DEL 2 Antioxidation och cytoskydd av akteosid och dess derivat: jämförelse och mekanistisk kemi
Mar 08, 2022
Del 2 Hur skyddar Cistanche Acteoside-antioxidanten celler?
Klicka här för del 1
För mer information vänligen kontakta:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola har många effekter, klicka här för att veta mer
3. Diskussion
Antioxidantverkan hos naturliga fenoliska föreningar är känd för att vara involverad i elektronöverföring (ET) [18,19]. Således har vissa ET-baserade metallreducerande analyser använts i stor utsträckning för att bedöma antioxidantnivåer av fenoler, såsom FRAP- och CUPRAC-analyserna. Riktlinjerna för FRAP-analys ska uppfyllas med ett pH på mindre än 3,6. En sådan sur miljö har framgångsrikt undertryckt H plus-jonisering från fenoler; således anses FRAP-analysen vara en ren ET-process [20,21]. Effektiviteten avakteosidoch dess derivat i FRAP-analysen innebär att när acteosid och dess derivat fungerar som antioxidanter, kan de använda ET-vägen för att utöva sin antioxidantverkan.
Dessutom utförde vi också en CUPRAC-analys i en buffert med pH 7,4. Som framgår av Suppl. 1,akteosidoch dess derivat ökade dosberoende deras Cu2 plus-reducerande effektprocent, vilket indikerar att de kan förbli ET-potential vid fysiologiskt pH. Men deras ET-potentialer minskade i följande ordning:akteosid> forsytosid B > poliumosid (tabell 1). Denna dynamik tyder tydligt på att apiosyldelen i forsytosid B och rhamnosyldelen i poliumosid sänkte ET-potentialen.
För att testa möjligheten att ET uppstår under deras radikalfångande processer, introducerades en syrecentrerad fri radikal PTIO・ i studien. Bevis för cyklisk voltammetri avslöjade att PTIO・-rening under pH 5.0 är en enkel elektron-redox-reaktion. Iakttagelsen attakteosidoch dess derivat skulle effektivt kunna rensa PTIO・-radikalen vid pH 4,5, tyder på möjligheten av ET under deras radikalrenande processer. Uppenbarligen stöder detta fynd ytterligare de tidigare nämnda resultaten från FRAP- och CUPRAC-analyser, och tidigare resultat att en donerande elektron (e) är en egenskap hos fenoliska antioxidanter [23].
Vid fysiologiskt pH 7,4 är den PTIO・-rensande uppsatsen inte bara en ET-väg utan inkluderar också en proton-(H plus ) överföringsväg. Under processen har PTIO・ föreslagits att acceptera Hplusfrån fenoler till att producera produkttoppen ([PTIO-H]plus). Eftersom Hplus-överföring åtföljs alltid av ET i stegvisa eller synkrona mekanismer [24], den realistiska (eller slutliga) produkten är en [PTIO-H]-molekyl [22]. PTIO・-rening vid pH 7,4 (Suppl. 1) innebär attakteosidoch dess derivat har också en H plus -överföringspotential. IC50-värdena (tabell 1) indikerade att den relativa Hplus-överföringspotentialer var i fallande ordning påakteosid>forsytosid B > poliumosid. Det är uppenbart att apiosyl- och rhamnosyl-delarna också försvagade Hplus-överföringspotential under antioxidantprocessen.
