta LAlV framkallade ett robust immunsvar och gav skydd mot infektion med homolog SD191 ( H1N2) och SD69 (H3N2) stammar [14). I denna aktuella studie ville vi testa om det bivalenta vaccinet skulle hålla in vivo mot nyare kliniska isolat som har genomgått antigendrift. SD467 är, liksom SD191, en medlem av den Ho-3 antigena gruppen som har uppstått i Kanada, men den har förvärvat många mutationer i viktiga antigena platser (12,15). På samma sätt representerar SD435 H3N2 IV-E-klustret som finns i västra Kanada och har flera aminosyrasubstitutioner i viktiga H3-antigenplatser från de som finns i SD69 (17].

Den bivalenta LAlV reducerade signifikant lesioner hos vaccinerade grisar när de utmanades med antingen SD435 (H3N2) eller SD467 (H1N2) och förhindrade en temperaturökning som sågs i MEM (mock)-vaccinerade grupper en dag efter utmaning. Det ledde också till en minskning av viral replikation av båda stammarna i lungan och en minskning av SD467 (H1N2) i näsproverna. Intressant nog var nasala titrar av SD435 (H3N2) låga i både vaccinerade och ovaccinerade grupper, trots identiska provtagningsmetoder, vilket tyder på att denna stam kanske inte har så mycket tropism för näsgångarna. När det gäller den extrema grisen i gruppen som hade en hög lunglesionspoäng på 31, visade temperaturmätningar ingen topp vid utmaningen, och virustitrarna i lungan var under 10 PFU/g/ml. Antikroppsnivåerna i serumet och det lokala lungsvaret var också desamma som i alla andra vaccinerade grisar. Detta får oss att spekulera i att lesionerna inte var influensarelaterade. Seroanalys visade att ett starkt immunsvar var monterat mot båda stammarna efter två doser av vaccinet och detsamma visade sig vara sant med avseende på lokal analys i lungan. Antikroppsriktade ytglykoproteiner är avgörande för att skydda mot IAV-infektion, så den höga nivån av neutraliserande antikroppar såväl som lgG och lgA som finns i vaccinerade grisar stödjer skyddet som ses in vivo [20].

Helinaktiverat virus (WIV)-vaccin är de vanligaste tillgängliga för svin som traditionellt formulerats med adjuvans, de anses vara ett säkert tillvägagångssätt eftersom det inte finns någon risk för omsortering med cirkulerande stammar. De ger dock begränsad effekt mot felmatchade stammar och har visat sig leda till vaccinassocierad förstärkt andningsstörning (VAERD) när de används mot felmatchade stammar. Deras effektivitet minskar också i närvaro av maternalt härledda antikroppar (MDA) [4]. De kommersiellt tillgängliga i Nordamerika inkluderar FluSure XP®, som är tillgänglig som en fyrvärd formulering i USA med H1N1-, H1N2- och H3N2-kluster IV-A och IV-B [21]. En äldre formulering av Flusure XP® finns tillgänglig i Kanada med två stammar av H1N1 och en H1N2-stam, isolerade mellan 2000 och 2005 [22]. I båda de nordamerikanska länderna finns FluSure® Pandemic tillgängligt, ett monovalent vaccin som består av H1N1pdm09-stammen, samt Pneumostar SIV Complete (Elanco, Greensboro, North Carolina, US Inc.), som innehåller H1N1, H1N2 och H3N2, och Pneumostar SIV, med H1N1 och H3N2 subtyp stammar (GOC, USDA) [23,24]. Dessa kommersiellt tillgängliga vacciner står för cirka 50 procent av svininfluensavaccinerna i Nordamerika, och de andra 50 procenten av vaccinationerna är autogena vacciner [4].

När det gäller alternativa vaccinplattformar licensierades ett rekombinant alfavirus-härlett replikonpartikelvaccin i USA [4]. Denna vaccinplattform använder sig av ett alfavirus med ett förändrat genom, där virala strukturella gener ersätts med en valfri gen, vilket gör replikationen av alfavirus defekt. Detta RNA är självreplikerande, så vaccinplattformen leder till högt uttryck av genen av intresse, och för influensa har både HA och nukleoprotein (NP) testats som antigener [25]. Studier har visat att användningen av denna plattform skyddar mot antigeniskt HA-matchade och -felmatchade utmaningar, såväl som NP-felmatchade stammar, även om plattformen inte kunde skydda mot närvaron av MDA.

