PartⅠQi Sui Zhu Shui gips hämmar AQP1- och MAPK-signalering minskar leverskador inducerade av cirrhotic ascites

Abstrakt

1. Målsättning

För närvarande finns det ingen speciell behandling för cirrhotic ascites i modern medicin. Qi Sui Zhu Shui gips (QSZSP) har använts vid ascites. Syftet med denna studie var att undersöka verkningsmekanismen för QSZSP vid behandling av cirrhotic ascites och dess samband med aquaporin 1 (AQP1).

2. Metoder

Tjugofyra råttor delades in i fyra grupper, sex råttor i varje grupp. Koltetraklorid-olivolja injiceras i modellering. Kontroll- och modellgrupperna behandlas med blank gelplåster (2 cm × 2 cm), QSZSP lågdosgrupp behandlas med Qi Sui Zhu Shui gips (1 cm × 1 cm) och QSZSP högdosgrupp behandlas med Qi Sui Zhu Shui gips (2 cm × 2 cm). Förändringarna i kroppsvikt och bukomkrets mättes, de histopatologiska förändringarna i levern, njurarna och bukhinnan observerades vid HE-färgning, de biokemiska indexen relaterade till leverfunktionen upptäcktes och förändringarna i AQP1-uttryck och aktiveringen av MAPK-vägen i lever, njure och peritoneala vävnader utvärderades i IHC-färgning och Western blot.

3. Resultat

Efter en veckas injektion av koltetrakloridleverolja ökade råttorna i modellgruppen långsamt sin kroppsvikt, och den abdominala omkretsen av modellråttorna fortsatte att öka med tiden. Efter 16 veckors konstruktion av cirrhotic ascites-modellen skadades levern, njurarna och bukhinnan signifikant, och serumnivåerna av TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na och Ca hos råttorna var signifikant högre ( P < 0.001) och ALB-nivåer var signifikant lägre (P < 0.001) än de i kontrollgruppen. Efter 4 veckors behandling förbättrades lever-, njur- och peritoneala skador. TBiL-, AST-, ALT-, Cr-, BUN-, K-, Na- och Ca-nivåerna var signifikant lägre (P < 0,001) och ALB-nivåerna var signifikant högre (P < 0,001) än de i modellgruppen. plus e-proteinuttryck av AQP1, p-ERK, p-JNK och p-p38 visade sig hämmas i levern, njurarna och bukhinnan.

4. Slutsats

QSZSP hämmar proteinuttrycket av AQP1- och MAPK-signalvägen i levern, bukhinnan och njurarna för att lindra lever-, njur- och peritonealskada orsakad av cirrhotic ascites, vilket minskar den onormala tillväxten av bukens omkrets.

Nyckelord

AQP1, MAPK-signalering, leverskada, ascites,Cistanche-tillskott.

Klicka här för att hämtafördelarna med Cistanche

Introduktion

Cirros är en vanlig klinisk sjukdom som orsakas av en rad patologiska förändringar såsom degeneration, nekros, regenerering och fibrös vävnadsproliferation av hepatocyter på grund av den ihållande eller upprepade verkan av olika patogena faktorer på levervävnaderna, huvudsakligen manifesterad som lever. funktionsnedgång [1]. Den globala prevalensen av cirros är okänd. Prevalensen av cirros i USA är cirka 0,15 procent –0,27 procent [2]. 69 procent av människorna vet inte att de har cirros, och diabetes, alkoholmissbruk, hepatit C och hepatit B, att vara man och att vara äldre är alla förknippade med cirros [3]. Oavsett etiologi kommer 50 procent av patienterna med cirros att utveckla cirros kardiomyopati [4]. 2017 års National Vital Statistics Report för USA rapporterade att cirka 4,5 miljoner vuxna, eller 1,8 procent av den vuxna befolkningen, har kronisk leversjukdom och cirros. 41 473 personer dog av kronisk leversjukdom och cirros [5].

Ascites är den mest framträdande kliniska manifestationen av cirros. Det är den onormala vätskeansamlingen i bukhålan. Cirka 60 procent av patienterna med kompensatorisk cirrhos utvecklar onormal ackumulering av peritonealvätska inom 10 år efter diagnosen hög incidens och dålig prognos av cirrhotic ascites, särskilt refraktär ascites, kan inducera många dödliga komplikationer, som allvarligt påverkar livskvaliteten och överlevnaden för cirrospatienter. [7]. 90 procent av levercancerfallen är förknippade med förekomst av cirros [8].

