Koagulering, proteasaktiverade receptorer och diabetisk njursjukdom: lärdomar från möss med ENOS-brist

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Koagulation, proteasaktiverade receptorer och diabetisk njursjukdom: lärdomar från möss med eNOS-brist

Yuji Oe,1 Mariko Miyazaki1 och Nobuyuki Takahashi2

1Avdelning för nefrologi, endokrinologi och vaskulär medicin, Tohoku University Graduate School of

Medicin, Sendai, Miyagi, Japan

2Division of Clinical Pharmacology and Therapeutics, Tohoku University Graduate School of Pharmaceutical Sciences & Faculty of Pharmaceutical Sciences, Sendai, Miyagi, Japan

Endotelial kväveoxidsyntas (eNOS) dysfunktion är känd för att förvärra utvecklingen och prognosen för diabetisk njursjukdom (DKD). En av mekanismerna genom vilka detta uppnås är att låga eNOS-nivåer är förknippade med hyperkoagulerbarhet, vilket främjar njurskada. I den yttre koagulationskaskaden förvärrar vävnadsfaktorn (faktor III) och nedströms koagulationsfaktorer, såsom aktiv faktor X (FXa), inflammation genom aktivering av de proteasaktiverade receptorerna (PAR). Nyligen har det visat sig att avsaknaden av eller minskat eNOS-uttryck hos diabetiska möss, som en modell av avancerad DKD, ökar njurvävnadsfaktornivåerna och PAR1- och 2-uttryck i deras njurar. Dessutom förbättrade farmaceutisk hämning eller genetisk deletion av koagulationsfaktorer eller PAR inflammation i DKD hos möss som saknade eNOS. I den här recensionen sammanfattar vi förhållandet mellan eNOS, koagulation och PAR och föreslår ett nytt terapeutiskt alternativ för hantering av patienter med DKD.

Nyckelord: diabetisk glomeruloskleros; faktor Xa; inflammation; vävnadsfaktor

Tohoku J. Exp. Med., 2021 september, 255 (1), 1-8.

Cistanche-extrakt kan hjälpa till med njursjukdom mycket bra

Antalet patienter med diabetisk njursjukdom (DKD) ökar världen över (de Boer et al. 2011; Kainz et al. 2015; Ogurtsova et al. 2017). DKD är en av de främsta orsakerna till dödlighet hos patienter med diabeteskomplikationer (Afkarian et al. 2013). Dessutom är DKD pro-aggressiv och är den främsta orsaken till njursjukdom i slutstadiet som kräver njurersättningsterapi (Gregg et al. 2014; Liyanage et al. 2015). I Japan står diabetisk nefropati för mer än 39 procent av nya dialyspatienter (Nitta et al. 2020). Därför krävs utveckling av nya terapeutiska alternativ för att hantera patienter med DKD.

Det finns ett ökande intresse för koagulationssystemets roll i DKD-patogenes. Hyperkoagulabilitet är förknippat med DKD (Goldberg 2009; Domingueti et al. 2016). En förhöjd fibrinogennivå i blod visades vara associerad med låg uppskattad glomerulär filtrationshastighet, hög proteinuri och allvarlig histologisk skada, och det var en prediktor för utvecklingen till njursjukdom i slutstadiet (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et al. al. 2018; Zhang et al. 2018). Vissa studier har visat en korrelation mellan nivån av D-dimer, en fibrinnedbrytningsprodukt, och njurfunktion vid DKD (Domingueti et al. 2018; Pan et al. 2018). Hyperkoagulabilitet vid DKD bestäms sannolikt av flera faktorer. Till exempel aktiverar renin-angiotensin-aldosteronsystemet vävnadsfaktor (TF, faktor III) och ökar trombotiska händelser (Dielis et al. 2005). Annars är hyperglykemi, dyslipidemi, inflammation eller endoteldysfunktion involverade i det protrombotiska tillståndet under DKD-patogenes (Goldberg 2009).

Endotelial dysfunktion finns i DKD som utvecklas till mikrovaskulära komplikationer (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011). Nedsatt endotelial kväveoxidsyntas (eNOS)-produktion eller minskad eNOS-aktivitet (t.ex. nedsatt eNOS-fosforylering) är ett kännetecken för endotelial dysfunktion vid DKD (Nakagawa et al. 2011; Cheng et al. 2012). Vi har visat att en förlust av eNOS-uttryck var kopplad till höjningen av TF-nivån och aktiviteten i det yttre koagulationssystemet (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), vilket är nära förknippat med trombotiska händelser hos patienter med kronisk njure sjukdomar (Kolachalama et al. 2018).

koagulationsproteaser, såsom aktiv faktor FVII (FVIIa), aktiv faktor (FXa) och trombin, som finns i den yttre koagulationskaskaden, medierar vävnadsskada genom en proteasaktiverad receptor (PAR)-beroende mekanism (Madhusudhan et al. 2016; Posma et al. 2019). I den här recensionen sammanfattar vi resultaten från diabetiska möss som saknar eNOS och diskuterar förhållandet mellan koagulations-PAR-vägen, eNOS-nivåer och DKD-patogenes.

Vävnadsfaktor/proteasaktiverade receptorer

Vävnadsfaktor (TF), känd som faktor III, är ett 47 kDa transmembranprotein som interagerar med faktor VII (FVII) (Grover och Mackman 2018). TF/FVIIa-komplexet är en aktivator av den yttre koagulationskaskaden och katalyserar aktiveringen av FX och FIX. FXa och aktiverad kofaktor V (FVa) bildar ett protrombotiskt komplex som genererar trombin. Slutligen omvandlar trombin fibrinogen till fibrin, vilket resulterar i bildandet av tromber (Grover och Mackman 2018). TF uttrycks i både vaskulära glatta muskelceller och adventitiella fibroblaster. Under inflammatoriska tillstånd induceras dess uttryck i endotelceller eller cirkulerande celler såsom monocyter (Østerud och Bjørklid 2006).

