Neuroprotektiva egenskaper hos 4-aminopyridin

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP och Philipp Albrecht, MD

Abstrakt

Som en antagonist av spänningsstyrda kaliumkanaler (Kv) används 4-aminopyridin (4-AP) som symtomatisk terapi vid flera neurologiska störningar. Förbättringen av synfunktion och motorik och lindring av trötthet hos patienter med MS har tillskrivits 4-AP. Dess depotformulering (fampridin) har godkänts för symtomatisk behandling av gångsvårigheter vid MS. De fördelaktiga effekterna förklarades av blockaden av axonala Kv-kanaler, vilket förbättrade ledning längs demyeliniserade axoner. Men allt fler bevis tyder på att 4-AP kan ha ytterligare egenskaper utöver det symtomatiska verkningssättet. I den här recensionen sammanfattar vi prekliniska och kliniska data om möjliga neuroprotektiva egenskaper hos 4-AP.

4-Aminopyridin vid neurologisk sjukdom

Aminopyridiner är en grupp av monoamin- och diaminoderivat av pyridin, som hämmar spänningsstyrda kaliumkanaler (Kv). Speciellt har de två bredspektrum-kaliumkanalblockerarna 4-aminopyridin (4-AP) och 3,4-aminopyridin (3,4- DAP) använts som nya substanser i undersökningen vid olika neurologiska sjukdomar. Även om 3,4-DAP är en mer potent antagonist av kaliumkanaler, 4-passar AP lättare blod-hjärnbarriären1 och var kliniskt överlägsen hos patienter med MS, särskilt för att förbättra synfunktionen,2 trötthet ,3 kognition,4 och gånghastighet.1 Dessutom har 4-AP rapporterats underlätta neural ledning vid andra neurologiska sjukdomar än MS.5,6

Effekter av cistanche: Skydda neuroner

I friska axoner är kanalerna Kv1.1 och Kv1.2 klustrade nära Ranviers noder.7 Dessa kanaler exponeras efter demyelinisering och migrerar genom det demyeliniserade segmentet. Samtidigt ökar uttrycket av dessa kanaler flera gånger.8 Denna felriktade omfördelning av Kv-kanalerna försämrar överföringen av aktionspotentialer, vilket leder till bestående funktionsnedsättning. 4-AP blockerar dessa exponerade kaliumkanaler och förbättrar därför signaltransduktionen.9,10Kv1.3-kanalen upptäcktes i mänskliga T-celler,11 visade sig vara starkt uttryckt på inflammatoriska infiltrat i MS-hjärnan,12 och är uttrycks på makrofager, mikroglia och effektorminne T-celler.13 Selektiva och icke-selektiva Kv1.3-kanalblockerare kan därigenom ge immunmodulerande egenskaper genom att hämma cellproliferation och proinflammatorisk cytokinutsöndring.14 Studier före 2009 misslyckades med att fastställa 4-AP som en symtomatisk behandling av MS eftersom läkemedelsnivåerna i blodet hos patienter var oförutsägbara, med för höga doser förknippade med risken för epileptiska anfall och nedsatt medvetande.15–18 Därför utvecklades fampridin, depotformuleringen av 4-AP och har därefter godkänts för symtomatisk behandling av gångsvårigheter i MS.19–23 Intressant nog på senare tid tyder allt fler bevis på att förutom dessa wid ely erkända symtomatiska effekter, 4-AP kan ha ytterligare skyddande egenskaper.

