Utforska de terapeutiska effekterna och mekanismerna för Yishen Tonglong-avkok på benign prostatahyperplasi hos råttor via IL-6/STAT3-signalvägen
Dec 17, 2025
Abstrakt
Mål:För att undersöka, genom interleukin (IL)-6/signalomvandlare och activator of transcription (STAT)3 signalvägen, de förbättrande effekterna och mekanismen av Yiqi Wenshen Tonglong Decoction (här förkortat som Yishen Tonglong Decoction) på benign prostatahyperplasi (BPH) hos råttor.
Metoder:Sprague-Dawley (SD) hanråttor kastrerades och injicerades sedan subkutant med testosteronpropionat för att etablera en BPH-modell. Råttor tilldelades slumpmässigt till följande grupper (n=12/grupp): modell; Yishen Tonglong Decoction låg- och högdosgrupper (15 och 30 g/kg); STAT3-aktivatorgrupp (Colivelin, 1 mg/kg); och kombinerad högdos Yishen Tonglong Decoction (30 g/kg) + Colivin (1 mg/kg) grupp. Ytterligare 12 SD-hanråttor fungerade som en skenopererad grupp. Efter gruppspecifika behandlingar med Yishen Tonglong Decoction och/eller Colivelin bedömde vi förhållandet mellan prostataindex (PI) och östradiol (E2)/testosteron (T); utvärderade prostatahistomorfologi och fibros med hematoxylin-eosin (HE) och Massons trikromfärgning; mätte Ki-67-expression genom immunhistokemi; kvantifierade IL-6 och IL-1 nivåer i prostatavävnad och serum med ELISA; och detekterade kollagen I/III- och IL-6/STAT3-vägrelaterade proteiner genom Western blotting.
Resultat:Jämfört med sken, visade modellgruppen markant prostatahyperplasi och fibros, med signifikanta ökningar av PI, Ki-67 optisk densitet, vävnad/serum IL-6 och IL-1 , kollagen I/III, IL-6 protein och p-STAT3/STAT3, tillsammans med en signifikant minskning av E2/05 P < 0,5 P < 0,05). I jämförelse med modellgruppen lindrade både låga och höga doser av Yishen Tonglong Decoction hyperplasi och fibros, minskade PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 protein och p-STAT3/STAT3 och ökade E2/T (alla P < 0,05). Högdosavkoket gav större förbättringar än lågdosen (P < 0,05). Enbart kolivelin förvärrade hyperplasi och fibros och ökade ytterligare PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 och p-STAT3/STAT3 samtidigt som E2/T minskade (P < 0,05). Samtidig administrering av Colivelin försvagade fördelarna med högdosavkoket, vilket signifikant försämrade alla ovanstående index jämfört med enbart högdosavkok (P < 0,05).
Slutsats:Yishen Tonglong Decoction mildrar inflammation och förbättrar BPH-patologi hos råttor, åtminstone delvis genom att undertrycka aktiveringen av IL-6/STAT3-signalvägen.
Nyckelord:IL-6/STAT3-signalering; Yishen Tonglong avkok; benign prostatahyperplasi; ört för att läka prostatitproblem
Ört Cistanche-tillskott
Mer information om ny tcm-ört för prostatahälsa
Introduktion
Benign prostatahyperplasi (BPH) är ett vanligt obstruktivt tillstånd i de nedre urinvägarna hos medelålders och äldre män, kännetecknat av epitel- och stromalproliferation och prostataförstoring, vilket leder till tveksamhet, frekvens och brådska som avsevärt försämrar livskvaliteten [1,2]. Inflammation är en nyckelfaktor för BPH-patogenes; det främjar epitelial och stromal glattmuskelproliferation och fibrotisk ombyggnad. Antiinfektiva och antiinflammatoriska strategier är därför effektiva för att förebygga och hantera BPH [3,4].
IL-6 är ett pleiotropt proinflammatoriskt cytokin som uttrycks brett i vävnadsceller. Den aktiverar STAT3 för att utlösa inflammatoriska program [5]. Hämning av IL-6/STAT3-aktivering minskar nedströms proinflammatoriska mediatorer, avbryter inflammatoriska kaskader, minskar hypertrofi-associerad immuninfiltration och fibros och saktar slutligen ner BPH-progression [6,7]. Därför är IL-6/STAT3 ett rationellt terapeutiskt mål i BPH.