Proteasaktiverade receptorer (PAR) är medlemmar av den G-proteinkopplade receptorsuperfamiljen, som omfattar fyra PAR-proteiner (PAR1-4). PAR genomgår klyvning av proteaser vid den N-terminala änden och aktiveras vid bindning till en ny N-terminal innehållande en bunden ligand. De fyra medlemmarna av PAR (PAR1-4) aktiveras av specifika koagulationsproteaser: TF- och FVIIa-komplexet aktiverar PAR2, faktor Xa aktiverar både PAR1 och PAR2, och trombin aktiverar PAR1, PAR3 och PAR4 (Camerer et al. 2000; Coughlin 2005; Rothmeier och Ruf 2012; Zhao et al. 2014). Förhållandet mellan TF, koagulationsproteaser och PAR visas i fig. 1.

PAR är kända för att uttryckas brett i njurceller och är involverade i patofysiologin för njurskada. Både PAR1 och PAR2 uttrycks i glomerulära endotelceller, mesangiala celler och tubulära njurceller härledda från människor eller möss; PAR2, PAR3 och PAR4 uttrycks i humana podocyter; PAR1, PAR3 och PAR4 uttrycks i murina podocyter (Tanaka et al. 2005; Vesey et al. 2005; Madhusudhan et al. 2012; Dong et al. 2015; Madhusudhan et al. 2016).

Även om de skadliga eller skyddande effekterna av PAR vid njurskada har påvisats, tyder ackumulerande data på att PAR förvärrar inflammation genom att stimulera produktionen av cytokiner och kemokiner (Rothmeier och Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019). I överensstämmelse med detta fynd främjar PAR1- och PAR2-agonister uttrycket av inflammatoriska mediatorer, såsom monocyt kemotaktisk protein 1 (MCP1) och plasminogenaktivatorhämmare -1 (PAI-1), och pro-fibrotisk molekyler i tubulära endotel-, mesangial- och njurceller (Vesey et al. 2005; Vesey et al. 2013; Ellinghaus et al. 2016; Waasdorp et al. 2016; Oe et al. 2019). I in vivo-studier minskade bristen på PAR1 eller närvaron av PAR1-hämmare inflammation i modeller av halvmåneskära glomerulonefrit eller obstruktiv njurskada (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020). På liknande sätt åtföljdes de terapeutiska effekterna av PAR2-hämning vid njurskador av en minskning av inflammation i njurarna (Hayashi et al. 2016; Du et al. 2017; Han et al. 2019; Watanabe et al. 2019).

Endotelial kväveoxidsyntaspolymorfismer i DKD

Endotelial kväveoxidsyntas (eNOS) är en av de tre NOS-isoformerna, och det bidrar till produktionen av NO i det vaskulära endotelet (Walford och Loscalzo 2003). NO producerat av eNOS i det vaskulära endotelet

Fig. 1. Samband mellan koagulationsfaktorer och proteasaktiverade receptorer (PAR).

I den yttre koagulationskaskaden aktiverar komplexet vävnadsfaktor (TF) och aktivt FVII (FVIIa) proteasaktiverad receptor 2 (PAR2), aktiv FX (FXa) aktiverar både PAR1 och PAR2 och trombinmålen PAR1, PAR3 och PAR4. Klyvning av den N-terminala sekvensen av PAR genom koagulationsproteaser avslöjar en ny N-terminal sekvens som fungerar som en bunden ligand och främjar inflammation.

spelar en avgörande roll för att reglera vaskulär avslappning, antiinflammation och förebyggande av trombbildning (Walford och Loscalzo 2003). Nedsatt eNOS-uttryck är associerat med utvecklingen av DKD. Nyligen genomförda metaanalyser på människor har visat att G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) och intron 4b/4a ​​(rs869109213) i eNOS (NOS3) gener är nära associerade med utveckling av DKD (Dellamea et al. 2014; Zhang et al. 2015; Dong et al. 2018). Av dessa varianter har rollen för G894T (Glu298Asp) polymorfism i eNOS-funktionen karaktäriserats väl. Den minskade produktionen av NO eller nitritackumulering indikerades i transfekterade CHO-celler med 298Asp jämfört med de med 298Glu (Noiri et al. 2002). Sammantaget indikerar dessa resultat att den minskade produktionen av NO genom eNOS-dysfunktion är viktig för utvecklingen av DKD hos människor.

Diabetiska möss som saknar eNOS som en modell för mänsklig diabetisk nefropati

Etableringen av tillförlitliga prekliniska modeller som liknar human DKD är avgörande för studiet av nya terapeutiska alternativ. Baserat på bevis som visar ett samband mellan eNOS-polymorfism och DKD, har flera studier visat att eNOS knock-out-modeller av typ I och typ II DM är några av de framgångsrika modellerna som efterliknar mänsklig DKD (Brosius et al. 2009; Azushima et al. 2018). Det visades att streptozotocin-inducerade diabetiska möss som saknar eNOS utvecklar svår albuminuri, mesangial expansion, förtjockning av det glomerulära basalmembranet och arteriolär hyalinos, som liknar mänsklig DKD (Nakagawa et al. 2007). På liknande sätt visade typ II diabetiska möss (DB/DB) som saknade eNOS allvarlig glomeruloskleros och albuminuri (Zhao et al. 2006).

Förhöjd TF i diabetiska möss som saknar eNOS

NO hämmar trombbildning och trombocytaggregation (Walford och Loscalzo 2003). Eftersom glomerulär trombbildning observerades hos diabetiska möss som saknade eNOS (Nakagawa et al. 2007), är försämrat eNOS-uttryck sannolikt associerat med ökningen av TF-beroende koagulation. Sambandet mellan eNOS och TF i DKD har behandlats i våra tidigare rapporter (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a; Oe et al. 2016) (Fig. 2).

