Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Antinociceptiv aktivitet av Cistanche salsa stoloner, som växer i Republiken Kazakstan

Elmira B. Kartbaevaa, et al

ABSTRAKT

HerbaCistanche(Cistanche-arter) i traditionell kinesisk medicin används för behandling av flera sjukdomar och symtom, inklusive smärta. Syftet med denna studie var att utvärdera den antinociceptiva effekten av hydroetanolenutdrag avCistanchesalsa(CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloner i djurmodeller av smärta. Den kemiska sammansättningen avHerbaCistancheanalyserades med HPLC-UV. Möss Swiss Webster (25–30 g, n=6) förbehandlades oralt medHerbaCistanche(10, 30 eller 100 mg/kg) och utvärderades i formalintestet och i det capsaicin- eller glutamatinducerade slickningssvaret. KazakiskaHerba Cistanchebestår huvudsakligen av fenylpropanoidglykosider, från vilkaechinakosid, akteosid, ochtubulosidB är huvudbeståndsdelarna. NärHerbaCistancheadministrerades till möss hade det en effekt i båda faserna av formalintestet (77 procent aktivitet vid 30 mg/kg för fas 1 och 62 procent aktivitet vid 100 mg/kg för fas 2), vilket tyder på smärtstillande och antiinflammatoriska egenskaper. KazakiskaHerbaCistanchekunde minska djurens slicktid efter injektion av glutamat (81 procent minskning vid 30 mg/kg) och capsaicin (81 procent minskning vid 100 mg/kg). Vi drar slutsatsen att fenoler som finns i det hydroetanoliska extraktet av C. salsa kan vara ansvariga för dess farmakologiska profil. För att få tillgång till ett råmaterial av god kvalitet för traditionell kinesisk medicin, rekommenderade vi att denna kazakiska art standardiseras med hjälp avechinacoside och akteosidsom markörer.

Nyckelord:Herba Cistanche,HPLC-UV,Echinacoside, Acteosid, Tubulosid, Standardisering

Introduktion

Cistanchesalsa(CA Mey) Beck, Orobanchaceae, är en parasitisk växt från Republiken Kazakstan där den används som industriellt råmaterial (Sarsenbayev et al., 2011; Grudzinskaya och Gemedzhieva, 2012). Det vetenskapliga värdet av denna ört i traditionell kinesisk medicin relaterar till behandlingen av njurproblem (varierande från smärta till insufficiens), impotens, kvinnlig infertilitet, sjuklig leukorré, riklig metrorragi och senil förstoppning (Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional ChineseDrugs, 1977; Chinese Medicinal Herbal, 1988). Den kemiska sammansättningen av stoloner av andra arter avCistanchehar redan studerats i detalj av kinesiska forskare. Följande fenolföreningar identifierades:echinakosid, tubulosid, akteosid, förutom lignaner, iridoider och en komplex polysackarid (Yong andTu, 2009; Zhang et al., 2003; Xie et al., 2005; Jiang et al., 2009; Suiet al., 2011; Liu et al., 2013; Zhou et al., 2014).

Shimoda et al. (2009) visade att denna ört har en hypokolesterolemisk effekt medan Yang et al. (2013) fastställde dess patoprotektiva aktivitet. Nan et al. (2013) rapporterade den antiinflammatoriska aktiviteten för dess extrakt. En komplex polysackarid som tidigare isolerats från denna växt visade immunmodulerande effekter (Wang et al., 2009).

Även om det finns en ansenlig mängdCistanchestoloner i Republiken Kazakstan finns det ingen populär användning för denna växt av den kazakiska befolkningen även om grannarna i Kina använder den i stor utsträckning. På grund av det faktum att det finns ett stort problem nuförtiden i samband med substitution/förfalskning av medicinalväxter och det ökande behovet av att standardisera läkemedel för användning i traditionell kinesisk medicin, utformades denna studie för att fastställa den fenolkemiska sammansättningen av detta råa växtmaterial som växer i grannlandet Kazakstan samt att bedöma dess användning som antinociceptiv för att potentiellt lindra smärtan – vilket kännetecknar en av dess huvudsakliga användning inom traditionell kinesisk medicin.

