Effekt Av Echinacoside På Cerebral Ischemi Råttor

Abstrakt: Mål Att studera effekten avEchinosid(ECH) på monoaminneurotransmittorer i den extracellulära vätskan i striatum hos råttor med fokal cerebral ischemi, och för att utforska den möjliga mekanismen för ECH:s neuroprotektiva effekt på hjärnan. Metoder SD-råttor delades slumpmässigt in i en kontrollgrupp, modellgrupp, ECH hög- och lågdosgrupper och ligustrazin (CXQ) grupp. Råttor i varje grupp fick motsvarande läkemedel eller fysiologisk saltlösning intraperitonealt en gång om dagen i 7 dagar. På den tredje administreringsdagen var sondhylsan inbäddad i hjärnans striatum. En timme efter den sista administreringen gjordes råttmodellen för fokal cerebral ischemi (MCAO). Efter att modellen tillverkats utfördes mikrodialys omedelbart. Dialysatet injicerades i den högpresterande vätskekromatografi-elektrokemiska detektorn (HPLC-ECD) för att bestämma innehållet av noradrenalin (NE), dopamin (DA), 5-hydroxitryptamin (5-HT), 3 ,4-dihydroxifenylättiksyra (DOPAC), homovanillinsyra (HVA), 5-hydroxiindolättiksyra (HIAA) i den extracellulära vätskan i striatum i varje grupp. Resultat Jämfört med kontrollgruppen ökade nivåerna av NE, DA och 5-HT i modellgruppen, och de sura metaboliterna DOPAC, HVA och HIAA ökade också. Jämfört med modellgruppen minskade innehållet av sex substanser i hög- och lågdosgrupperna ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) och CXQ-grupperna. Slutsats Den neuroprotektiva effekten av ECH kan vara relaterad till ökningen av monoaminneurotransmittorer efter cerebral ischemi.

Cistanche pulver

Nyckelord: Echinosid; Cerebral ischemi; Striatum; HPLC-ECD; Monoamin neurotransmittorer och metaboliter

Echinaceosid(ECH) är en effektiv komponent av fenyletanoidglykosider isolerade och renade frånCistanche deserticola, en speciell anläggning i Xinjiang. Studier har visat att ECH har neuroprotektiva effekter såsom antioxidation [1-2], nervskydd [3-4], anti-aging [5] och förbättring av inlärning och minne [6-8]. Resultaten av Chen Hong et al. bekräftat att ECH har en skyddande effekt på DA-neuroner vid Parkinsons sjukdom [9]. Monoamin-neurotransmittorer är ett slags viktiga ämnen som reglerar kroppens fysiologiska aktiviteter.Innehållet i vävnaden kan återspegla processerna för neurotransmittorbiosyntes, frisättning, upptag och inaktivering [10-11]. För närvarande finns det ingen relevant rapport om effekten av ECH på monoaminsändare i hjärnan hos råttor med cerebral ischemi. I denna studie undersöktes effekten av ECH på innehållet av monoaminneurotransmittorer i den extracellulära vätskan i striatum hos råttor med cerebral ischemi med hjälp av hjärnmikrodialysteknik, och den möjliga mekanismen för ECH på hjärnans neuroprotektion undersöktes preliminärt.

Cistanche tubulosa extraktpulver

1.Material

1.1 Försöksdjur

SD-råttor, ♂, Kroppsmassa 250~300g (köpt från Xinjiang Experimental Animal Center, licensnummer: 2009-0053).