Minskad eller brist på eNOS-uttryck ökar renal TF-aktivitet hos diabetiska Akita-möss

Vi karakteriserade TF-uttryck i diabetiska Akita (Ins2Akita/ plus) möss, en modell av typ I DM, med olika uttrycksnivåer av eNOS (eNOS plus / plus, eNOS plus /- och eNOS-/-) (Wang et al. 2011a) ). Vi fann att svårighetsgraden av DKD var associerad med minskat eNOS-uttryck. Urinalbuminutsöndring, glomeruloskleros och minskning av glomerulär filtrationshastighet förvärrades i följande ordning: eNOS plus/plus; Ins2Akita/ plus < enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="">< enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" .="" intressant="" nog="" ökade="" njur-tf-uttryck="" och="" aktivitet="" i="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" och="" enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" möss="" jämfört="" med="" de="" i="" enos="" plus/plus;="" ins2akita/="" plus="" möss.="" glomerulär="" fibrindeposition="" var="" också="" anmärkningsvärd="" i="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" och="" enos-/-="" ;="" ins2akita/="" plus="" möss.="" vidare="" korrelerades="" njur-tf-mrna-uttryck="" med="" sjukdomens="" svårighetsgrad,="" urinalbuminutsöndring="" och="" njurinflammatoriskt="">

Neutraliserande antikroppar mot TF förbättrar inflammation i diabetiska njurar i

eNOS-Knockout-möss

En ökning av TF-beroende koagulation är associerad med ökad inflammation (Witkowski et al. 2016). Hämning av det TF-beroende koagulationssystemet förbättrade inflammatoriska sjukdomar, såsom LPS-inducerad sepsis (Pawlinski et al. 2010). För att belysa orsakssambandet mellan inflammation och TF vid DKD undersökte vi den kortsiktiga effekten av neutraliserande antikroppar mot TF på inflammation av diabetiska njurar hos möss med eNOS-brist (Li et al. 2010). Resultaten visade att administrering av anti-TF-antikroppar markant minskade de renala expressionsnivåerna av inflammations- och fibrosrelaterade gener såsom Tnfa, Ccl2, Tgfb och Col4 mRNA i musnjurar under fyra dagar efter TF-neutralisering.

Koagulations-FXa-hämmare förbättrar njurskador hos diabetiska möss som saknar eNOS

Koagulation FXa, belägen nedströms om TF/VIIa, bidrar också till inflammation genom de PAR-beroende vägarna. Dess roll i DKD har visats i flera djurmodeller. Sumi et al. (2011) visade att fondaparinux, en FXa-hämmare, minskade proteinnivåer i urinen, glomerulär hypertrofi och fibrinavlagring i DB/DB-möss. Den terapeutiska effekten av FXa-hämning i DKD-möss som saknar eNOS demonstrerades av vår grupp (Oe et al. 2016). Edoxaban (50 mg/kg/dag), en oral FXa-hämmare, administrerades till eNOS-/-; Ins2Akita/plus möss i tre månader, och resultaten visade förbättring av histologiska skador, såsom mesangial matrisproliferation. Expressionsnivåerna av inflammatoriska gener i njurarna reducerades av edoxaban (tabell 1). FXa aktiverar både PAR1 och PAR2. För att klargöra mekanismen för FXa-medierad njurskada, visade vi att de antiinflammatoriska effekterna av FXa-hämmare liknar de som finns hos PAR2-/- möss och PAR2-/- möss med FXa-hämmare . Dessa fynd tydde på att FXa sannolikt orsakade inflammation genom en PAR2-beroende mekanism i DKD. Däremot förbättrade edoxaban inte glomerulär skada i eNOS plus/plus; Ins2Akita/plus-möss, vilket tyder på att den terapeutiska effekten av FXa-hämning var associerad med eNOS-beroende hyperkoagulabilitet hos typ I-diabetiska möss.

Andra koagulationsfaktorer i DKD

Eftersom trombin är inriktat på PAR1, som fortskrider vaskulär inflammation (Chen och Dorling 2009), förvärrar trombin sannolikt DKD. Trombins skyddande eller skadliga roll i DKD-patogenes har emellertid visats; lågdos trombin (50 pM) förhindras, medan högdos trombin (20 nM) förvärrade, glukosinducerad apoptos i podocyter (Wang et al. 201lb). Effekterna av trombinhämmare som dabigatran på diabetiska möss som saknar eNOS bör belysas i framtiden.

Fibrinogen är involverat i olika inflammatoriska tillstånd. Intressant nog var partiell minskning eller frånvaro av fibrinogen fördelaktigt för njurischemi-reperfusionsmodeller eller obstruktiv njurfibros (Sorensen et al.2011; Craciun et al, 2014). Eftersom glomerulär fibrindeposition ökar hos diabetiska möss som saknar eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al. 2010; Wang et al.201la), förtjänar att belysa dess roll i DKD-patogenes ytterligare forskning.

Tabell 1. Effekter av vävnadsfaktor (TF), koagulationsfaktor Xa (FXa) och proteasaktiverad receptor (PAR)-hämning i möss med diabetesnjursjukdom (DKD) med minskat eller saknat eNOS-uttryck.

