Nätverksfarmakologi och experimentell validering av Cistanche-baserad förening vid behandling av benign prostatahyperplasi via PI3K/AKT Pathway Modulation
Jun 17, 2025
Abstrakt
Mål:
Att utforskaförebyggande och terapeutiska effekter av Cistanche-baserade sammansatta granulatpåbenign prostatahyperplasi (BPH)och belysa de underliggande mekanismerna genomnätverksfarmakologiska förutsägelserkombinerat medin vivo djurförsök.
Cistanche-baserade örtpiller med höga aktiva ingredienser
Gå till produktlista Få fler detaljer
Metoder:
(1) Aktiva beståndsdelaravCistanche deserticolaoch andra stödjande örter screenades viaTCMSP databas, kompletterat med litteraturbrytning. Mål för dessa fytokemikalier förutspåddes med användning avPubChem, Swiss Target Prediction, ochComparative Toxicogenomics Database (CTD). BPH-relaterade mål samlades in frånGeneCards, CTD, DrugBank, ochDisGeNET. Korsningsanalys identifierad125 potentiella terapeutiska målav Cistanche vid behandling av BPH. Aprotein-protein interaktion (PPI) nätverkbyggdes med hjälp avSTRÄNG, ochGO- och KEGG-vägberikningsanalyserutfördes viaMetascape. En heltäckande"ört-förening-mål-väg" nätverkvisualiserades med hjälp avCytoscape, och nyckelmål validerades genommolekylär dockninganvänderAutoDock Vina.
(2) Sextio hanråttor delades slumpmässigt in i sex grupper: kontroll, modell, positiv kontroll (Qianlie ShutongKapslar, 0,324 g/kg), och tre dosgrupper avCistanche sammansatta granulat(hög: 3,24 g/kg, medium: 1,62 g/kg, låg: 0,81 g/kg). BPH inducerades avkastration och testosteronpropionatinjektion. Råttor fick oral behandling dagligen i 30 dagar. Prostata våtvikt och index beräknades. Serumnivåer avCOX-2, VEGF, ochPGE2mättes via ELISA.Histopatologiska förändringarobserverades av HE-färgning, ochproteinuttryckavAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, ochVEGFbedömdes via Western blot.
Resultat:
(1) Totalt260 sammansatta mål, 1 584 BPH-relaterade mål, och125 överlappande terapeutiska målidentifierades. Nyckelmål ingårAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3, ochPTGS2. Anrikningsanalyser tydde på detIL-17, HIF-1, TNF, ochPI3K-AKT signalvägarspela kritiska roller. Kärnaktiva ingredienser som t.exluteolin, apigenin, grobladglykosider, mangiferin, ochisovitexinvisade starka bindningsaffiniteter med mål somAKT1, PTGS2, CASP3, ochIL6, med bindningsenergier Mindre än eller lika med –6 kcal/mol.
(2) Resultaten in vivo visade detCistanche-granulat minskade signifikant prostatavikt och index(P < 0,05 eller P < 0,01), förbättradkörtelstrukturoch lindrasepitelial hyperplasi. Serumnivåer avCOX-2, PGE2, ochVEGFsänktes avsevärt. Uttryck förp-AKT1, p-PI3K, COX-2, ochVEGFi prostatavävnad var signifikant nedreglerad (P < 0,05 eller P < 0,01).
Slutsats:
Denna studie ger preliminära bevis för detCistanche-baserad örtterapiutövarförebyggande och terapeutiska effekter mot BPH, främst genom modulering avPI3K/AKT-signalväg, hämning avCOX-2 och PGE2och undertryckande avVEGF-medierad prostatacellsproliferation. Nyckel bioaktiva komponenter somgrobladglykosider, mangiferin, ochluteolinkan tjäna som de viktigaste farmakologiska medlen. Dessa fynd stöder potentialen förCistanche-extraktsom ennaturligt botemedel för prostatahälsa.
