Utforska de terapeutiska effekterna av Cistanche-baserad formulering på kronisk icke-bakteriell prostatit (CNP) och dess mekanism via tarmmikrobiota och metabolomik i en råttmodell
Jul 04, 2025
Abstrakt
Baserat på enexperimentell autoimmun prostatit (EAP) råttmodell, denna studie undersökerterapeutiska effekter och underliggande mekanismer för en Cistanche-baserad kapsel (CBC)i att lindrakronisk icke-bakteriell prostatit (CNP). Målet är att ge en preklinisk grund för utvecklingen avförbättrade botaniska läkemedelmed utökade indikationer för hanteringen avkronisk prostatit och bäckensmärta syndrom.
Metodik:
Histopatologiska förändringari råtta prostatavävnad bedömdes viahematoxylin-eosin (HE) färgning.
Infiltration av vita blodkropparochlecitinkroppstätheti prostatahomogenat utvärderades mikroskopiskt.
Serumnivåer avsuperoxiddismutas (SOD)ochmalondialdehyd (MDA)mättes med hjälp av biokemisk analys.
Inflammatoriska cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 och IL-10) kvantifierades med hjälp avenzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA).
16S rDNA-sekvenseringanvändes för att utvärdera ändringar itarmmikrobiota.
Oriktad metabolomikanalys utfördes för att belysametabola vägar påverkade av CBC.
Western blot (WB)användes för att verifiera moduleringen avSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalväg.
Resultat:
CBC-administration avsevärt:
Minskad histologisk skadatill prostatavävnader;
Ökad lecitinkroppstäthetochminskad leukocytinfiltration;
Sänkta pro-inflammatoriska cytokiner(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);
Förhöjda det antiinflammatoriska cytokinet IL-10;
Förbättrad sammansättning av tarmmikrobiota, särskilt ökarLaktobacillusochBifidobacterium animalissamtidigt som den minskarunclassified_f_PrevotellaceaeochVeillonella;
Ändrade 10 nyckelmetaboliter, inklusivesfingosinochretinoyl-glukuronid, påverkarsfingolipidmetabolismochretinolmetabolism;
Nedreglerad SPHK1 och S1P1 uttryck, och hämmasPI3K och Akt fosforyleringi prostatavävnad.
Slutsats:
Cistanche-baserade kapslar (CBC) effektivtlindra inflammatorisk skadai prostatavävnaden hos EAP-råttor. Mekanismerna kan innefatta:
Modulering av intestinal mikrobiota dysbios;
Korrigering av metabola dysfunktioner;
Undertryckande av SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalvägen.
Dessa fynd stöder potentialen förCistanche-härledda örtformuleringarsom ennaturlig, multi-target terapiförkronisk icke-bakteriell prostatitoch erbjuda en lovande riktning för framtidenväxtbaserade läkemedelsinnovation.
Nyckelord:
Cistanche-baserade kapslar; kronisk icke-bakteriell prostatit; tarmmikrobiota; metabolomik; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt väg; örtbehandling för prostatit; naturlig antiinflammatorisk terapi; EAP råttmodell
Cistanche-baserat formelte
Abstrakt:
Kronisk icke-bakteriell prostatit/kronisk bäckensmärta syndrom (CNP/CPPS), även känd som kategori III prostatit, står för ca.90 % av alla fall av prostatit. Det kännetecknas av obehag i de nedre urinvägarna, bäckensmärta och perineal smärta, sexuell dysfunktion och ofta psykologiska eller neurologiska symtom. I traditionell kinesisk medicin (TCM) kategoriseras CNP under "Jing Zhuo" (sädens grumlighet), ofta förknippad med inre fuktighet, brist på mjälte eller långvarig användning av kalla eller bittra mediciner som försämrar mjältens funktion, vilket leder till ackumulering av fukt och värme i prostatan.
Aktuella västerländska farmakologiska behandlingar för CNP, inklusive antibiotika, -blockerare och NSAID, fokuserar främst på symtomhantering och saknar ofta långsiktig effekt. Allt oftare vänder sig forskare tillörtmedicin som ett säkrare och mer holistiskt alternativ.
Cistanche: En lovande örtkandidat
Cistanche, en traditionell kinesisk ört känd för sinnjurförstärkande, antiinflammatorisk, immunmodulerande och antioxidantegenskaper, har visat potential vid behandling av olika genitourinary störningar. Moderna farmakologiska studier rapporterar detCistanche deserticolakan reglera inflammatoriska cytokiner, förbättra immunsvaret och förbättra mikrocirkulationen vilket gör det till enlovande kandidat för CNP-behandling.
