En undersökning av effekten mot levercancer av Cistanche fenyletanoidglykosider

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Abstrakt

Syfte: Att studera anti-hepatokarcinomeffekten avcistanche fenyletanoidglykosider (CPhGs),och att utforska dess möjliga verkningsmekanism. Metoder: En muslevercancer H22-tumörbärande modell etablerades genom subkutan injektion i den högra axillen på frambenen. Experimentet skapade en blank kontrollgrupp, en levercancer H22-tumörbärande modellgrupp och en Ganfule-positiv behandlingsgrupp (1351,5 mg/kg) med höga CPhGs. Dosgruppen (500 mg/kg), mellandosgruppen (250 mg/kg) och lågdosgruppen (125 mg/kg), totalt 6 grupper, vardera med 10 djur. Förutom den blanka kontrollgruppen och modellgruppen fick de andra grupperna Ganfule eller CPhGs genom sondmatning under 10 dagar i följd. Under övervakningen av det allmänna tillståndet hos mössen observerades tillväxten av tumörkroppar av H22-tumörbärande möss i varje grupp. I slutet av experimentet togs ögongloberna för att samla blod, och seruminterleukin 2 (IL-2) och tumörnekrosfaktor detekterades genom enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). a(TNF-∞ och alfa-fetoprotein (AFP) innehåll; separera mjälten och levern, väg dem, beräkna organkoefficienten; strippa tumörkroppen helt, beräkna tumörhämningshastigheten för varje grupp av möss; observera den patologiska vävnaden hos tumörkroppen genom HE-färgning Resultat: De axillära tumörerna i den tumörbärande modellgruppen dök upp tidigt och växte snabbast, följt av låg- och medeldosgruppen CPhGs, och tumörerna i högdosgruppen och den positiva behandlingen gruppen växte långsamt. Jämfört med modellgruppen visade CPhGs medelhög och snabb tillväxt. Tumörmassan i högdosgruppen minskade signifikant (P<0.05), and="" the="" tumor="" suppressor="" rate="" in="" each="" dose="" group="" increased="" with="" the="" increase="" of="" cphgs="" dose=""><0.05); the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" spleen="" coefficient="" of="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" increased="" significantly="" and="" liver="" coefficients="" were="" significantly="" reduced=""><0.05); the="" levels="" of="" il-2="" in="" cphgs="" medium,="" high-dose="" groups,="" and="" positive="" treatment="" groups="" were="" significantly="" increased=""><0.05), while="" the="" content="" of="" afp="" was="" significantly="" reduced="" (,="">< 0.05);="" tnf-0="" [content="" in="" each="" dose="" group="" and="" a="" positive="" treatment="" group="" of="" cphgs="" was="" significantly="" reduced=""><0.05). pathological="" results="" showed="" that="" the="" growth="" of="" mouse="" liver="" cancer="" cells="" in="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" was="" inhibited,="" the="" number="" was="" smaller,="" the="" heterogeneity="" was="" reduced,="" and="" a="" large="" number="" of="" necrotic="" cells="" were="" accompanied.="" conclusion:="" cphgs="" can="" reduce="" liver="" damage="" in="" h22="" tumor-bearing="" mice="" and="" inhibit="" tumor="" growth,="" which="" may="" be="" related="" to="" cphgs="" reducing="" the="" serum="" afp="" content="" in="" tumor-bearing="" mice="" and="" improving="" the="" immunity="" of="" tumor-bearing="">