Uttryck av PAR1 och PAR2 i diabetiska möss som saknar eNOS

Ökat uttryck av PAR är förknippat med en njurskada. Vi och andra har visat att uttrycksnivåerna av Par1 och/eller Par2 mRNA ökade i djurmodeller med diabetisk nefropati, adenin-inducerad njurskada, obstruktiv njurfibros och cisplatininducerad njurskada (Chung et al. 2013; Hayashi et al. 2016; Oe et al. 2016; Watanabe et al. 2019). Dessutom ökade glomerulära PAR2-proteinnivåer i DB/DB-möss, en modell av typ II DM (Sumi et al. 2011). Vi visade sambandet mellan PAR-uttryck och eNOS-brist hos diabetiska möss (Oe et al. 2016). Expressionsnivån av Par1 mRNA var signifikant högre i eNOS−/−; Ins2Akita/ plus möss än i eNOS−/−; Ins2Akita/plus och icke-DM möss. På liknande sätt var uttrycket av Par2 signifikant högre i eNOS−/−; Ins2Akita/plus-möss än hos icke-DM-möss. Däremot skilde sig inte Par4-mRNA-nivåerna mellan genotyperna. Brist på eNOS förvärrar inflammation vid DKD (Wang et al. 2011a). Eftersom proinflammatoriska cytokiner enligt rapporter ökar PARs (Nystedt et al. 1996), inducerar sannolikt förhöjd inflammation orsakad av brist på eNOS renalt Pars-uttryck i DKD. Sammantaget antydde resultaten av våra studier att uttrycksnivåerna av PAR1 och PAR2, liknande fallet med TF, ökade i diabetiska njurar när eNOS saknades (Fig. 2).

PAR2-deletion Förbättrad diabetisk njurskada hos möss med reducerad eNOS

Vi och andra har tagit upp rollen av PAR2 i DKD i tidigare studier. Par2-deletion påverkade inte glomerulär skada hos diabetiska Akita-möss av vildtyp (Ins2Akita/plus ) med eNOS (Oe et al. 2016). Vidare visade STZ-inducerade diabetiska möss som saknade PAR2 minskad albuminuri jämfört med diabetiska vildtypsmöss, men ökad mesangial expansion (Waasdorp et al. 2017). Sammantaget visar dessa resultat att det inte finns några eller milda terapeutiska effekter av PAR2-hämning på njurskada i de tidiga och milda modellerna av DKD. Däremot har vi visat effekterna av PAR2-brist på DKD hos diabetiska Akita-möss med minskat uttryck av eNOS (eNOS plus /-; Ins2Akita/ plus ) (Oe et al. 2016). Bristen på PAR2 minskade signifikant nivåerna av urinalbuminutsöndring, mesangial expansion och tjockleken av GBM. Expressionsnivåerna av pro-inflammatoriska och fibrosrelaterade gener, inklusive Tnfa, Tgfb och Col4, reducerades också i musnjurar. Dessa fynd tyder på att PAR2 är patogen inte i början, utan i den relativt avancerade diabetiska glomerulära skadan orsakad av eNOS-brist (tabell 1).

Dubbel blockad av PAR1 och PAR2 i diabetiska möss med reducerad eNOS

Vi har visat att PAR1 och PAR2 tillsammans bidrar till DKD-patogenes (Mitsui et al. 2020). I denna studie användes Akita-hanmöss av typ I diabetes heterozygota för eNOS (Ins2Akita/plus; eNOS plus /-) som en modell för DKD. Dessa möss behandlades med vehikel, PAR1-antagonist (E5555, 60 mg/kg/dag), PAR2-antagonist (FSLLRY, 3 mg/kg/dag) eller E5555 plus FSLLRY under 4 veckor. Administrering av PAR1- eller PAR2-antagonisten enbart försvagade glomerulär skada, såsom mesangial expansion och kollagen IV-avsättning, jämfört med administrering av vehikel. Synergistiska terapeutiska effekter av både PAR1- och PAR2-hämning observerades, och förhållandet mellan albumin och kreatinin i urinen minskade signifikant när både PAR1 och PAR2 blockerades med E5555 plus FSLLRY jämfört med vehikeladministrationen. Dessutom förbättrade dubbel blockad av PAR1 och PAR2 av E5555 plus FSLLRY synergistiskt histologisk skada, inklusive mesangial expansion, glomerulär makrofaginfiltration och avsättning av typ IV kollagen. Expressionsnivåerna av inflammations- och fibrosrelaterade gener i njurarna reducerades också (tabell 1).

Vi fokuserade på de pro-inflammatoriska effekterna av PAR1- och PAR2-agonister på mänskliga endotelceller (Mitsui et al. 2020). Resultaten visade att stimulering med både PAR1- och PAR2-agonister synergistiskt ökade uttrycksnivåerna av MCP1- och PAI1-mRNA. Effekten av PAR1-agonisten blockerades av en NF-KB-hämmare, medan effekten av PAR2-agonisten blockerades av NF-kB- och MAPK-hämmare. Tillsammans bidrar PAR1 och PAR2 tillsammans till vaskulär inflammation och DKD genom olika signalvägar (Fig. 3).

Slutsats

I denna recension fokuserade vi på förhållandet mellan koagulationsproteas-PAR-vägen och eNOS-brist hos diabetiska möss. Låg produktion av eNOS är kopplat till hyperkoagulabilitet och ökad PAR-signalering, vilket är skadligt vid DKD. Dessa fynd kan indikera deras patologiska roll i den avancerade eller senare fasen av DKD (t.ex. med njursvikt och/eller massiv proteinuri). Orala FXa-hämmare används i stor utsträckning för att förhindra trombos (Patel et al. 2011; Robertson et al. 2015). Deras användning vid behandling av DKD är ett lovande alternativ. Dessutom kan vissa PAR1-antagonister, inklusive atopaxar och vorapaxar, användas i trombocythämmande behandling för att förhindra det akuta koronarsyndromet

Fig. 3. Distinkta roller för PAR1 och PAR2 vid vaskulär inflammation och diabetisk njursjukdom (DKD).

I humana endotelceller ökar PAR1-agonisten kemokin- och cytokinexpression via NF-KB-signalvägen, medan PAR2-agonisten ökar dem via NF-KB- och MAPK-signalvägarna. PAR1 och PAR2 orsakar synergistiskt vaskulär inflammation via distinkta vägar i DKD.

