Effekter av diabetes mellitus på sexuell funktion, histomorfologi och -mooth muskelaktinuttryck i kavernös kropp av penis hos råttor
Mar 05, 2025
Abstrakt:
Mål:Att observeraSexuell funktion av diabetesmodellråttor och utforska den möjliga mekanismen för sekundär sexuell dysfunktion orsakad av hyperglykemi.
MetoderDe experimentella råttorna delades slumpmässigt i den tomma gruppen (n =5) ochdiabetesgrupp(n =15). Efter att Diabetes Animal -modellen framgångsrikt konstruerades utvärderades den sexuella funktionen hos två grupper. De histologiska egenskaperna hos testiklar i två grupper observerades. Uttrycket av -mooth muskelaktin (-SMA) i penisvävnaden i två grupper mättes. Resultaten av serumsexhormoner minskade signifikant (s<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
SlutsatsDe minskade nivåerna av könshormoner, det minskade antalet glatta muskelceller i kavernös kropp av penis, det minskade uttrycket av -SMA i kavernös kropp av penis, den störda strukturen hos interstitiella vävnader av testis, de morfologiska förändringarna av glatta muskelceller och förvärringen av fibros i diabetesråttorna är viktiga fenotypiska egenskaper. Att utforska diagnosen och behandlingen av denna sjukdom med dessa fenotypiska egenskaper kommer att vara av stor betydelse.
Nyckelord:diabetes mellitus;erektil dysfunktion; sexuell funktion; könshormon; - Uttryck av glatt muskelaktin
Örtcistanche -tillskott för erektil dysfunktion orsakad av diabetes
Diabetes mellitus (DM)har länge varit en kontaktpunkt för uppmärksamhet både inhemskt och internationellt på grund av dess höga förekomst och prevalens [1]. De olika komplikationerna som induceras av DM påverkar betydligt livskvaliteten för patienter. Bland dessa förekomsten averektil dysfunktion (ed)på manDM -patienterär markant förhöjd. För närvarande har DM blivit en högriskgrupp för ED [2–3]. Därför genomförde djupgående studier påDM-inducerad ED (DMED)har stor betydelse. Denna studie syftar till att observera effekterna av DM på erektilfunktion, könshormoner, expressionsnivåerna för -mooth muskelaktin (-SMA) i den penile kavernösa kroppen och morfologin för testikel interstitial ochPenilkavernös glatt muskelVävnader hos råttor, preliminärt undersöker den potentiella patologiska grunden för ED inducerad av DM.
1 Material och metoder
1.1 Experimentella djur och reagens
Tjugo vuxna SPF-klass SD-råttor med enhetlig kroppsvikt valdes. De viktigaste experimentella reagensen inkluderade streptozotocin (STZ) och apomorfin (APO), såväl som antikroppar som krävs för att detektera -SMA -uttryck. Denna studie godkändes av djurskydds- och etikkommittén vid Dongzhimen Hospital, Peking University of Chinese Medicine (No. 17-04).
1.2 Experimentella metoder
1.2.1 Upprättande av en diabetisk råttmodell
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/L när som helst efter 5 dagar med STZ intraperitoneal injektion ansågs vara standarden för framgångsrik DM -modellanläggning [4].
1.2.2 Erektilfunktionstest hos råttor
Efter att ha bekräftat framgångsrik DM -modellering vägdes råttorna och placerades i en transparent glaslåda. APO -lösningsmedlet (100 ug/kg) injicerades subkutant på baksidan av nacken baserat på kroppsvikt. Den omgivande miljön hölls tyst, och inomhusbelysningen justerades till en nivå som bara var tillräcklig för att observera penilerektion hos råttor. Antalet penilerektioner inom 30 minuter efter subkutan injektion observerades och registrerades. Kriterier för penilerektion: Penilförstoring, tillbakadragning av forhuden, exponering av glans åtföljd av hyperemi och rodnad och synlighet för de mellersta och nedre segmenten av penis.
1.2.3 Mätning av könshormoner hos råttor
Serumsexhormonnivåerna i de två grupperna mättes med hjälp av RadioimmunoAssay -metoden, enligt de specifika procedurerna som beskrivs i RadioimmunoAssay Kit -instruktionerna.
1.2.4 Histopatologisk observation av testikel interstitiell vävnad
Efter att ha samlat blod från råttorens buk aorta extraherades den högra testikeln jämnt. Testikeln tvättades med PBS -buffert och fixerades helt i paraformaldehyd i 72 timmar. Vävnaden var inbäddad i paraffin, sektionerad, färgad med hematoxylin-eosin (H&E) och observerades för histologiska egenskaper.
1.2.5 Observation av peniskavernös fibros hos råttor
Efter att ha samlat blod från abdominal aorta skars och tvättades penilvävnad med PBS -buffert. Vävnaden fixerades helt i paraformaldehyd i 72 timmar, inbäddad i paraffin, sektionerad och färgad med Massons trikrom. Det relativa innehållet i glatt muskel/kollagenfibrer i peniskavernös vävnad i varje grupp observerades under ett mikroskop.