Material och metoder

Växtmaterial

Cistanchesalsa (CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloner samlades in i öknen Moinkum, byn Bakanas, i juli 2014 i Almaty. Växtmaterialet identifierades av Dr. G. Sitpayeva från Institute of Botany and Phytointroduction, Ministry of Education and Sciences i Republiken Kazakstan där det deponerades under numret 01-04/306.

Kemisk analys

Stoloner av C. salsa (2 g) utsattes för en mikrovågsextraktion. Inledningsvis maldes materialet till 0.001–2.000 mm och placerades sedan i ett hermetiskt kärl för att extraheras i 10 min vid 100–1100 ◦C med etanol 80 procent (förhållande 1:10). Hydroetanolextraktet (CSHE) analyserades med HPLC-MS. Det råa extraktet löstes i metanol (9,6 mg/ml) och filtrerades genom ett 0,45 mm teflonmembran före analysen. En vätskekromatografHP 1100-seriens modell (företaget Agilent Technologies, Inc., CA, USA), utrustad med en strömmande vakuumavgasare, en fyrkanalig lågtrycksgradientpump och en automatisk injektor. Fenolföreningar separerades kromatografiskt med en kolonnZorbax Eclipse XDB-C18, 2,1 x 50 mm, fylld med oktadecylsilylsilikagelpolymer (1,8 µm). Kromatografisk analys utfördes med ett rörligt fasflöde på 0,2 ml/min, eluentdriftstryck på 175–200 kPa, kolonnugnstemperatur på 30 ◦C, 2 ml provvolym, gradienteluentmatningsläge: 0–36 min 10 procent A – 90 procent B;36 min – 100 procent B (eluent A: metanol, eluent B: 0,2 procent myrsyralösning). Detektion utfördes med UV vid våglängderna 254, 334, 350, 410, 450 och 550 nm. Jämförelse av de erhållna retentionstiderna, UV- och masspektra med de för referensföreningar användes för identifiering av de kemiska föreningarna i extraktet. Kvantitativ analys utfördes med användning av standardverbascosideochechinakosidanalyserades under samma kromatografiska betingelser. Deras kalibreringskurvor möjliggjorde beräkningen av mängden av varandras fenylpropanoidglykosid i etanolextraktet från denna växt. Metoden validerades inte.

Djur

Swiss Webster-möss (20–25 g, två månader gamla) användes i denna studie (donerad av Instituto Vital Brazil, Niterói, RJ, Brasilien). Djuren hölls under standardförhållanden (ljus-mörkercykel på 12 timmar, 22 ± 2 grader och 70–80 procent luftfuktighet. Mat och vatten ad libitum). Djuren fick endast vatten för att undvika matinterferens med substansabsorptionen 12 timmar innan experimenten började. Acklimatisering till laboratorieförhållandena skedde i minst 1 timme före varje test. Alla protokoll utfördes i enlighet med riktlinjerna för etiska standarder för undersökning av experimentell smärta hos djur och följde de principer och riktlinjer som antagits av National Council for the Control of Animal Experimentation (CONCEA), godkänd av Biomedical Science Institute/UFRJ, Ethical Committee for Animal Research, och fick numret DFBCICB015-04/16. Alla experimentella protokoll utfördes under den lätta fasen. Antalet djur per grupp hölls på ett minimum och enligt regler från CONCEA. Vid slutet av varje experiment dödades möss genom överdosering av ketamin/xylazin.