Som tidigare diskuterats, under antioxidantprocessen av fenoler, åtföljs ET vanligtvis av proton (Hplus) överföring för att bilda flera antioxidantmekanismer [24], såsom väteatomöverföring (HAT) [23,25-27], sekventiell elektron-protonöverföring (SEPT) [26,27], sekventiell protonförlust enkelelektron överföring (SPLET) [26] och protonkopplad elektronöverföring (PCET) [24-26,28]. Till exempel har ABTS plus • -rening, en reaktion dominerad av enkelelektronöverföring (SET) [29], också visat sig påverkas av H plus-nivåer nyligen [30]. ABTS plus • -rening är därför en multi-pathway-baserad antioxidantanalys [21,31]. Faktumet attakteosidoch dess derivat kan rensa ABTS plus ・ radikaler indikerar att deras antioxidantverkan också kan förmedlas via flera vägar. Denna hypotes bekräftas ytterligare av bevisen från DPPH・-rensande analysen, en reaktion som omfattar flera HAT-, ET-, SEPT- och PCET-vägar [26,32]. Men den kvantitativa analysen baserade IC50värden (tabell 1) visade att i multi-pathway-baserad ABTS plus --rening och DPPH*-renande aspekter,akteosidvar överlägsen dess motstående forsytosid B och rhamnosidpoliumosid. Således kan man dra slutsatsen att apiol- och rhamnosylgrupper så småningom hindrar multi-pathway potentialer (särskilt ET och Hplus-transfer) under processen för att avlägsna fria radikaler.
Som noterats av författarna och andra [14,26], under antioxidantprocessen, kan en RAF-reaktion också inträffa. För att verifiera RAF-möjligheten studerades tre fenylpropanoidglykosider tillsammans med koffeinsyra med UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS-analys. Koffeinsyra visade sig ge en dimer produkt, medan tre fenylpropanoidglykosider inte producerade någon topp av RAF-produkt. Detta fynd tyder tydligt på att tre fenylpropanoidglykosider inte kan genomgå RAF-vägen för att utöva sin antioxidantverkan. Eftersom tre fenylpropanoidglykosider kan betraktas som estrar av koffeinsyra (Figur 1), indikerar en sådan skillnad mellan koffeinsyra och koffeinsyraestrar också att enorma delar kan hindra genereringen av RAF.
Sammantaget, ur en aspekt som rensar fria radikaler,akteosidoch dess derivat kan genomgå flera vägar för att utöva sin antioxidantverkan. Dessa antioxidantvägar är åtminstone involverade i ET och H plus -överföring (men inte RAF). Våra resultat stöds delvis av den teoretiska studien somakteosidkan utöva antioxidantverkan via SPLET-vägen. I processen kan akteosid först deprotonera (Hplus-överföring) för att ge anjon. Deprotoneringen tros ske i katekoldelarna med svag surhet. Därefter donerade anjonen elektroner för att ge upphov till fenoxiradikalform [33]. Fenoxiradikaler med pn-konjugering är dock stabila i viss utsträckning. Naturligtvis behövs i detta avseende ytterligare experimentellt arbete i framtiden.
Det är värt att nämna att cellulär oxidativ stress också kan härröra från övergångsmetaller (särskilt Fe2 plus). Fe2 plusjon kan dock omvandla H2O2molekyl till en mycket skadlig •OH-radikaler via Fenton-reaktionen (Fe2plus plus H2O2 T Fe3plus plus ・OH plus OH-). Därför dämpas Fe2plusnivåer kan effektivt hämma ・OH-radikaler för att frigöra cellulär oxidativ stress. I själva verket har järnkelatbildning av naturliga fenoliska antioxidanter nu utvecklats till en effektiv terapi för vissa oxidativa stresssjukdomar [34,35].
I föreliggande studie föreslogs akteosid och dess derivat som effektiv Fe2 plus-kelatorer genom förändringarna i spektroskopi och lösningsfärger (Figur 2). Ändå är akteosid sämre än de två glukosiderna i kelaterande Fe2 plusoch forsytosid B med apiosyldel är sämre än poliumosid med rhamnosyldel. Baserat på jämförelsen av deras preferentiella konformationer (Figur 1, till höger), föreslås det att apiosyl (eller rhamnosyl) del kan hjälpa huvudliganden (fenylpropanoidgruppen) i kelaterande Fe2 plus. En sådan synergistisk effekt stärker utan tvekan Fe2 plus-kelaterande förmåga och förstorar UV-vis topparna. Emellertid är rhamnosyl effektivare än apiosyl i sin Fe2 plus-kelaterande förmåga. Skillnaden kan hänföras till det faktum att rhamnosyl förekommer i en exocyklisk form (dvs aL-rhamnopyranosyl), medan apiosyl är i en pentacyklisk form (dvs pD-apiofuransyl). En exocyklisk form är känd för att vara större och mer stabil. Därför är exocyklisk rhamnosyl mer effektiv jämfört med pentacyklisk apiosyl i sin Fe2 plus-kelaterande förmåga.