1.2 Läkemedel och reagens

ECH är donerat av professor Tu Pengfei, School of Pharmacy, Peking University (renhet över 95%); Noradrenalin (NE), dopamin (DA), 5-hydroxitryptamin (5-HT), 3,4-dihydroxifenylättiksyra (DOPAC), homovanillinsyra (HVA)

5-hydroxiindolättiksyra (HIAA) är Sigma; Tetrametylpyrazinhydroklorid för injektion (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Zinkfosfatcement (produkt från Shanghai Medical Instruments Co., Ltd., bestående av vätska och pulver, blandat med tiden); Natrium 1-alkylsulfat (DIKMA); Citronsyrahydrat (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); trinatriumcitrat (Acros); Dinatriumetylendiamintetraättiksyra (JTTakerChemicalco); Metanol (DIKMA); acetonitril (DIKMA); Cerebral mikrodialys perfusionsvätska är sammansatt natriumkloridinjektion (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Allt vatten som används är återångat vatten.

1.3 Instrument

Amerikansk BAS4100 stereotaktisk apparat för råtthjärna; CMA/12-sond och sondhylsa; CMA/120 medvetande djuranordning; CMA/402 mikropump; CMA/150 automatisk provsamlare för låg temperatur. Esa 5600A infusionspump; Esa 5600A infusionspump; Esa 542 automatisk provinsprutningsanordning; Esas CoulArray elektrokemiska detektor; Glasartad kolarbetselektrod och Ag/AgCl-referenselektrod; C18-kolonn (DIKMA, ODS5 μm, 150 mm × 4,6 mm); CoulArraywin kromatografi arbetsstation (Esa företag); Vortexmixer (QL-861 typ); Desktop surhetstestare (HANNA-211); Stationär höghastighetscentrifug (XYJ-2 typ).

2.Metod

Cistanche tillägg nära mig—Imbevisa minnet

Klicka här för att se produkter från Cistanche Improve Memory

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 Djurgruppering och administration

Trettio råttor delades slumpmässigt in i fem grupper: ① Kontrollgrupp: 1ml · kg-1 · d-1 normal saltlösning; ② Modellgrupp: normal koksaltlösning 1ml · kg-1 · d-1; ③ Modell+ligustrazin (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Modell+ECH hög- och lågdosgrupper (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Alla djur i varje grupp injicerades intraperitonealt under 7 dagar.

2.2 Modelleringsmetod och mikrodialys

Varje råtta begravdes med en kanyl på den tredje administreringsdagen: råttorna bedövades med 10% kloralhydrat (3,5 ml · kg-1), fixerades på den stereotaktiska hjärnan BAS4100, och sondkatetern implanterades i vänster striatum (koordinater AP:+0.2mm; ML: - 3.0mm; DV: - 3.5mm) angående GeorgePaxinos "Stereotactic Map of Rat Brain". Efter den sista administreringen bedövades råttorna 1 timme senare och råttorna gjordes till en fokal cerebral ischemimodell (MCAO-modell) med användning av Yang Zanzhang [12]s förbättrade Longa-suturmetod. Fisklinan i kontrollgruppen sattes in endast 10 mm, och de andra stegen var desamma som i operationsgruppen. Efter modellering, sätt in mikrodialyssonden i tillståndet av medveten och fri rörelse, och använd Ringer-lösning till μ Det cerebrala mikrodialysatet samlades in vid 4 grader och ett rör med dialysat samlades in efter 20 minuter. Efter att varje tub med dialysat har samlats in ska den omedelbart förvaras i ett - 20 graders kylskåp och överföras till ett - 70 graders kylskåp efter dialys. Återvinningshastigheten för sonden mättes före användning, som användes för att omvandla koncentrationen av monoaminneurotransmittorer i dialysatet.

vad gör cistanche tubulosa – Förbättra minnet

2.3 HPLC-ECD-analys

Mobilfaskonfiguration: den mobila fasen innehåller 829 ml 0.15mol · L-1 citronsyra-natriumcitratbuffert per liter; 0.1mol · L-1 dinatrium-EDTA 1 ml; Metanol 150ml; Natrium {{10}}alkylsulfat 0.283g. Ställ in flödeshastigheten för den mobila fasen som 0.7ml · min-1 och temperaturen på kolonnugnen till 28 grader . Arbetsspänningen för den elektrokemiska detektorn är 200mV, 400mV och 600mV, med 2, 3 respektive 4 kanaler; Förstärkningen är 2nA. Injektionsvolymen är 25 μl. Standardkurvan är ritad med 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1 gradientblandad standardlösning.