Yishen Tonglong Decoction är en klassisk kinesisk örtformel med traditionella funktioner som ger näring till Yin och stödjer Yang, tonifierar Qi och njurar och främjar blodcirkulationen med fuktlindring. Kliniskt används det för dysuri på grund av fukt-värme och blodstas med njur-Qi-brist, och det har rapporterats att dämpa prostatainflammation och hyperplastiska förändringar i BPH [8]. Utöver BPH hämmar det mänsklig prostatacancercellproliferation, främjar apoptos och undertrycker invasion och migration [9]. Nätverksfarmakologi och molekylär dockning tyder på att nyckelmål som är relevanta för modulering av prostatasjukdom inkluderar AKT1, IL-6 och VEGFA, bland andra [10]. Baserat på denna teoretiska motivering och tidigare bevis antog vi att Yishen Tonglong Decoction förbättrar BPH genom undertryckande av IL-6/STAT3-signalering. Vi testade denna hypotes i en rått-BPH-modell.
Material och metoder
Djur
SD-hanråttor, SPF-kvalitet, 200–230 g, 6–7 veckor gamla, erhölls från Daoke Pharmaceutical Technology (Guangdong) Co., Ltd. (SCXK [Yue] 2022-0060). Råttor hölls vid mindre än eller lika med 4 per bur under 12 timmars ljus/mörker-cykler, 50–60 % luftfuktighet och 23–25 grader.
Reagens och instrument
Yishen Tonglong Decoction råa örter: Anemarrhena asphodeloides (Zhi Mu), Phellodendron chinense (Huang Bai), Cinnamomum cassia (Rou Gui), Rehmannia glutinosa beredd rot (Shu Di Huang), Cornus officinalis (Shan Zhu Yu), Dioscorea opposita (Shan cognaco Paoniae), Poriauingco Paoniae (F). suffruticosa bark (Mu Dan Pi), Achyranthes bidentata (Niu Xi), Aconitum carmichaeli bearbetad lateral rot (Fu Zi), Sparganium stoloniferum (San Leng), Curcuma zedoaria (E Zhu), Prunus persica-frö (Tao Ren), Vaccaria segetalis-frö (Xing-Zaqua Liicaa planta), Aliqua Liicaa planta. Kommer från Beijing Tongrentang (Anguo) Chinese Herbal Slices Co., Ltd.
Colivin (HY-P1061), MCE (USA).
Testosteronpropionat (renhet 98%, T7260); ELISA-kit för råtta IL-1 (SEKR-0002), E2 (SEKR-0107), T (SEKSM-0003), Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.
HE färgningssats (ab245880), anti-p-STAT3 (ab76315), Massons kit (ab150669), anti-STAT3 (ab68153), anti-kollagen I (ab270993), anti-Ki-67 (ab16649), anti-kollagen (ab16649), anti-kollagen anti-IL-6 (ab259341), HRP åsna anti-kanin sekundär (ab205722), råtta IL-6 ELISA (ab234570), Abcam (USA).
Anti-aktin (AF5003), Beyotime (Shanghai).
Paraffinmikrotom HS-2205 (Olabao, Jinan), KP-PH100S-mikroskop (Shenzhen KEPUS), UMR-9600 mikroplattläsare (Hangzhou Youmi), PowerPac Basic 1645050 och PROTEAN-nätaggregat (Bio-Rad, USA).
BPH-modell och gruppering
Råttor bedövades med natriumpentobarbital (45 mg/kg, 3% vikt/volym, intraperitoneal), testiklar exterioriserades och avlägsnades kirurgiskt. Efter 3 dagars återhämtning fick råttor dagliga subkutana injektioner av testosteronpropionat (5 mg/kg i olivolja) under 21 dagar. Grov förstoring och histopatologisk hyperplasi bekräftade BPH-modelleringsframgång [11]. Sham-råttor genomgick pungens snitt utan orkidektomi och fick vehikelolivolja.
