Anti-Skin-aging effekt av en behandling med en kosmetisk produkt och ett kosttillskott baserat på en ny hyaluronan: en randomiserad klinisk studie i friska kvinnor del 1

Abstrakt: Hyaluronsyra (HA) har länge använts för sina anti-age egenskaper, som en ingrediens i både topiska applikationer och kosttillskott. I denna studie administrerades ett nytt natriumhyaluronat, baserat på den innovativa fullspektrumteknologin, som en ingrediens i en kosmetisk produkt och som huvudbeståndsdelen i ett kosttillskott för att utvärdera dess effektivitet när det gäller att motverka tecken på hudens åldrande. Sjuttiofem kvinnliga försökspersoner tilldelades slumpmässigt följande behandlingar under 4 veckor: ett aktivt kosttillskott och en kosmetisk placeboprodukt, en aktiv kosmetisk produkt och ett placebokosttillskott, och en kombination av de två produkterna som innehåller den aktiva ingrediensen, dvs. , en "In&Out"-behandling. Försökspersonerna använde den kosmetiska placeboprodukten i ytterligare 14 dagar. Förbättring av alla resultatmått (hudfuktning, elasticitet, fasthet och profilometri) uppnåddes av alla behandlingar (p < 0.05); den kombinerade behandlingen resulterade emellertid i en ytterligare förbättring av tecknen på hudens åldrande avseende de två enskilda aktiva behandlingarna (p < 0,001), och en sådan effekt varade även efter uppföljningsperioden. Sammanfattningsvis bekräftade sådana resultat att samtidig administrering av hyaluronaner på dessa två olika vägar representerar mer än ett intressant tillvägagångssätt för att motverka tecken på hudens åldrande.

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en stark rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranfunktionen. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en bra rensande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenereringen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinacoside i Cistanche en betydande förmåga att avlägsna DPPH-fria radikaler och har förmågan att avlägsna reaktiva syrearter och förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning, och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tymin-fria radikaler.

Klicka på Cistanche Tubulosa för oxidation

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Introduktion

Huden, människokroppens största organ, liksom alla andra organ, genomgår fysiologiskt åldrande, en oundviklig process på grund av inneboende orsaker såsom kronologiska, hormonella och genetiska faktorer samt yttre faktorer, främst ultraviolett bestrålning (UVR) och exponering för föroreningar, eftersom huden utgör huvudbarriären mot den yttre miljön [1,2]. Dessutom bidrar kost och fysisk aktivitet till hudens åldrande, tillsammans med ångest, stress och rökvanor [2]. Eftersom flera sätt för hudens åldrande har föreslagits när det gäller deras cellulära och molekylära mekanism(er) [3], anses reaktiva syrearter (ROS) eller fria radikaler som härrör från UV-strålar vara de främsta bidragande orsakerna till hudens åldrande (fotoåldring) [ 1]. Hudens åldrandetecken, såsom torrhet, strävhet, uppkomsten av rynkor och pigmenterade fläckar, och nedsatt barriärfunktion, är de viktigaste histologiska förändringarna till följd av hudens strukturella och funktionella förändringar [4–6].

Hudens huvudkomponenter är kollagen och elastin, som bildar och bibehåller dess 3D-struktur, och glykosaminoglykaner (GAG), bland vilka den mest relevanta är hyaluronsyra (HA), en huvudkomponent i den extracellulära matrisen (ECM), som pga. till dess höga hydrofila egenskaper, bevarar fuktighet och fasthet av ECM [7,8]. Kollagen- och elastinhalten minskar med åldern, och huden tappar gradvis sin mekaniska spänning [4]. Hudens HA-innehåll minskar också med åldrandet: mängden HA i huden på en 75-årig person är mindre än en fjärdedel av den i huden på en 19-årig försöksperson [8–10]. I senil hud finns HA fortfarande i dermis, medan det helt försvinner i epidermis [8,10] och även blir mer vävnadsassocierat, ett tillstånd som kan minska dess hygroskopiska förmåga med följden av att huden försvinner fukt [8,10] 8,11].

