Forskningsframsteg och tillämpning inom fingeravtrycksteknik på kinesisk materia Medica Ⅱ

1.2 Elektrokemiskt fingeravtryck

Elektrokemi är en enkel analysmetod baserad på de elektrokemiska egenskaperna och principerna för det ämne som ska testas, vilket är billigt, mycket känsligt och kräver få förbrukningsvaror [19]. Denna metod har dock vissa begränsningar och är för närvarande huvudsakligen tillämpbar för analys av kinesiska läkemedel som innehåller kemiska komponenter som terpener (som Angelica sinensis), flavonoider (som Scutellaria baicalensis), alkaloider (som Aconite) och antrakinoner ( såsom rabarber) som kan genomgå elektrokemiska reaktioner.

Wu Di et al. [20] använde ett elektrokemiskt fingeravtryck för att fastställa den optimala extraktionsprocessen av Scutellaria baicalensis Georgi, vilket ger en bra metod för att rationellt använda kinesiska medicinska material. Shi Huihui et al. [21] använde Belousov-Chabotinsky (BZ) reaktion kemisk oscillationsteknik för att undersöka effekterna av temperatur, rotationshastighet och antalet medicinska material som lagts till experimentresultaten och etablerade rimliga experimentella förhållanden för att erhålla det elektrokemiska fingeravtrycket från Magnolia biondii Pamp ., tillhandahåller en ny metod för kvalitetskontroll av Magnolia biondii. Zou Guihua et al. [22] fastställde det olinjära elektrokemiska fingeravtrycket för Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. Och Gentiana macrophylla Pall. De elektrokemiska fingeravtrycken för de två medicinska materialen är visuellt olika, vilket kan användas som en enkel och effektiv metod för att skilja Codonopsis pilosula från Gentiana macrophylla. Dai Hongxia et al. [23] genomförde en elektrokemisk analys på 20 partier Angelica sinensis (Oliv.) Diels med en tillväxtperiod på 1, 2 och 3 år. I kombination med huvudkomponentanalys fann man att de elektrokemiska fingeravtrycken och oscillationsparametrarna (inklusive oscillationsinduktionstid, maximal potential, oscillationslivslängd, maximal amplitud, stopppotential och antal cykler) för Angelica sinensis vid olika tillväxtperioder var signifikant olika, som kan användas som underlag för att identifiera Angelica sinensis vid olika perioder.

KINESISK MATERIALMEDICINISK Ört CISTANCHE HPLC Fingeravtryck

1.3 Kromatografiskt fingeravtryck

1.3.1 Tunnskiktskromatografi

Tunnskiktskromatografi är en kromatografisk metod som uppnår separation genom att förlita sig på de olika adsorptionskapaciteterna hos samma adsorbent för olika kemiska komponenter. Det är den mest använda metoden för att identifiera traditionella kinesiska mediciner, med fördelarna med enkel användning, enkel utrustning, bra känslighet, hög jämförbarhet, stark specificitet och enkel färgutveckling. Det medicinska materialets äkthet kan bestämmas av närvaron eller frånvaron av fläckar på den tunna skiktplattan. Djupet och storleken på färgen på fläckarna kan i viss utsträckning återspegla kvaliteten på det medicinska materialet[24]. För närvarande högpresterande tunnskiktskromatografi(HPTLC) används ofta för att ersätta högpresterande vätskekromatografi (HPLC) för att kvalitativt och kvantitativt identifiera traditionella kinesiska medicinprodukter på grund av dess enkelhet, noggrannhet, låga kostnad, höga effektivitet och snabbhet. HPTLC-fingeravtryck har bättre upplösning och kan rimligt och exakt uppskatta de aktiva ingredienserna i läkemedlet på kortare tid[25]. Men på grund av det stora antalet påverkande faktorer (fuktighet, temperatur, etc.) är reproducerbarheten av resultaten dålig jämfört med HPLC. Loescher et al. [26] använde HPLC och HPTLC för att analysera extraktet av Calendula officinalis och fann att HPLC var mer lämplig för kvantitativ analys än HPTLC.