Behandlingar

I denna studie utvärderades CSHE vid 10, 30 och 100 mg/kg. Extraktet löstes i dimetylsulfoxid (DMSO, FisherBiotech) för att framställa en stamlösning med 100 mg/ml. PBS användes som ett utspädningsmedel för framställning av de olika doserna. Lösningar innehållande 10, 30 och 100 mg/kg av hydroetanolextraktet avCistanchesalsavar förberedda. Standardläkemedlen som användes var morfin 2,5 mg/kg (Merck, utspädd i fosfatbuffertsaltlösning (PBS)), acetylsalicylsyra 200 mg/kg (Sigma Aldrich, löst med 5 M natriumhydroxid (NaOH) i 0,9 procent saltlösning) och capsazepin 10 nMolper tass. Saltlösning plus DMSO (i samma koncentration som i den högsta behandlingen med extrakt) gavs till den negativa kontrollgruppen. Alla behandlingar (testade extrakt och standarder) administrerades oralt. Det enda undantaget var kapsazepin som administrerades genom intraplantar injektion.

Formalin-inducerad akut smärta

En lösning av 2,5 procent formalin (37 procent formaldehyd) injicerades (20 ul) i plantarområdet på höger baktass på möss 60 min efter behandling (hydroetanolextrakt avCistanchesalsaeller acetylsalicylsyra 200 mg/kg eller morfin 2,5 mg/kg) (Matheus et al., 2005). Djuren placerades individuellt i en genomskinlig glaskammare och tiden i sekunder som de tillbringade med att slicka sin pawafter-injektion av formalin registrerades och analyserades under två separata perioder, tidig fas-neurogen smärta (0–5 minuter efter injektion) och sen fas- inflammatorisk smärta (15–30 min efter injektion).

Nociception inducerad av capsaicin

Detta test baserades på den metod som beskrivs av Sakurada et al. med vissa modifieringar (Sakurada et al., 1992). Capsaicin (20 ul) C18H27NO3 (Galena, Campinas, SP) injicerades i plantarregionen av höger baktass på mössen (1,6 ug/tass) en timme efter behandling (hydroetanolextrakt avCistanchesalsa eller capsazepin10 nMol/tass). Djuren placerades individuellt i en glaskammare och varaktigheten för tassslickning registrerades mellan 0 och 5 minuter efter capsaicininjektionen och analyserades sedan.

Glutamat-inducerad nociception

I metoden som beskrivs av Beirith et al. (2002), injicerades glutamatlösning i PBS (20 ul) (l-glutaminsyra, Sigma–Aldrich, 3,7 ng/tass) i plantarområdet på höger baktass på mössen en timme efter behandling (hydroetanolextrakt avCistanchesalsa eller morfin 2,5 mg/kg). Djuren placerades individuellt i en glaskammare och tassslickningstiden (sekunder) registrerades mellan 0 och 15 minuter efter glutamatinjektionen och analyserades sedan.

Statistisk analys

De kemiska data presenteras som medelvärde ± SD för fem experiment. Alla farmakologiska experimentella grupper bestod av minst sex möss. Analys av envägsvarians (ANOVA) följt av Dunnetts test möjliggjorde visualisering av statistisk signifikans mellan grupper med programvaran GraphPad Prism 5.0. p-värden ansågs signifikanta när de var mindre än 0.05(p <>

Resultat

Cistanchesalsahydroetanolextrakt (två olika spädningar) kromatogram visas i fig. 1. Tabell 1 visar bestämningen av fenolföreningarna tillsammans med deras respektive retentionstider i kromatogrammet.

Effekt av CSHE på formalin-inducerad akut smärta

I det formalininducerade akuta smärttestet kunde CSHE vid 10, 30 och 100 mg/kg minska tassslickning i den första fasen av testet som kallas neurogen smärtfas, dessa minskningar var 60, 77 respektive 58 procent . . Dessutom var de också effektiva för att minska inflammatorisk smärta inducerad under den andra fasen av testet, den procentuella hämningen av inflammatorisk smärta var 42, 46 respektive 62 procent (Fig. 2). Morfin (2,5 mg/kg) och acetylsalicylsyra (200 mg/kg) gav följande resultat: 55 procent /33 procent och 31 procent /54 procent för den första respektive andra fasen.