Traditionell kinesisk medicin (TCM) har effekten att blockera eller fördröja malignitet och har låg toxicitet [9]. Långvarig användning av kinesiska örter kan minska risken för cirros hos patienter med kronisk hepatit B [10]. Qi Sui Zhu Shui gips (QSZSP) består av Radix Astragali, Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Poria, Herba Leonuri, Radix Salviae miltiorrhizae och Pericarpium Arecae. En tidigare klinisk studie fann att QSZSP-adjuvansbehandling av patienter med cirrhotic ascites resulterade i förbättrad urinproduktion, 24 timmars urinutsöndring av natrium, minskade kreatinin- och totala bilirubinnivåer, ökat albumininnehåll, förbättrad ascitesåterfallsfrekvens efter 3 månaders kontinuerlig behandling med QSZSP [11]. Det finns få studier på QSZSP och cirrhotic ascites. I historien om forskning om komponenterna i QSZSP och cirros i levern är Xiaozhang Tie säker som adjuvans till primär terapi av cirrhotic ascites [12]. Salviae miltiorrhizae förbättrar signifikant cirros och portal hypertoni [13]. Ytterligare studier behövs på verkningsmedlen av QSZSP vid behandling av cirrhotic ascites.

kanal, och därefter döptes CHIP28 om till aquaporins [14, 15]. Tretton akvaporiner (AQP0-AQP12) har identifierats [16–18]. Akvaporiner har tre isoformer. Den första subtypen transporterar endast vattenmolekyler, den andra subtypen transporterar vattenmolekyler, urea, glycerol etc. och den tredje subtypen transporterar kanaler kontinuerligt öppna, utan energiförbrukning eller reglering [19–21]. Aquaporin 1 (AQP1) tillhör den första subtypen, som existerar som en tetramer och tillåter endast vattenmolekyler att transporteras över membranet, och det är en oberoende vattenkanal [22, 23]. Levern, bukhinnan och njurarna är de organ som står i nära kontakt, och AQP1 råkar vara distribuerad i levern, bukhinnan och njuren [24]. Vattenhalten i människokroppen är 70 procent av kroppsvikten, och onormal vattenproduktion-absorption-utsöndring i bukhålan är en nyckelfaktor för bildandet av ascites [19]. AQP1 är ett av de akvaporiner som endast är involverade i transporten av vattenmolekyler. Ascites vid cirros leder till ökad vätskeansamling i levern, och överskottsvätskan överförs till bukhinnan, som inte återupptager tillräckligt med vatten och så småningom leder till ökad återupptag av vatten i njurarna, så AQP1 kan vara en viktig mellanprodukt att studera metabolismen av ascites.

Inledningsvis leder skrumplever till nedsatt leverfunktion och ökad vätskeansamling i buk- och brösthålorna, vilket bildar ascites [25]. Ascites förekommer vanligen vid cirros [6]. Ascites är den onormala vätskeansamlingen i bukhålan [6]. Cirrhotic ascites kan leda till njurdysfunktion [26]. I hypotesen om perifer arteriell vasodilatation är njuren involverad i alla 5 stadier av ascites [27]. Genom att länka AQP1-uttryck i levern, bukhinnan och njuren föreslår vi en "lever-peritoneal-njure"-axel vid cirrhotic ascites och föreslår att den spelar en avgörande roll i bildandet av cirrhotic ascites. Det har rapporterats att AQP1 regleras av MEK1/2-hämmare i gliaceller [28]. I prostatacancerceller regleras AQP1-proteinuttrycksnivåer av p38MAPK [29]. I humana pleurala mesotelceller hämmar peptidoglykan p38 MAPK-reglering av AQP1-proteinuttryck [30]. Därför skulle MAPK-vägen vara en riktning för AQP1-förändringar i "lever-peritoneal-njure"-axeln.