För att testa om akteosid och dess derivat kan rensa ROS, genomförde vi en pyrogallol autooxidationsanalys. Som framgår av Suppl. 1, skulle alla effektivt kunna rensa bort radikalen, en typisk ROS som förekommer i celler. Den relativa bioaktiviteten minskade dock i ordningen poliumosid > forsytosid B >akteosid. Denna ordning är också parallell med den för de cytoskyddande effekterna (tabell 2). Detta fynd indikerar att den allmänna effekten av rhamnosyldel eller apiosyldel är att förstärka ROS-fångande eller cytoprotektiva effekter.
4. Material och metoder
4.1. Kemikalier och djur
Acteosid (CAS-nummer: 61276-17-3, 97 procent), forsytosid B (CAS-nummer: 81525-13-5,97 procent) erhölls från BioBioPha (Kunming, Kina, Suppl. 3). Poliumosid (CAS-nummer: 94079-81-9, 97 procent ) isolerades av vårt team från den traditionella kinesiska örtenCallicarpa periHT Chang (Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetrametylkroman-2-karboxylsyra (Trolox), 2,9-dimetyl{{ 9}},10-fenantrolin (neokuproin), 2,4,6-tripyridyltriazin (TPTZ) och pyrogallol köptes från Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Shanghai, Kina). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-etylbensen-tiazolin-6-sulfonsyradiammoniumsalt)] erhölls från Amresco Chemical Co. (Solon, OH, USA). PTIO・radikal köptes från TCI Development Co., Ltd. (Shanghai, Kina). Kaffeinsyra köptes från National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products (Peking, Kina). Dulbeccos modifierade Eagle's medium (DMEM), fetalt bovint serum (FBS) och trypsin köptes från Gibco (Grand Island, NY, USA).AnnexinV/propidiumjodid (PI) analyskit köptes från Invitrogen (Carlsbad, CA, USA) Alla andra reagens var av analytisk kvalitet.
Sprague-Dawley (SD)-råttor av 4 veckors ålder erhölls från djurcentret vid Guangzhou University of Chinese Medicine. Protokollet för detta experiment utfördes under överinseende av den institutionella djuretiska kommittén i Guangzhou University of Chinese (godkännandenummer 20170306A).
4.2. Metallreducerande analyser (FRAP& CUPRAC)
Metallreducerande analyser inkluderar Fe3 plus-reducerande effektanalys och Cu2 plus-reducerande effektanalys. Fe3 plus-reducerande analys etablerades av Benzie och Strain och heter formellt FRAP [20]. Det experimentella protokollet för denna analys beskrevs i en tidigare rapport [9]. Kortfattat framställdes FRAP-reagenset färskt genom att blanda 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl3,och {{0}}.25 M acetatbuffert i ett förhållande av 1:1:10 vid pH 3,6. Testprovet (x=4-20 L, 0,05 mg/ml) sattes till (20 — x) 95 procent etanol följt av 80 RL FRAP-reagens. Efter en 30- min inkubation vid omgivningstemperatur, mättes absorbansen vid 595 nm med användning av en mikroplattläsare (Multiskan FC, Thermo Scientific, Shanghai, Kina). Den relativa reducerande kraften för provet beräknades med hjälp av följande formel:
där enmaxvar den maximala absorbansen för reaktionsblandningen med provet, och Aminär den minsta absorbansen i testet. A är provets absorbans.
