Att bedöma förhållandet mellan högkänsligt C-reaktivt protein och njurfunktion med hjälp av mendelsk randomisering i den japanska gemenskapsbaserade J-MICC-studien

ABSTRAKT

Bakgrund: Inflammation tros vara enriskfaktor för njursjukdom. Men huruvida inflammatorisk status är antingen en orsak eller ett resultat avkronisk njursjukdomförblir kontroversiellt. Vi syftade till att undersöka orsakssambandet mellanhögkänsligt C-reaktivt protein(hs-CRP) ochuppskattad glomerulär filtrationshastighet(eGFR) med hjälp av Mendelsk randomisering (MR) metoder.

Metoder:Totalt 10 521 deltagare i Japan Multi-institutional Collaborative Cohort Study analyserades i denna studie. Vi använde två-prov MR-metoder (den omvända variansviktade (IVW), den viktade medianen (WM) och MR-Egger-metoden) för att uppskatta effekten av genetiskt bestämd hs-CRP på njurfunktionen. Vi valde fyra och tre hs-CRP-associerade singelnukleotidpolymorfismer (SNP) som två instrumentella variabler (IV): IVCRP och IVAsian, baserat på SNP som tidigare identifierats i europeiska och asiatiska populationer. IVCRP och IVAsian förklarade 3,4 % respektive 3,9 % av variationen i hs-CRP.Resultat:Genom att använda IVCRP var genetiskt bestämd hs-CRP inte signifikant associerad medeGFRi IVW- och WM-metoderna (uppskattning per 1 enhetsökning i ln(hs-CRP), 0.000; 95 % konfidensintervall [CI], −0.{{ 7}}19 till 0.020 och −0.003 95 % CI, −{{23 }}.019 till 0.014, respektive). För IVAsian hittade vi liknande resultat med IVW- och WM-metoderna (uppskattning, 0.005; 95 % CI, −0.{{44} }20 till 0,010 respektive -0,004; MR-Egger-metoden visade inte heller några orsakssamband mellan hs-CRP och eGFR (IVCRP: -0,008; 95% CI, -0,058 till 0,042; IVAsian: 0,001; 95% CI, -0,036 till 0,036).

Slutsatser:Våra tvåprovs MR-analyser med olika IV stödde inte en orsakseffekt av hs-CRP på eGFR.

Nyckelord: hs-CRP; eGFR; Mendelsk randomiseringsstudie;genetisk epidemiologi; inflammation

KLICKA HÄR FÖR ATT FÅ NATURLIGT EKOLOGISKT CISTANCHE-EXTRAKT MED 25% ECHINACOSIDE OCH 9% ACTEOSIDE FÖR NJURFUNKTION

Supportive Service Of Wecistanche - Den största cistanche-exportören i Kina:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Handla för fler specifikationer:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-butik

INTRODUKTION

Systemisk inflammation anses vara en av deriskfaktorer för vanliga kroniska sjukdomar, InklusiveDiabetes mellitus,1 högt blodtryck,2 hjärt-kärlsjukdomar,3 ochkronisk njursjukdom(CKD).4 I allmänhet,C-reaktivt protein(CRP) har använts som en biomarkör för systemisk inflammation i klinisk och grundforskning. Även om de tidigare longitudinella studierna har undersökt sambandet mellan CRP-nivåer och CKD i olika populationer, är bevis på orsakssambandet för detta samband fortfarande kontroversiella.5–7 Vissa forskare visade dock effekten av CRP-orienterade biologiska funktioner på njurfunktionen.8, 9 En forskare har också publicerat en metaanalys som tyder på att D-vitamintillskott kan sänka cirkulerande CRP-nivåer.10 Sammantaget tyder dessa studier på att ingrepp på CRP kan bidra till att förbättra njurfunktionen.