Som svar på denna effekt, Li Xiangjun et al. [27] gjorde en serie motsvarande lösningar, inklusive att genomföra utvecklingsexperimentet i ett kylskåp eller en förseglad temperaturkontrollerad anordning för att minska påverkan av temperaturen och lägga till olika proportioner av svavelsyra i ena änden av framkallningscylindern för att kontrollera luftfuktigheten.

KINESISKT MATERIAL MEDICINSK Ört CISTANCHE HPLC ETIKETT

Patil et al. [28] fastställde HPTLC-fingeravtrycket för petroleumeterextraktet från Catsia tora Linn. Resultaten visade att bladen, fröna och blommorna innehöll 10, 7 respektive 11 typer av ingredienser. Denna metod kan användas för att identifiera äktheten av Catsia tora Linn. Xiao Honghua et al. [29] använde tunnskiktskromatografi kombinerat med masspektrometri för att fastställa ett tunnskiktskromatografiskt fingeravtryck av kromoner, organiska syror och triterpenoidsaponiner i Cimicifuga foetida L., och utförde likhetsanalys, klusteranalys och huvudkomponentanalys på 16 partier av Cimicifuga-prover från fem källor, vilket ger en grund för kvalitetskontrollen av Cimicifuga.

Guzelmeric et al. [30] använde etylacetat-myrsyra-ättiksyra-vatten (30:1.5:1.5:3) som framkallningslösningsmedel för att utveckla HPTLC-fingeravtrycket för apigenin-7-glukosid, en aktiv markör för Matricaria chamomilla L., som kan användas som en viktig vägledning för kvalitetsbedömning av kamomill. Bazylko et al. [31] etablerade HPTLC-fingeravtrycket för fem flavonoidföreningar, nämligen tagetoides, quercetin, flavonoider, koffeinsyra och klorogensyra, från Galinsoga parviflora Cav. Denna metod kan användas för att identifiera Galinsoga parviflora. Etanolic et al. [32] fastställde fingeravtrycket av etanolextraktet av Acacia catechu (L. f.) Willd. Med hjälp av HPTLC utfördes en enkel och snabb kvantitativ utvärdering av rutin och quercetin i extraktet. Agatonovic-Kustrin et al. [33] använde HPTLC för att kvantitativt analysera apigenin, Matricaria och bisabolol i blad- och blomextrakten av Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. och Calendula officinalis L., kombinerade det med DPPH-metoden för att jämföra antioxidanten kapaciteten hos dessa komponenter. Denna metod är enkel, snabb, pålitlig och billig och kan också användas för att screena antioxidantaktiviteten hos växtextrakt.

1.3.2 HPLC-metod HPLC är en universell analysmetod för att detektera olika kemiska komponenter inom traditionell kinesisk medicin.

Det används i stor utsträckning vid upptäckt av kemiska komponenter i traditionell kinesisk medicin på grund av dess fördelar med högt tryck, hög känslighet, hög effektivitet och automatisering [34]. UV-detektorn, diode array-detektorn (DAD), elektrokemisk detektor, evaporativ ljusdetektor, etc. som kan kopplas till det hela visar sin oersättliga överlägsenhet.

Qiao et al. [35] använde omvänd fas × omvänd fas omfattande tvådimensionell vätskekromatografi (RP × RP 2DLC) för att separera de fenoliska föreningar som erhållits genom etylacetatextraktion av lakrits Glycyrrhiza uralensis Fisch.