HA, även kallad hyaluronan, är en linjär, flexibel, lång polymerkedjig naturlig polysackarid, sammansatt av upprepade disackaridsekvenser av D-glukuronsyra och N-acetylD-glukosamin kopplade genom alternerande -1,4 och {{7 }},3 glykosidbindningar [12].

Det syntetiseras mestadels av mesenkymala celler [13,14] och genomgår en kontinuerlig nedbrytningsprocess förmedlad av hyaluronidaser eller oxidativ skada [12,15], som båda minskar den ursprungliga polymerstorleken. Det har föreslagits att balansen mellan dessa syntes-/nedbrytningsprocesser av HA i människokroppen skulle kunna ha en relevant reglerande roll, eftersom processens produktion bestämmer inte bara mängden HA utan även dess storlek [16,17], vilket indikerar att polymerstorleken och omständigheterna för dess syntes eller nedbrytning bestämmer dess biologiska verkan [16,17].

HA har en potentiellt viktig roll i anti-aging hudbehandlingar på grund av dess förmåga att återställa fukt i de kutana skikten och att främja endogen kollagensyntes genom dess fysikalisk-kemiska egenskaper, stimulering av hudfibroblaster och antioxidanteffekter, samt genom HAs signalegenskaper. fragment [16,18].

HA har använts i kosmetiska formuleringar under en lång tid sedan det har rapporterats att det aktivt penetrerar hornhinneskiktet [19,20], förbättrar hydrering, jämnhet och elasticitet och fördröjer bildning av rynkor och djupa linjer [21]; HA levereras också i injicerbara formler [22], och båda tillvägagångssätten upprätthåller, från utsidan, hudinnehållet av HA, som har en kort halveringstid, på cirka 1–2 dagar, i huden [16]. Dessutom har flera bevis under de senaste åren indikerat att administrering av HA även oralt kan uppnå relevanta resultat för att motverka hudens åldrande och därmed förbättra dess spridning i nutrikosmetikaapplikationer [8,9,16,23,24]. Därför, med tanke på att HA-tillskott kan förbättra fysiologisk HA-brist, skulle kombinationen av kutan och oral HA-administration i en kompletterande och samtidig "In&Out"-behandling i första hand kunna representera ett innovativt och effektivt tillvägagångssätt för att proaktivt förebygga alla kliniska tecken associerade med hudens åldrande, vilket främjar en hudföryngringseffekt, återfuktning och fotoskydd [21]; vidare, genom att modulera intervallet för polymerstorleken för HA som används i behandlingen, kunde ytterligare information om de biologiska effekterna av hyaluronaner uppnås [21,25-27].

Denna nuvarande kliniska studie syftade till att utvärdera hudens anti-aging-effekt av en kombinerad behandling bestående av en kosmetisk produkt innehållande PrincipHYAL® Difference och ett kosttillskott innehållande ExceptionHYAL® Star. Båda ingredienserna innehåller hyaluronaner baserade på Full Spectrum Hyaluronan (FS-HA), framställd genom en exakt modulering av olika steg i fermenteringsprocessen, vilket resulterar i en produkt som kännetecknas av HA-polymerer med ett brett och specifikt spektrum av storlekar [28]. Resultatet är en ingrediens som liknar HA som finns fysiologiskt i huden, ger differentieringssignaler till celler och har en reostatliknande effekt. De två ingredienserna administrerades, ensamma och i kombination, till friska vuxna kaukasiska kvinnliga försökspersoner i en dubbelblind, randomiserad, klinisk studie under 4 veckor, med en 14-dagars uppföljningsperiod med endast en kosmetisk placeboprodukt.

Instrumentella parametrar relaterade till hudens åldrande utvärderades varannan vecka. Ett frågeformulär administrerades i slutet av behandlingsperioden och efter uppföljningsperioden för att utvärdera produktens tolerabilitet och den upplevda effekten.

2. Material och metoder

2.1. Studieämnen 

75 friska vuxna kvinnliga försökspersoner (medelålder 55,8 ± 7,3) registrerades av en hudläkare enligt följande huvudsakliga uteslutningskriterier: ingen intensiv exponering för UV-strålar under studieperioden, ingen längre exponering för UV-strålar under de fyra veckorna före studie, inte använder produkter (kosmetik eller kosttillskott) med aktivitet jämförbar med studieprodukterna, inte gravid/ammar och använder ett adekvat preventivmedel, inte under en lokal farmakologisk behandling i det hudområde som övervakas under testet eller under behandling med kosttillskott som kan störa testprodukternas funktionalitet.