Cu2 plus-reducerande kraft kan också karakterisera antioxidantnivån och kallas därför CUPRAC. Denna analys utfördes enligt en tidigare publicerad metod [36]. Kortfattat, 12 RL CuSOq vattenlösning (10 mmol/L), 12 RL neocuproin etanollösning (7,5 mmol/L) och (75 — x) RL av CH3COONH4buffertlösning ({{0}},1 mol/L, pH 7,5) sattes till brunnar med olika volymer prov (0,05 mg/ml, 4-20 |^L). Absorbansen vid 450 nm efter 30 min mättes med användning av den tidigare nämnda mikroplattläsaren. Den relativa CUPRAC-effekten beräknades med hjälp av formeln för FRAP. Amaxvar den maximala absorbansen för reaktionsblandningen med provet, och Aminär den minsta absorbansen i testet. A är provets absorbans.
4.3. PTI0・-Scavenging Assay
PTIO*-rensande analyser (vid pH 4,5 eller pH 7,4) utfördes baserat på vår metod [16]. I korthet sattes testprovlösningen (x=0-20 ^L, 1 mg/ml för pH 4,5 och {{10}},5 mg/ml för pH 7,4) till (20 — x) rL av 95 procent etanol, följt av 80 RL av en vattenhaltig PTIO*-lösning. Den vattenhaltiga PTIO*-lösningen framställdes med användning av en fosfat-smörlösning (0,1 mM, pH 4,5 eller pH 7,4). Blandningen hölls vid 37 grader i 2 timmar, och absorbansen mättes sedan vid 560 nm med användning av den tidigare nämnda mikroplattläsaren. PTIO*-inhiberingsprocenten beräknades enligt följande:
där A grad är absorbansen för kontrollen utan provet, och A är absorbansen av reaktionsblandningen med provet.
4.4. ABTSplus*-Scavenging och DPPH*- Rengöringsanalyser
ABTS*plus-rensande aktivitet utvärderades enligt metoden [37]. ABTS plus * producerades genom att blanda 0,2 mL ABTS-diammoniumsalt (7,4 mmol/L) med 0,2 mL kaliumpersulfat (2,6 mmol/L). Blandningen hölls mörkt vid rumstemperatur i 12 timmar för att möjliggöra fullbordande av radikalgenereringen innan den späddes med destillerat vatten (i ett förhållande av ungefär 1:20) så att dess absorbans vid 734 nm var { {16}}.35 土 0.01 med den tidigare nämnda mikroplattläsaren. För att bestämma rensningsaktiviteten sattes testprovet (x=4-20 RL, 0,05 mg/ml) till (20 — x) RL destillerat vatten följt av 80 RL ABTS plus *-reagens och absorbansen vid 734 nm mättes 3 min efter initial blandning, med användning av destillerat vatten som blank.
DPPH*-radikalfångande aktivitet bestämdes som tidigare beskrivits [18]. Kortfattat blandades 75 RL DPPH*-lösning (0,1 rM) med de angivna koncentrationerna av provet (0,025 mg/ml, 5-25 RL) löst i metanol. Blandningen hölls vid rumstemperatur under 30 minuter, och absorbansen mättes vid 519 nm med användning av den tidigare nämnda mikroplattläsaren.
Procentandelen av ABTS plus •-renande aktivitet och DPPH*-renande aktivitet beräknades baserat på formeln som presenteras i avsnitt 4.3.