[Nyckelord]Cistanche; totala fenyletanoidglykosider; H22-celler; lever cancer

Cistanche deserticola har många effekter, klicka här för att veta mer

Cistanche (tubulosa)produceras huvudsakligen i Xinjiang och Alexa League of Inner Mongolia. Den är känd som "ökenginsengen" och har extremt högt medicinskt värde. Det är ett dyrbart traditionellt kinesiskt medicinskt material. Först publicerad i "Shen Nong's Materia Medica", den är listad som högsta betyg. Den är söt, salt och varm till sin natur. Det har effekterna av närande njure yang, närande essens och blod och återfuktar tarmarna. Det används ofta för att behandla impotens hos män, infertilitet hos kvinnor, samt midja och knän. Förkylningssmärta, torr blod, förstoppning och andra symtom förlöjligar. Inhemska forskare har genomfört mycket forskning om de kemiska komponenterna iCistanche, Inklusivefenyletanoidglykosiderfråncistanche(CPhGs), iridoider, lignaner, polysackarider, alkaloider etc. De viktigaste komponenterna är CPhGso, modern farmakologisk forskning har visat att CPhG har antibakteriella, antiinflammatoriska, antivirala, anti-tumörer, antioxidanter, immunreglering, minnesförbättring , yang och andra farmakologiska aktiviteter. Samtidigt visade ett stort antal forskargruppsmedlemmar som utfördes på CPhGs i ett tidigt skede att CPhGs Det har en anti-leverfibroseffekt". 71. I detta experiment, CPhGs isolerade frånCistanchemedicinska material användes för att studera dess anti-hepatokarcinomeffekt på H22-tumörbärande möss. Ge en grund för läkemedelsutveckling.

1. Material och metoder

1.1 Testämnet och försöksdjur

Cistanchefenyletanoidglykosider(CPhG) extraherades, separerades och identifierades av forskaren Zhao Jun från Xinjiang Institute of Materia Medica, renheten var 70 procent 91, och 0,5 procent karboximetylcellulosa användes i experimentet. Natrium (0,5 procent CMC-Na) löses upp, bereds i olika koncentrationer, förvaras vid 4 grader och används inom 1 vecka.

SPF-klassade Kunming-möss, 60 hanar, som väger 18-22g, köpta från Experimental Animal Research Center vid Xinjiang Medical University, certifikatnumret är SCXK (nytt) 2016—0002, och licensnumret är SYXK (lön: ) 2016—0003.

1.2. Cellinjemusen

H22 hepatokarcinomcellinje tillhandahålls av Wuhan Prose Life Technology Co., Ltd., artikelnumret är CL-01341.

1.3. Apparater och huvudreagenser

Låghastighetscentrifug (70L-5A, Shanghai Anting); CO, inkubator (Heal Force, HF240); elektrisk uppvärmning vattentank med konstant temperatur (DK-8D, Shanghai ◎Heng Technology Co., Ltd.); Mikroplattläsare (Bio-rad); vernier bromsok (Shanghai Future Experimental Equipment Co., Ltd.); elektronisk balans (Changzhou Wantai Balance Instrument Co., Ltd.).

Gainful är en produkt från CommScope Pharmaceutical Co., Ltd. (Z20060389); RPMI-1640 medium och 1 procent dubbel antikropp (Isher IJBI); Fetalt bovint serum (Gibco, USA); 0,4 procent trypanblått och 4 procent paraformaldehyd (Jing Suo Lebao); mustumörnekrosfaktor IX (TNF-cc), interleukin 2 (IL-2), alfa-fetoprotein (AFP) ELISA-kit (Wuhan Huamei).

1.4 Testmetod

1.4.1 Etablering av H22-tumörbärande musmodell av levercancer

Återuppliva H22-celler vid 37 grader, kassera supernatanten genom centrifugering, tillsätt färskt RPMI-1640 komplett medium för att återsuspendera cellerna för snabb återhämtning, odla mer än 95 procent av livskraftiga celler in vitro och inokulera möss när celldensiteten når 1×106/ml bukhåla, 0,2 ml vardera. Passage ca 8.10 d. Den peritoneala H22-tumörvätskan från mus som odlats till höger om 8 dE extraherades aseptiskt, späddes med normal saltlösning för att justera antalet tumörceller till 1X 107/ml, blandades väl och sattes åt sidan. Förutom att den tomma kontrollgruppen injicerades med samma mängd normal saltlösning på samma ställe, desinficerades mössen i de andra grupperna och inokulerades med H22-tumörcellsuspension på högra armhålan på deras framben, var och en. 2mL [9,101, 24 timmar efter modellering, observera tumörtillväxten varje dag.