Den första LAIV för svininfluensa godkändes av US Department of Agriculture (USDA) 2017. Ingelvac Provenza™ är ett bivalent H3N2- och H1N1-vaccin, med HA och NA från två stammar isolerade i USA, uttryckt på TX98-ryggraden, försvagad genom trunkering av det icke-strukturella proteinet (NS1) [14,26]. LAIV efterliknar naturlig infektion och leder till ökad slemhinneimmunitet i de övre luftvägarna vid intranasalt tillförsel. Där inaktiverade vacciner huvudsakligen leder till produktion av systemiska IgG-antikroppar, kan levande försvagade vacciner inducera slemhinne-IgA i luftvägarna, samt ökad cellmedierad respons på grund av att immunsystemet exponeras för interna influensaproteiner, som innehåller mer T. cellepitoper [27]. Detta leder till bättre skydd mot felaktiga stammar.

De har visat partiellt skydd i närvaro av MDA. Hela IgG-antikroppar är vanligare i de nedre luftvägarna, och polymera IgA-antikroppar är dominerande i de övre luftvägarna hos grisar, oftast som dimerer [28]. Dessa antikroppar produceras lokalt och transporteras över epitelcellskiktet där de förblir i slemhinnan, med hjälp av en sekretorisk komponent som motstår nedbrytning av proteaser [28,29]. IgA-antikroppar är det adaptiva immunsystemets första försvarslinje mot inkommande patogener, som arbetar för att blockera viral bindning till sialinsyrareceptorer [30]. Polymera IgA-antikroppar är mer brett korsreaktiva än monomera IgG-antikroppar, potentiellt på grund av multivalent bindning [31]. Studier har också visat att dessa antikroppar kan förhindra frisättning av nybildat IAV från infekterade celler mycket mer effektivt än IgG eller monomert IgA, som kan hittas i svinserum, vilket tyder på att den polymera strukturen av IgA är fördelaktig för tvärbindning av den virala avkomman. till HA uttryckt på den infekterade cellytan [31-33]. Det lokala IgA-antikroppssvaret är därför integrerat i skyddet mot infektion med IAV och har föreslagits vara ett korrelat av skydd hos människor [34].

Risken med LAIV är dock potentialen för omsortiment med cirkulerande stammar. En fylogenetisk studie i USA fann nya stammar i cirkulation som hade återsorterats med vaccinstammarna som ingår i Ingelvac Provenza™ [26]. Den elastasberoende LAIV-plattformen minskar denna risk, eftersom elastasproteinet är mycket knappt i luftvägarna hos svin, så replikering av vaccinvirus är mycket begränsad, liksom tidsramen för att omsortiment ska ske. Framtida studier kommer att inkludera utvärderingen av detta bivalenta vaccins omsortimentsrisk, såväl som hur detta vaccin håller sig i närvaro av MDA. Det skulle också vara intressant att testa det cellmedierade svaret av detta vaccin, eftersom detta är en av de största fördelarna med LAIV. Sammanfattningsvis utökade det bivalenta elastasberoende LAIV skyddet till nya kliniska isolat som finns i västra Kanada och skulle fylla några luckor på marknaden för vaccin mot svininfluensa.

Författarbidrag:

Konceptualisering, YZ; metodik, YZ och LA; formell analys, LA; utredning, LA och UB-C.; resurser, SD; skrift—original utkast förberedelse, LA; skrivande— recension och redigering, YZ, UB-C. och SD; övervakning, YZ; finansieringsförvärv, YZ Alla författare har läst och samtyckt till den publicerade versionen av manuskriptet.

Finansiering:

Denna forskning finansierades av Agriculture Development Fund (ADF), Ministeriet för Saskatchewan Agriculture. LA stöds delvis av Vaccinology and Immunotherapeutics (V&I) Scholarship från School of Public Health, University of Saskatchewan. VIDO får operativ finansiering från Saskatchewans regering genom Innovation Saskatchewan och jordbruksministeriet och från Canada Foundation for Innovation genom Major Science Initiatives för sin CL3-anläggning (InterVac).

Uttalande av institutionell granskningsnämnd:

Inte tillämpbar.

Datatillgänglighetsförklaring:

Data och analyser av denna studie redovisas alla i den här artikeln.

Erkännanden:

Vi vill tacka VIDO:s veterinärer och djurtekniker för att de utfört allt djurarbete för våra djurförsök. Detta arbete är publicerat med tillstånd av direktören för VIDO som manuskriptserie #1005.