4.5. UPLC—ESI—Q-TOF—MS/MS-analys av PPH* Reaktionsprodukter
Denna metod baserades på vår tidigare studie [25]. Metanollösningen av akteosid blandades med en lösning av DPPH*-radikaler i metanol vid ett molförhållande av 1:2, och den resulterande blandningen inkuberades i 24 timmar vid rumstemperatur. Produktblandningen filtrerades sedan genom ett 0.22-Rm-filter och analyserades med ett UPLC-system utrustat med en C18-kolonn (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, USA). Den mobila fasen användes för elueringen av systemet och bestod av en blandning av metanol (fas A) och vatten (fas B). Kolonnen eluerades med en flödeshastighet av 0,3 ml/min med följande gradientelueringsprogram: 0-10 min, 60-100 procent A; 10-15 min, 100 procent A. Provinjektionsvolymen sattes till 1 RL för separationen av de olika komponenterna. ESI-Q-TOF-MS/MS-analys utfördes med en Triple TOF 5600plusMasspektrometer (AB SCIEX, Framingham, MA, USA) utrustad med en ESI-källa, som kördes i negativ joniseringsläge. Skanningsintervallet sattes till 100-2000 Da. Systemet kördes med följande parametrar: jonsprayspänning, —4500 V; jonkälla värmare, 550 grader C; gardingas (CUR, N2), 30 psi; nebuliserande gas (GS1, luft), 50 psi; Tis gas (GS2, Air), 50 psi. Deklusterpotentialen (DP) sattes till -100 V, medan kollisionsenergin (CE) sattes till -40 V med en kollisionsenergispridning (CES) på 20 V. RAF-produkterna
kvantifierades genom att extrahera motsvarande molekylformel från totaljonkromatogrammet (Suppl. 2).
Det tidigare nämnda experimentet upprepades med användning av forsytosid B, podiumsidan och koffeinsyra. Korresponderandem/ztoppar extraherades från motsvarande molekylformel från totaljonkromatogrammet (Suppl. 2).
4.6. UV-Vis-Spectra Analys ofFe2 plus-Kelaterande produkter
Fe2 plus-kelaterande reaktionsprodukter av akteosid-Fe2 plusutvärderades med UV-Vis-spektroskopi [13]. För experimentet sattes 300 av en metanolisk lösning av akteosid (0,24 mM) till 700 rL av en vattenlösning av FeCl? 4H2O (168 mM). Lösningen blandades sedan kraftigt. Därefter skannades den resulterande blandningen med en UV-Vis-spektrofotometer efter en timme (Unico 2600A, Shanghai, Kina) från 200-850 nm.
Det tidigare nämnda experimentet upprepades med användning av forsytosid B, eller podiumsidan, istället för akteosid.
4.7. Pyrogallol autooxidationsanalys för superoxidanjon (•O2~) Rensning
Mätning av superoxidanjon (・.{{0}}) rensande aktivitet baserades på vår metod [17]. Kortfattat löstes provet i etanol vid 1 mg/ml. Provlösningen (x rL) blandades med Tris-HCl-buffert (980 - x rL, 0,05 M, pH 7,4) innehållande EDTA (1 mM). När 20 RL pyrogallol (60 mM i 1 mM HCl) tillsattes, skakades blandningen omedelbart vid rumstemperatur. Absorbansen vid 325 nm av blandningen mättes (Unico 2100, Shanghai, Kina) mot Tris-HCl-bufferten som en blank var 30:e s under 5 min. Rengöringsförmågan beräknades enligt följande:
4.8. Cytoskyddande effekt mot oxidativt stressade bmMSCs (MTT-analys)
BmMSCs odlades enligt våra tidigare rapporter [38] med små modifieringar. I korthet erhölls benmärg från lårbenet och skenbenet på en råtta. Märgproverna späddes med DMEM (låg glukos) innehållande 10 procent FBS. BmMSC:erna framställdes genom gradientcentrifugering vid 900 g under 30 minuter vid 1,073 g/ml Percoll. De preparerade cellerna lossades genom behandling med 0,25 procent trypsin och fördes in i odlingskolvar vid 1 x 104/cm2. BmMSCs vid passage 3 utvärderades för homogenitet i odlade celler med användning av detektion av CD44 med MTT-analys [39].
MTT-analysen användes för att utvärdera den cytoskyddande effekten av acteosid och dess derivat mot bmMSCs [40]. Skademodellen fastställdes utifrån den tidigare studien [41]. Det experimentella protokollet illustreras kort i figur 3.