1.4.2 Gruppering och administration

De H22-tumörbärande mössen som modellerades ovan delades slumpmässigt in i 5 grupper, nämligen modellgruppen och den positiva behandlingsgruppen (Ganfule 1351,5 mg/kg), med höga CPhGs (500 mg/kg), QB ( 250 mg/kg) mg/kg), lågdosgrupp (125mg/kg), varje grupp har 10 djur. Gavage startades vid 24 hA efter modellering. Förutom den blanka kontrollgruppen och modellen, fick gruppen samma volym av 0,5 procent CMC-Na-lösning, de andra grupperna fick en given dos av positiva läkemedel eller CPhGs genom sondmatning under 10 på varandra följande 10 timmar. d"2.1 31. Intervju daglig observation av mental aktivitetsstatus, höger axillär svullnadsstorlek och utseendetid, pälsfärg och aptit hos tumörbärande möss. 24 timmar efter den senaste administreringen, väg vikten, ta bort ögonglober och samla blod och separera serumet Reserv; Cervikal dislokationsmetod dödar möss, separerar mjälten och levern, väger levern och mjältekoefficienten; skalar av tumören helt, torkar rent med filterpapper och väger massan, beräknar tumörhämningen hastighet av varje grupp av möss, tumörvävnaden är patologisk Histologisk undersökning.

1.4.3 Testningsindikatorer

①Bestämning av mjälte- och leverkoefficienter: Efter att mössen i varje grupp avlivats, skars mjältarna och levrarna och vägdes och organkoefficienterna beräknades. Organkoefficient=organmassa/4, muskroppsmassa × 100 procent . ②Bestämning av tumörmassan och tumörinhiberingshastigheten: 24 timmar efter den senaste administreringen avlivades mössen med cervikal dislokationsmetoden och vägdes. Tumören skalades av helt, torkades ren med filterpapper och vägdes sedan på en elektronisk våg. Massan beräknades baserat på tumörmassan. Tumörhämningshastighet för möss i varje administreringsgrupp, tumörhämningshastighet=(modellgrupp tumörmassa-experimentell grupp tumörmassa) membrangrupps tumörmassa X 100 procent. ③ Efter att ha tagit bort ögongloberna och tagit blod, separera serumet och förvara det i 80 grader för inspektion. Upptäck IL-2-, TNF-0- och AFP-innehåll i serum enligt instruktionerna för ELISA-kit. ④Tumörhistopatologisk undersökning. Efter att tumörerna i varje grupp fixerats med 4 procent paraformaldehyd under 24 timmar, bäddades sektionerna in i paraffin och färgades med konventionell HE. De patologiska förändringarna av tumören observerades under ljusmikroskopet, och området för tumörcellsnekros bedömdes preliminärt. CPhGs läkemedelsbehandling Effekt.

1.5 Statistiska metoder

Programvaran SPSS 17.0 användes för statistisk analys, och dataresultaten för varje grupp uttrycktes som x±S, och data mellan flera grupper jämfördes med envägsanalys av varians och testnivån a=0.05.

2. resultat

2.1 Den allmänna observationen av möss

Before administration, there was no statistically significant difference in the bodyweight of the mice between the groups (P>0.05). I modellgruppen dog 2 möss på grund av magadministration under experimentet. Efter administrering, jämfört med den tomma kontrollgruppen, ökade kroppsvikten hos modellgruppen möss med tillväxten av tumören, men skillnaden var inte statistiskt signifikant

(P>0.05); Compared with the model group, the bodyweight of mice in the positive treatment group and the CPhGs dose group decreased to a certain extent, but the difference was not statistically significant (P>0.05). Den 4:e dagen av experimentet började underarmarna på mössen svälla, djurets mentala aktivitet blev värre, djuren svarade långsamt på yttre stimuli, deras aptit minskade och deras pälsfärg blev svag. Tumörmassan dök upp först i modellgruppen och tillväxthastigheten var den snabbaste. Ovanstående reaktioner var de mest uppenbara, följt av CPhGs låg- och medeldosgrupp. Högdosgruppen och den positiva behandlingsgruppen hade långsammare tumörtillväxt, bättre livskvalitet och inga uppenbara biverkningar.