Förberedelse och administration
Ett recept på Yishen Tonglong Decoction innehöll: Zhi Mu, Huang Bai, Shan Zhu Yu, Shan Yao, Fu Ling, Mu Dan Pi, Wang Bu Liu Xing, Ze Xie (vardera 15 g); Niu Xi, Shu Di Huang, Tao Ren (vardera 20 g); Fu Zi, San Leng, E Zhu, Rou Gui (vardera 10 g). Örter avkokades två gånger med vatten, filtraten kombinerades och koncentrerades till 1,5 eller 3,0 g/ml. Colivelin löstes i saltlösning till 0,1 mg/ml.
Låg- och högdosavkoksgrupper: sondmatning 15 eller 30 g/kg (10 mL/kg vid 1,5 eller 3,0 g/mL), plus intraperitoneal koksaltlösning (10 mL/kg).
Colivelin-grupp: sondmatningssaltlösning (10 ml/kg) plus intraperitonealt Colivelin 1 mg/kg (10 ml/kg av 0,1 mg/ml).
Högdos + Colivelin-grupp: sondmatning 30 g/kg avkok plus Colivelin 1 mg/kg ip
Sham- och modellgrupper: sondmatningssaltlösning och ip-saltlösning (10 ml/kg).
Alla behandlingar var en gång dagligen i 21 dagar.
Prostata Index och E2/T; Provsamling
Tjugofyra timmar efter den slutliga behandlingen bedövades råttorna (enligt ovan). Kroppsmassa och prostata våtvikt registrerades för att beräkna PI=prostata våt vikt/kroppsmassa. Abdominalt aortablod uppsamlades, centrifugerades (2000 rpm, 15 min) för att erhålla serum. E2 och T mättes med ELISA och E2/T beräknades; kvarvarande serum lagrades vid -80 grader. Ungefär 0,7 g prostatavävnad snabbfrystes i flytande kväve för proteinanalyser; resten fixerades, dehydrerades, paraffininbäddades och sektionerades vid ~5 μm.
HAN och Massons färgning
Avparaffinering i xylen och graderade etanoler (100%, 90%, 80%, 75%) följdes av hydratisering. Sektioner färgades med HE och Massons kit enligt tillverkarens instruktioner (3 objektglas vardera), tvättades sedan, dehydrerades, rensades och monterades för mikroskopi.
Immunhistokemi för cellproliferation
Efter avparaffinering/hydrering behandlades sektioner med 3 % H2O2, blockerades med getserum och inkuberades över natten med anti-Ki-67 (1:150). Detektion använde ett SP-kit med DAB-kromogen. Bilder förvärvades och Ki‑67 optisk densitet kvantifierades av ImageJ.
ELISA för IL‑6 och IL‑1 i prostata och serum
Fryst prostatavävnad maldes, homogeniserades i RIPA-buffert och centrifugerades (3000 rpm, 20 min) för att erhålla totala proteinlysat. Proteinkoncentrationer bestämdes med BCA. Alikvoter (0,2 ml) av vävnadslysat och tinat serum analyserades för IL-6 och IL-1 med ELISA.
Western blot för kollagen I/III- och IL-6/STAT3-vägproteiner
Denaturerade prover (100 grader) separerades med SDS-PAGE och överfördes till nitrocellulosa. Membran sektionerades efter molekylvikt för kollagen I, kollagen III, -aktin, IL-6, STAT3 och p-STAT3. Efter 3 % BSA-blockering applicerades primära antikroppar, följt av HRP-konjugerad sekundär antikropp. Banden visualiserades genom kemiluminescens och kvantifierades med ImageJ.
Statistik
Data analyserades med SPSS 26.0 med envägs ANOVA och SNK-q post hoc-tester.
Resultat
BPH-modelleringsframgång: Jämfört med bluff uppvisade modellgruppen uppenbara ökningar i prostatastorlek och histologisk hyperplasi och fibros. PI, Ki‑67 optisk densitet, prostata/serum IL‑6 och IL‑1, kollagen I/III, IL‑6 och p‑STAT3/STAT3 var alla signifikant förhöjda, medan E2/T reducerades (P < 0,05).
