Jämföra innehåll av fenyletanolglykosider i två olika värdcistancher Herba efter olika torkningsbehandlingar

De jämförde innehållet ifenyletanolglykosideri två olika värdarCistanchesHerbaefter olikatorkbehandlingarGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11(Agronomy College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Kina)2(State Key Laboratory of Aridland Crop Science, Lanzhou 730070, Kina)

AbstraktAtt jämföra innehållet av 10 fenyletanoidglykosider i olika bearbetade Cistancher Herba från olika värdar med hjälp av ultrahögpresterande vätskekromatografi-trippelkvadrupolmasspektrometri (UPLC-QQQ-MS). Den torkade Cistanches Herba krossades, siktades genom en 60-nätsikt och extraherades med ultraljud med 50 % metanol. Separation utfördes på en Agilent Eclipse Plus C18-kolonn (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm) med användning av gradienteluering med mobil fas A (0,1 % vattenlösning av myrsyra) och B (acetonitril). Detektion utfördes i dynamiskt multipelreaktionsövervakningsläge med användning av en elektrosprayjoniseringskälla i UPLC-QQQ-MS.

Resultaten visade att betydande variationer observerades i sammansättningen av10 fenyletanoidglykosiderblandCistanches Herba odlas på olika värdaroch utsatts för olika torkningsbehandlingar. Frystorkade Cistanches Herba visade det högsta innehållet av dessa föreningar för båda värdväxterna, följt av torkning vid 80 grader. Även om frystorkning bevarade det maximala innehållet av 10 fenyletanoidglykosider i Cistanches Herba, var torkning vid 80 grader mer kostnadseffektiv för storskalig produktion.

Nyckelord:ultrahögpresterande vätskekromatografi-trippelkvadrupolmasspektrometri; Cistanches Herba;Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) Nutt; fenyletanoidglykosider; torkningsmetod

Cistanche Raw material

KLICKA HÄR FÖR ATT FÅ NATURLIGT EKOLOGISKT CISTANCHE TUBULOSA-EXTRAKT MED 30% ECHINACOSID OCH 12% ACTEOSIDE

Cistanches Herbaär den torra köttiga stjälken med fjällande blad avCistanche deserticola YCMaellerCistanche tubulosa(Schenk) Wight. Den sågs första gången i "Shen Nongs Materia Medica" och rankas bland de högsta betygen. Det är en dyrbar kinesisk örtmedicin som kan användas både som medicin och mat. Eftersom den mestadels växer i torra områden som Inre Mongoliet, Xinjiang, Gansu och Ningxia, är den också känd som "öken ginseng." Cistanche deserticola är söt, salt och varm och återgår till njurens och tjocktarmens meridianer; den har effekterna avnärande njure yang, fyller på essens och blod, fuktar tarmarna och laxermedel etc. och används ofta för att behandla sjukdomar som t.ex.otillräcklig njuryang, brist på essens och blod, impotens och infertilitet, ochsvaghet i muskler och skelett [1 -4].Fenyletanolglykosiderär de viktigaste aktiva ingredienserna iCistanche deserticola, och de är också de mest rapporterade ämnena i forskningen om Cistanche deserticola [5]

Den traditionella värdväxten förCistanche deserticolaär Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge i familjen Chenopodiaceae. Haloxylon ammodendron växer dock långsamt och har lågt ekonomiskt värde. Haloxylon ammodendronplantor som är mindre än 3 år gamla är svåra att använda för att odla Cistanche deserticola. För att lindra motsättningen mellan utbud och efterfrågan på Cistanche deserticola läkemedelsmarknaden, öka produktionen av Cistanche deserticola och uppnå storskalig och standardiserad odling av Cistanche deserticola. Vetenskapliga forskare introducerade framgångsrikt Atriplex canescens (Pursh) Nutt i Gansu, men huruvida denna trädart kan användas som en ny värdväxt för Cistanche deserticola och om dess tillväxtprestanda är bättre än Haloxylon ammodendron har blivit en het fråga av stor oro [6] . Huruvida Atriplex truncatula helt kan ersätta Haloxylon ammodendron vid odling av Cistanche deserticola behöver fortfarande stödjas av bredare, mer omfattande och djupgående grundforskningsresultat. I mitt land, även om omfattande forskning har utförts på Atriplex truncatula från aspekter av introduktion, plantodling och komponentanalys [7-10], finns det mycket få rapporter om inokulering av Atriplex truncatula med Cistanche deserticola. Tidigare fokuserade forskningen huvudsakligen på utvecklingen och användningsegenskaperna hos Cistanche deserticola [11-14]. Forskningen om de aktiva ingredienserna i två värdar Cistanche deserticola har dock inte rapporterats, särskilt två värdar Cistanche deserticola efter att ha använt olika torkningsprocesser. Det finns få studier om skillnader i retention av aktiva ingredienser.

Ultrahögpresterande vätskekromatografi-trippelkvadrupolmasspektrometri (UPLC-QQQ-MS) använder UPLC som kromatografiskt separationssystem och trippelkvadrupol (QQQ) som analysator i serie. Det är en vätskemasspektrometriteknik som har god separationseffekt på multi -komponentkomplexa system och kan snabbt och korrekt kvantitativt analysera de komplexa komponenterna i traditionell kinesisk medicin [15-16]. I detta experiment användes UPLC-QQQ-MS-teknologi för att kvantitativt analysera 10 fenyletanolglykosider, inklusive echinaceaside, verbascoside, isorbascoside och antocyanoside A, i de torkade produkterna från två värdarter av Cistanche deserticola efter olika torkningsbehandlingar. Att jämföra innehållet av dessa komponenter i Cistanche deserticola under olika torkningsmetoder och olika värdar ger en teoretisk grund för utveckling och exakt utnyttjande av fenyletanolglykosider i Cistanche deserticola.

