Effekter av Cistanche-glykosider på immunfunktionen hos D-galaktos-inducerade åldrande modellmöss

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

〔Abstrakt〕 Mål:

Att studera den immunologiska mekanismen för anti-aging-effekten av Cistanche-glykosider på D-galaktos-inducerade åldrande möss.Metoder: 3H-TdR-inkorporeringsmetoden användes för att bestämma lymfocyttransformationsförmågan, det neutrala röda testet användes för att bestämma den fagocytiska funktionen hos mus peritoneala makrofager, immunofluorescensmetoden användes för att detektera lymfocytundergrupper, och radioimmunoanalysen användes för att bestämma nivån av IL-2 i perifert blod. , Spåra NAG-enzymfrisättningsmetod för att mäta NK-cellaktivitet.Resultat: Immunfunktionen hos D-galaktos-inducerade åldrande möss minskade signifikant, vilket manifesterades i förmågan till lymfocyttransformation, IL-2-halt i perifert blod, CD4 plus T-cell och CD8 plus T-cellinnehåll, en fagocytisk funktion av peritoneala makrofager och NK-cellaktivitet. Minska (s<>cistanchen av glykosidkan förbättra lymfocyttransformationsförmågan, perifert blod IL-2-innehåll, en fagocytisk funktion av peritoneala makrofager, NK-cellsaktivitet, CD4 plus T och CD8 plus T-cellinnehåll (P<0.05). 0.="" 05).="">Slutsats: cistanchen av glykosid kan avsevärt förbättra immunfunktionen hos D-galaktos-inducerade åldrande möss, återställa eller närma sig tillståndet hos unga möss och ha effekten att fördröja åldrandet.

[Nyckelord]: Cistanche totala glykosider; D-galaktos; åldrande modell; immunitet

Cistanche av glykosid:anti-åldring

Cistancheär det mest använda läkemedlet i anti-aging och livslängdsformler. Cistanche totalglykosider (GCS) är den allmänna termen för en klass av fenyletanoidglykosider i cistanche och är den huvudsakliga biologiska aktiviteten extraherad från den saltproducerande cistanchen i norra Xinjiang-komponenten [1], GCS har visat sig ha en antilipid peroxidationseffekt [2], men det finns få forskningsrapporter om dessanti-aging immunmekanism.

1. Material och metoder

1. 1 Djurgruppering och medicin

60 Kunming-möss, hanar och honor, 3 månader gamla, som väger 18-21 g, tillhandahållna av djurrummet vid Institute of Biological Products, Ministry of Health. Mössen i varje grupp hölls i samma rum i separata burar, och de var fria att äta och dricka. Djuren delades slumpmässigt in i tre grupper: ungdomskontrollgruppen, åldrandemodellgruppen och modelladministrationsgruppen, med 20 djur i varje grupp. GCS extraherades och identifierades av Institutionen för fytokemi, School of Pharmacy, Jiamusi University enligt litteraturen [1].

Förbättra immunitetenCistanche tillägg

1.2 Metod

Den unga gruppen injicerades med normal koksaltlösning subkutant i nacken under 30 dagar varje dag och fick varmt vatten i 15 dagar från den 15:e dagen. Mössen i den åldrande modellgruppen injicerades med D-galaktos (autoklaverad) 100 mg/kg subkutant på baksidan av nacken varje dag. Kroppsvikt i 30 dagar i följd. I gruppen för modelladministration injicerades D-galaktos 100 mg/kg kroppsvikt subkutant på nacken varje dag, och GCS 125 mg·kg-1·d-1 administrerades samtidigt tid från den 15:e dagen, och administreringen administrerades kontinuerligt under 15 dagar. Alla djur avlivades samtidigt på den 30:e dagen och olika observationsindex bestämdes.

1. 2. 1 Lymfocyttransformationsexperiment

Musmjältecellsuspensionen justerades till en cellkoncentration av 2x106, och Con A användes som en stimulans för att odlas in vitro under 5 dagar, och dess transformationsförmåga testades med 3H-TdR-inkorporeringsmetoden. Resultaten uttrycks som stimulusindex SI (SI=ConA-stimuleringsgrupp/kontrollgrupp).