2.4 Statistisk bearbetning

Experimentdata uttrycks i x-fält ± s, och de upprepade mätdata analyseras med hjälp av SPSS13.0 statistisk programvara.

Fig. 1-6 visar förändringarna i NE-, DA-, DOPAC-, HIAA-, HVA- och 5-HT-nivåerna i den extracellulära vätskan i råttstriatum. Det kan ses från figuren att efter cerebral ischemi har monoaminneurotransmittorer i den extracellulära vätskan i striatum en metabol störning, och innehållet i varje signalsubstans har ökat. Inom ett visst intervall är ökningen mer uppenbar med förlängningen av ischemitiden. Vid 90 min av ischemi var koncentrationen av DA och NE i den extracellulära vätskan i striatum mer än tre gånger nivån för kontrollgruppen. Nivåerna av NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA och 5-HT i kontrollgruppen minskade från hög till låg, vilket kan vara relaterat till den tillfälliga ischemin i vänster hjärna efter ligering av den vänstra gemensamma halspulsådern och skadan som orsakats av att sätta in sonden. Från förändringskurvan kan ECH och CXQ minska toppkoncentrationen av DA, DOPAC, HIAA, HVA och 5-HT efter cerebral ischemi, och CXQ och högdos ECH är mer uppenbara. Den nedåtgående förskjutningen av tidsförloppskurvan för varje neurotransmittor indikerar att ECH kan hämma ökningen av neurotransmittorer och deras metaboliter i hjärnan hos råttor med cerebral ischemi.

                                                                           Fig 2 Effekt av Echinoside på extracellulär nivå av DA i striatum hos råttor

Fig 3 Effekt av Echinoside på extracellulär nivå av DOPAC i striatum hos råttor Fig4 Effekt av Echinoside en extracellulär nivå av HIVV i striatum hos råttor

Fig 5 Effekt av Echinoside på extracellulär nivå av HVA i striatum hos råttor Fig6 Effekt av Echinoside på extracellulär nivå av 5-HT instriatum hos råttor

4.Diskussion

Stålmannen cistancheört– Improhar minne

【Be om mer】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Mekanismen för hjärnskada orsakad av cerebral ischemi är komplex. Vid cerebral ischemi störs monoaminneurotransmittorerna i hjärnan och innehållet av NE, DA och 5-HT reduceras avsevärt. Ju allvarligare cerebral ischemi är, desto lägre är innehållet av NE, DA och 5-HT i hjärnvävnaden [13]. Den intracerebrala mikrodialysmetoden visade att innehållet av monoaminneurotransmittorer ökade i den extracellulära vätskan under cerebral ischemi, varade under hela den ischemiska perioden och ökade ytterligare med förlängningen av ischemisk tid. De experimentella resultaten överensstämde med rapporten [14].Echinosideär en effektiv komponent av fenyletanoidglykosider isolerade och renade från Cistanche deserticola, en speciell växt i Xinjiang. Det har många neuroprotektiva effekter som anti-aging, förbättrad inlärning och minne, och anti-neuronal apoptos. I denna studie användes avancerad inhemsk hjärnmikrodialys kombinerad med HPLC-ECD-detektionsteknologi för att preliminärt utforska effekten avEchinosidpå monoaminneurotransmittorer och deras metaboliter i den extracellulära vätskan i striatum hos experimentråttor med cerebral ischemi. Resultaten visade att ECH kan minska ökningen av monoamin-neurotransmittorer i den extracellulära vätskan i striatum orsakad av cerebral ischemi, och har en bättre effekt på att förbättra skadorna på cerebral ischemisk vävnad.