Effekt av CSHE på glutamatinducerad nociception

CSHE minskade slickningen som inducerades av glutamat vid de tre testade doserna, 10, 30 och 100 mg/kg med 76, 81 respektive 53 procent (fig. 3). Morfin på 2,5 procent resulterade i en minskning med 76 procent

Effekt av CSHE på capsaicin-inducerad nociception

För att verifiera om CSHE skulle påverka nociception genom TRPV1-receptorer, testades det i en modell av smärta inducerad av capsaicin. Den antinociceptiva effekten genom denna modell observerades för CSHE i de tre testade doserna, med 76, 79 respektive 81 procent (Fig. 4). Capsazepin 10 nMol/tass resulterade i en minskning med 60 procent.

Diskussion

Totalt tio fenylpropanoidglukosider identifierades i hydroetanolextraktet av C. salsa (som växer i Kazakstan).Echinacoside(10,98 mg/g),akteosid(9,44 mg/g) och tubulosid B (7,94 mg/g) var huvudföreningarna som identifierades. De erhållna data var korrelerade med tillgänglig litteratur för arter avCistancheväxer i olika regioner i Asien (Zhou et al., 2014; Xieet al., 2005; Jiang et al., 2009).Echinacosideochakteosidär huvudkomponenterna som ligger till grund för standardisering av de officiella arternaCistanchedeserticola ochCistanchetubulosa, listad i den kinesiska farmakopén 2005. Vi föreslår att dessa föreningar också kan användas för standardisering avCistanchesalsastoloner från Kazakstan, eftersom de är de viktigaste i det studerade hydroetanolextraktet.

Enligt de farmakologiska resultaten av denna studie är det möjligt att föreslå att CSHE är ett effektivt medel mot neurogenisk smärta och inflammation som observerats i formalintestet. Som vi förstår det,Cistanchesalsa har aldrig testats i relation till dess antinociceptiva verkan. En studie från 2002 medCistanchedeserticola (Lin et al., 2002) har visat att denna växt uppvisade antinociceptiva och antiinflammatoriska aktiviteter när den analyserades i modeller som total vridning, formalin och tassödem. Även om det inte gjordes något försök att undersöka huvudbeståndsdelarna i extrakten som var aktiva, ansåg de butanolextraktet och vattenskiktet som de aktiva. Inte överraskande har dessa lösningsmedel en polaritetsskala som matchar de fenylpropanoidglykosider som finns iCistanchesalsa. Dessutom fastställde Lin och medarbetare att den antinociceptiva verkan avCistanchedeserticolaextrakt berodde inte på verkan av föreningen i opiatreceptorn eller relaterade till immunsystemet. I vår studie visade det fenylpropanoidrika extraktet aktivitet i båda faserna av formalintestet. Den observerade aktiviteten berodde i själva verket på det undersökta farmakologiska målet och inte på någon möjlig motorisk förändring, vilket framgår av therotarod-testet. Formalintestresultat indikerar potentialen för neurogen smärta såväl som smärta inducerad av inflammatoriska mediatorer. Inledningsvis bestämde vi oss för att undersöka den neurogena smärtvägen. Eftersom liknande föreningar från andra arter som tidigare studerats inte visade någon opiatreceptoraktivitet, bestämde vi oss för att testa andra modeller, såsom glutamat- och capsaicinmodeller.