2.2 Effekten av Cistanche CPhGs på mjälte och leverkoefficienter hos H22-tumörbärande möss

Jämfört med den blanka kontrollgruppen var mjältkoefficienten för modellgruppen signifikant reducerad och leverkoefficienten ökade signifikant (P<0.01); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" spleen="" coefficient="" of="" the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" cphgs="" dose="" groups="" were="" significantly="" increased,="" and="" the="" liver="" coefficient="" was="" significantly="" decreased="" (p=""><0.01), indicating="" that="" cphgs="" can="" improve="" the="" immune="" function="" of="" tumor-bearing="" mice="" to="" a="" certain="" extent="" and="" inhibit="" liver="">

3. Diskussion

Primärlever cancerär en vanlig malign tumör i klinisk praxis. Det står för 4:e platsen i världens tumörincidens och 2:a platsen i dödlighet. Dess förebyggande och behandling är fortfarande ett hett forskningsämne i mitt land. Fördelarna med traditionell kinesisk medicin när det gäller att kontrollera utvecklingen av patienter, förbättra symtom och tecken och förbättra livskvaliteten växer gradvis fram. För att hitta lågtoxiska och högeffektivamot levercancerdroger från traditionell kinesisk medicin, detta ämne använder H22lever cancerceller för att framställa H22-tumörbärande celler. Möstumörmodell, jämför de olika doserna av CPhGs-behandlingsgruppen med modellkontrollgruppen och Ganfule-positiva behandlingsgruppen för att utforska antitumöreffekten av CPhGs på H22-tumörbärande möss och dess mekanism.

Resultaten visade att modellgruppen var den första som hade axillär tumörsvullnad och att dess tillväxt var snabbast. Mössens mentala tillstånd minskade, aptiten minskade och pälsfärgen började dämpas. Låg- och medeldosgruppen av CPhGs följt av högdosgruppen och Ganfule-positiva. Behandlingsgruppen var långsammare, och kroppsvikten hos möss i varje dosgrupp av CPhGs och det fanns ingen signifikant minskning i den Ganfule-positiva behandlingsgruppen, vilket tyder på att CPhGs-läkemedel relativt sett kan förbättra livskvaliteten för H22-tumörbärande möss och minska toxicitet av tumörer för kroppen. Tumörkvaliteten för varje dosgrupp av CPhGs och Ganfule positiv behandlingsgrupp var signifikant lägre än den för modellkontrollgruppen, och tumörhämningshastigheten för högdosgruppen var ekvivalent med den för Ganfule positiva behandlingsgruppen, vilket tyder på att CPhGs kan påverka H22-tumörbärande möss Tumörer in vivo har en viss hämmande effekt. Dessutom visar resultaten av denna studie att mjältkoefficienterna för den Ganfule-positiva behandlingsgruppen och CPhGs-dosgrupperna är högre än modellgruppen, medan leverkoefficienterna är lägre än modellkontrollgruppen, vilket tyder på att läkemedlet är effektivt, Detta projekt använder H22lever cancerceller för att förbereda H22-tumörbärande mustumörmodeller, jämför de olika doserna av CPhGs-behandlingsgruppen med modellkontrollgruppen och Ganfule-positiva behandlingsgruppen, och utforskar antitumöreffekterna av CPhGs på H22-tumörbärande möss. Dess mekanism.

Resultaten visade att modellgruppen var den första som hade axillär tumörsvullnad och att dess tillväxt var snabbast. Mössens mentala tillstånd minskade, aptiten minskade och pälsfärgen började dämpas. Låg- och medeldosgruppen av CPhGs följt av högdosgruppen och Ganfule-positiva. Behandlingsgruppen var långsammare, och kroppsvikten hos möss i varje dosgrupp av CPhGs och den Ganfule positiva behandlingsgruppen minskade inte signifikant, vilket tyder på att CPhGs läkemedel relativt sett kan förbättra livskvaliteten för H22-tumörbärande möss och minska toxiciteten av tumörer i kroppen. Tumörkvaliteten för varje dosgrupp av CPhGs och Ganfule positiv behandlingsgrupp var signifikant lägre än den för modellkontrollgruppen, och tumörhämningshastigheten för högdosgruppen var ekvivalent med den för Ganfule positiva behandlingsgruppen, vilket tyder på att CPhGs har en viss effekt på tumörer hos H22-tumörbärande möss Hämning. Dessutom visade resultaten av denna studie att mjältkoefficienterna för den Ganfule-positiva behandlingsgruppen och CPhGs-dosgrupperna var högre än modellgruppen, medan leverkoefficienterna var lägre än modellkontrollgruppen, vilket tyder på att CPhGs kan hämma tumörer vid samtidigt. Till viss del förbättrar den immunfunktionen hos tumörbärande möss och har även en skyddande effekt på levern, men effekten på mjälten och levern skiljer sig inte nämnvärt från den hos Ganfule.