QSZSP:s roll vid behandling av cirrhotic ascites och dess relation med AQP1 har ännu inte rapporterats. Vi spekulerar i att "lever-peritoneal-njure"-axeln är en funktionell axel för vattenmetabolism med aquaporiner som den gemensamma materialbasen, som är involverad i "produktion-absorption-excision" av peritonealvätska och spelar en nyckelroll i bildningen av cirrhotic ascites. MAPK-vägen kan förmedla QSZSP-reglering av AQP1. Därför behandlade vi i denna studie råttor med cirrhotic ascites in vitro med QSZSP, observerade de histopatologiska förändringarna i levern, njurarna och bukhinnan och utvärderade förändringarna i AQP1-uttryck och aktivering av MAPK-vägen i levern, njuren och bukhinnan. vävnader för att belysa effekten av QSZSP vid behandling av cirrhotic ascites och dess mekanism.

Cistanche-extrakt

Material och metoder

1. Regents.

Reagensen som används är följande: koltetraklorid (C805332) från Macklin, olivolja från Yihai Kerry Golden Dragon Fish Cereals, Oils and Foodstuffs Co., Ltd. (Kina), xylen och absolut etanol från National Pharmaceutical Group Chemical Reagent Co., Ltd. (Kina), eosin (E8090) och neutralt harts (G8590) från Solarbio (Kina) och hematoxylin (G1004) från Service.

2. Qi Sui Zhu Shui gipsprocess.

Qi Sui Zhu Shui gips består av Radix Astragali, Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Poria, Herba Leonuri, Radix Salviae miltiorrhizae och Pericarpium Arecae. Ovanstående sju kinesiska mediciner köptes från First Affiliated Hospital of Guangxi University of Traditional Chinese Medicine, enligt bestämmelserna i "Chinese Pharmacopoeia" 2010-utgåvan.

12 ml vatten tillsätts till varje 1 g Radix Astragali, Poria och Herba Leonuri och blötläggs i 3 0 min, vattenåterflödesextraktion upprepas 3 gånger, 1,5 h varje gång, och extrakten kombineras och filtreras . 6 ml 85 procent etanol tillsätts till varje 1 g Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Radix Salviae miltiorrhizae och Pericarpium Arecae och blötläggs i 30 minuter, vattenåterflödesextraktionen upprepas två gånger, 1,5 timmar varje gång, och extrakten kombineras och filtreras. Ovanstående två extrakt kombinerades och torkades under vakuum för att framställa torrt pulver. Basen består av 60 procent natriumakrylat, 30 procent karbomer, 10 procent aluminiumglycinat och 6 gånger glycerin. Penetrationsförstärkaren består av 50 procent Azon och 50 procent propylenglykol. Basen, penetrationsförstärkaren och torrpulvret blandas. Coater (RK-200, Tianjin Ruikang Babu Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd.) som producerar QSZSP används. Hydrogelpastan framställs av en RK-200 hydrogelbeläggningsmaskin (Tianjin Ruikang Babu Pharmaceutical Biotechnology Co.). Varje tablett av denna produkt innehåller Astragalus-metylas (C41H68O14) i Radix Astragali, inte mindre än 0,6932 mg, och Euphorbia grandis dienol (C30H50O) i Radix Kansui, inte mindre än 1,4766 mg.

3. Djur.

Djur från tre Gorges University, tjugofyra råttor, hanar, som vägde 200-250 g, föddes upp under tillståndet av ingen specifik patogen (specifik patogenfri, SPF). Utfodringsmiljön är 22–26 grader, 50 procent –60 procent av relativ luftfuktighet. Modelleringen börjar om två veckor. Koltetraklorid-olivolja i proportioner 4:6, intraperitoneal injektionsdos på 3 ml/kg kroppsvikt och injektioner gavs två gånger i veckan (de fyra dagarna och de sju dagarna) under elva veckor. För kontrollgruppen gavs en isoton intraperitoneal injektion av en lika stor mängd olivolja. Vikten och bukens omkrets mäts före varje injektion. Under perioden användes destillerat vatten med 75 procent medicinsk alkohol för att bereda en 10 procentig koncentration av dricksvatten för råttor. Slutligen, inom fyra veckors behandling, mättes kroppsvikten (tabell 1) och bukens omkrets (tabell 2) hos råttorna två gånger i veckan under 15 veckor.