Glutamat är en excitatorisk signalsubstans som har en viktig roll i att modulera smärta i det perifera och centrala nervsystemet. Denna verkan medieras av ligandstyrda jonotropiska glutamatreceptorer (iGluRs) och metabotropa glutamatreceptorer. iGluR kan delas in i N-metyl-d-aspartat(NMDA) och -amino-3-hydroxi-5-metylisoxazol-4-propionsyra (AMPA) (Kolber, 2015). Forskning har visat att när man antagoniserar NMDA- och AMPA-receptorer med ketamin respektive kainat, observeras antinociceptionseffekter. Emellertid har antagonister som riktar sig mot dessa receptorer hittills inducerat en avsevärd negativ effekt och av denna anledning fokuserar ny forskning på att mGluRshopping att medicin som förmedlas via denna receptor skulle orsaka färre biverkningar har utförts (Palazzo et al., 2014). Resultaten av att testa CSHE visade att denna behandling var effektiv för att minska smärta inducerad av glutamat. Det är dock fortfarande okänt om denna effekt förmedlas genom jonotropa och/eller metabotropa receptorer. Morfin är ett av de tillgängliga läkemedel som har en effekt på glutamatergisk överföring (Deyama et al., 2007). Det rapporteras i litteraturen att glutamatreceptoraktivering ökar TRPV1-svaren (Szteyn et al., 2015). Av den anledningen är det möjligt att effekten som observerats för CSHE kan bero på aktivitet på TRPV1 och inte nödvändigtvis genom ett direkt svar på glutamatreceptorer.

Nästa steg i denna forskning var att utföra ett tassslickande test med capsaicin som det algetiska medlet, vilket är en TRPV1-receptoragonist. Resultaten visade att CSHE verkligen minskade smärta genom TRPV1-receptorn.

När det gäller CSHE, nästan i alla testade metoder, kunde vi observera att dosen 30 mg/kg gav bättre resultat än 100 mg/kg. Detta kan bero på att lösningens mättnad leder till utfällda föreningar och att mindre mängder läkemedel är biotillgängliga.

Att bekräfta den etablerade kemiska sammansättningen för det kazakiska extraktet CSHE var ett viktigt steg eftersom de viktigaste beståndsdelarna som finns i det redan har fått sina antinociceptiva/antiinflammatoriska effekter bekräftade på något sätt.echinakosidetablerades som en av de aktiva principerna som ansvarar för den antinociceptiva effekten av Echinacea (Hostettmann, 2003). En tidigare studie av Schapoval och medarbetare (Schapoval et al., 1998) påpekade ocksåakteosidsom en av de huvudsakliga aktiva beståndsdelarna i ett etanolextrakt framställt med Stachytarpheta cayennensis, utvärderat med tassödem och varma plattor. Backhouse och medarbetare (Backhouse et al., 2008) ansåg ocksåakteosidatt vara den aktiva principen för Buddleja globos genom att använda flera modeller för smärtbedömning, inklusive formalintest. Nya formuleringar utvecklas nu med hjälp av den senaste kunskapen för att öka stabiliteten och förlänga den antinociceptiva effekten avakteosid(Isacchi et al., 2016).

Slutsats

Tio ämnen av fenolisk natur identifierades i kazakernas stolonsCistanchesalsa genom HPLC/MS-analys. Dessa föreningar kan vara ansvariga för den antinociceptiva aktivitet som observeras i de experimentella modellerna utförda häri. Med tanke på att släktet på Kazakstans territoriumCistancherepresenteras huvudsakligen av arterCistanchesalsa, kan vi rekommendera dess skörd och standardisering med hjälp avechinakosidochakteosidsom standardföreningar, för att få fram ett råmaterial av god kvalitet för traditionell kinesisk medicin.

Etiska avslöjanden

Skydd av människor och djur. Författarna förklarar att de förfaranden som följdes var i enlighet med föreskrifterna från den relevanta kliniska forskningsetiska kommittén och med de i World Medical Associations etiska regler (Helsingforsdeklarationen).

Sekretess för data.

Författarna förklarar att inga patientdata förekommer i denna artikel.

Rätt till integritet och informerat samtycke. Författarna förklarar att inga patientdata förekommer i denna artikel.

Författarnas bidrag

EBK utförde insamlingen av anläggningen, beredningen av extraktet och analysen av de kemiska resultaten samt skrivningen av uppsatsen; GRD, utförde alla farmakologiska tester; ZBS, designade studien i samband med FB; LNI och ENB deltog i studiens farmakopédesign för att inkludera de erhållna resultaten i den kazakiska farmakopén; IIT, utförde HPLC-analyserna; PDF, designade den farmakologiska studien och FB, organiserade teamet tillsammans för att skriva detta papper.