(Goto et al. 2010; Tricoci et al. 2012). Dessutom finns det anmärkningsvärda framsteg i utvecklingen av PAR2-antagonister (Lim et al. 2013; Cheng et al. 2017; Jiang et al. 2018), och de kan vara nya terapeutiska alternativ för att behandla patienter med DKD.

Erkännanden

Denna studie stöddes av Gonryo Medical Foundation. Vi vill tacka Editage (https://www. editage.com) för redigering på engelska.

Intressekonflikt

Författarna förklarar ingen intressekonflikt.

Referenser

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Njursjukdom och ökad mortalitetsrisk vid typ 2-diabetes. J. Am. Soc. Nephrol., 24, 302-308.

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Modellering av diabetisk nefropati hos möss. Nat. Rev. Nephrol., 14, 48-56.

Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki, M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., et al. (2009) Musmodeller av diabetisk nefropati. J. Am. Soc. Nephrol., 20, 2503-2512.

Camerer, E., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Vävnadsfaktor- och faktor X-beroende aktivering av proteasaktiverad receptor 2 av faktor VIIa. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97, 5255-5260.

Chen, D. & Dorling, A. (2009) Kritiska roller för trombin vid akut och kronisk inflammation. J. Thromb. Haemost., 7 Suppl 1, 122-126.

Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) Förbättring av endotelial kväveoxidsyntasaktivitet fördröjer utvecklingen av diabetisk nefropati hos DB/DB-möss. Kidney Int., 82, 1176-1183.

Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., et al. (2017) Strukturell insikt i allosterisk modulering av proteasaktiverad receptor 2. Nature, 545, 112-115.

Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013) Proteinasaktiverad receptor-2 transaktivering av epidermal tillväxtfaktorreceptor och transformerande tillväxtfaktor-receptorsignalvägar bidrar till njurfibros. J. Biol. Chem., 288, 37319-37331.

Coughlin, SR (2005) Proteasaktiverade receptorer i hemostas, trombos och vaskulär biologi. J. Thromb. Haemost., 3, 1800-1814.

Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL, Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) Farmakologisk och genetisk utarmning av fibrinogen skyddar mot njurfibros. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 307, F471-484.

Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Holdworth, SR & Tipping, PG (2000) Proteasaktiverad receptor 1 förmedlar trombinberoende, cellmedierad njurinflammation vid crescentisk glomerulonefrit. J. Exp. Med., 191, 455-462.

Dalla Vestra, M., Mussap, M., Gallina, P., Bruseghin, M., Cernigoi, AM, Saller, A., Plebani, M. & Fioretto, P. (2005) Akutfasmarkörer för inflammation och glomerulär struktur hos patienter med typ 2-diabetes. J. Am. Soc. Nephrol., 16 Suppl 1, S78-82.

de Boer, IH, Rue, TC, Hall, YN, Heagerty, PJ, Weiss, NS & Himmelfarb, J. (2011) Temporala trender i prevalensen av diabetisk njursjukdom i USA. JAMA, 305, 2532-2539.

Dellamea, BS, Pinto, LC, Leitão, CB, Santos, KG & Canani, LH (2014) Endotelial kväveoxidsyntasgenpolymorfismer och risk för diabetisk nefropati: en systematisk översikt och metaanalys. BMC Med. Genet., 15, 9.

Dielis, AW, Smid, M., Spronk, HM, Hamulyak, K., Kroon, AA, ten Cate, H. & de Leeuw, PW (2005) The prothrombotic paradox of hypertension: role of the renin-angiotensin and kallikrein- kininsystem. Hypertoni, 46, 1236-1242.

Domingue, CP, Dusse, LM, Carvalho, M., de Sousa, LP, Gomes, KB & Fernandes, AP (2016) Diabetes mellitus: kopplingen mellan oxidativ stress, inflammation, hyperkoagulabilitet och vaskulära komplikationer. J. Diabeteskomplikationer, koagulation, eNOS och DKD 7

30, 738-745.

Domingue, CP, Fóscolo, RB, Dusse, LMS, Reis, JS, Carv- also, MDG, Gomes, KB & Fernandes, AP (2018) Sammanslutning av olika biomarkörer för njurfunktion med D-dimernivåer hos patienter med typ 1-diabetes mellitus (njurbiomarkörer och D-dimer vid diabetes). Båge. Endokrinol. Metab., 62, 27-33.

Dong, J., Peng, Y., Wang, Y. & Zhang, Y. (2018) Rollerna för endotelial kväveoxidsyntasgenpolymorfismer i diabetes mellitus och dess associerade vaskulära komplikationer: en systematisk översikt och metaanalys. Endokrin, 62, 412-422.

Dong, W., Wang, H., Shahzad, K., Bock, F., Al-Dabet, MM, Ranjan, S., Wolter, J., Kohli, S., Hoffmann, J., Dhople, VM, Zhu, C., Lindquist, JA, Esmon, CT, Gröne, E., Gröne, HJ, et al. (2015) Aktiverat protein C förbättrar njurischemi-reperfusionsskada genom att begränsa Y-box-bindande protein-1 offentlig urinering. J. Am. Soc. Nephrol., 26, 2789-2799.

Du, C., Zhang, T., Xiao, X., Shi, Y., Duan, H. & Ren, Y. (2017) Proteasaktiverad receptor-2 främjar tubulär epitelinflammation i njurarna genom att hämma autofagi via signalvägen PI3K/Akt/mTOR. Biochem. J., 474, 2733-2747.

Ellinghaus, P., Perzborn, E., Hauenschild, P., Gerdes, C., Heit- meier, S., Visser, M., Summer, H. & Laux, V. (2016) Uttryck för pro- inflammatoriska gener i mänskliga endotelceller: jämförelse av rivaroxaban och dabigatran. Thromb. Res.,

142, 44-51.