4. Behandling och provtagning.

Tjugofyra råttor delades in i fyra grupper, sex råttor i varje grupp, alla råttor avhårades på buken och avhårningsområdet var 3 cm × 3 cm. Kontrollgruppen (Con) behandlas med blank gelplåster (2 cm x 2 cm); modellgruppen (Mod), blank gelgips (2 cm × 2 cm); QSZSP lågdosgrupp, Qi Sui Zhu Shui gips (1 cm × 1 cm); och QSZSP högdosgrupp, Qi Sui Zhu Shui gips (2 cm × 2 cm). Dessa applicerades på bukhuden på hårborttagna råttor en gång om dagen i 6 timmar i 4 veckor. Koltetraklorid-olivolja injicerades subkutant i ryggen en gång i veckan under behandlingen för att förhindra att skrumplever vänds. Efter fyra veckor avlivades djuren genom bedövning och blodutsläpp. Om djuren inte var döda bedövades djuren till döds med en överdos av pentobarbitalnatrium (100 mg/kg). Efter bedövning dog djuren utan att andas eller hjärtslag. Filterpappersmetoden används för att få ascites. Blodet från bukaortan samlas upp och centrifugeras och serum samlas upp. En lämplig mängd levervävnad, njurvävnad och peritonealvävnad skärs och fixeras med 4 procent paraformaldehyd. Dessutom förvarades vävnaderna i levern, bukhinnan och njurarna i ett kylskåp med ultralåg temperatur vid -80 grader. Råttors fixerade lever-, njur- och peritoneala vävnader dehydrerades och inbäddades i vax. Sektionerna frystes vid -20 grader och skars till en tjocklek av 3 μm, ett vattenbad användes för att sträcka sektionerna, sektionerna fästes på objektglas och sektionerna förvarades vid 4 grader för backup.

Cistanche pulver

5. Hematoxylin och Eosin (HE) färgning.

Sektionerna färgades i hematoxylinlösning under 4 min, följt av sköljning med rinnande kranvatten i 2 min och 15 s. Sektionerna motfärgades sedan med eosinlösning under 3 min. Rengöring utfördes med 80 procent respektive 95 procent etanol under 30 s vardera. Sektionerna rensades sedan i xylen under 3 s och monterades med neutral balsam. Efter färgning observerades sektionerna med ett mikroskop och Leica Application Suite användes för att samla in och analysera de relevanta delarna av proverna.

6. Biokemisk analys.

Efter att serumproverna tinats vid 4 grader, detekterades serumproverna av Shenzhen Mindray BS420 Automatic Biochemical Analyzer, och TBiL, AST, ALT, ALB, Cr, BUN, K, Na och Ca-koncentrationer bestämdes med Shenzhen Mairui ( Shenzhen, Kina) Matchande biokemiska kit.

7. Immunhistokemisk färgning.

Proteinuttrycket av AQP1 i lever-, peritoneum- och njurvävnader undersöktes med immunhistokemi. Objektglasen bakades vid 65 grader i 1 timme, blötlades i xylen i 30 minuter och hydratiserades i gradientalkohol. 1 mM Tris-EDTA buffertlösning (G1203, Servicebio) användes för 18 minuters reparation vid 125 grader och 103 kPa, inkuberades med 3 procent H2O2 (National Pharmaceutical Group Chemical Reagent Co., Ltd., Kina) i 10 minuter, inkuberades med 10 procent getserum (SL038, Solarbio) i 30 min, och titrerat med primär antikropp AQP1 (PAB45863, Bioswamp), peritoneumspädning 1:250 och lever- och njurspädning 1:400 vid 4 grader C över natten. Sektionerna överfördes från 4 grader till rumstemperatur och lämnades i 45 minuter. Behandlad med Max Vision TM HRPPolymer anti-kanin sekundär antikropp (KIT-5020, MXB) i 60 minuter vid 37 grader. Behandlas med DAB (DA1010, Solarbio) tills sektionerna ändrar färg. Blötlägg sektionerna i tur och ordning, hematoxylin 3 min, 75 procent alkohol 5 min, 85 procent alkohol 5 min, 95 procent alkohol 5 min, 100 procent alkohol 10 min, xylen 10 min. Neutrala hartstätningssektioner. Bildsystemet Leica Application Suite användes för att fånga de relevanta delarna av provet. Kärnorna färgades blå med hematoxylin och DAB visade positivt brungult.