IL-2 är en typ av celltillväxtfaktor i immunsystemet. Det deltar i cellulär immunitet och spelar en central reglerande roll i kroppens komplexa immunnätverk. Det kan förbättra kroppens immunfunktion genom att främja proliferation och differentiering av T-celler och kan producera antitumöraktiva immunceller. Studier har funnit att IL-2 kan främja överlevnaden, expansionen och aktiveringen av lymfokinaktiverade mördarceller. Denna typ av cell är en sorts mördarcell med höga antitumörceller producerade av lymfocyter i kontakt med IL-2, och denna mördarcell Celler känner bara igen tumörantigener och har ingen effekt på normala värdceller." 5.161. Resultaten av detta experiment visar att hög- och medeldosgrupperna av CPhGs avsevärt kan öka IL-2-innehållet hos möss, vilket indikerar att CPhGs kan förbättra immuniteten hos H22-tumörbärande möss Förmåga att hjälpa kroppen att döda tumörceller.

TNF- är en av de biologiskt aktiva faktorerna med den starkaste direkta anti-tumöreffekten som hittills hittats."7-81. TNF inducerar tumörcellsapoptos, förbättrar värdens immunfunktion och verkar på tumörens vaskulära endotelceller genom att binda till receptorer. Vaskulär dysfunktion leder till tumörblödning och nekros för att utöva sin antitumöreffekt"91, men TNF- uppvisar dualitet i tumörer, vilket kan orsaka tumörnekros och främja tumörtillväxt." TNF- i normala organismer Den låga koncentrationen av har effekterna av hämma tumörcellsproliferation, främja bildning av tumörceller blodkärl och trombos för att orsaka blödning och nekros, och stärka kroppens anti-tumör immunfunktion.Samtidigt är TNF en endogen tumörfrämjande faktor och produceras av tumörcellerna själva. TNF- kan stimulera tumörcelltillväxt och hämma den toxiska effekten av immuneffektorceller på tumörceller; därför är den biologiska effekten av TNF- nära relaterad till dess nivå i kroppen. Det visade sig att jämfört med den normala gruppen ökade modellgruppen TNF- signifikant, vilket överensstämmer med ökningen av tumör-TNF-. TNF-nivån hos möss i varje dosgrupp av CPhGs minskade signifikant, vilket indikerar att CPhGs kan hämma den onormala ökningen av TNF- i serumet hos H22-tumörbärande möss, Hämmar förekomsten av tumörer.

Under normala omständigheter kommer AFP huvudsakligen från embryonala leverceller. AFP försvinner från blodet cirka två veckor efter födseln. Därför är innehållet av AFP i serumet hos normala vuxna mindre än 20 gg/ml. tjugoett. Hos vuxna kan AFP vara förhöjt i serumet med cirka 80 procent avlever cancerpatienter31. När mänskliga leverceller blir cancerösa återställer de funktionen att producera proteinet AFP, och när sjukdomen förvärras kommer även dess serumhalt att öka kraftigt. Som en specifik klinisk indikator för att diagnostisera primärlever cancer, AFP-koncentrationen i serum är vanligtvis positivt korrelerad med storleken pålever cancer1. Resultaten av detta experiment visar att hög- och medeldosgrupperna av CPhGs avsevärt kan minska innehållet av AFP i möss, vilket indikerar att CPhGs kan hämma uttrycket av AFP i serumet från H22-tumörbärande möss och hämma tumörtillväxt.

HE-färgning visar att jämfört med modellgruppen kan CPhGs avsevärt främja tumörcellsapoptos, hämma tumörcelltillväxt, minska tumörcellernas heterogenitet och åtföljas av ett stort antal cellnekroser. Bland dem ökar CPhGs i olika dosgrupper med dosen Med ökningen ökar också det nekrotiska området av tumörceller, och högdosgruppen CPhGs och den Ganfule positiva behandlingsgruppen har en betydande mängd tumörcellsnekros, vilket tyder på att CPhGs. har en bra antitumöreffekt på H22lever cancertumörbärande möss.