4.9. Statistisk analys
Varje experiment i avsnitt 4.2-4.4 och 4.7 utfördes i tre exemplar och MTT-analysexperimentet utfördes i pentaplikat. Data registrerades som medelvärde土SD (standardavvikelse). Dos-respons-kurvorna plottades med hjälp av Origin 6.0 professionell programvara (OriginLab, Northampton, MA, USA). IC50-värdet definierades som den slutliga koncentrationen av 50 procent radikal inhibering (relativ reducerande kraft) [42]. Statistiska jämförelser gjordes med envägs ANOVA för att upptäcka signifikanta skillnader med SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) för Windows.p< 0.05 ansågs vara statistiskt signifikant.
5. Slutsatser
Tre naturliga fenylpropanoidglykosider, nämligen akteosid, forsytosid B och podiumsidan, kan vara involverade i flera vägar för att utöva antioxidantverkan, inklusive ET, H plus -överföring; och Fe2 plus-kelat, men inte RAF. ET och Hplus-överföringsvägar kan hindras av rhamnosyldel eller apiosyldel; dock Fe2 plus-kelateringsväg kan förstärkas av sockerrester (särskilt rhamnosyl-del). Den allmänna effekten av rhamnosyldel eller apiosyldel är att förbättra ROS-fångande förmåga som är involverad i flera vägar. Således är forsytosid B och poliumosid överlägsna akteosid i cytoskyddande effekter.
Tilläggsmaterial:Kompletterande material finns tillgängligt online. 1. Dos-responskurvor; 2. HPLC-MS-spektra; 3. Analyscertifikat för akteosid, forsytosid B och poliumosid.
Erkännanden:Detta arbete stöddes av Kinas National Science Foundation (81573558, 81603269), Guangdong Science and Technology Project (2017A050506043) och Natural Science Foundation i Guangdongprovinsen (2 017A030312009, 2015A0303104).
Författarbidrag:Xian Li och Dongfeng Chen tänkte ut och designade experimenten; Aichi Wu beredde poliumosid; Yulu Xie, Qian Guo och Penghui Xue utförde antioxidantexperimenten; Ke Li och Wei Zhao utförde MTT-experimenten; Hong Xie analyserade uppgifterna; Jiasong Guo genomförde experimentet i figur 2D; Xian Li skrev tidningen. Alla författare läste och godkände det slutliga manuskriptet.
Intressekonflikt:Författarna förklarar ingen intressekonflikt.
akteosidicistanche
A förkortningar
ABTS plus • 2,2'-azino-bis (3-etylbenso-tiazolin-6-sulfonsyra) radikal
bmMSCs benmärgshärledda mesenkymala stamceller
CUPRAC kopparsyra reducerande antioxidantkapacitet
dAMP 2'-deoxiadenosin-5'-monofosfatradikal
DMEM Dulbeccos modifierade Eagle's medium
dGMP 2/-deoxiguanosin-5'-monofosfatradikal
DPPHe 1,1-difenyl-2-pikrylhydrazinradikal
ET-elektronöverföring; FBS: Fetalt bovint serum
FRAP ferrijon reducerande antioxidantkraft;
HAT väteatomöverföring
MTT 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyl
PCET protonkopplad elektronöverföring
PTIOe 2-fenyl-4,4,5,5-tetrametylimidazolin-1-oxyl-3-oxidradikal
RAF radikal adduktbildning
ROS-reaktiva syrearter
SCNT somatisk cellkärnöverföring
SEPT sekventiell elektron-protonöverföring
SPLET sekventiell protonförlust enkel elektronöverföring
TPTZ 2,4,6-tripyridyltriazin
Trolox (±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetrametylkroman-2-karboxylsyra
Referenser
1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Produktion av verbascoside och fenolsyror i biomassa av Verbena Officinalis L. (vervain) odlad under olika in vitro-förhållanden. Nat. Driva. Res. 2017, 31, 1663-1668.