8. Västra Blot.

Proteinnivåerna av p38, p-p38, ERK1/2, p-ERK1/2, JNK1/2/3, p-JNK1/2/3 och AQP1 i lever-, buk- och njurvävnaderna analyserades med Western blot . Vävnadsprover homogeniserades i RIPA-lysat (R0010, Solarbio) innehållande proteashämmare vid 4 grader C och centrifugerades vid 12 000 g under 15 minuter. Koncentrationen av proteinerna mättes med användning av BCA Protein Assay Kit (PC0020, Solarbio). Proteiner (20 ug) separerades genom 12% natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektrofores och överfördes till polyvinylidenfluoridmembran (IPVH00010, Millipore). Membranen blockerades med 5 procent skummjölk under 2 timmar vid rumstemperatur i Tris-buffrad saltlösning och inkuberades med primära antikroppar mot p-ERK1/2 (ab214036), JNK1/2/3 (ab208035), p-JNK1/2/ 3 (ab76572), och p-p38 (ab47363) från Abcam (UK), och ERK1/2 (MAB37123), p38 (PAB37381), AQP1 (PAB45863) och GAPDH (PAB36269) från Bioswamp (Kina), över natten vid 4 grad . GAPDH-antikropp (PAB36269, Bioswamp) valdes som en intern referens. Alla de primära antikroppsutspädningsförhållandena är 1:1000. Membranen tvättades sedan med Tris-buffrad saltlösning och inkuberades i get-anti-kanin-IgG-sekundär antikropp (SAB43714, Bioswamp, 1: 20000) under 2 timmar vid rumstemperatur. Immunreaktivitet visualiserades genom den kolorimetriska reaktionen med användning av Immobilon Western HRP (WBKLS0500, Millipore). Membranen skannades med en Automatic Chemiluminescence Analyzer (Tanon 5200, Tanon).

9. Statistiska analyser.

Statistiska analyser utfördes med SPSS 23.0 programvara. Alla data presenterades som medel ± standardavvikelse (SD). Jämförelser mellan de två grupperna gjordes med hjälp av de oberoende t-testerna. Envägs ANOVA användes för att jämföra skillnader mellan tre eller flera grupper, och post hoc Fishers minst signifikanta skillnad (LSD) test användes för de individuella gruppjämförelserna. Värdena på P < 0.05 ansågs vara statistiskt signifikanta.

Effekterna av Cistanche

Referenser

[1] D. Schuppan och NH Afdhal, "Levercirrhosis," The Lancet, vol. 371, nr. 9615, s. 838–851, 2008.

[2] B. Sharma och S. John, Hepatic Cirrhosis. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022.

[3] S. Scaglione, S. Kliethermes, G. Cao, et al., "The epidemiology of cirrhosis in the United States: a population-based study," Journal of Clinical Gastroenterology, vol. 49, nr. 8, s. 690–696, 2015.

[4] LA Lyssy och MP Soos, Cirrhotic Cardiomyopathy. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022.

[5] A. Sharma och S. Nagalli, kronisk leversjukdom. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022.

[6] FA Rochling och RK Zetterman, "Management of ascites," Drugs, vol. 69, nr. 13, s. 1739–1760, 2009.

[7] R. Planas, S. Montoliu, B. Ballest´e, et al., "Natural history of patients hospitalized for management of cirrhotic ascites," Clinical Gastroenterology and Hepatology, vol. 4, nr. 11, s. 1385–1394, 2006.

[8] A. Zanetto, E. Campello, F. Pelizzaro och F. Farinati, "Hemostatiska förändringar hos patienter med cirrhosis och hepatocellulärt karcinom: laboratoriebevis och kliniska implikationer," Liver International: Official Journal of the International Association for the Study av levern, 2022.

[9] Z. Yi, Q. Jia, Y. Lin, et al., "Mechanism of Elian granules in the treatment of precanceous lesions of gastric cancer in rats through MAPK signaling pathway based on network farmakology," Pharmaceutical Biology, vol. . 60, nej. 1, s. 87–95, 2022.

[10] ZJ Hou, JH Zhang, X. Zhang, et al., "Långsiktig traditionell kinesisk medicin kombinerat med NA antiviral terapi på cirrosincidens hos kronisk hepatit B-patienter i verkligheten: en retrospektiv studie," Bevis -baserad komplementär och alternativ medicin: eCAM, vol. 2020, artikel-id 3826857, 8 sidor, 2020.