Sammanfattningsvis har CPhGs en bramot levercancereffekt, som kan vara relaterad till CPhG som minskar serum-AFP-innehållet hos tumörbärande möss och förbättrar immunförmågan hos tumörbärande möss. Denna studie ger grundläggande data för utveckling av nyamot levercancerdroger som använder CPhGs iCistanche.

Referenser

[1] Peng Fang, Xu Rong, Wang Xia, et al. Forskningsframsteg inom bearbetning och bearbetning av medicinska material av släktet Mesquite [JI Modern Chinese Medicine, 2015, 17(4): 406-412.

[2] Zhong Yaoxin. Tolkning av "Shen Nongs Materia Medica" 32[J], Det är fördelaktigt att öppna volymen (sök medicinsk rådgivning),

2015, 35(8): 40-41.

[3] Liu Xiong, Li Chengming, Gao Jiande, et al. Forskningsframsteg för köttaskpasta[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Technology, 2013, 20(5): 575-576.

[4] Geng Huijie, Yu Guangen. Utveckling och användning av växter av släktet Sargassum [J]. Tianjin Science and Technology, 2012, 21 (4): 66-68.

[5] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long, et al. Effekten och mekanismen av etanolextrakt av köttaskpasta på immun leverfibros hos råttor [J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology,

2016, 30(5): 504-510.

[6] Mu Ke Remu • Di Mai Ti, You Shu Ping, Zhao Jun, et al. Experimentell studie om effekten avFenyletanoid glykosideroxim från köttaska på BSA-inducerad leverfibros hos råttor [J]. Journal of Xinjiang Medical University, 2015, 38(5): 567-570.

[7] You Shuping, Zhao Jun, Mu Keremu•Di Mai Ti, et al. Effekter av Roucong Rongs Phenylethanoid på uttrycket av transformerande tillväxtfaktor|31 hos råttor med BSA-inducerad leverfibros [JL Cancer Transformation. Distortion•Mutation, 2015, 27(6): 409-414.

[8] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long, et al. Effekten av total köttaskepuré fenetylalkohol på uttrycket av TGF-01/Smad-signalvägen i leverstjärnceller från råtta[J]. Carcinogenes. Distortion and Mutation, 2016, 28(5): 372-376.

[9] Zhang Jianwu, Pu Qigong, Chen Doujia, et al. Studie om effekten av aspirin-nikotinamid-zink-komplexet hos möss som bär H22lever cancer［J］. Sichuan Journal of Physiological Sciences, 2012, 34(4): 148-149.

[10] Shen Julio. Antitumöreffekten av Kuiling Huajijian på mus H22-hepatokarcinomceller och dess inverkan på uttrycket av C-my och nm23-Hl [D]. Dalian: Dalian Medical University, 2013: 8-9.

[11] Hao Mingzhi, Chen Wujin, Lin Hailan, et al. Klinisk effektobservation av leverartäremboliseringskemoterapi kombinerat med Ganfule kapsel vid behandling av avanceradlever cancer［J］. Zhongnan Pharmaceutical, 2013, 11⑵: 147-150.

[12] Guo Shengqi, Huang Tingzhang, Li Yuanhui, et al. Studie om antitumöreffekten av vattenextrakt från stjälkar av jasmin på H22-tumörbärande möss]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology, 2015, 31(10): 855-857.

[13] Zhang Wenjuan, Jiang Weizhe, Lan Xianli, et al. Studie på antitumörmekanismen för Wu Gu-insektsextrakt på H22lever cancercelltumörbärande möss]. Guangxi Medicine, 2017, 39(2): 215-219.

[14] Ye Shenglong. Nya framsteg inom områdetlever cancer2013［J］. Chinese Journal of Hepatology, 2014, 22(1): 2-4.

[15] Liu Xiaorui, Wang Jian. Framsteg i den kliniska tillämpningen av cytokininducerade mördarceller mot tumörer［J］. Guangdong Medicine, 2016, 37(18): 2840-2843.