Nyckelord:
Cistanche deserticola; Cistanche-extrakt; benign prostatahyperplasi (BPH); nätverksfarmakologi; PI3K/AKT-väg; VEGF; COX-2; PGE2; prostatainflammation; naturligt botemedel mot prostata; örtbehandling för BPH; traditionell kinesisk medicin; fytoterapi; molekylär dockning; råttmodell
Bakgrund
Benign prostatahyperplasi (BPH)är en vanlig urologisk störning hos medelålders och äldre män. I sina tidiga skeden kännetecknas BPH av urinfrekvens, brådska, tveksamhet och ofullständig tömning. När sjukdomen fortskrider kan allvarligare symtom som hematuri, smärtsam urinering, blåssten och till och med nedsatt njurfunktion uppstå [1–2]. Studier [3] har visat att förekomsten av BPH ökar med åldern och drabbar över 50 % av män över 50 år, vilket avsevärt försämrar livskvaliteten.
Nuvarande BPH-behandlingar inkluderar främstläkemedel och kirurgiska ingrepp, vilket kan leda tillbiverkningar, komplikationer och långvariga följdsjukdomar[4–7]. Därför,Traditionell kinesisk medicin (TCM)formuleringar som ärkliniskt effektiv med färre biverkningarhar fått ökad uppmärksamhet som alternativa terapier för BPH.
Cistanche-baserade örtgranulathar visat antiinflammatoriska, diuretiska och vävnadsskyddande effekter vid urinvägssjukdomar. Tidigare studier [9–10] har visat att växtbaserade recept främst baserat påCistanche deserticolautövaskyddande effektermot BPH i djurmodeller. Preliminär forskning från vår grupp [11] tyder på att denna formel kan minska prostatainflammation medhämmande inflammatoriska mediatorersåsomCOX-2, PGE2, IL-6, ochTNF-. Sedanprostatit är ofta ett komorbidt tillstånd som förvärrar BPH, denna studie syftar till att utvärderaverkningsmekanism och terapeutisk potentialav enCistanche-baserad föreninganvändernätverksfarmakologi och in vivo-valideringi en råttmodell av BPH.
Supporttjänst från Wecistanche-The Kontakta oss för att få ett grossistpris
E-post:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
1. Material och metoder
1.1 Försöksdjur
Totalt 70 SD-hanråttor av SPF-grad (180–220 g) tillhandahölls av Laboratory Animal Center vid Guangxi Medical University (licens: SCXK [Gui] 2020-0003). Djurprotokollen godkändes av den institutionella djuretiska kommittén (godkännandenummer: GXBGMP20220602). Råttor hölls i standardförhållanden med kontrollerad temperatur (23 ± 2 grader), fuktighet (60 ± 5%) och en 12-timmars ljus/mörker-cykel.
1.2 Läkemedel och reagenser
Cistanche-föreningsgranulat (försöksformulering)
Positiv kontroll: Qianlie Shutong-kapslar (0,324 g/kg)
Testosteronpropionatinjektion (15 mg/kg)
ELISA-kit för COX-2, PGE2, VEGF
Antikroppar: anti-AKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, VEGF, GAPDH
Western blot-reagens, SDS-PAGE-geler och bildsystem
Alla reagenser köptes från pålitliga inhemska och internationella leverantörer
1.3 Utrustning
Analytisk balans (0,0001g noggrannhet)
Inverterat biologiskt mikroskop (Olympus IX73)
Mikroplattläsare (Tecan M200)
Western blot-system (Bio-Rad)
Bildstation (GE Imager 680)
1.4 Målförutsägelse för Cistanche-aktiva föreningar
Aktiva ingredienser avCistanche deserticolaoch andra kompletterande örter hämtades frånTCMSP databas, filtrerad efteroral biotillgänglighet (OB större än eller lika med 30%)ochdroglikhet (DL större än eller lika med 0,18). Litteraturverifierade bioaktiva föreningar som inte uppfyller dessa tröskelvärden inkluderades också. Förmodade mål förutspåddes igenomPubChem, SwissTargetPrediction, ochCTD, med hjälp av filter för hög GI-absorption och gynnsamma ADME-egenskaper.