2.2. Undersökningsprodukter

Följande produkter testades: ett aktivt kosttillskott (AFS), bestående av kapslar innehållande 200 mg ExceptionHYAL® Star, L-askorbinsyra, gelatin, maltodextriner, magnesiumsalter av fettsyror, kiseldioxid och Titandioxid; ett placebokosttillskott (PFS), bestående av kapslar som endast innehåller hjälpämnen och färgämnen. AFS- och PFS-kapslar tillhandahölls av Roelmi HPC SRL och visade samma aspekt, storlek, färg och lukt; en aktiv kosmetisk produkt (ACP) som innehåller 0,5 % (vikt/vikt) PrincipHYAL® Difference och har följande kvalitativa sammansättning som INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredient): Aqua, Helianthus Annus Seed Oil, Coco Caprylate/Caprate, Polyglyceryl{{4} } Metylglukosdistearat, Cetearylalkohol, Glycerylstearat, Natriumhyaluronat, Kaprylglykol, Etylhexylglycerin, O-Cymen-5-ol, Dinatrium EDTA, Parfym; en placebo kosmetisk produkt (PCP) med samma sammansättning av ACP men utan natriumhyaluronat. ACP och PCP tillhandahölls av Roelmi HPC SRL och visade samma fysikalisk-kemiska egenskaper; båda produkterna placerades i 50 ml anonyma PE-burkar.

2.3. Studera design

Denna enkelcenter, dubbelblinda, randomiserade, kliniska studie utfördes vid Complife Italia SRLs anläggningar i enlighet med Helsingforsdeklarationen (1964) och ändringar. Inskrivna försökspersoner tilldelades slumpmässigt till 3 grupper om 25 försökspersoner vardera enligt följande: grupp G1 använde PCP plus AFS; Grupp G2 använde ACP plus PFS; Grupp G3 använde den fullständiga aktiva behandlingen, dvs ACP plus AFS. Försökspersonerna instruerades att applicera, under 28 dagar, ett nötskal av den kosmetiska produkten (PCP eller ACP) på morgonen på ett rent ansikte, massera tills fullständig absorption, och att svälja en kapsel med kosttillskott (PFS eller AFS) med ett glas vatten mellan måltiderna. Försökspersonerna från alla grupper ombads sedan att applicera en kosmetisk kräm (känd för försökspersonerna, men faktiskt PCP) i ytterligare 14 dagar (uppföljning). Kliniska besök planerades vid baslinjen (T0), efter 14 (T14) och 28 (T28) dagars användning av båda produkterna och 42 dagar (T42) efter den ytterligare perioden med PCP-användning. Vid besöken bedömdes studiebehörigheten och instrumentella mätningar genomfördes; Försökspersonerna ombads också att fylla i ett självutvärderingsformulär. Skriftligt informerat samtycke erhölls från alla deltagare. Studieprotokollet och Informed Consent Form godkändes den 4 september 2019 av "Independent Ethical Committee for Non-Farmacological Clinical Studies" Genova, Italien (Ref: 2019/09). Den kliniska studien var förregistrerad (ISRCTN-39211).

2.4. Provstorlek

Urvalsstorleken beräknades med en dubbelsidig signifikansnivå på 5 procent och en styrka på 80 procent med hänsyn tagen till en 20-procentig variation av de primära endpoints på grund av både interindividuell mänsklig variabilitet och fel i mätteknikerna. Provstorleken beräknades med hjälp av PASS 11 statistisk programvara (version 11.0.8 för Windows) som kördes på Windows Server 2008 R2 Standard SP{10}}bitars upplaga (Microsoft, Redmond, Washington, USA). En urvalsstorlek på 20 försökspersoner per grupp var nödvändig, givet en förväntad avhoppsfrekvens på 20 procent.