[16] Song Haojie. Lågdos kemoterapi kombinerat med genetiskt modifierat dendritiska cellvaccin för att behandla lever

Experimentell forskning om cancer［D］. Guangzhou: Southern Medical University, 2012.

[17] Zuo Shaoyuan, Qian Jintao, Fang Shuhuan, et al. Antitumöraktivitet av safflorbipollenpolysackarid［J］. Frontier of Medicine, 2014, 4(1): 42-43.

[18] Ni Yang. Effekten av Lithospermum polysackarid på immunorgan och cytokiner TNF-a och IFN-y i S180 tumörbärande möss［J］. Heilongjiang Medicine, 2014, 27(3): 512-514.

[19] Gu Cuiping, Zhang Yiping. Nya framsteg inom antitumörmekanismen för TNF-a [J]. Kinesisk tumör, 2007, 16⑵: 102-105.

[20] Zhu Bo, Zhang Wei, Chen Yanhua, et al. Tillämpning av tumörspecifik tillväxtfaktor och tumörnekrosfaktor vid diagnos och prognos avlever cancer［J］. Modern Oncology Medicine, 2008, 16(5): 765-766.

[21] Lin Yu. Preliminär studie om anti-hepatokarcinomeffekten och mekanismen hos spindelluktande läkemedel [D]. Chengdu: Southwest Jiaotong University, 2015.

[22] Wang Shimo, Hu Yonghao, Li Qiang, et al. Korrelationsanalys mellan AFP-nivå och prognosen för patienter med primär hepatocellulär karcinomkirurgi［J］. Chinese Journal of Hepatobiliary Surgery, 2017, 23(2): 134-136.

[23] Song Wei. Den kliniska betydelsen av kombinerad detektion av serum-AFP, AFU, GP73 och IL-8 vid diagnos av primärlever cancer[J] Chinese Journal of Clinicians (Electronic Edition), 2016, 10(9): 1266-1270.

[24] Guan Yu, Yu Xinfa, Zhou Chengyu, et al. Det kliniska värdet av alfa-fetoprotein vid diagnos och prognos för primärlever cancer［J］. Hainan Medicine, 2016, 27(6): 891 894.

RANKL och deras effekt på bensjukdomar[J]. Prog Mod Biomed, 2010, 10(20): 3963-3966.

[14]FRANCESCHI RT, XIAO G. Reglering av den osteoblastspecifika transkriptionsfaktorn, Runx2: känslighet för flera signaltransduktionsvägar[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[15]FRANCESCHI RT, XIAO G. Reglering av den osteoblastspecifika transkriptionsfaktorn, Runx2: känslighet för flera signaltransduktionsvägar[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[16]GUICHEUX J, LEMONNIER J, GHAYOR C, et al. Aktivering av p38-mitogenaktiverat proteinkinas och c-Jun-NH2-terminalt kinas av BMP-2 och deras implikation i stimuleringen av osteoblastisk celldifferentiering^]. J Bone Mineral Res, 2003, 18(11): 2060.

[17]GE C, CAWTHORN WP, LI Y, et al. Ömsesidig kontroll av osteogen och adipogen differentiering genom ERK/MAP kinasfosforylering av Runx2 och PPARgamma transkriptionsfaktorer [J]. J Cell Physiol, 2016, 231(3): 587 -596.

[18]GE C, XIAO G, JIANG D, et al. Identifiering och funktionell karakterisering av ERK/MAPK-fosforyleringsställen i Runx2-transkriptionsfaktorn[J]- J Biol Chem, 2009, 284(47): 32533-32543.

[19] GREENBLATT MB, Shim JH, GLIMCHER L H. Mitogenaktiverade proteinkinasvägar i osteoblaster [J]. Annual Rev Cell Dev Biol, 2013, 29(1): 63.

[20] Li Feng, Liu Wenfeng, Liu Rushi, et al. Malondialdehyd hämmar den osteogena differentieringen av mesenkymala stamceller genom att aktivera p38- och JNK-vägar[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2012, 28(9): 804-810.

[21]ZHANG G M. Ubiquitin ligas Smurfl kontrollerar osteoblastaktivitet och benhomeostas genom att rikta MEKK2 för nedbrytning^]. Cell, 2005, 121(1): 101-113.