Utvärdering av 4-AP med in vitro-modeller

In vitro har neuroprotektiva effekter av 4-AP observerats i många modeller. När motorneuroner (MN) differentierade från inducerade pluripotenta stamceller från patienter med amyotrofisk lateral skleros som bär mutationer av FUS- och SOD1-genen exponerades för 4-AP, åtgärdades jonkanalobalanser, höjda neuronala aktivitetsnivåer, endoplasmatiskt retikulum stressen minskade och kaspasaktiveringen dämpades. De muterade MN:erna visade lägre natriumströmmar och Na plus/K plus-förhållanden, vilket åtminstone delvis kan vara orsaken till deras hyperexcitabilitet. Detta vändes efter 4-AP-behandling, vilket ledde till minskade kaliumströmmar och återställda spontana aktivitetsmönster och synaptisk input i MNs.24 4-AP-behandling minskade frisättningen av proinflammatoriska mediatorer från mänskliga mikroglia utmanade med amyloid- beta- och skyddade odlade hippocampusneuroner från råtta badade i supernatanter från amyloid-beta-behandlade mikroglia.25 Ett 4-AP-derivat har enligt uppgift minskat -synukleinackumulering, oxidation, inflammation och Rho-kinasaktivering i en in vitro-modell av Parkinsons sjukdom.26 Andra in vitro-studier rapporterade att 4-AP ökade cAMP-svar elementbindande proteinfosforylering skyddad från cellulär stress av glutamat, NMDA och 3-nitropropionsyra som utövas på neonatala cerebellära granulneuroner från råtta. Glutamat leder till en minskad livsduglighet även i celler som förkonditionerats med 4-AP men utan någon signifikant aktivering av kaspas-3. Dessa observationer antydde att 4-AP främst är effektivt mot nekrotisk excitotoxicitet.27 Det visade sig också skydda primära neuronala kulturer från syre-glukosbrist eller ouabain/DL-tre- -bensyloxiasparaginsyratoxicitet.28

neuroskyddande effekt av Cistanche

Prekliniska in vivo-studier på 4-AP

Flera studier har undersökt de skyddande effekterna av 4-AP i olika sjukdomsmodeller (tabell 1). I nervkrossmodeller av perifer nervskada ledde profylaktisk och tidig 4-AP-behandling till återhämtning av nervledningshastigheten, främjade remyelinisering och förstärkte det axonala området. De sistnämnda observationerna förklarades av effekter liknande de som uppträder efter elektrisk stimulering, till exempel förhöjda nivåer av neuronal hjärnhärledd neurotrofisk faktor (BDNF).29 I en modell av Alzheimers sjukdom, injektion av amyloid-beta i hippocampus av Sprague Dawley råttor inducerade neuronal skada och ökad mikroglial aktivering. Daglig administrering av 1 mg/kg 4-AP visade sig undertrycka mikroglialaktivering och gav neuroskydd. Detta tillskrevs 4-AP:s förmåga att blockera den icke-inaktiverande utåtriktande K plus-strömmen i aktiverade mikroglia och minska cellulär produktion av proinflammatoriska cytokiner.25 Undersökningar med en in vivo-modell av kainatinducerad hippocampus neurotoxicitet avslöjade robusta neuroprotektiva effekter av { {11}}AP som skulle kunna upphävas av den icke-kompetitiva NMDA-receptorantagonisten MK-801 och adenosin A1-antagonisten 8-cyklopentylteofyllin. Dessa observationer tyder på att NMDA-receptorer är relevanta för 4-AP-medierat skydd i denna modell.30I en djurmodell av autoimmun neuropati hos Lewis-råttor, 4-förbättrade AP den kliniska svårighetsgraden och patologiska elektrofysiologiska fynden. Författarna föreslog att axonalt skydd gavs genom att blockera natriummedierade inåtgående strömmar i den tidiga fasen eftersom höga membranpotentialer i den akuta fasen av inflammation kan vara neurotoxiska. I den kroniska fasen förbättrades nervledning potentiellt genom att blockera kaliummedierad utåtgående ström.1

I experimentell autoimmun encefalomyelit (EAE), en modell av immunmedierad CNS-inflammation som replikerar kardinaldrag av MS, har Kv-kanalblockad rapporterats hämma T-cellsaktivering, potentiellt genom blockering av kanaler i Kv1.3-underfamiljen och försvagad axonal demyelinisering och degenerering genom att verka på K.3.1-kanalen på astroglia, vilket potentiellt inducerar BDNF-signalen. långa. I proteolipidproteininducerad EAE i SJL-möss förbättrade 4-AP-behandling signifikant de digitala poängen som bekräftades patologiskt. Glialfibrillärt surt proteinuttryck observerades vara nedreglerat i 4-AP-behandlade möss, och T-cellsaktivering och Th1/17-polarisering mildrades. I den kroniska, myelin-oligodendrocytglykoprotein (MOG)-peptidinducerade EAE-modellen i C57BL/6-möss,4-förändrade dock inte AP EAE-förloppet.5 En annan studie undersökte också effekterna av {{19} }AP i en MOG-EAE-modell i C57BL/6-möss och rapporterade symtomatiska men inga sjukdomsmodifierande effekter. Varken en profylaktisk eller terapeutisk 4-AP-behandling dämpade svårighetsgraden av det digitala EAE-förloppet, medan 4-AP-behandlade djur visade förbättrad rörlighet utvärderad med fotavtrycks- och rotarodanalys. Demyelinisering av ryggmärgen, neuronal skada och MRT-avbildning av hjärnvolymförändringar var oförändrade. Proliferation, IL17 eller IFN-y produktion av CD4* T-celler påverkades inte heller.3

På senare tid har vi visat att förutom dess symtomatiska effekter på att förbättra neural ledning, kan 4-AP förhindra retinal neurodegeneration under MOG-peptidinducerad experimentell optisk neurit (EAEON) i C5BL6-möss.'Med in vivo optisk koherenstomografi ( OCT) avbildning, synfunktionstestning och histologisk bedömning, observerade vi en minskning av omfattningen av degenerering av de inre näthinnelagren i modeller av EAEON, både för profylaktisk och terapeutisk 4-AP-administrering. I denna modell potentierade 4-AP effekterna av immunmodulerande behandling med sfingosin-1-fosfatreceptormodulatorn fingolimod, vilket tyder på oberoende verkningssätt. Det är rimligt att anta att denna effekt inte är begränsad till enbart fingolimod och är tillämplig på 4-AP i kombination med andra MS-immunmodulerande läkemedel. I vår studie visade synnervens histologi att i motsats till fingolimod hade 4-AP inget signifikant inflytande på mikroglialaktivering och/eller infiltration av lymfocyter eller makrofager, vilket tyder på att de skyddande effekterna inte var relaterade till ett antiinflammatoriskt läge handling. I linje med detta störde 4-AP-behandling inte EAE-induktion, validerad av en T-cellsrestimuleringsanalys. Dessutom observerade vi ett betydande skydd mot retinal neurodegeneration under 4-AP-behandling även i den icke-inflammatoriska modellen för synnervskross, medan fingolimod här inte hade någon effekt. In vitro, 4-AP-behandling misslyckades med att direkt skydda retinala ganglieceller. Istället visade histologi och in vitro-experiment 4-AP-medierad stabilisering av myelin- och oligodendrocytprekursorceller. Denna effekt var associerad med ökat kalciuminflöde och nukleär translokation av den nukleära faktorn av aktiverade T-celler (NFAT). Det har tidigare visats att 4-AP reglerar kalciumhomeostas genom att höja inositoltrifosfatnivåerna och därigenom orsaka kalciumfrisättning från intracellulära kalciumförråd. Ytterligare studier om 4-AP i demyeliniserande modeller, till exempel cuprizon-behandling eller transgena musmodeller med inducerbar oligodendrocytablation, kan dock vara till hjälp för att bekräfta dessa tillstånd. Befintliga studier i djurmodeller för demyelinisering fokuserar huvudsakligen på kapaciteten hos 4-AP att återställa aktionspotentialen men saknar ytterligare undersökningar av oligodendrogliaceller (figur).

Det är viktigt att nämna att doserna som behövs för att uppnå dessa effekter in vitro är ungefär 100-1,000xhögre än den koncentration som uppnås hos patienter. Därför kan ytterligare eller andra mekanismer vara relevanta för de observationer som görs in vivo och in vitro. Dessa inkluderar men är inte begränsade till en minskad energiförlust av demyeliniserade axoner på grund av blockering av kaliumläckage och starkare skyddande och reparerande kapacitet i hjärnan som indirekt är ett resultat av ökad rörlighet och större träning.

Dessutom kan immunmodulerande mekanismer för 4-AP inte uteslutas, särskilt eftersom minskad T-cellsaktivering och Th1/17-polarisering har påvisats i PLP-inducerad EAE i SJL-möss.3 Dessutom har prekliniska studier av andra sjukdomsmodeller hittats en försvagad aktivering och minskad frisättning av proinflammatoriska mediatorer av mikroglia. Dessa kontroversiella resultat belyser de olika patologiska mekanismerna hos de olika djurmodellerna, där immunceller är mer eller mindre mottagliga för behandlingsstrategier. Avvikelserna mellan våra resultat och tidigare rapporter om endast symtomatiska effekter i MOG-peptidinducerad EAE i C57BL6-möss" kan åtminstone delvis förklaras av (1) skillnader i dosering eftersom andra använde doser på 100 ug och 600 ug/mus/dag, medan vi administrerade 250 ug/mus/d;(2)behandlingslängd (40,60 och 90 dagar av Göbel et al,* Moriguchi et al,3 respektive Dietrich et al); och (3) mängd MOG som användes för immunisering eftersom vi använde 200 ug MOG per mus, medan andra endast använde 100 ug MOG per mus. Ny forskning fokuserar på tarmmikrobiotans roll för att påverka induktionen och svårighetsgraden av EAE genom att förändra balansen mellan effektor och regulatoriska T- och B-celler. Gnagarnas mikrobiomet kan skilja sig åt mellan djuranläggningarna, vilket resulterar i skillnader i EAEs svårighetsgrad, förlopp och möjligen till och med svar på terapi. Sammantaget skulle dessa faktorer kunna förklara heterogeniteten i studieresultaten.

neuroskyddande effekt av Cistanche

Klinisk metod för 4-AP hos patienter med MS

Flera kliniska prövningar sedan 1980-talet antydde redan de fördelaktiga effekterna av 4-AP hos personer med MS. Bland annat identifierade de förbättringar i motoriska40-2 och visuella funktioner-44 och trötthet.5-7 Studiens begränsningar, frånvaron av en homogen studiedesign och ett litet antal patienter förbjöd dock godkännande av {{ 5}}AP av de vanliga myndigheterna och ledde till en off-label användning i mer än tre decennier.4 Å andra sidan underlättade vissa av dessa studier utvecklingen av formuleringen för fördröjd frisättning (SR-4-AP eller fampridin) eftersom de fann att plasmanivåerna av den ursprungliga föreningen med omedelbar frisättning var inkonsekventa och oförutsägbara. Den första kliniska studien med SR-4-AP utfördes 1997 av Schwid et al.49 och visade på en signifikant förbättring av gånghastigheten och en trend mot förbättring av muskelstyrka.

Tekniksystemet med utökad frisättning har utvecklats av Elan Pharmaceuticals. Den använde ett så kallat matrix-läkemedelsabsorptionssystem, bestående av en egenutvecklad polymermatris som kontrollerar frisättningen genom diffusion och erosion av gastrointestinala enzymer. Detta resulterade i lägre maximala plasmaläkemedelsnivåer och en längre verkningstid.1 Inledningsvis testades SR-4-AP i fyra studier. Under 2007 utförde Goodman et al.1 ett dosintervall på 5 mg steg från 10 upp till 40 mg två gånger dagligen med 36 patienter med MS. I Timed 25 Foot Walk Test (T25FW) observerades ingen signifikant förändring, medan en post hoc-analys som omvandlade data till gånghastighet (ft/s) nådde signifikans. Dessutom observerades en förbättring av självrapporterad trötthet. I en dosjämförelsestudie 2008 (randomiserad, dubbelblind, placebokontrollerad) rekryterade Goodman et al.2 206 patienter som fick placebo eller doser på 10, 15 eller 20 mg två gånger dagligen. Återigen fann post hoc-analyser som jämförde förbättringar i gånghastighet signifikant bättre resultat för alla behandlingsgrupper individuellt och för alla SR-4-AP-behandlade patienter poolade jämfört med placebo. Musestyrkan förbättrades för de 10-mg- och 15-mg-behandlade grupperna, men inte för de 20 mg-behandlade grupperna jämfört med placebopatienterna. I de två efterföljande fas Ⅲ kliniska prövningarna (21-veckors dubbelblind placebokontrollerad randomiserad studie, 301 patienter och 14-veckors dubbelblind placebokontrollerad studie, 239 patienter) med 10 mg två gånger dagligen, patienterna delades in i en grupp som svarade och en grupp som inte svarade, definierade av konsekvent förbättring av T25FW. I båda studierna var ökningen i gånghastighet signifikant jämfört med gruppen som inte svarade eller placebo. Dessutom var det en förbättring av 12-Item MS Walking Scale(MSWS-12)-poängen för svararna.2122

I en öppen förlängningsstudie av dessa studier visades det att den kliniska förbättringen gick förlorad efter utsättande av läkemedlet men återkom 2 veckor efter återstart av behandlingen med SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, tablettformuleringen av SR{ {3}}AP fick fullt godkännande av Food and Drug Administration i januari 2010 för att förbättra promenader hos patienter med MS, men endast ett villkorat marknadsföringstillstånd 2011 från European Medicines Agency (EMA). Baserat på de nämnda försöken var godkännandet föremål för bestämmelsen för att ge mer långsiktiga effektivitets- och säkerhetsdata. Därför inleddes en explorativ fas II (MOBILE) och en fas I bekräftande studie (ENHANCE).

I den explorativa MOBLE-studien med 132 deltagare fann man en förbättring av Patient Global Impression of Change (PGIC), MSWS-12 och Timed Up and Go (TUG) hastighet23 För att utvärdera den långsiktiga effekten och säkerheten av SR-4-AP, den bekräftande ENHANCE-studien (10 mg två gånger dagligen på 646 MS-patienter) utfördes. Utöver de förbättringar som rapporterades i MOBILE-studien fann författarna en signifikant förbättring av SR-4-AP-behandlade patienter på 29-Item MS Impact Scale.5 EMA beviljade efteråt ovillkorligt godkännande av SR{ {11}}AP för behandling av patienter med MS med gångsvårigheter. ENABLE-fasobservationsstudien med 901 patienter visade att behandling med SR-4-AP är fördelaktigt för patienter med MS med hjälp av självupplevd fysisk funktion och psykologisk hälsa i en verklig miljö2(tabell 2).

Baserat på de lovande prekliniska data om skydd mot retinal neurodegeneration som beskrivs ovan, utförde vår grupp en retrospektiv, multicenter OCT-studie för att longitudinellt jämföra retinal neurodegeneration mellan 52 patienter på kontinuerlig 4-AP-terapi och 51 kontroller som matchades för alla relevanta kovariater använder en fördefinierad matchningsalgoritm. I linje med experimentella data, under samtidig 4-AP-terapi, minskade degenerering av skiktet av makulär retinal nervfiber under 2 år. Dessa fynd måste dock bekräftas i oberoende och idealiskt prospektiva kohortstudier, särskilt eftersom effektstorleken var låg och frekvensen av peripapillär retinal nervfiber och makulära ganglionceller/inre plexiforma lager förtunning inte skiljde sig signifikant mellan grupperna . Dessa avvikelser av en skyddande effekt av 4AP endast på mRNFL, men varken i pRNFL eller i McGill, är inte lätt att förklara. Det är viktigt att nämna att eftersom 4AP endast är licensierad för att förbättra gångsvårigheter hos patienter med EDSS 3.5-5, undersöktes förändringshastigheterna som analyserades i senare stadier av sjukdomen och utan akut optikusneurit. I en sådan miljö inträffar endast mycket subtila näthinneförändringar, och stora kohorter skulle krävas för att upptäcka behandlingseffekter. Därför var den retrospektiva studien på patienter verkligen inte tillräckligt kraftfull för att tillförlitligt upptäcka skyddande behandlingseffekter, och det kommer inte som en överraskning att endast ett av resultaten visade sig positivt. MRNFL var möjligen det känsligaste lagret för detektering av behandlingseffekter.5"

Sammanfattningsvis tyder en växande mängd in vivo-bevis på att 4-AP, utöver dess välkända symtomatiska effekter, genom att förhindra neurodegeneration kan modifiera sjukdomsförloppet hos EAEON och möjligen även patienter med MS. Preliminära in vitro-bevis antyder involvering av cellulära kalciumnivåer och NFAT-vägen, men ytterligare undersökningar är berättigade för att klargöra de exakta molekylära mekanismerna bakom 4-AP:s neuroprotektiva effekt vid immunmedierad inflammatorisk demyelinisering. Dessa fynd kan ha en markant inverkan på MS-behandlingsstrategier om de bekräftas i en prospektiv randomiserad kontrollerad klinisk prövning.

effekten av Cistanche

Referenser

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Restoring axonal function with 4-aminopyridine: clinical efficacy in multiple sclerosis and beyond. CNS drugs 2018;32:637–651.

2. Horton L, Conger A, Conger D, et al. Effekt av 4-aminopyridin på synen hos patienter med multipel skleros med optisk neuropati. Neurology 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. Effekten av Fampridine-SR på kognitiv trötthet i en randomiserad dubbelblind crossover-studie hos patienter med MS. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Broder SD, Filli L, Geissler O, et al. Positiva effekter av fampridin på kognition, trötthet och depression hos patienter med multipel skleros över 2 år. J Neurol 2018; 265:1016–1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ, et al. Preklinisk prövning av 4-aminopyridin hos patienter med kronisk ryggmärgsskada. Paraplegia 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z, et al. Dalfampridin förbättrar den sensorimotoriska funktionen hos råttor med kroniska störningar efter ocklusion av den mellersta cerebrala artären. Stroke 2013;44: 1942–1950.

7. Trimmer JS, Rhodes KJ. Lokalisering av spänningsstyrda jonkanaler i däggdjurshjärnan. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Studier av struktur-aktivitetssamband av fyra nya 4-aminopyridin K(plus)-kanalblockerare. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. Effekterna av 4-aminopyridin och tetraetylammoniumjoner på normala och demyeliniserade nervfibrer från däggdjur. J Physiol 1981;313:301-315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Effekt av fampridin på axonal excitabilitet vid multipel skleros. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Spänningsstyrda K plus-kanaler i mänskliga T-lymfocyter: en roll i mitogenes? Nature 1984;307:465–468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. Den spänningsstyrda kaliumkanalen Kv1.3 är starkt uttryckt på inflammatoriska infiltrat i hjärnan med multipel skleros. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J, et al. Kv1.3-kanal som ett viktigt terapeutiskt mål för neuroinflammatoriska sjukdomar: toppmoderna och vidare. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. Den spänningsstyrda Kv1.3 K(plus)-kanalen i effektorminnes T-celler som ett nytt mål för MS. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopyridintoxicitet med oavsiktlig överdos hos fyra patienter med multipel skleros. Neurology 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Ett ovanligt fall av 4-aminopyridintoxicitet. J Emerg Med 2006;30:175–177.

17. Schwam E. Allvarlig oavsiktlig överdos av 4-aminopyridin på grund av ett fel på apoteket. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A, et al. Effekten av fampridin på risken för anfall hos patienter med multipel skleros. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A, et al. Fampridine-SR i multipel skleros: en randomiserad, dubbelblind, placebokontrollerad, dosvarierande studie. Mult Scler 2007; 13:357–368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA, et al. Dosjämförelsestudie av fampridin med fördröjd frisättning vid multipel skleros. Neurology 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Oralt fampridin med fördröjd frisättning vid multipel skleros: en randomiserad, dubbelblind, kontrollerad studie. Lancet 2009;373: 732–738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR, et al. En fas 3-studie av oral dalfamridin med förlängd frisättning vid multipel skleros. Ann Neurol 2010;68:494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Fampridin med förlängd frisättning och gång och balans i MS: randomiserad kontrollerad MOBIL-studie. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S, et al. 4-Aminopyridin-inducerad aktivitet räddar hypoexciterbara motorneuroner från amyotrofisk lateral skleros-patient-inducerade pluripotenta stamceller. Stamceller 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Bredspektrumeffekter av 4-aminopyridin för att modulera amyloid beta1-42-inducerad cellsignalering och funktionella svar i mänskliga mikroglia. J Neurosci 2006;26:11652–11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z, et al. Design, syntes, immuncytokemiutvärdering och molekylär dockningsundersökning av flera 4-aminopyridinderivat som potentiella neuroprotektiva medel för behandling av Parkinsons sjukdom. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Förkonditionering med 4-aminopyridin skyddar cerebellära granulatneuroner mot excitotoxicitet. Brain Res 2009;1294: 165–175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Misslyckande och räddning av förkonditioneringsinducerad neuroprotektion vid allvarliga strokeliknande förolämpningar. Neurophar mycology 2016;105:533–542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A, et al. 4-Aminopyridin främjar funktionell återhämtning och remyelinisering vid akut perifer nervskada. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. In vivo-behandling med K plus-kanalblockeraren 4-aminopyridin skyddar mot kainatinducerad neuronal celldöd genom aktivering av NMDA-receptorer i murina hippocampus. Neurofarmakologi 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Aminopyridin lindrar experimentell autoimmun neurit hos Lewis-råttor. J Neuroimmunol 2017;305:72–74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB, et al. Identifiering av en ny klass av inhibitorer av den spänningsstyrda kaliumkanalen, Kv1.3, med immunsuppressiva egenskaper. Biochemistry 2002;41:7781–7794.

33. Varga Z, Company T, Papp F, et al. Kaliumkanaluttryck i human CD4 plus regulatoriska och na¨ iva T-celler från friska försökspersoner och patienter med multipel skleros. Immunol Let 2009;124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Undertryckande av inflammatorisk demyelinisering och axondegeneration genom att hämma Kv3-kanaler. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Aminopyridin förbättrar skovvis-remitterande experimentell autoimmun encefalomyelit hos SJL/J-möss. J Neuroimmunol 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-Aminopyridin förbättrar rörligheten men inte sjukdomsförloppet i en djurmodell av multipel skleros. Exp Neurol 2013;248: 62–71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Skyddseffekter av 4-aminopyridin vid experimentell optisk neurit och multipel skleros. Hjärna 2020;143:1127–1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Mobilisering av kalcium från intracellulära förråd, förstärkning av neurotransmittorinducerade kalciumtransienter och kapacitivt kalciuminträde av 4-aminopyridin. J Neurosci 2001;21:3135–3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopyridin hos patienter med multipel skleros: dosering och serumnivå relaterad till effekt och säkerhet. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. Oralt administrerat 4-aminopyridin förbättrar kliniska tecken vid multipel skleros. Ann Neurol 1990;27:186–192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Aminopyridin förbättrar kliniska tecken vid multipel skleros. Ann Neurol 1987;21:71–77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopyridin vid multipel skleros: förlängd administrering. Neurology 1991;41: 1344–1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Effekter av 4-aminopyridin hos patienter med multipel skleros. J Neurol Sci 1983;60:353-362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. Effekterna av 4-aminopyridin på kliniska tecken vid multipel skleros: en randomiserad, placebokontrollerad, dubbelblind, cross-over-studie. Ann Neurol 1992;32:123–130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopyridin vid behandling av patienter med multipel skleros. Långsiktig effekt och säkerhet. Arch Neurol 1994;51:292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Trötthet vid multipel skleros: multidimensionell bedömning och svar på symptomatisk behandling. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Trötthet vid progressiv multipel skleros: resultat av en randomiserad, dubbelblind, placebokontrollerad, crossover-studie av oral 4-aminopyridin. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopyridin: nytt liv för en gammal drog. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Kvantitativ bedömning av 4-aminopyridin med fördröjd frisättning för symptomatisk behandling av multipel skleros. Neurology 1997;48:817–821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR, et al. Långsiktig säkerhet och effekt av dalampridin för gångnedsättning hos patienter med multipel skleros: resultat av öppna förlängningar av två kliniska fas 3-prövningar. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P, et al. Bedömning av kliniskt betydelsefulla förbättringar av självrapporterad gångförmåga hos deltagare med multipel skleros: resultat från den randomiserade, dubbelblinda, fas III ENHANCE-studien av fampridin med förlängd frisättning. CNS-läkemedel 2019;33:61–79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA, et al. Förbättrad patientrapporterad hälsoeffekt av multipel skleros: ENABLE-studien av PR-fampridine. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopyridin som ett enda medel för diagnostik och behandling för allvarlig nervkrossskada. Mil Med 2019;184(suppl 1):379–385.