311 föreningar upptäcktes inom 40 minuter, och strukturerna för 21 okända föreningar karakteriserades preliminärt av masspektrometri, och 8 av dem hittades i lakrits för första gången. Resultaten visade att RP×RP2DLC/MS-systemet har en god effekt på separationen av komplexa traditionella kinesiska medicinextrakt och den kvalitativa analysen av naturprodukter. Peng Liang et al. [36] analyserade flavonoidkomponenterna i 10 satser av Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino etablerade HPLC-fingeravtrycket för Gynostemma pentaphyllum och kalibrerade 11 vanliga karakteristiska toppar. Likhetsanalysresultaten visade att den högsta likheten mellan 10-satserna av Gynostemma pentaphyllum-fingeravtryck i förhållande till referensspektrumet var 0,989, och den lägsta var 0,128, vilket indikerar att flavonoidkomponenterna i Gynostemma pentaphyllum från olika ursprung var lika i typ men hade betydande skillnader i innehåll. Sun et al. [37] använde HPLC-DAD-metoden för att analysera likheten mellan de kemiska komponenterna i Bupleurum chinense DC. och B. scorzonerifolium Willd. För första gången och fann att de två hade 12 vanliga flavonoidtoppar respektive 4 saponintoppar, och samtidigt hade var och en 6 unika flavonoidtoppar respektive 5 saponintoppar. Resultaten visade att denna metod rimligt och effektivt kan återspegla skillnaden i kemiska komponenter mellan Bupleurum och Bupleurum chinense. Korrelationen mellan de två är dålig. Därför bör Bupleurum chinense användas med försiktighet i klinisk praxis. Han et al. [38] kvantitativt analyserade 10 sorters bioaktiv gallussyra, klorogensyra, koffein och katekiner som ingår i 10 partier av Ziyang grönt te. Det utvecklade HPLC-fingeravtrycket var enkelt och pålitligt. Li et al. [39] fastställde HPLC-fingeravtrycket för granatäppleskal. De valde ut 15 karakteristiska toppar och utvärderade likheten mellan 10 satser av granatäppleskal till 0,968. De separerade och analyserade också kvantitativt punicalagin, gallussyra, katekin, klorogensyra, koffeinsyra, epikatekin, rutin och ellaginsyra som finns i det, vilket ger en pålitlig och effektiv metod för att identifiera äktheten och kvalitetskontrollen av granatäppleskal. Sumathy et al. [1] använde HPLC kombinerat med HPTLC och gaskromatografi-masspektrometri (GC-MS) för att bestämma den kemiska sammansättningen av metanolextraktet av Ixora chinensis Lam. HPLC-analys visade närvaron av biokin A, myricetin, quercetin, rutin, daidzein och formononetin; ursolsyra hittades i HPTLC-fingeravtrycket; 24 fytokemiska komponenter hittades av GC-MS; denna kombinerade kvalitativa och kvantitativa metod kan enkelt utvärdera kvaliteten och stabiliteten hos Ixora chinensis Lam. Ge et al. [40] etablerade UHPLC-DAD-fingeravtrycket för Radix Angelicae Pubescentis, analyserade kvantitativt kumarinerna och fenolsyrorna som finns i Radix Angelicae Pubescentis, och identifierade kvalitativt dess aktiva ingredienser med hjälp av masspektrometri med kvadrupol-tid för flygning (Q-TOF-MS). De hittade 9 fenolsyror, 30 kumariner och 41 föreningar av myrra och adenosin. De kombinerade den diskriminerande analysmetoden för att effektivt och snabbt särskilja 32 partier av Radix Angelicae Pubescentis från olika provinser. Denna metod ger en ny idé för kvalitetskontroll av Radix Angelicae Pubescentis.