1.5 Identifiering av BPH-relaterade mål
"BPH" söktes i flera databaser inklusiveDisGeNET, CTD, GeneCards, ochDrugBankför att samla sjukdomsrelaterade mål. Endast mål med relevanspoäng över medianen behölls, och dubbletter togs bort för att erhålla ett BPH-måluppsättning med hög konfidens.
1.6 Intersektionsanalys för potentiella terapeutiska mål
Genom att korsaCistanche sammansatta målmed kändaBPH-relaterade gener, identifierade vi potentialanti-BPH terapeutiska mål, visualiserad viaVenn diagrammed R-programvara.
1.7 Protein-Protein Interaction (PPI) nätverkskonstruktion
Potentiella mål laddades upp tillSTRING v11.5databas för att bygga ett PPI-nätverk. Visualisering och topologisk analys (graden centralitet) utfördes med hjälp avCytoscape 3.9.1.
1.8 GO och KEGG anrikningsanalys
Anrikningsanalyser förGenontologi (GO)funktioner ochKEGG vägarutfördes med hjälp avMetascape, med betydelse satt tillP < 0,01.
1.9 Nätverkskonstruktion "Herb-Compound-Target-Pathway".
Nyckelvägar som är relevanta för BPH valdes ut från KEGG-anrikningsresultat. Aflerskiktsnätverklänkande örter, aktiva föreningar, mål och vägar konstruerades i Cytoscape, och nyckelnoder analyserades med hjälp avNätverksanalysatorplugin.
1.10 Molekylär dockningsverifiering
Sex kärnmålproteiner (PTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, AKT1) och topprankade föreningar (luteolin, apigenin, isovitexin, mangiferin, grobladglykosider) valdes ut förmolekylär dockning. Proteinkristallstrukturer laddades ner frånRCSB Protein Data Bank(https://www.rcsb.org), och dockning utfördes med hjälp avAutoDock Vina. Bindningsenergier visualiserades och analyserades med användning avPyMOL.
1.11 Djurmodell och gruppering
Efter 7 dagars acklimatisering delades 60 hanråttor slumpmässigt in i 6 grupper (n=10): kontroll, modell, positiv kontroll och låg-, medel-, högdosCistanche-föreningsgrupper(0,81, 1,62, 3,24 g/kg). BPH inducerades viaorkiektomiföljt avtestosteronpropionatinjektioner(15 mg/kg) i 28 dagar. Läkemedelsadministration började på dag 29 och fortsatte i 30 dagar.
1.12 Provtagning
Efter den slutliga behandlingen bedövades råttorna och blod samlades upp från bukaortan. Prostater dissekerades, vägdes ochprostataindex (mg/g)beräknades. Prover lagrades vid -80 grader för analys.
1.13 ELISA för seruminflammatoriska markörer
Serumnivåer avCOX-2, PGE2, ochVEGFbestämdes med användning av ELISA-kit enligt tillverkarens instruktioner.
1.14 Histologisk analys (H&E-färgning)
Prostatavävnader fixerades, paraffininbäddades, snittades och färgades medhematoxylin och eosin (H&E). Patologiska förändringar observerades under ljusmikroskopi.
1.15 Western blotting
Proteinuttrycksnivåer avAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, ochVEGFanalyserades avWestern blot. Bandintensiteten kvantifierades med användning avImageJ, medGAPDHsom den interna kontrollen.
1.16 Statistisk analys
Data analyserades med användning avSPSS 22.0. Resultat presenteras sommedelvärde ± SD. Envägs ANOVA ochLSD-t testanvändes för gruppjämförelser, medP < 0,05anses statistiskt signifikant.