1.2.6 Mätning av -SMA -expressionsnivåer i peniskavernös vävnad
Penilkavernös vävnad utsattes för rutinmässig deparaffinisering för vatten, tvättades med PBS -buffert i 5 minuter och utsattes för mikrovågsvärmereparation i citratbuffert (pH 6. 0) i 20 minuter. Efter kylning till rumstemperatur tvättades vävnaden tre gånger med PBS, 3 minuter varje gång. En 3% väteperoxidlösning applicerades i ett mörkt rum vid rumstemperatur i 15 minuter, följt av PBS -tvätt. -SMA -antikropp tillsattes sedan och vävnaden inkuberades över natten vid 4 grader. Efter att ha återvänt till rumstemperatur tvättades vävnaden med PBS, inkuberades med en sekundär antikropp vid 37 grader i 30 minuter och tvättades igen med PBS. DAB applicerades för färgutveckling i mörkret och reaktionen avslutades med vatten. PBS användes som en ersättning för den primära antikroppen som en negativ kontroll, och kvantitativ analys genomfördes med en bildanalysator.
1.3 Statistiska metoder
Uppgifterna som samlats in i denna studie organiserades med Microsoft Excel och analyserades sedan med SPSS 25. 0 för statistisk testning. Uppgifterna för varje grupp uttrycks som medelvärde ± standardavvikelse (x̄ ± s). Ett p-värde på mindre än 0. 0 5 (p <0,05) ansågs statistiskt signifikant.
2 resultat
2.1 Jämförelse av kroppsvikt och blodglukosförändringar mellan de två grupperna
Se tabell 1.
2.2 Jämförelse av penilereringsgraden mellan de två grupperna
Se tabell 2.
2.3 Jämförelse av serumsexhormonnivåer mellan de två grupperna
Se tabell 3.
2.4 Patologisk observation av testikel interstitiell vävnad mellan de två grupperna
Den testikel interstitiella vävnaden i kontrollgruppen verkade normal. De interstitiella cellerna var runda eller ovala i form, med regelbunden morfologi, normalt intercellulärt avstånd, ordnat arrangemang och ingen signifikant minskning av cellantalet. Däremot visade den diabetiska gruppen testikel interstitiell ödem, oregelbunden cellmorfologi, lösa intercellulära utrymmen, störda arrangemang, störda intracellulära strukturer och tecken på differentiering i vissa celler, vilket förlorar strukturella egenskaper. Se figur 1.
| Grupp | Provstorlek (n) | Baslinje kroppsvikt (g) | Kroppsvikt 5 dagar efter modellering (G) | Blodglukos 5 dagar efter modellering (mmol/L) | Kroppsvikt före uppoffring (G) | Blodglukos före uppoffring (mmol/l) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Diabetesgrupp | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Kontrollgrupp | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Notera: Jämfört med kontrollgruppen,P <0. 01.
Tabell 2: Jämförelse av penilereringshastigheter mellan två grupper
| Grupp | Provstorlek (n) | Positiva fall i erektionstest (N) | Erektionshastighet (%) |
|---|---|---|---|
| Diabetesgrupp | 15 | 5 | 33.3** |
| Kontrollgrupp | 5 | 4 | 80.0 |
Notera: Jämfört med kontrollgruppen,P <0. 01.
Tabell 3: Jämförelse av serumsexhormonnivåer mellan två grupper (x̄ ± s)
| Grupp | Provstorlek (n) | T (nmol·l⁻) | FSH (iu · l⁻⁻) | Lh (ng · l⁻⁻) |
|---|---|---|---|---|
| Diabetesgrupp | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Kontrollgrupp | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Notera: Jämfört med kontrollgruppen,P <0. 01.
2.4 Patologisk observation av testikel interstitiell vävnad mellan två grupper
I kontrollgruppen verkade testikelinterstitiell vävnad normal, med interstitiella celler som var runda eller ovala i form, som visade regelbunden morfologi, normala intercellulära utrymmen och ordnat arrangemang. Antalet celler visade inte någon signifikant minskning. Jämfört med kontrollgruppen uppvisade den diabetiska gruppen testikel interstitiell ödem, oregelbundet formade celler, lösa intercellulära utrymmen, störda arrangemang, störda intracellulära strukturer och tecken på differentiering i vissa celler, vilket förlorar sina strukturella egenskaper. Se figur 1.
2.5 Observation av peniskavernös fibros mellan två grupper
Massons färgning användes för att observera skillnaderna i graden av fibros i peniskavernös vävnad mellan de två grupperna. I diabetikergruppen var andelen kollagenfibrer signifikant högre, med en ökning av relativt innehåll, medan andelen glatta muskelceller var mindre, med en minskning av relativt innehåll. Se figur 2.
Figur 1 Han färgning av resultat av testiklar i två grupper (× 10, n=3)
Figur 2 Masson -färgningsresultat från Corpora Cavernosa i två grupper (× 4, n=3)
2.6 Uttryck av -SMA i Corpus Cavernosum glatta muskelceller i två grupper
Immunohistokemi användes för att detektera uttrycket av -SMA i de två grupperna. Jämfört med den tomma gruppen reducerades den brungul färgade delen i diabetikergruppen signifikant, det vill säga det positiva celluttrycket av -SMA i diabetikergruppen minskades signifikant. Se figur 3.
Fig. 3 Immunohistochemistry Resultat från Corpus Cavernosum i två grupper (× 10, N=3)