2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Effekten av Acteoside som ett cellskydd för att producera en klonad hund. PLoS ONE 2016,11, e0159330.
3. Wang, HQ; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sun, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside Skyddar mänskliga neuroblastom SH-SY5Y-celler mot |3-amyloidinducerad cellskada. Brain Res. 2009,1283,139-147.
4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Skyddande effekter av akteosid mot röntgeninducerade skador i human hudfibroblaster. Mol. Med. Rep. 2015,12, 2301-2306.
5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Bestämning av forsythiaside B och poliumosid i olika ursprung och delar från Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.
6. Jiang, WL; Tian, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotective Efficacy and Therapeutic Window of Forsythoside B: Ina Rat Model of Cerebral Ischemi and Reperfusion Injury. Eur. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.
7. Pan, N.; Hori, H. Antioxidantverkan av akteosid och dess analoger på lipidperoxidation. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.
8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR Snabb reparation av DNA-radikaler. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.
9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Kemisk studie om skyddande effekt mot hydroxyl-inducerad DNA-skada och antioxidantmekanism av myricitrin. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.
10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Snabb reparation av oxidativ DNA-skada av fenylpropanoidglykosider och deras analoger. Mutagenesis 2008, 23, 19-26.
11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Lyofiliserade vattenextrakt av Mori Fructus och Mori Ramulus Skydda mesenkymala stamceller från eOH-behandlade skador: bioanalys och antioxidantmekanism. BMC komplement. Altern. Med. 2017, 17, 242.
12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro-studier av antioxidant- och skyddseffekten av 2-substituerade-8-hydroxikinolinderivat mot H2O2-inducerad oxidativ stress i BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.
13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) Skyddar mesenkymala stamceller från oxidativ stress: en bioevaluering och mekanistisk kemi. BMC komplement. Altern. Med. 2016, 16, 423.
14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Skyddseffekt av Sinapin mot hydroxylradikal-inducerad skada på mesenkymala stamceller och möjliga mekanismer. Chem. Pharm. Tjur. 2016, 64, 319-325.
15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oxidativ status förutsäger kvalitet i mänskliga mesenkymala stamceller. Stamcell Res. Ther. 2017, 8, 3.
16. Li, XC 2-Fenyl-4,4,5,5-Tetrametylimidazolin-1-oxyl 3-Oxide (PTIOe) Radical Scavenging: A New and Simple Antioxidant Analys in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.
17. Li, X. Förbättrad pyrogallol-autoxidationsmetod: En pålitlig och billig superoxid-renande analys som är lämplig för alla antioxidanter. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.
18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Jämförelse av antioxidanteffekterna av Quercitrin och Isoquercitrin: Förstå rollen för 6〃-OH-gruppen. Molecules 2016, 21,1246.
19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioxidantegenskaper hos fenoliska föreningar: H-atom kontra elektronöverföringsmekanism. J. Phys. Chem. A 2004,108, 4916^922.
20. Benzie, IFF; Stam, JJ Den järnreducerande förmågan hos plasma (FRAP) som ett mått på "antioxidantkraft": FRAP-analysen. Anal. Biochem. 1996, 239, 70-76.
21. Gulcin, I. Antioxidantaktivitet hos livsmedelsbeståndsdelar: en översikt. Båge. Toxicol. 2012, 86, 345-391.
22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reaktioner av PTIO och Carboxy-PTIO med ・NO, ・NO2 och O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.
23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioxidantaktivitet och mekanism för tetrahydroamentoflavon in vitro. Nat. Driva. Commun. 2013, 8, 787-789.
24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Studie av protonkopplad elektronöverföring (PCET) med fyra explicita diabatiska tillstånd på ab Initio-nivå. Comput. Theor. Chem. 2017, 1116, 50-58.
25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Skyddseffekt mot hydroxylradikal-inducerad DNA-skada och antioxidantmekanism av [6]-gingerol: en kemisk studie. Tjur. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.