2.5. Blindning och randomisering

Burkarna som innehöll de kosmetiska produkterna och tuberna som innehöll kosttillskotten var identiska förutom deras batchnummer. En tekniker som inte var inblandad i studien satte ihop kombinationen av testprodukterna enligt deras batchnummer och placerade dem i lådor identifierade med sifferkoder. Tilldelning av behandlingen till försökspersonerna utfördes av en randomiseringslista genererad med hjälp av en lämplig statistisk algoritm ("Weis urn"), en urndesign för sekventiella försök som jämför m Större än eller lika med 2 behandlingar med lika tilldelningar. Studien följde etablerade rutiner för att upprätthålla åtskillnad mellan utredaren och dess medarbetare och personalen som levererade interventionen. Försökspersoner, utredare och kollaboratörer hölls maskerade till produkttilldelningen. Utredaren och de samarbetspartners som fick resultatmätningar informerades inte om det (maskerade) produktgruppsuppdraget. Tilldelningssekvensen hölls tom fram till dataanalysen.

2.6. Utfallsmått

Kliniska och instrumentella utvärderingar utfördes under kontrollerade förhållanden (temperatur 20 ± 2 ◦C och relativ luftfuktighet 50 ± 10 procent), genom att låta försökspersonerna acklimatisera sig i 15–20 minuter före varje besök. Hudens fuktighet mättes i ansiktet enligt Corneometer®-metoden, med användning av Corneometer® CM 825 (Courage plus Khazaka, electronic GmbH). Fördelningen av hydrering på hudytan erhölls av MoistureMap MM 100, en enhet med en kapacitansbaserad sensor som ger grafisk information om hydreringsfördelningen nära ytan och hudens mikrotopografi. Fördelningen av hydrering på hudytan uttrycks i termer av det grå indexet, där närvaron av ledande material (t.ex. vatten) avbildas, i bilden, som mörkare pixlar, medan icke-ledande material resulterar i pixlar på ljusare sida av en gråskala; därför betyder ett högre värde på Grey Index en högre fuktfördelning.

Hudens elasticitet och hudens fasthet utvärderades med Cutometer® MPA 580 (Courage plus Khazaka Electronic, Köln, Tyskland). Hudens elasticitet beräknades som R2-förhållandet (Ua/Uf), det vill säga förhållandet mellan den slutliga deformationen (Uf) och den totala deformationsåtervinningen av huden (Ua) och indikerar hudens förmåga att återgå till sitt ursprungliga tillstånd efter en påfrestande händelse: ju närmare värdet är 1, desto mer elastisk blir huden. Parameter R0=Uf, som antyder hudens fasthet, utvärderades också: en minskning av en sådan parameter indikerar en förbättring av hudens förmåga att motverka den deformation som proben utsätts för under sugfasen. Hudprofilometri utvärderades med hjälp av Primos 3D (Canfield Scientific Europe, BV, Utrecht, Nederländerna), en icke-kontakt in vivo hudmätningsenhet baserad på strukturerade ljusprojektioner som kan kvantitativt utvärdera hudens ytegenskaper (dvs. rynkdjup, rynkvolym , grov hud, etc.); i denna studie utvärderades endast rynkdjup (Rv) och hudens jämnhet (Ra).

2.7. Frågeformulär för självutvärdering

Alla deltagare fick en kopia av ett 16-frågeformulär för självutvärdering relaterat till produktens effektivitet, specifika egenskaper (dvs. produkternas överensstämmelse och behaglighet) och tolerabilitet; hudläkaren tillhandahöll uttömmande information om frågorna och 4-betygsutvärderingsskalan (håller med, håller snarare med, inte håller med, håller inte med) till deltagarna. Frågeformuläret fylldes i av deltagarna under det 28:e besöket och samlades in av hudläkaren. En ny kopia gavs till alla deltagare som fyllde i den efter uppföljningsperioden. Andelen positiva svar (instämmer och håller snarare med) för varje behandling beräknades, och det antogs att den upplevda effekten validerades om minst 80 procent av panelen gav positiv feedback.

2.8. Statistik

Instrumentella data skickades till RM-ANOVA följt av Tukey-Kramer-testet (intragruppsanalys) och till Students t-test för oparade data (intergruppanalys). Variationer ansågs statistiskt signifikanta när p-värdet var<0.05. The statistical software used for statistical analysis was NCSS 10—PROFESSIONAL, vers. 10.0.7, released on 22 July 2015, running on Windows Server 2008 R2 Standard.