CISTANCHE SPECIFIKATIONER

Yang et al. [41] använde ultrahögpresterande vätskekromatografi (UPLC)-DAD-detektor och ESI-MS-teknik för att erhålla HPLC-fingeravtryck och masspektrometrifingeravtryck för Xiaoyanlidan-tabletter, respektive. De analyserade 113 prover av Xiaoyanlidan-tabletter och erhöll 39 toppar, varav 26 var från Quassia, 9 från Andrographis paniculata och 4 från Rhizoma Cynoglossi. Med hjälp av kemometriska metoder för likhet och PCA, bestämde de att de fem signifikanta komponenterna var 4-metoxi-5-hydroxiferrocefalostomon, andrografolid, dehydroandrografolid, neoandrografolid och rosmarinsyra. De etablerade ett systematiskt och omfattande fingeravtryck för att förbättra och utvärdera kvaliteten på Xiaoyanlidan-tabletter. Fan et al. [42] etablerade HPLC- och UPLC-fingeravtryck av flavonoidglykosider i Lophatherum gracile Brongn., och isolerade en ny flavonoid C-glykosid luteolin 6-C- -D-glukuronsyra-(1→2){{19 }}D-pyranoglukosid för första gången. De upptäckte också de optiska isomererna av två föreningar, flavonoid flavonoid och flavonoid hydroxyflavonoid, för första gången. De använde endimensionell och tvådimensionell kärnmagnetisk resonans och masspektrometri för att särskilja och bestämma deras strukturer, vilket gav en ny metod för kvalitetskontroll av Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu et al. [43] använde HPLC-DAD kombinerat med tunnskiktskromatografi, kärnmagnetisk resonans och masspektrometri för att effektivt separera de viktigaste biflavonoidföreningarna GB1, GB2, GB-1a och flavonoider från Garcinia kola Linn., och bekräftade deras strukturer. , som kan användas som en rutinanalysmetod för farmaceutiska preparat. Zhao et al. [44] fastställde HPLC-UV-MS-fingeravtrycket för Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, kvantitativt bestämd andrographolide och dehydroandrographolide som finns i Andrographis paniculata, och utvärderade skillnaderna mellan 10 partier av Andrographis paniculata-likhet genom att analysera och kombinera PCA. Denna metod ger en grund för kvalitetskontrollen av Andrographis paniculata.

Ahmed et al. [45] använde HPLC för att erhålla fingeravtrycket av Commiphora wightii (Arn.) Bhandari-harts, och analyserade kvantitativt trans- och cis-sterolonet som fanns i det. Samtidigt kan denna metod effektivt särskilja 22 partier av Commiphora wightii-harts och 9 partier av förfalskat harts, vilket kan användas som en metod för att identifiera äktheten av Commiphora wightii-harts.

2 Biologiska fingeravtryck

Biologiska fingeravtryck är användningen av gensekvensanalysmetoder på molekylär nivå för att särskilja och klassificera den geografiska fördelningen och förändringarna i kinesiska medicinska material, inklusive genomiska fingeravtryck, proteomiska fingeravtryck[60] och DNA-fingeravtryck[61]. För närvarande finns det färre studier på biologiska fingeravtryck av kinesiska läkemedel än kemiska fingeravtryck. De vanligaste metoderna är polyakrylamidgelelektrofores (PAGE), slumpmässig amplifierad polymorf DNA molekylär markörteknologi (RAPD), polymeraskedjereaktion.

(PCR) och andra metoder.

Liu Li et al.[62] använde RAPD-markörer, kombinerat med PCR och klusteranalys, för att effektivt identifiera Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. och amerikansk ginseng Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] etablerade först SDS-PAGE-proteinfingeravtrycket från Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus och Scolopendra subventionerar mutilans L. Koch, vilket ger en pålitlig och effektiv metod för identifiering av dessa tre medicinska material. Wei Yicong et al. [64] designade dual-site specifika primers och konstruerade en multiplex PCR. Den snabba identifieringen av två medicinska material, Houttuynia cordata Thunb. Och Gymnotheca chinensis Decne., kan samtidigt identifiera de två arterna positivt och avgöra om de är blandade. Wang Fu et al. [65] använde ITS2-sekvensen (internt transkriberad spacer 2) som en DNA-streckkod för att exakt identifiera den kinesiska medicinen, Zanthoxylumbungeanum Maxim. Och dess krydda Zanthoxylumbungeanum Maxim., vilket ger en grund för identifieringen av kinesisk medicin Zanthoxylumbungeanum och dess krydda Zanthoxylumbungeanum.