26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioxidantaktivitet av trans-resveratrol mot hydroxyl- och hydroperoxylradikaler: en kvantkemisk och beräkningskinetisk studie. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Skyddar mot Hydroxyl-inducerade skador på DNA och MSC via antioxidantmekanism. J. Saudi Chem. Soc. 2015,19, 454-460.
28. Amic, A.; Markovic, Z.; Markovic, JMD; Stepanic, V.; Lucic, B.; Amic, D. Towards an Improved Prediction of the Free Radical Scavenging Potency of Flavonoids: The Significance of Double PCET Mechanisms. Food Chem. 2014, 152, 578-585.
29. Lee, CH; Yoon, JY UV-direkt fotolys av 2,2'-och-bis(3-etylbensotiazolin-6-sulfonat) (ABTS) i vattenlösning: kinetik och mekanism. J. Photochem. Fotobiol. A 2008, 197, 232-238.
30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reaktion av 2,2'-azinobis(3-etylbensotiazolin-6-sulfonsyra (ABTS) härledda radikaler med hydroperoxider. Kinetics and Mechanism. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.
31. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS Radikaldriven oxidation av polyfenoler: isolering och strukturell belysning av kovalenta addukter. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006, 346, 321-329.
32. Osman, AM Multiple Pathways of the Reaction of 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl Radical (DPPHe) med (plus)-katekin: bevis för bildandet av en kovalent addukt mellan DPHe och den oxiderade formen av polyfenolen. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2011, 412, 473-478.
33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Phenylpropanoid Glycoside Analogs: Enzymatisk syntes, antioxidantaktivitet och teoretisk studie av deras mekanism för fria radikaler. PLoS ONE 2011, 6, e20115.
34. Perron, NR; Brumaghim, JL En översyn av antioxidantmekanismerna för polyfenolföreningar relaterade till järnbindning. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.
35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; et al. Inriktning på kelaterbart järn som en terapeutisk modalitet vid Parkinsons sjukdom. Antioxid. Redoxsignal. 2014, 21,195-210.
36. Cekic, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Modified Cupric Reducing Antioxidant Capacity (CUPRAC) analys för att mäta antioxidantkapaciteten hos tiolinnehållande proteiner i blandning med polyfenoler. Talanta 2009, 79, 344-351.
37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Överensstämmelse mellan antioxidantaktiviteter in vitro och kemiska komponenter i Radix Astragali (Huangqi). Nat. Driva. Res. 2012, 26, 1050-1053.
38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Hexadekansyra från Buzhong Yiqi avkoksinducerad spridning av benmärgsmesenkymala stamceller. J. Med. Mat 2010,13, 967-975.
39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Skyddseffekter av dihydromyricetin mot »OH-inducerad mesenkymala stamcellsskada och mekanistisk kemi. Molecules 2016, 21, 604.
40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP Synthesis, antioxidationsaktivitet av (E)-9-p-Tolyl-3-2-(8-hydroxi-kinol- 2-yl)vinyl-karbazol och (E){{8 }}(p-Anisyl)-3-2-(8-hydroxi-kinol-2-yl)vinyl-karbazol och deras induktionsproliferation av mesenkymala stamceller. Acta Chim. Synd. 2009, 67, 974-982.
41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Targeting of the Shh Pathway av atractylenolides främjar kondrogen differentiering av mesenkymala stamceller. Biol. Pharm. Tjur. 2012, 35,1328-1335.
42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin skyddar mot hydroxylradikal-inducerade skador på mesenkymala stamceller: Antioxidantutvärdering och mekanistisk insikt. Chem. Biol. Påverka varandra. 2014, 219, 221-228.
Provtillgänglighet: Ett prov av föreningen poliumosid finns tillgängligt från författarna.
© 2018 av författarna. Licenstagare MDPI, Basel, Schweiz. Den här artikeln är en artikel med öppen tillgång som distribueras under villkoren för Creative Commons Attribution (CC BY)-licensen (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