[11] HZ Qiu Hua och D. Mao, "Effekter av TCM-punktapplicering med QiSuiZuShui-pasta på livskvalitet hos patienter med refraktär ascites av cirros," Chinese Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Digestion, vol. 17, nr. 5, s. 306–309, 2009.

[12] F. Xing, Y. Tan, G.-J. Yan, et al., "Effects of Chinese herbal cataplasm Xiaozhang Tie on cirrhotic ascites," Journal of Ethnopharmacology, vol. 139, nr. 2, s. 343–349, 2012.

[13] H. Wang, XP Chen och FZ Qiu, "Salviae miltiorrhizae lindrar cirros och portalhypertoni genom att hämma kväveoxiden i cirrhotic råttor," Hepatobiliary and Pancreatic Diseases International: HBPD INT, vol. 2, nr. 3, s. 391–396, 2003.

[14] BM Denker, BL Smith, FP Kuhajda och P. Agre, "Identifiering, rening och partiell karakterisering av ett nytt Mr 28,000 integral membranprotein från erytrocyter och renal tubuli," Journal of Biological Chemistry vol. 263, nr. 30, s. 15634–15642, 1988.

[15] P. Agre, S. Sasaki och MJ Chrispeels, "Aquaporins: a family of water channel proteins," The American Journal of Physiology, vol. 265, nr. 3, artikel-ID F461, 1993.

[16] AS Verkman, MO Anderson och MC Papadopoulos, "Aquaporins: viktiga men svårfångade läkemedelsmål," Nature Reviews Drug Discovery, vol. 13, nr. 4, s. 259–277, 2014.

[17] Z. Draelos, "Aquaporins: en introduktion till en nyckelfaktor i mekanismen för hudhydrering," The Journal of Clinical and aesthetic dermatology, vol. 5, nr. 7, s. 53–56, 2012.

[18] AS Verkman, "Mer än bara vattenkanaler: aquaporins oväntade cellulära roller," Journal of Cell Science, vol. 118, nr. 15, s. 3225–3232, 2005.

[19] M. Suzuki och S. Tanaka, "Structure and divers functions of vertebrate aquaporins," Seikagaku The-Journal of Japanese Biochemical Society, vol. 86, nej. 1, s. 41–53, 2014.

[20] AD Sales, CH Lobo, AA Carvalho, AA Moura och APR Rodrigues, "Review Structure, function and localization of aquaporins: their possible implikations on gamete cryopreservation," Genetics and Molecular Research, vol. 12, nr. 4, s. 6718–6732, 2013.

[21] J. von B¨ulow, "Aquaporins--vattenkanaler i cellmembranet och terapeutiska mål," Medizinische Monatsschrift fur Pharmazeuten, vol. 36, nr. 3, s. 86–94, 2013.

[22] A. Yool, "Functional domains of aquaporin-1: keys to physiology, and targets for drug discovery," Current Pharmaceutical Design, vol. 13, nr. 31, s. 3212–3221, 2007.

[23] G. Benga, "Det första upptäckta vattenkanalproteinet, senare kallat aquaporin 1: molekylära egenskaper, funktioner och medicinska implikationer," Molecular Aspects of Medicine, vol. 33, nr. 5-6, s. 518–534, 2012.

[24] MYS Kalani, AS Filippidis och HL Rekate, "Hydrocephalus and aquaporins: the role of aquaporin-1," Acta Neurochirurgica Supplementum, vol. 113, s. 51–54, 2012.

[25] NJ Shah, OY Mousa, K. Syed och S. John, Acute on Chronic Liver Failure, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022.

[26] JS Pedersen, F. Bendtsen och S. Møller, "Management of cirrhotic ascites," Therapeutic advances in chronic disease, vol. 6, nr. 3, s. 124–137, 2015.

[27] DV Garbuzenko och NO Arefyev, "Aktuella metoder för hantering av patienter med cirrhotic ascites," World Journal of Gastroenterology, vol. 25, nr. 28, s. 3738–3752, 2019.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 och Zhen Heng Song 3

1 Hepatologiska avdelningen, det första anslutna sjukhuset vid Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning, Kina

2 Institutionen för medicinskt laboratorium, det första anslutna sjukhuset vid Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning, Kina

3 Institutionen för hepatologi, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning, Kina