Under de senaste åren harMendelsk randomisering(MR) tillvägagångssätt har väckt stor uppmärksamhet inom genetisk epidemiologi. Den största fördelen med denna metod är att undersöka ett orsakssamband mellan en exponering (X) och ett utfall (Y) från en observationsdatauppsättning med hjälp av genetiska varianter som instrumentella variabler (G: IV).11 Utvecklingen av MR-analys skedde i följd efterr identifiera enkelnukleotidpolymorfismer(SNP) i genomomfattande associationsstudier (GWAS). Som med andra hälsoresultat, identifierade tidigare GWAS SNP:er associerade med CRP-nivåer, inklusive CRP-genen i kromosom 1.12,13 Intressant nog är det känt att serum CRP-nivåer påverkas av genetiska polymorfismer,14 vilket indikerar att SNP:er associerade med CRP-nivåer kan återspegla den långa exponeringen för högre=lägre CRP-nivå. Därför är SNP associerade med serum-CRP-nivåer lämpliga för IV för att undersöka orsakssambanden mellan CRP och flera patofysiologiska tillstånd, och används i tidigare MR-studier bland vuxna i europeiska länder.15–17

I asiatiska länder har storskaliga kohortstudier samlat in mänskliga genom och utfört genotypning under de senaste decennierna. Flera forskare genomförde GWAS och fann nya loci associerade med CRP-nivåer i asiatiska populationer.18–20 Dessa studier gör det möjligt för forskare att genomföra MR-studier med CRP-associerade SNP i asiatiska populationer, vilket verkar vara viktigt med tanke på etniska skillnader. Därför undersökte vi om genetiskt bestämda hs-CRP-nivåer med två olika IV, baserade på SNP: er identifierade i europeiska och asiatiska populationer, var orsaksrelaterade tillnjurfunktioni en japansk befolkning som använder MR-metoder.

METODER

Studera ämnen

The study subjects were participants of the Japan Multi-institutional Collaborative Cohort (J-MICC) Study which was conducted in 14 study areas throughout Japan. The purpose of the J-MICC study was to find out the risk factors of cancer and other diseases by examining the relationship between genetic variants, lifestyle habits, blood components, and disease. The eligibility for the J-MICC Study was adults aged 35–69 years living in each study area. The details of the J-MICC Study have been described previously elsewhere and the latest information is available on its website (http:==www.jmicc.com).21,22 The selection process of participants is shown in Figure 1. From the genotyped 14,539 subjects, 26 samples with inconsistent sex information between the questionnaire and an estimate from genotype were excluded. The identity-by-descent method implemented in the PLINK 1.9 software (https:==www.cog-genomics.org=plink2) identified 388 relative pairs (pi-hat >0.1875) and one sample of each pair was excluded. Principal component analysis with a 1,000 Genomes reference panel (phase 3) (http:==www. international genome.org= category=phase-3=) detected 34 subjects whose estimated ancestries were outliers from the Japanese population. The 34 samples were excluded. Among all the remaining 14,091 samples, five subjects withdrew their consent to participate, leaving 14,086 subjects for the final analyses. Of these, the values of serum hs-CRP were available only at three study sites. Therefore, we decided to use a two-sample MR study design, rather than a single sample MR for a smaller dataset. We divided the participants into two groups; 1) 2,503 participants (available for hs-CRP) and 2) 12,501 participants (non-overlapping participants), which are by a basic principle of two-sample MR (nonoverlapping populations with the same ethnicity, similar sex, and age distribution).23 After excluding participants who had an extremely high value for hs-CRP (hs-CRP >3.0 mg=dL, n = 828) and eGFR (eGFR >120 mL=min=1.73 m2, n=3,647), och lägre än kvantifieringsgränsen för hs-CRP (n=8), totalt 10 521 japaner (1 667 för genetisk association med hs-CRP [kallas CRP-datauppsättning] och 8 854 för genetisk association med eGFR [kallas som eGFR-datauppsättning]) analyserades i MR med två prover i denna studie. Skriftligt informerat samtycke erhölls från alla deltagare i denna studie. J-MICC-studien genomfördes med efterlevnad av de etiska riktlinjerna för det mänskliga genomet och genetisk sekvenseringsforskning. Proceduren för denna studie godkändes av Ethics Review Committee vid Nagoya University Graduate School of Medicine (939-14), Aichi Cancer Center och alla forskningsinstitut. Vi utförde analyser med hjälp av datamängden från version 20190728.