Trots växande intresse, den exaktamekanismer genom vilka Cistanche lindrar CNP är fortfarande dåligt förstådda. Nyligen genomförda studier tyder på dettarmmikrobiota dysbiosspelar en avgörande roll i patogenesen av CNP. Därför undersöker denna studie de terapeutiska effekterna av enCistanche-baserad örtkapsel (CBC)på CNP med användning av en råttmodell av experimentell autoimmun prostatit (EAP), med särskilt fokus påtarmmikrobiotans sammansättning och metabolomiska förändringar.
1. Material och metoder
1.1 Djur
30 Sprague-Dawley (SD) hanråttor av SPF-grad(300–320g) och45 SPF-klassade SD-hanråttor(180–200 g) erhölls från Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd.
Inrymt under standard SPF-förhållanden: temperatur 25±1 grad, luftfuktighet 55±5%, 12-timmars ljus/mörkercykel.
Djuretisk godkännande:HUCMS00302159, beviljad av etikkommittén vid Hubei University of Chinese Medicine.
1.2 Läkemedel och reagenser
Cistanche-baserade kapslar (CBC)(Batch: 20221226) från ett GMP-certifierat växtbaserat läkemedelsföretag.
Tamsulosinhydrokloridkapslar(positiv kontroll) köpt från Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd.
Komplettera Freunds adjuvans (CFA)från Sigma (Tyskland).
ELISA kitför IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF- och iNOS från Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.
Kit för oxidativ stress(MDA, T-SOD) från Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd.
Tarmmikrobiota DNA-extraktionssatserochmetabolomiska reagenserfrån Meiji Biotechnology (Shanghai).
1.3 Utrustning
Höghastighetscentrifug (Eppendorf, Tyskland), UHPLC och Q-Exactive HF-X masspektrometer (Thermo Fisher Scientific) och andra molekylärbiologiska instrument för ELISA, PCR, sekvensering och metabolomikanalys.
2. Experimentprotokoll
2.1 Induktion av experimentell autoimmun prostatit (EAP) modell
2.1.1 Framställning av prostataprotein-CFA-emulsion
Prostatavävnad extraherades från donatorråttor, homogeniserades i steril koksaltlösning med 0,5 % TritonX-100 och centrifugerades vid 20 000 rpm under 30 minuter vid 4 grader.
Proteinkoncentration justerad till 20 mg/ml med BCA-analys.
Proteinextrakt emulgerades med CFA i ett 1:1-förhållande för att bildaCNP-antigenemulsion.
2.1.2 Immuniseringsprocedur
45 SD-råttor (180±20 g) delades slumpmässigt upp, med 10 tilldelade den normala gruppen.
Resterande råttor togs emotsubkutana flerpunktsinjektionerav CNP-antigenemulsionen i ljumsken, insidan av låret och ryggen.
Boosterimmunisering administrerades påDag 15enligt samma protokoll.
Normala kontroller fick saltlösningsinjektioner.
2.2 Gruppering och behandling
På dag 28 efter immunisering bekräftades framgångsrik modellering via histologi (HE-färgning).
Råttor tilldelades slumpmässigt till:
Normal kontrollgrupp
Modellgrupp
Positiv droggrupp: Tamsulosin (0,021 mg/kg)
CBC lågdosgrupp: 0,63 g/kg (klinisk ekvivalent dos)
CBC högdosgrupp: 1,26 g/kg
Behandlingen administrerades oralt en gång dagligen under 30 dagar. Kontroll- och modellgrupper fick koksaltlösning.
2.3 Provtagning och analys
24 timmar efter den slutliga dosen avlivades råttor.
Blod uppsamlades via den abdominala aortan; serum separerades och lagrades vid -80 grader.
Prostatavävnader skördades, vägdes och undersöktes makroskopiskt.
DeProstata Index (PI)beräknades:
PI=Prostata våtvikt/kroppsvikt
Vävnader fixerades i formalin för histologi eller frystes för cytokinanalys, Western blotting, mikrobiota-DNA-extraktion och metabolomik.
Slutsats och betydelse
Denna studie syftar till att geprekliniska bevisför användning avCistanche-baserad örtterapivid behandling avkronisk icke-bakteriell prostatit. Genom att integreratarmmikrobiotaanalysochmetabolomics profilering, försöker vi avslöjaflermålsmekanismergenom vilken Cistanche utövar sina antiinflammatoriska och immunmodulerande effekter.
Dessa resultat kommer att stödjautveckling av Cistanche som en ny örtmedicinför CNP och potentiellt leda tillnya indikationerför dess kliniska tillämpning.