Terapeutiska effekter av Yishen Tonglong Decoction: Både 15 och 30 g/kg doser mildrade prostataförstoring och fibros. Dessa behandlingar sänkte signifikant PI, Ki‑67, IL‑6, IL‑1, kollagen I/III, IL‑6 protein och p‑STAT3/STAT3 och ökade E2/T (P < 0,05). Den höga dosen gav överlägsna effekter än den låga dosen (P < 0,05).
Effekter av STAT3-aktivering: Colivelin förvärrade prostatahyperplasi och fibros och ökade ytterligare inflammatoriska och fibrotiska markörer samtidigt som E2/T minskade jämfört med modellen (P < 0,05).
Antagonism av Colivin: Samtidig behandling med Colivelin försvagade fördelarna med högdosavkoket, höjde inflammatoriska/fibrotiska index och minskade E2/T jämfört med enbart högdosavkok (P < 0,05).
Diskussion
Mekanistisk logik: IL-6/STAT3-axeln är en central inflammatorisk väg inblandad i ombyggnad av prostatavävnad. IL-6-bindning aktiverar JAK/STAT3-signalering, driver transkription av proinflammatoriska och profibrotiska gener, främjar epitelial/stromal proliferation, immuncellsinfiltration och extracellulär matrixavsättning. Våra resultat – förbättring med örtformeln och försämring med en STAT3-aktivator – stödjer ett kausalt mekanistiskt samband där Yishen Tonglong Decoction lindrar BPH genom att dämpa IL-6/STAT3-aktivering.
Örtformelperspektiv (ört för att läka prostatitproblem): De ingående örterna ger kompletterande åtgärder som är relevanta för BPH och prostatitliknande inflammation:
Avlägsnande av fuktig värme och antiinflammatorisk: Zhi Mu (Anemarrhena), Huang Bai (Phellodendron), Mu Dan Pi (Paeonia bark), Ze Xie (Alisma).
Qi/njurtonifiering och endokrin modulering: Shu Di Huang (Rehmannia), Shan Zhu Yu (Cornus), Shan Yao (Dioscorea), Fu Ling (Poria).
Blodaktivering och antifibrotisk potential: San Leng (Sparganium), E Zhu (Zedoary), Tao Ren (Peach kärna), Wang Bu Liu Xing (Vaccaria).
Värmer Yang och förbättrar mikrocirkulationen: Rou Gui (kanel), Fu Zi (akonit, bearbetad).
Sen/benstöd och bäckencirkulation: Niu Xi (Achyranthes).
Denna synergi kan kollektivt minska inflammatoriska cytokiner (IL-6, IL-1), proliferation (Ki-67) och fibros (kollagen I/III), i överensstämmelse med undertryckande av IL-6/STAT3-signalering som observerats i Western blots. Ökningen av E2/T antyder partiell ombalansering av könssteroidmiljö, vilket också kan påverka prostatatillväxtdynamiken.
Klinisk översättning och begränsningar: Även om dessa prekliniska data är lovande för BPH och potentiellt för prostatitliknande inflammation, kräver extrapolering till människor försiktighet. Dosomvandling, kvalitetskontroll av multiörtpreparat och ört-läkemedelsinteraktioner behöver studeras ytterligare. Icke desto mindre stärker det väg-centrerade beviset (nytta med avkok, skada med STAT3-aktivering och vägavläsningar) den teoretiska grunden för klinisk utforskning av detta örtbaserade tillvägagångssätt för att läka prostatitproblem och BPH.
Slutsats
Yishen Tonglong Decoction lindrar prostatahyperplasi och fibros hos BPH-råttor genom att hämma IL-6/STAT3-aktivering och minska inflammatorisk och profibrotisk signalering, med dosberoende effekt. Dessa fynd ger mekanistiskt stöd för dess traditionella användning och en modern, vägbaserad motivering för vidareutveckling som en örtbaserad terapi för BPH och prostatitrelaterade tillstånd.
Referenser
[1–13] Som citeras i originaltexten.