Goldberg, RB (2009) Cytokin och cytokinliknande inflammationsmarkörer, endoteldysfunktion och obalanserad koagulation vid utveckling av diabetes och dess komplikationer. J. Clin. Endokrinol. Metab., 94, 3171-3182.

Goto, S., Ogawa, H., Takeuchi, M., Flather, MD & Bhatt, DL; J-LANCELOT (Japanese-Lesson from Antagonizing the Cellular Effect of Thrombin) Investigators (2010) Dubbelblinda, placebokontrollerade fas II-studier av den proteasaktiverade receptor 1-antagonisten E5555 (atopaxar) på japanska patienter med akut koronarsyndrom eller högrisk kranskärlssjukdom. Eur. Heart J., 31, 2601-2613.

Gregg, EW, Williams, DE & Geiss, L. (2014) Förändringar i diabetesrelaterade komplikationer i USA. N. Engl. J. Med., 371, 286-287.

Grover, SP & Mackman, N. (2018) Vävnadsfaktor: en viktig mediator för hemostas och utlösare av trombos. Åderförkalkning. Thromb. Vasc. Biol., 38, 709-725.

Han, Y., Tian, ​​L., Ma, F., Tesch, G., Vesey, DA, Globe, GC, Lohman, RJ, Morais, C., Suen, JY, Fairlie, DP & Nikolic- Paterson, DJ (2019) Farmakologisk hämning av proteasaktiverad receptor -2 minskar halvmånebildning vid nefrotoxisk serumnefrit från råtta. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 46,

456-464.

Hayashi, S., Oe, Y., Fushimi, T., Sato, E., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) Proteasaktiverad receptor 2 förvärrar adenin-inducerad njurtubulointerstitiell skada i möss. Biochem. Biophys. Res. Commun.,483, 547-552.

Isermann, B. (2017) Homeostatiska effekter av koagulationsproteasberoende signalering och proteasaktiverade receptorer. J. Thromb. Haemost., 15, 1273-1284.

Jiang, Y., Yau, MK, Lim, J., Wu, KC, Xu, W., Suen, JY & Fairlie, DP (2018) En potent antagonist av proteasaktiverad receptor 2 som hämmar flera signalfunktioner i human cancer celler. J. Pharmacol. Exp. Ther., 364, 246-257.

Kainz, A., Hronsky, M., Stel, VS, Jager, KJ, Geroldinger, A., Dunkler, D., Heinze, G., Tripepi, G. & Oberbauer, R. (2015) Förutsägelse av förekomsten av kronisk njursjukdom hos diabetespatienter i länder i Europeiska unionen fram till 2025. Nephrol. Ringa. Transplant., 30 Suppl 4, iv113-118.

Kolachalama, VB, Shashar, M., Alousi, F., Shivanna, S., Rijal, K., Belghasem, ME, Walker, J., Matsuura, S., Chang, GH, Gibson, CM, Dember, LM, Francis, JM, Ravid, K. & Chitalia, VC (2018) Uremic solute-aryl-kolvätereceptor-vävnadsfaktoraxel associerar med trombos efter vaskulär skada hos människor. J. Am. Soc. Nephrol., 29, 1063- 1072.

Li, F., Wang, CH, Wang, JG, Thai, T., Boysen, G., Xu, L., Turner, AL, Wolberg, AS, Mackman, N., Maeda, N. & Takahashi, N. (2010) Förhöjd vävnadsfaktoruttryck bidrar till förvärrad diabetisk nefropati hos möss som saknar eNOS som matas med en fettrik kost. J. Thromb. Haemost., 8, 2122-2132.

Lim, J., Iyer, A., Liu, L., Suen, JY, Lohman, RJ, Seow, V., Yau, MK, Brown, L. & Fairlie, DP (2013) Dietinducerad fetma, fettinflammation , och metabolisk dysfunktion som korrelerar med PAR2-uttryck försvagas av PAR2-antagonism. FASEB J., 27, 4757-4767.

Liyanage, T., Ninomiya, T., Jha, V., Neal, B., Patrice, HM, Okpechi, I., Zhao, MH, Lv, J., Garg, AX, Knight, J., Rodgers, A. ., Gallagher, M., Kotwal, S., Cass, A. & Perkovic, V. (2015) Worldwide access to treatment for end-stage kidney disease: a systematisk översikt. Lancet, 385, 1975-1982.

Lok, SWY, Yiu, WH, Li, H., Xue, R., Zou, Y., Li, B., Chan, KW, Chan, LYY, Leung, JCK, Lai, KN & Tang, SCW

(2020) PAR-1-antagonisten vorapaxar förbättrar njurskador och tubulointerstitiell fibros. Clin. Sci. (Lond.), 134, 2873-2891.

Lv, B., Wang, H., Tang, Y., Fan, Z., Xiao, X. & Chen, F. (2009) High-mobility group box 1-protein inducerar vävnadsfaktoruttryck i vaskulära endotelceller via aktivering av NF-kappaB och Egr-1. Thromb. Haemost., 102, 352-359.

Madhusudhan, T., Kerlin, BA & Isermann, B. (2016) Den framväxande rollen av koagulationsproteaser vid njursjukdom. Nat. Rev. Nephrol., 12, 94-109.

Madhusudhan, T., Wang, H., Straub, BK, Gröne, E., Zhou, Q., Shahzad, K., Müller-Krebs, S., Schwenger, V., Gerlitz, B., Grinnell, BW, Griffin, JH, Reiser, J., Gröne, HJ, Esmon, CT, Nawroth, PP, et al. (2012) Cytoskyddande signalering av aktiverat protein C kräver proteasaktiverad receptor -3 i podocyter. Blood, 119, 874-883.