1. 2. 2 Mus peritoneal makrofag fagocytisk funktion (neutralt rött test [3])

Samla upp musen peritonealvätskamakrofagsuspension aseptiskt. Efter centrifugering, flyt fällningen i cellodlingsmediet. Använd en hemocytometer för att räkna och justera lösningens cellkoncentration till 2×106. Placera den i en 37 graders inkubator i 2 timmar. , Kassera supernatanten och icke-vidhäftande celler. Ta väggmakrofagerna och tillsätt 0,1 procent neutral röd fysiologisk saltlösning till 37 grader och fortsätt att odla i 30 minuter, kassera den neutrala röda och tvätta makrofagerna upprepade gånger med 37 grader PBS, späd med 50 procent ättiksyra och 50 procent etanol, ställ in 722 Spektrofotometer kolorimetrisk vid 540 nm våglängd, uppmätt absorbans A-värde.

1. 2. 3 Detektion av lymfocytundergrupper

Ta 0.1 ml av 1×107/mllymfocytsuspension, tillsätt 1 0 ul mus anti-mus CD3, CD4 respektive CD8 monoklonala antikroppar, blanda väl, inkubera vid 4 grader i 30 minuter, 1 procent FC S i PBS (0,2M, pH7,4) Tvätta 3 gånger, flödescytometridetektion: laserflödescytometer (FACScan, USA BD-företag), argonlaser, excitationsvåglängd 488 nm, FITC-detektionsspektrum 480-630 nm, räkna 800/s celler, 200,000 celler totalt. Resultaten analyserades och registrerades med en dator HP340 och professionell programvara LYSI SⅡ.

1. 2. 4 Bestämning av IL-2 i perifert blod genom radioimmunoanalys

Ta 1 ml blod från musögonen i ett provrör. Efter koagulering separeras serumet. Enligt satsens funktion mäts CPM-numret på räknaren.

1. 2. 5 NK-cellaktivitet

Ta musögonblod aseptiskt och tillsätt heparin för antikoagulering. Se litteraturen [4] för detaljer. 1.3 Statistisk bearbetning Experimentdata uttrycks som x±s, bearbetas av S AS-mjukvaran och analyseras med variansanalys, F-test och t-test.

fördel med cistanche: Förbättra immunitet

2. resultat

2.1 Effekterna av GCS på transformationsförmågan hos lymfocyter och T-cellsundergrupper i varje grupp av möss visas i Tabell 1.

bord 1. Effekten av GCS på transformationsförmågan hos lymfocyter och T-cellsundergrupper i varje grupp av möss (n= 16,x±s)

Jämfört med Ⅰ: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 Effekterna av GC på den fagocytiska funktionen, IL-2-innehållet och NK-cellaktiviteten hos peritoneala makrofager i varje grupp av möss visas i Tabell 2.

Tabell 2. Effekten av GCS på den fagocytiska funktionen, NK-cellaktivitet och IL-2-innehåll i peritoneala makrofager i varje grupp av möss (n= 16,x±s)

3. Diskussion

I detta experiment reducerades den fagocytiska funktionen hos peritoneala makrofager och NK-cellaktiviteten hos de åldrande modellmössen (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">förbättra kroppens ospecifika cellulära immunitet och immunregleringsfunktioner, ochförbättra Anti-tumör och anti-infektionav den åldrande kroppen är ett av sätten att fördröja åldrandet [4]. IL-2 är ett oumbärligt cytokin för proliferation och differentiering av T-lymfocyter, och det kan reglera funktionerna hos lymfocyter, monocyter-makrofager och NK-celler. IL-2 kan främja proliferation och differentiering av T-lymfocyter, regleraimmunsvar, inducerar Tc-aktivitet och främjar produktionen av antikroppar och interferon.Det spelar en viktig roll i immunförsvaret. I detta experiment minskade IL-2-innehållet i åldrande modellmöss (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">förbättra den specifika cellulära immunfunktionen hos möss.

Förbättra immunitet cistanche tillägg

4. Referenser

1. Du Niansheng, Wang Hong. Isolering och identifiering av fenoxietanolglykosider från Cistanche [J]. Natural Products Research and Development, 1993; 5(4): 7-8.

2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Anti-lipidperoxidation och anti-strålningseffekter av de totala glykosiderna av Cistanche 〔J〕. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997; 22(6): 364-367.

3. Xu Shuyun, Bian Rulian. Experimentell metodik för farmakologi [M]. 2:a upplagan. Peking: People's Health Publishing House, 1994: 1221.

4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun, et al. Detektion av NK-cellaktivitet med mikro-NAG-frisättningsmetod [J]. Journal of Clinical Laboratory Science, 1996; 14(2): 66-67.