Intressekonflikt:

Författarna förklarar ingen intressekonflikt.

Referenser

Webster, RG Influensavirus: Överföring mellan arter och relevans för uppkomsten av nästa mänskliga pandemi. Båge. Virol. Suppl. 1997, 13, 105–113. [PubMed]

2. Li, Y.; Robertson, I. Epidemiologin av svininfluensa. Anim. Dis. 2021, 1, 21. [CrossRef] [PubMed]

3. Donovan, T. Influensans roll på växande grisprestanda; University of Minnesota: Minneapolis, MN, USA, 2005.

4. Gracia, JCM; Pearce, DS; Masic, A.; Balasch, M. Influenza A Virus in Swine: Epidemiology, Challenges and Vaccination Strategies. Främre. Vet.-Sci. 2020, 7, 647. [CrossRef] [PubMed]

5. Ma, W. Svininfluensavirus: Nuvarande status och utmaning. Virus Res. 2020, 288, 198118. [CrossRef]

6. Suzuki, Y.; Ito, T.; Suzuki, T.; Holland, RE; Chambers, TM; Kiso, M.; Ishida, H.; Kawaoka, Y. Sialinsyraarter som en bestämningsfaktor för värdområdet för influensa A-virus. J. Virol. 2000, 74, 11825–11831. [CrossRef]

7. Sun, H.; Xiao, Y.; Liu, J.; Wang, D.; Li, F.; Wang, C.; Li, C.; Zhu, J.; Song, J.; Sun, H.; et al. Vanligt förekommande eurasiskt fågelliknande H1N1-svininfluensavirus med 2009 pandemiska virusgener som underlättar mänsklig infektion. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2020, 117, 17204–17210. [CrossRef]

8. Henritzi, D.; Petric, PP; Lewis, NS; Graaf, A.; Pessia, A.; Starick, E.; Breithaupt, A.; Strebelow, G.; Luttermann, C.; Parker, LMK; et al. Övervakning av europeiska tamgrispopulationer identifierar en framväxande reservoar av potentiellt zoonotiska svininfluensa A-virus. Cell Host Microbe 2020, 28, 614–627.e6. [CrossRef]

9. Vincent, AL; Ma, W.; Lager, KM; Janke, BH; Richt, JA Svininfluensavirus: ett nordamerikanskt perspektiv. Adv. Virus Res. 2008, 72, 127–154.

10. Rajao, DS; Anderson, TK; Kitikoon, P.; Stratton, J.; Lewis, NS; Vincent, AL Antigen och genetisk utveckling av samtida svin H1-influensavirus i USA. Virology 2018, 518, 45–54. [CrossRef]

11. Mena, I.; I Nelson, M.; Quezada-Monroy, F.; Dutta, J.; Cortes-Fernández, R.; Lara-Puente, JH; Castro-Peralta, F.; Cunha, LF; Trovão, NS; Lozano-Dubernard, B.; et al. Ursprunget till 2009 års H1N1-influensapandemi hos svin i Mexiko. Elife 2016, 5, e16777. [CrossRef]

12. Nelson, MI; Culhane, MR; Trovão, NS; Patnayak, DP; Halpin, RA; Lin, X.; Shilts, MH; Das, SR; Detmer, SE Uppkomsten och utvecklingen av influensa A (H1)-virus hos svin i Kanada och USA. J. Gen. Virol. 2017, 98, 2663–2675. [CrossRef] [PubMed]

13. Chauhan, RP; Gordon, ML En systematisk översyn som analyserar förekomsten och cirkulationen av influensavirus i svinpopulationen över hela världen. Patogener 2020, 9, 355. [CrossRef]

14. Landreth, S.; Detmer, S.; Gerdts, V.; Zhou, Y. Ett bivalent levande försvagat influensavirusvaccin skyddar mot H1N2- och H3N2-virusinfektion hos svin. Veterinär. Microbiol. 2020, 253, 108968. [CrossRef] [PubMed]

15. McCormick, K.; Jiang, Z.; Zhu, L.; Lawson, SR; Langenhorst, R.; Ransburgh, R.; Brunick, C.; Tracy, MC; Hurtig, HR; Mabee, LM; et al. Konstruktion och immunogenicitetsutvärdering av rekombinanta influensa A-virus som innehåller chimära hemagglutiningener härledda från genetiskt divergerande influensa A H1N1-subtypvirus. PLoS ONE 2015, 10, e0127649. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com