Mitsui, S., Oe, Y., Sekimoto, A., Sato, E., Hashizume, Y., Yamakage, S., Kumakura, S., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. ( 2020) Dubbel blockad av proteasaktiverad receptor 1 och 2 förbättrar additivt diabetisk njursjukdom. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 318, F1067-F1073.

Nakagawa, T., Sato, W., Glushakova, O., Heinig, M., Clarke, T., Campbell-Thompson, M., Yuzawa, Y., Atkinson, MA, Johnson, RJ & Croker, B. ( 2007) Diabetiska endotelial kväveoxidsyntas knockoutmöss utvecklar avancerad diabetisk nefropati. J. Am. Soc. Nephrol., 18, 539-550.

Nakagawa, T., Tanabe, K., Croker, BP, Johnson, RJ, Grant, MB, Kosugi, T. & Li, Q. (2011) Endotelial dysfunktion som en potentiell bidragsgivare vid diabetisk nefropati. Nat. Rev. Nephrol., 7, 36-44.

Nitta, K., Goto, S., Masakane, I., Hanafusa, N., Taniguchi, M., Hasegawa, T., Nakai, S., Wada, A., Hamano, T., Hoshino, J., Joki, N., Abe, M., Yamamoto, K. & Nakamoto, H.; Japanese Society for Dialysis Therapy Renal Data Registry Committee (2020) Årlig dialysdatarapport för 2018, JSDT Renal Data Registry: undersökningsmetoder, anläggningsdata, incidens, prevalens och dödlighet. Ren. Byta ut. Ther., 6, 41.

Noiri, E., Satoh, H., Taguchi, J., Brodsky, SV, Nakao, A., Ogawa, Y., Nishijima, S., Yokomizo, T., Tokunaga, K. & Fujita, T. (2002) ) Association of eNOS Glu298Asp polymorphism with end-stage renal disease. Hypertoni, 40, 535-540.

Nystedt, S., Ramakrishnan, V. & Sundelin, J. (1996) Den proteinasaktiverade receptorn 2 induceras av inflammatoriska mediatorer i humana endotelceller. Jämförelse med trombinreceptorn. J. Biol. Chem., 271, 14910-14915.

Oe, Y., Fushima, T., Sato, E., Sekimoto, A., Kisu, K., Sato, H., Sugawara, J., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) Proteasaktiverad receptor 2 skyddar mot VEGF-inhibitor-inducerad 8 Y. Oe et al. glomerulär endotel- och podocytskada. Sci. Rep., 9, 2986.

Oe, Y., Hayashi, S., Fushima, T., Sato, E., Kisu, K., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2016) Koagulationsfaktor Xa och proteasaktiverad receptor 2 som nya terapeutiska mål för diabetisk nefropati. Åderförkalkning. Thromb. Vasc. Biol., 36, 1525- 1533.

Ogurtsova, K., da Rocha Fernandes, JD, Huang, Y., Linnenkamp, ​​U., Guariguata, L., Cho, NH, Cavan, D., Shaw, JE & Makaroff, LE (2017) IDF Diabetes Atlas: Global uppskattningar för prevalensen av diabetes för 2015 och 2040. Diabetes Res. Clin. Pract., 128, 40-50.

Østerud, B. & Bjørklid, E. (2006) Källor till vävnadsfaktor. Semin. Thromb. Hemost., 32, 11-23.

Owens, AP, Passam, FH, Antoniak, S., Marshall, SM, McDaniel, AL, Rudel, L., Williams, JC, Hubbard, BK, Dutton, JA, Wang, J., Tobias, PS, Curtiss, LK Daugherty, A., Kirchhofer, D., Luyendyk, JP, et al. (2012) Monocytvävnadsfaktorberoende aktivering av koagulation i hyperkolesterolemiska möss och apor hämmas av simvastatin. J. Clin. Invest., 122, 558-568.

Pan, L., Ye, Y., Wo, M., Bao, D., Zhu, F., Cheng, M., Ni, X. & Fei, X. (2018) Klinisk betydelse av hemostatiska parametrar i prognosen för typ 2-diabetes mellitus och diabetisk nefropati. Dis. Markörer, 2018, 5214376.

Patel, MR, Mahaffey, KW, Garg, J., Pan, G., Singer, DE, Hacke, W., Breithardt, G., Halperin, JL, Hankey, GJ, Piccini, JP, Becker, RC, Nessel, CC, Paolini, JF, Berkowitz, SD, Fox, KA, et al. (2011) Rivaroxaban kontra warfarin vid icke-valvulärt förmaksflimmer. N. Engl. J. Med.,

365, 883-891. Pawlinski, R., Wang, JG, Owens, AP, Williams, J., Antoniak, S., Tencati, M., Luther, T., Rowley, JW, Low, EN, Weyrich, AS & Mackman, N. ( 2010) Hematopoetisk och icke-hematopoetisk cellvävnadsfaktor aktiverar koagulationskaskaden hos endotoxemiska möss. Blood, 116, 806-814. Posma, JJ, Grover, SP, Hisada, Y., Owens, AP, Antoniak, S., Spronk, HM & Mackman, N. (2019) Roller av koagulationsproteaser och PAR (Protease-Activated Receptors) i musmodeller av inflammatoriska sjukdomar. Åderförkalkning. Thromb. Vasc. Biol., 39, 13-24.

Robertson, L., Kesteven, P. & McCaslin, JE (2015) Orala direkta trombinhämmare eller orala faktor Xa-hämmare för behandling av djup ventrombos. Cochrane Database Syst. Varv.,

CD010956.

Rogero, MM & Calder, PC (2018) Fetma, inflammation, avgiftsliknande receptor 4 och fettsyror. Näringsämnen, 10, 432.

Rothmeier, AS & Ruf, W. (2012) Proteasaktiverad receptor 2-signalering vid inflammation. Semin. Immunopatol. , 34 ,133-149.