Intressekonflikt

Författarna förklarar inga intressekonflikter.

Erkännanden

Författarna från Brasilien tackar Alan Minho för teknisk hjälp och Instituto Vital Brazil för donationer av använt djur. De vill också erkänna bidragen från CNPq och Fundac¸ ão Carlos Chagas Filho de Apoio à Pesquisa do Estadodo Rio de Janeiro. Författarna från Irland vill erkänna High Education Authority's Program for Research in Third-Level Institutions Cycle 5:s finansieringsstöd för TBSI och att förstärka betydelsen av SFI-programmet ISCA-Brazil (anslagsnr. SFI/13/ISCA/2843) som bidrog till samarbete mellan Brasilien och Irland. Författarna från Kazakstan vill tacka KazNMU för det ekonomiska stöd som tillåts för genomförandet av detta arbete.

Från: "Antinociceptiv aktivitet hos Cistanche salsa stoloner, som växer i Republiken Kazakstan" av Elmira B. Kartbaevaa, et al.

---EB Kartbaeva et al. / Revista Brasileira de Farmacognosia 27 (2017) 587–591

Referenser

Backhouse, N., Delporte, C., Apablaza, C., Farias, M., Goïty, L., Arrau, S., Negrete, R., Castro, C., Miranda, H., 2008. Antinociceptiv aktivitet av Buddleja globose (matico) i flera modeller av smärta. J. Etnopharmacol. 119, 160–165.

Beirith, A., Santos, ARS, Calixto, JB, 2002. Mekanismer som ligger till grund för nociception och tassödem orsakade av injektion av glutamat i mustassen. Brain Res. 924, 219-228.

Chinese Academy of Medical Sciences, 1988. Institute of Medicinal Plants, Chinese Medicinal Herbal, vol. 4., 2:a uppl. People's Medical Publishing House, Peking.

Deyama, S., Yamamoto, J., Machida, T., Tanimoto, S., Nakagawa, AT, Kaneko, S., Satoh, M., Minami, M., 2007. Hämning av glutamatergisk överföring av morfin i basolateral amygdaloid nucleus minskar smärtinducerad aversion. Neurosci. Res. 59, 199-204.