3. Resultat

3.1. Tolerabilitet

Alla deltagare genomförde studien och tolerabiliteten för de kosmetiska preparaten och kosttillskotten var mycket god enligt deras självbedömning. Inga allvarliga biverkningar och inga biverkningar registrerades under hela studien.

3.2. Hudfuktning

De basala nivåerna av hudfuktning visade en icke-statistisk skillnad mellan de tre grupperna (Figur 1a). Kronometriresultaten (godtyckliga enheter) indikerade en progressiv ökning av den genomsnittliga hudfuktningen under produktens behandlingsperiod, vilket resulterade signifikant vid T14 för G2 (p < 0.001) och vid T28 för alla tre grupperna (p < 0.001) angående T{{20}}. Fuktighetsnivåerna minskade när de mättes efter uppföljningsperioden, dvs efter 14 dagars användning av endast PCP; emellertid resulterade sådana nivåer statistiskt högre jämfört med de vid T0 för G1 (p < 0,05) och G2 och G3 (p < 0,001). En signifikant skillnad (p < 0,05) observerades för G3 vs. G1 vid T28 och T42. Följaktligen inducerade alla behandlingar en ökning i termer av genomsnittlig procentuell variation av hudfuktning avseende T0 (Figur 1b), nådde en topp vid T28 och minskade sedan vid T42. G2- och G3-behandlingarna, som båda innehöll ACP, resulterade i en högre ökning för G1; G3-behandlingen visade den maximala ökningen av genomsnittlig procentuell variation (plus 17,4 procent vid T28).

3.3. Hydration Distribution

Gray Index-resultaten visade ett liknande mönster som resultaten för hudfuktning. Vid T{{0}} (Figur 2a), visade gråindexet inga signifikanta skillnader mellan grupperna, sedan registrerades en progressiv ökning av medelgråindexet under hela behandlingsperioden för alla grupper; ökningen var redan signifikant vid T14 för G1 (p < 0.01) såväl som för G2 och G3 (p < 0.001). Gråindexet minskade efter uppföljningsperioden; dess nivåer vid T42 var dock statistiskt högre för alla behandlingar (p < 0,001) jämfört med de vid T0, utan signifikanta skillnader mellan grupperna. Alla behandlingar inducerade en ökning i termer av genomsnittlig procentuell variation av gråindexet avseende T0, och nådde en topp vid T28 (Figur 2b), med den högre ökningen som uppnåddes av G3-behandlingen (plus 12,9 procent vid T28). Sedan sjönk det grå indexet vid T42 men till nivåer som fortfarande var högre än vid T14. Fuktighetskartbilder av ett G3-ämne under hela studieperioden visas i figur 3.

3.4. Hudens elasticitet

Inga signifikanta skillnader mellan grupperna för R2-parametern beräknades vid T0 (Figur 4a); sedan registrerades en progressiv ökning för alla tre grupperna under behandlingsperioden, vilket var statistiskt signifikant redan vid T14 för G2 och G3 (p < 0.05 och p < 0 .001 respektive) och vid T28 för alla grupper (p < 0.001). R2-värdet visade en liten minskning efter uppföljningen av det tidigare värdet vid T28 men låg kvar på signifikant högre nivåer (p < 0.001) för de vid T0 för alla behandlingar. Signifikanta skillnader mellan grupperna beräknades vid alla tidpunkter för G3 vs. G1 (p < 0,05, p < 0,1, p < 0,001, respektive vid T14, T28 och T42) och vid T28 för G2 vs. G1 (p < 0,01). Figur 4b visar att alla behandlingar inducerade en ökning i termer av genomsnittlig procentuell variation av hudens elasticitet avseende T0; G2- och G3-behandlingarna, som båda innehöll ACP, resulterade dock i en högre ökning för G1. Den högre ökningen uppnåddes av G3-behandlingen (plus 11,1 procent) vid T28; sedan minskade den procentuella variationen vid T42 för alla behandlingar, men till nivåer som fortfarande var högre jämfört med de vid T14.

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】