Samad, F. & Ruf, W. (2013) Inflammation, fetma och trombos. Blood, 122, 3415-3422.

Shrestha, C., Ito, T., Kawahara, K., Shrestha, B., Yamakuchi, M., Hashiguchi, T. & Maruyama, I. (2013) Mättad fettsyrapalmitat inducerar extracellulär frisättning av histon H3: a möjlig mekanistisk grund för dietframkallad med hög fetthalt inflammation och trombos. Biochem. Biophys. Res. Commun., 437, 573-578. Sörensen, I., Susnik, N., Inhester, T., Degen, JL, Melk, A., Haller,

H. & Schmitt, R. (2011) Fibrinogen, som fungerar som mitogen för tubulointerstitiell fibroblaster, främjar njurfibros. Kidney Int., 80, 1035-1044.

Sumi, A., Yamanaka-Hanada, N., Bai, F., Makino, T., Mizukami, H. & Ono, T. (2011) Roller av koagulationsväg och faktor Xa i utvecklingen av diabetisk nefropati i DB/ DB möss. Biol. Pharm. Bull., 34, 824-830.

Tanaka, M., Arai, H., Liu, N., Nogaki, F., Nomura, K., Kasuno, K., Oida, E., Kita, T. & Ono, T. (2005) Koagulationens roll faktor Xa och proteasaktiverad receptor 2 i human mesangial cellproliferation. Kidney Int., 67, 2123-2133.

Tricoci, P., Huang, Z., Held, C., Moliterno, DJ, Armstrong, PW, Van de Werf, F., White, HD, Aylward, PE, Wallentin, L., Chen, E., Lokhnygina, Y., Pei, J., Leonardi, S., Rorick, TL, Kilian, AM, et al. (2012) Trombinreceptorantagonist vorapaxar vid akuta kranskärlssyndrom. N. Engl. J. Med., 366, 20-33.

Vesey, DA, Cheung, CW, Kruger, WA, Poronnik, P., Gobe, G. & Johnson, DW (2005) Trombin stimulerar proinflammatoriska och proliferativa svar i primära kulturer av humana proximala tubuliceller. Kidney Int., 67, 1315-1329.

Vesey, DA, Suen, JY, Seow, V., Lohman, RJ, Liu, L., Gobe, GC, Johnson, DW & Fairlie, DP (2013) PAR2-inducerade inflammatoriska svar i tubulär epitel från människan i njuren celler. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 304, F737-750.

Waasdorp, M., de Rooij, DM, Florquin, S., Duitman, J. & Spek, CA (2019) Proteasaktiverad receptor-1 bidrar till njurskada och interstitiell fibros under kronisk obstruktiv nefropati. J. Cell. Mol. Med., 23, 1268-1279.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S. & Spek, CA (2016) Proteasaktiverad receptor-1-brist skyddar mot streptozotocin-inducerad diabetisk nefropati hos möss. Sci. Rep., 6, 33030.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S., Spek, CA & Spek, AC (2017) Proteasaktiverad receptor 2 vid diabetisk nefropati: ett dubbeleggat svärd. Am. J. Transl. Res., 9, 4512-4520.

Walford, G. & Loscalzo, J. (2003) Kväveoxid i vaskulär biologi.

J. Thromb. Haemost., 1, 2112-2118.

Wang, CH, Li, F., Hiller, S., Kim, HS, Maeda, N., Smithies, O. & Takahashi, N. (2011a) En blygsam minskning av endotelial NOS hos möss jämförbar med den som är associerad med human NOS3 varianter förvärrar diabetisk nefropati. Proc. Natl. Acad.

Sci. USA, 108, 2070-2075.

Wang, H., Madhusudhan, T., He, T., Hummel, B., Schmidt, S., Vinnikov, IA, Shahzad, K., Kashif, M., Muller-Krebs, S., Schwenger, V. , Bierhaus, A., Rudofsky, G., Nawroth, PP & Isermann, B. (2011b) Låg men ihållande koagulationsaktivering förbättrar glukosinducerad podocytapoptos: skyddande effekt av faktor V Leiden vid diabetisk nefropati. Blood, 117, 5231-5242.

Watanabe, M., Oe, Y., Sato, E., Sekimoto, A., Sato, H., Ito, S. & Takahashi, N. (2019) Proteasaktiverad receptor 2 förvärrar cisplatin-inducerad nefrotoxicitet. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 316, F654-F659.

Witkowski, M., Landmesser, U. & Rauch, U. (2016) Vävnadsfaktor som en koppling mellan inflammation och koagulation. Trender Cardiovasc. Med., 26, 297-303.

Zhang, J., Wang, Y., Zhang, R., Li, H., Han, Q., Wu, Y., Wang, S., Guo, R., Wang, T., Li, L. & Liu, F. (2018) Serumfibrinogen förutsäger diabetisk ESRD hos patienter med typ 2-diabetes mellitus. Diabetes Res. Clin. Pract., 141, 1-9.

Zhang, Y., Xiao, HQ, Zeng, XT, Zuo, HX & Xu, YC (2015) Samband mellan endotelial kväveoxidsyntaspolymorfismer och risk för diabetisk nefropati: en uppdaterad metaanalys. Ren. Fail., 37, 312-326.

Zhao, HJ, Wang, S., Cheng, H., Zhang, MZ, Takahashi, T., Fogo, AB, Breyer, MD & Harris, RC (2006) Endotelial kväveoxidsyntasbrist producerar accelererad nefropati hos diabetiska möss. J. Am. Soc. Nephrol., 17, 2664-2669.

Zhao, P., Metcalf, M. & Bunnett, NW (2014) Partisk signalering av proteasaktiverade receptorer. Främre. Endokrinol. (Lausanne), 5, 67.