Grudzinskaya, LM, Gemedzhieva, NG, 2012. Lista över medicinalväxter i Kazakstan. Publishing House of Institute of Botany and Phytointroduction of the RK, Almaty.
Hostettmann, K., 2003. En växts historia: exemplet med Echinacea. Forsch Komp. Klas. Nat. Suppl. 1, 9–12.
Isacchi, B., Bergonzi, MC, Iacopi, R., Ghelardini, C., Galeotti, N., Bilia, AR, 2016.
Liposomal formulering för att öka stabiliteten och förlänga anti-neuropatisk aktivitet av verbascoside. Planta Med. 83, 412–419.
Jiang, Y., Li, SP, Wang, YT, Chen, XJ, Tu, PF, 2009. Differentiering avHerbaCistanchergenom fingeravtryck med högpresterande vätskekromatografi-diod array-detektion-masspektrometri. J. Chromatogr. 1216, 2156–2162.
Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional Chinese Drugs, 1977. 1:a upplagan, Shanghai Scientific & Technologic Publisher, Shanghai.
Kolber, BJ, 2015. mGluRs topp till tå i smärta. Prog. Mol. Biol. Transl. 131, 281-324.
Lin, LW, Hsieh, MT, Tsai, FH, Wang, WH, Wu, CR, 2002. Anti-nociceptiv och antiinflammatorisk aktivitet orsakad av Cistanche deserticola hos gnagare. J. Etnopharmacol. 83, 177–182.
Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB, Tu, PF, 2013. Kemiska beståndsdelar från Cistanche Sinensis (Orobanchaceae). Biochem. Syst. Ecol. 47, 21–24.
Matheus, ME, Berrondo, LF, Vieitas, EC, Menezes, FS, Fernandes, PD, 2005. Utvärdering av de antinociceptiva egenskaperna från Brillantaisia ​​palisotii Lindau stamextrakt. J. Etnopharmacol. 102, 377-381.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF, 2013. Fenyletanoidglykosider med antiinflammatoriska aktiviteter från stjälkar av Cistanche deserticola odlade i Tarimöknen. Fitoterapia 89, 167–174.
Palazzo, E., Marabese, I., de Novellis, V., Rossi, F., Maione, S., 2014. Supraspinal metabotropa glutamatreceptorer: ett mål för smärtlindring och bortom. Eur. J. Neurosci. 39, 444–454.
Sakurada, T., Katsumata, K., Tanno, K., Sakurada, S., Kisara, K., 1992. Capsaicintestet på möss för att utvärdera tachykinin-antagonister i ryggmärgen. Neuropharmacology 31, 1279–1285.
Sarsenbayev, KN, Isabaev, SO, Kolosov, NG, 2011. Proceedings of the International Scientific Conference "Modern Ecological State of the Aral Sea Region, the Prospects for Solving Problems", Kyzylorda, s. 195–200.
Schapoval, EES, Vargas, MRW, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, Henriques, AT, 1998. Antiinflammatoriska och antinociceptiva aktiviteter av extrakt och isolerade föreningar från Stachytarpheta cayennensis. J. Etnopharmacol. 60, 53–59.
Shimoda, H., Tanaka, J., Takahara, Y., Takemoto, K., Shan, SJ, Su, MH, 2009. De hypokolesterolemiska effekterna av Cistanche tubulosa-extrakt, en kinesisk traditionell råmedicin, hos möss. Am. J. Chin. Med. 37, 1125-1138.
Sui, ZF, Gu, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Le, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Vattenlöslig kolhydratförening från kropparna avHerbaCistanche: isolering och dess renande effekt på fria radikaler i huden. kolhydr. Polym. 85, 75–79.
Szteyn, K., Rowen, MP, Gomez, R., Du, J., Carlton, SM, Jeske, NA, 2015. A-kinasförankringsprotein 79/150 koordinerar metabotropisk glutamatreceptorsensibilisering av perifera sensoriska neuroner. Smärta 156, 2364–2372.
Wang, XY, Qi, Y., Cai, RL, Li, XH, Yang, MH, Shi, Y., 2009. Effekten av Cistanche deserticola polysaccharides (CDPS) på makrofageraktivering. Haka. Pharmacol. Tjur. 25, 787-789.
Xie, JN, Zhao, MB, Wu, FW, Tu, PF, 2005. Det kromatografiska fingeravtrycket av Cistanche deserticola med HPLC. Haka. Trad. Ört. Drugs 36, 268–271.
Yang, FR, Wen, DS, Fang, BW, Lou, JS, Meng, L., 2013. Förebyggande av Cistanche-salsaextrakt på leverfibros inducerad av koltetraklorid hos råttor. Haka. Ört. Med. 5, 199-204.
Yong, J., Tu, PF, 2009. Analys av kemiska beståndsdelar i Cistanche-arter. J. Chromatogr. 1216, 1970–1979.
Zhang, X., Li, X., Rena, K., Du, NS, 2003. RP-HPLC-bestämning av echinakosid ochakteosidiHerbaCistancherodlas på olika parasitiska arter och livsmiljöer. Haka. J. Pharm. Anal. 23, 254-256.
Zhou, J., Zhang, Q., Bing Sun, J., Li Sun, X., Zeng, P., 2014. Tvåfas ihålig fiber vätskefas mikroextraktion baserad på magnetofluid för samtidig bestämning avechinakosid, tubulosid B, akteosidoch isoakteosid i råttplasma efter oral administrering av Cistanche-salsaextrakt genom högpresterande vätskekromatografi. J. Pharm. Biomed. Anal. 94, 30–35.