Cistanche extract can reduce Inflammatory hyperplasia (2)

1 Material och instrument

Haloxylon ammodendron Cistanches och Cistanches tetrapteraner samlades in från Cistanche deserticola planteringsbasen i Jingtai County, Gansu-provinsen. Skördetiden var mars 2023. Professor Guo Yehong vid Gansu Agricultural University identifierade de köttiga stjälkarna av Cistanche deserticola med fjällande löv. Referensämnen echinacea-sida (C35H46O20, CAS-nr: 82854-37-3, renhet 98,30%), verbascoside (C29H36O15, CAS-nr: 61276-17-3, renhet 99,35%), tuberos A (C37H48O21, CAS-nr.: 112516-05-9, renhet 99,74 %), isomuraskosid (C29H36O15, CAS-nr: 61303-13-7, renhet 97,77 %), trädgårdiposid (C17H24O10, CAS-nr: 24512-63-8, renhet 99,11 %), 2 '-acetyl verbascosid (C31H38O16, CAS-nummer: 94492-24-7, renhet 97,12%), salidrosid

(C14H20O7, CAS-nr: 10338-51-9, renhet 98,43%), moderört (C15H24O9, CAS-nr: 52949-83-4, renhet 97,64%), Cistancheside A (C36H48O20, CAS-nr: {{15} }, renhet 93,24%), angiosid B (C31H38O16, CAS-nummer: 112516-04-8, renhet 98,57%), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; metanol och acetonitril är kromatografiskt rena, Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; myrsyra, Tianjin Comeo Chemical Reagent Co., Ltd.; vatten var ultrarent vatten.

DESKTOP-T2G6S78\6460 ultrahögpresterande vätskekromatografi-trippel kvadrupol tandemmasspektrometer, Agilent Company i USA; AL104 elektronisk analytisk våg, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., Schweiz; LyoQuest-85 frystork, Telstar, Spanien.

2 Experimentella metoder

2.1 Beredning av Cistanche deserticola-prover med olika torkningsprocesser

Skär färska Cistanche deserticola-produkter från olika värdar i 3 mm tjocka skivor och bearbeta dem enligt följande.

(1) Soltorkning: Ånga skivorna i 5 minuter och lägg dem sedan platt på en solig plats för att torka. Kontrollera förändringarna i fukthalten. När fukthalten är mindre än 10 %, lägg undan dem för senare användning.

(2) Torkning: Ångkoka skivorna i 5 minuter och placera dem sedan i en ugn på 40, 60 eller 80 grader för att torka tills fukthalten är mindre än 10 % och lägg undan dem för senare användning.

(3) Vakuumfrystorkning: Placera skivorna i ett -80 graders kylskåp i 2 timmar innan de förkyls, placera dem sedan i en vakuumfrystork (vakuumgrad 650Pa, frystemperatur -55 grad ) , torka i 48 timmar och lägg undan för senare användning.

Cistanche tubulosa (5)

2.2 Kromatografiska förhållanden

Agilent Eclipse Plus C18 kolumn (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm); flödeshastighet: 0,3 ml/min; injektionsvolym 1 μL; mobil fas: fas A är 0,1 % vattenhaltig myrsyralösning och fas B är kromatografisk acetonitril. Elueringshastigheten för mobil fas A och B är 0~1,5 min, 10%~15% B; 1,5~2 tum, 15%~20% B; 2~3 min, 20%~25% B; 3~4 min, 25%~30% B; 4~5 min, 30%~32% B; 5~6 min, 32%~34% B; 6~7 min, 34%~36% B; 7~8 min, 36 %~38% B; 8~9 min, 38%~40% B; 9~9,5 min, 0%~45% B; 9,5~9,6 min, 45%~10% B; 9,6~10 min, 10 % B .

2.3 Optimerade masspektrometriförhållanden

Typ jonkälla: elektronisk sprayjonkälla; skanningsmetod: negativ jonskanning; jonkällans temperatur: 350 grader; nebulisator: 35 psi; multipelreaktionsövervakningsläge och dynamiskt multipelreaktionsläge för att övervaka och analysera varje förening. De optimerade förhållandena för masspektrometri av 10 ämnen visas i tabell 1.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE

2.4 Beredning av referenslösning och standardkurvlösning

Väg exakt standardpulver avechinakosid,verbascoside, anortosit A, isolebaskosid, gardeniposid, 2'-acetylverbaskosid, salidrosid, leonin, avstånd A och anortosit B., tillsätt 50% metanol för att göra en blandad referenslösning innehållande 0,2 mg per 1 ml; späd med 50 % metanol till en standardserie av blandade lösningar av 40,96, 102,4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/L, tryck på "Betingelserna under 2.2" och 2.3" injiceras sekventiellt från låg koncentration till hög koncentration, och sedan används den kvantitativa mjukvaran (agilent mass hunter) för att bearbeta detekteringsresultaten med hjälp av standardkurvan som passerar ursprunget. Utför linjär regression med ämneskoncentrationen X (ng/ml) som abskissan och jonen svarsvärdet Y som ordinatan, och beräkna regressionsekvationen och korrelationskoefficienten, som visas i tabell 2. Det finns ett bra linjärt samband med jonsvarsvärdet inom området.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE