Översikt över Phlorotannins beståndsdelar i Fucales del 3

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en stark rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranets funktion. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en god renande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenerationen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinacoside i Cistanche en betydande förmåga att ta bort DPPH-fria radikaler och kan avlägsna reaktiva syrearter och förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning, och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tymin-fria radikaler.

Klicka på Var kan jag köpa Cistanche

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

När det gäller Eckols, på grund av närvaron av dibensodioxinstrukturer, kan dessa särskiljas från de andra grupperna baserat på deras deprotonerade molekylära joner, som vanligtvis är 2 Da lägre än andra PT:er med lika DP:er, för varje dibensodioxinmotiv som finns i strukturen (figur 5D). Till exempel presenterar eckol en [MH]− vid m/z 371, medan trifokal, trifloretol och fukofloretol alla är närvarande [MH]− vid m/z 373. I sin tur lockar, som har två dibensodioxinstrukturer i sin ryggrad, presentera en [MH]− vid m/z 741, medan deras hexamerekvivalenter visar [MH]− vid m/z 745. Detsamma gäller karmaloler, som i huvudsak är hallar som innehåller dibensodioxinstrukturer [120]. Slutligen kännetecknas vissa PT:er som innehåller furanringar, såsom fukofuroeckol och phlorofukofuroeckol, av en dehydrerad-deprotonerad molekylär jon, dvs en [MH]− som är 18 Da lägre, jämfört med deras icke-furaninnehållande ekvivalenter med lika DP:er (t.ex. fucofuroeckol vs. phloroeckol strukturer skiljer sig endast på närvaron/frånvaron av furanringen och visar [MH]- vid m/z 496 respektive 478) [120]. Tabell 3 visar MS-data som samlats in från olika studier fokuserade på identifiering av PTs i Fucales.

Även om dessa grunder kan vara användbara för att uppnå rimlig strukturell identifiering av PT:er med låg molekylvikt, uppstår stora svårigheter när det gäller oligomerer och polymerer med hög molekylvikt eftersom deras isomerisering ökar exponentiellt, och de många möjligheterna för floroglucinolarrangemang och kombinationer knappast kan vara belyst av MS eller MS/MS. Ändå kan MS i sådana fall fortfarande ge värdefull information om DP för föreningarna som finns i en florotanninblandning. I detta avseende utgör matrisassisterad laserdesorption/joniseringstid för flygning MS (MALDI-TOF-MS) ett mer lämpligt tillvägagångssätt för analys av större oligomerer eftersom det kan detektera molekyler med m/z över den övre gränsen för ESI- FRÖKEN. Denna teknik har använts för att studera florotanninfraktionen av Sargassum wightii, vilket gör att den kan bekräfta närvaron av dimerer, trimerer och hexamerer av floroglucinol [125]. Högupplöst MS (HRMS) är ett alternativt tillvägagångssätt som också kan användas för analys av PT:er med hög molekylvikt, beroende på de multipelladdade jonerna och förändringar i plus 1 13C isotopmönstret. Med andra ord, när en förening är dubbel- eller trippelladdad visar den ett plus 1 13C isotopmönster med m/z-skillnader på 0.5 respektive 0.33 . På denna princip har Steevensz et al. [78] kunde profilera PT-sammansättningen av P. canaliculata, F. spiralis, F. vesiculosus och A. nodosum i termer av DP, och detekterade föreningar med molekylvikter upp till 6000 Da som annars skulle överskrida massintervallet av ESI-MS.

Sammantaget, även om masspektrometri kan vara en fyndig teknik för kvalitativ analys av PT:er och till och med tillräckligt kraftfull för att uppnå någorlunda bra karakterisering av föreningar med låg molekylvikt, lyckas den inte hämta tillräckliga detaljer om typen och kopplingspositionen för de isomera formerna av föreningar. med högre DPS. Därför, när målet är att helt belysa PTs-strukturella egenskaper, är NMR den enda effektiva metoden som kan erbjuda en tillräcklig upplösning för en sådan djupgående analys.

5.2.3. NMR

NMR-spektroskopi omfattar en direkt och oförstörande analys som kan vara användbar inte bara för att få tillgång till innehållet i PT:er utan också för att fullständigt belysa de strukturella egenskaperna hos PT:er. När kvantitativa data är avsedda, integreras 1H NMR-resonanssignaler för alla fenoliska föreningar som ingår i algextrakt och jämförs med de från en lämplig intern standard; dessa föreningar måste vara stabila, kemiskt inerta, tillgängliga i mycket ren form och fullständigt lösliga i samma deutererade lösningsmedel som provet. Sammantaget har författarna använt olika tillvägagångssätt och metoder för att kvantifiera fenoliska föreningar och/eller PT genom denna teknik, inklusive i Fucale-härledda prover.

I 2009, Parys et al. beskrev, för första gången, användningen av kvantitativ 1H NMR (NMR) för att bestämma variationen av florotanninhalten i A. nodosum under året. I deras arbete användes trimesinsyra som intern standard (2,0 mg trimesinsyra i 0,8 ml deutererad metanol och 0,2 ml deuteriumoxid), och en kalibreringskurva togs fram med användning av floroglucinol. Trots att högre PT-innehåll detekterades med qHNMR, jämfört med de som erhölls med FC kolorimetrisk metod, följde båda metoderna samma trend för säsongsvariationer [126]. Det är viktigt att notera att, i motsats till den kolorimetriska analysen, som inte är specifik för PT:er eller ens för fenoliska föreningar, jämförs integrationen av resonanssignalerna för 1H NMR-spektra i qHNMR med de för den interna standarden. På grund av dessa principiella skillnader kan en direkt jämförelse inte göras exakt mellan båda metoderna [127,128].

Med ett distinkt tillvägagångssätt använde Stiger-Pouvreau och hans medarbetare högupplöst magisk vinkelspinning (HR-MAS) för att kvantifiera PTs i brunalgerna, Cystoseira tamariscifolia. I denna studie användes solid-state NMR för att detektera floroglucinol (monomer) in vivo och 1H qNMR användes för att uppskatta monomerkvantifieringen (med användning av trimetylsilylpropionat -d4 (TSP) som en intern standard). Floroglucinol-singletten vid 5 6,02 ppm, integrerad i tre protoner, bekräftade dess närvaro i provet. Noggrannheten av denna metod utvärderades med användning av en standardlösning av floroglucinol och resultaten validerades genom jämförelse med de för FC-analysen. I slutändan hävdade författarna att den presenterade metoden består av en innovativ och snabb metod för att kvantifiera floroglucinol, som kan tillämpas på alla algarter. Den enda begränsningen för qNMR-metoden ligger i nödvändigheten av att minst en av spektrasignalerna (singlett, dubblett, etc.) otvetydigt tillskrivs en och endast en förening [129].

Tidigare under 2010 visade samma författare redan potentialen hos in vivo 1H HR-MAS NMR associerad med masspektrometri (LC/ESI–MSn) för att observera den globala kemiska profilen för fem arter av släktet, Cystoseira, som finns längs kusterna av Bretagne i Frankrike: C. baccata, C. foeniculacea, C. humilis, C. nodi caulis och C. tamariscifolia [130]. De

Huvudsyftet med deras arbete var att identifiera Cystoseira-exemplar och diskutera deras taxonomi. Resultaten bevisade effektiviteten av det presenterade tillvägagångssättet för att särskilja huvudsakligen C. nodicaulis och C. tamariscifolia eftersom deras spektra bevisade närvaron av karakteristiska signaler, vilket möjliggjorde deras entydiga identifiering. I fallet med en singlett vid 2,91 ppm för den första och för den senare, karakteriserade en topp vid exakt 6, 00 ppm arten och indikerade den möjliga förekomsten av ett enkelt florotannin. Foeniculacea och C. humilis karakteriserades i allmänhet av förekomsten av två dubletter av samma intensitet vid 7,90 och 7,36 ppm. Den absoluta diskrimineringen mellan de två signalerna förblev dock omöjlig. Likheten mellan in vivo NMR-signalerna, i tandem med den lilla intraspecifika kemiska mångfalden hos båda arterna, motiverade dessa resultat. Slutligen, i fallet med C. baccata, trots att de visade den viktigaste kemiska mångfalden, tillät många signaler konstant diskriminering från de andra arterna.

År 2020 visade Walsh och medarbetare [131] den antimikrobiella potentialen hos två renade florotanninextrakt från A. nodosum och F. serratus, två intertidal bruna alger. I det arbetet tillät 1H och 13C NMR-analys inte bara en kvantitativ och kvalitativ uppskattning av totala fenoliska föreningar utan också tillgång till skillnader i kopplingsprofilen mellan renade fenolextrakt av båda arterna. När det gäller FC-analysen hittades en signifikant högre nivå av total-fenoliska föreningar i A. nodosum än i F. serratus, och resultaten validerades av FC-analysen. Dessutom visade de uppnådda resultaten med både qNMR- och FC-analys förekomsten av variationer mellan prover som samlas in varje månad och mellan båda metoderna.

För att klargöra PTs struktur, tillämpades 1H och 13C NMR-analys först av Glombitza och hans grupp på 70-talet när de identifierade floroglucinol i olika brunalger. Komplexiteten hos spektra associerade med dessa derivat möjliggjorde endast identifiering av mindre polyfenoliska strukturer. Sålunda, 1974, var det första gången som de kemiska strukturerna av bifuhalol och difloretol klargjordes från ett 80-procentigt etanolextrakt av C. tamariscifolia [132].

Ändå, sedan dess, har mer än hundra PT-strukturer belysts med hjälp av NMR [133]. För detta underkastas extrakt vanligtvis ett förbehandlingssteg med hexan eller petroleumeter för att fälla ut stora PT. Dessutom, för att förhindra PTs instabilitet, underlätta NMR-analys och ändra polariteten hos dessa föreningar, acetyleras de ofta med ättiksyraanhydrid och pyridin, vilket möjliggör deras normalfas-kiseldioxidkromatografirening [119]. I IH NMR-spektra för denna typ av förening måste två aspekter anmärkas: resonansen hos aromatiska protoner uppträder mellan δ 6.0 och 7,5 ppm, och acetylgrupperna uppträder som singletttoppar mellan δ 2 och 3 ppm . Detta är ett användbart verktyg för att fastställa antalet fria hydroxigrupper i de ursprungliga oskyddade fenolerna. De två typerna av aromatiska ringsystem som kan förekomma är representerade i figur 6. Den distinkta kemiska omgivningen för de två typerna av protoner (Ha och Hb) förändrar mångfalden av de observerade signalerna i 1H NMR, såväl som deras integration.

Tillsammans med 1H NMR-spektroskopi har 13C och HSQC och HMBC NMR-spektra använts för att klargöra strukturerna hos renade PT, inklusive i Fucales. Den heteronukleära korrelations-NMR-spektroskopiska metoden är användbar för att identifiera klassen av PT från en provmatris (monomer, bränsle, kloroetyl, full, fukofloretol, etc.) [134]. De karakteristiska 13C-NMR-signalerna för PT:er sammanfattas i tabell 4. Kolresonanser av en distinkt typ av kol, tillsammans med deras intensitet, som uppträder vid karakteristisk-kemiska skiftningar möjliggör tilldelning av vissa signaler till specifika klasser av PT:er, särskilt phlorethols e halls .

1997 gjorde Glombitza et al. [135] beskrev isoleringen och karakteriseringen av 33 PT från brunalgen, Cystophora torulosa. Olika PT-klasser identifierades inklusive floretoler och hallar och fukofloretoler och hydroxifukofloretoler (exempel i figur 7). När det gäller det senare identifierades och karakteriserades dessutom sju nya hydroxifukofloretoler som bär ytterligare hydroxylgrupper (NMR och MS). Som tidigare nämnts, för att förhindra oxidation och öka lipofilicitet hos de isolerade PT-derivaten, beskrev författarna deras isolering som acetater [82].

Koch et al. har också visat tillämpningen av 1H och 13C NMR för att karakterisera större fuhalolacetater i B. bifurcate [136]. HSQC och HMBC (2D) NMR-spektroskopiska tekniker har använts av Cérantola et al. att visa närvaron av fukol- och fukofloretolstrukturer i extrakten av Fucus spiralis [137]. Samma tillvägagångssätt användes med Halidrys siliquosa, rikligt förekommande i Bretagne. Användningen av 1D och 2D NMR och MS-analys möjliggjorde identifiering av fyra fenolderivat: trifuhaloler och tetrafuhaloler, och, för första gången, difloretoler och trifloretoler [125]. Tabell 5 sammanfattar de studier som nämnts ovan i vilka 1H och 13C NMR bidrog till att klargöra strukturen hos PT extraherade från alger som tillhör Fucales.

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】