Mätning av hs-CRP och eGFR

Serumprover samlades in från alla deltagare. Vi mätte hs-CRP med latexförstärkt nefelometri. Serumkreatinin mättes med användning av en enzymatisk metod. Vissa institut mätte serumkreatinin med Jaffe-metoden och omvandlade det sedan till motsvarande värde för den enzymatiska metoden. eGFR beräknades med den japanska ekvationen som föreslagits av Japanese Society of Nephrology: eGFR (mL= min=1.73 m2)=194 × serumkreatinin (mg=dL) −1.{{10}}94 × ålder−0,287 (× 0,739 för kvinnor).24

Urval av instrumentella variabler

Listan över kandidat-SNP för IV visas i tabell 1. Först valde vi fyra SNP (rs3093077, rs1205, rs1130864 och rs1800947) inom CRP-genen som användes som IV i tidigare MR-studier.15 I denna studie valdes ut som en minsta delmängd för att erhålla diversitet vid CRP-genen i europeiska populationer och kallades IVCRP. Därefter ansåg vi att det är nödvändigt att välja SNP: er och utveckla ursprungliga IV: er i en asiatisk befolkning eftersom IVCRP utvecklades baserat på SNP: er identifierade hos människor av europeisk härkomst. Därför sökte vi efter ordet 'CRP' i GWAS-katalogen (https:==www.ebi.ac.uk= gwas=), och avgränsade till studierna enligt följande kriterier: 1) en studie utförd i en asiatisk befolkning och 2) en studie med både upptäckten och replikeringsfasen. Efter det webbaserade urvalet valde vi slutligen 13 SNP. För 151233628, på grund av låg imputeringskvalitet (MAF<0.05 and r2 < 0.3), this SNP was not included in the original J-MICC dataset. Of the remaining 12 SNPs, 6 SNPs (rs12133641, rs9375813, rs2097677, rs79802086, rs2393791, and rs1169284) were excluded because these SNPs were not significantly associated with hs-CRP in our dataset (P > 0.0042 = 0.05=12). Next, rs814295 (GCKR) and rs429358 (APOE) were likely to have pleiotropic effects on kidney function. rs3093059 was excluded due to the high linkage disequilibrium (LD) with rs3093068 in the CRP dataset (r2 > 0.9). Finally, three SNPs (rs30933068, rs7553007, and rs7310409) were included in our analysis and were called as IVAsian (Table 2).

Statistisk analys

To confirm the cross-sectional association between hs-CRP and eGFR, multiple linear regression analysis was performed with adjustments for sex, age, and study sites. We performed two-sample MR approaches after dividing the participants into two datasets (CRP and eGFR datasets) as described above. Methods for two-sample MR were different from the one-sample MR method, which was described in previous methodological papers.25–27 The inversevariance weighted method (IVW) is a conventional approach to estimating a causal effect on a study outcome from different studies in meta-analysis.25 In the setting of MR analysis, the IVW method can provide a combined estimate weighted using the inverse variances of the causal effect of per-allele. However, this method can be biased when a genetic variant violates the assumptions of MR (eg, pleiotropic effect).27 Therefore, we also performed two other methods (the weighted median (WM) and the MR-Egger method) which can provide consistent estimates even under the weaker assumption.25 The MR-Egger analysis is also useful to detect either both directional pleiotropy or violation of the Instrument Strength Independent of Direct Effect (InSIDE) assumption. Additionally, the F-statistic was calculated for each IV from linear regression analyses to test whether IVs are strongly associated with exposure (referred to as relevance assumption).28 We performed linear regression analyses using the lm function in R and included all SNPs used in each IV in models. An arbitrary threshold of F-statistic >10 användes för att undvika att använda svaga genetiska instrument i denna studie.29 Alla statistiska analyser utfördes med programvaran R version 3.5.0 (R Foundation for Statistical Computing, Wien, Österrike). I synnerhet användes ett R-paket av "MendelianRandomization" för tvåprovs MR-analyser.30