Fenyletanoidglykosider av cistanche på klimakteriets syndrommodell hos möss

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ShuoTian, ​​Mingsan Miao, MingBai, Zhenzhen Wei

Institutionen för farmakologi, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450008, Kina Tillgänglig online 10 maj 2017.

Abstrakt

Cistanche är den traditionella och dyrbara kinesiska örtläkemedlet, med två tusen års användningshistoria i Kina. Det har effekten att tonifiera njuren, starka tillskott till levern och njurarna och fylla på essens och blod, känd som "ökenginseng". Här undersökte vi mekanismen förPhenylethanoid Glycosides of Cistanche(PGC) till modellen möss avmenopausalt syndrom, såväl som den terapeutiska effekten och egenskaperna hos PGC tillmenopausalt syndrom. I denna studie reproducerades KM-möss genom fullständig resektion av äggstockarna på båda sidor av ryggen för att fastställa modellmöss avmenopausalt syndrom(MPS), och fick destillerat vatten respektive droger. Modellmöss fick destillerat vatten. Möss fick 200 mg/(kg dag) höga doser avPhenylethanoid Glycosides of Cistanche(HPGC), 100 mg/(kg dag) medelstora doser avPhenylethanoid Glycosides of Cistanche(MPGC), och 50 mg/(kg dag) låga doser avPhenylethanoid Glycosides of Cistanche(LPGC). Efter 21 dagar kunde den bestämma antalet oberoende aktiviteter och antalet stående, den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret. Den beräknade också inälvsindex för livmodern, tymus, mjälte, mätte nivåerna av östradiol (E2), testosteron (T), luteiniserande hormon (LH) och follikelstimulerande hormon (FSH) i serumet. Dessutom observerade den patologiska förändringar i livmodern, tymus, mjälte och hypofys hos möss. Resultaten visade att beteendeindikatorer: Jämfört med modellgruppen (MG), HPGC, MPGC, LPGC kunde öka de oberoende aktiviteterna (P < 0.01);="" hpgc,="" mpgc="" kan="" öka="" antalet="" stående,="" den="" latenta="" perioden="" för="" första="" inträde="" i="" mörkrummet="" och="" minska="" det="" elektriska="" talet="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" kan="" öka="" antalet="" stående="" (p="">< 0.05);="" visceraindex:="" jämfört="" med="" mg,="" hpgc="" kan="" mpgc="" öka="" inälvsindexet="" i="" livmodern,="" tymus,="" mjälte="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" kan="" öka="" livmoderns="" visceraindex="" (p="">< 0,05);="" serumindex:="" jämfört="" med="" mg="" kunde="" alla="" grupper="" minska="" nivåerna="" av="" lh="" i="" serumet="" (p="">< 0,01);="" hpgc,="" mpgc="" skulle="" kunna="" förbättra="" nivåerna="" av="" e2,="" t="" och="" minska="" nivåerna="" av="" lh,="" fsh="" i="" serumet="" (p="">< 0,01);="" lpgc="" kan="" förbättra="" nivåerna="" av="" e2="" och="" minska="" nivåerna="" av="" fsh="" i="" serumet="" (p="">< 0,05).="" samtidigt="" hade="" den="" trenden="" att="" förbättra="" nivåerna="" av="" t="" i="" serumet.="" patologiska="" förändringar:="" jämfört="" med="" mg="" kan="" hpgc="" avsevärt="" förbättra="" de="" patologiska="" förändringarna="" i="" uterus,="" tymus,="" mjälte="" och="" hypofys="" hos="" möss;="" även="" andra="" grupper="" har="" en="" viss="" effekt.="" resultaten="" visade="" att="" pgc="" kunde="" förbättra="" könshormonstörningen="" vid="" mps="" och="" återställa="" funktionen="" hos="" livmodern,="" tymus="" och="" mjälte,="" med="" bättre="" terapeutisk="" effekt="" på="">

Grafiskt abstrakt

Nyckelord: PGC;Menopausalt syndrom; Möss

Förkortningar

MPSmenopausalt syndromPGCPolyetylenglykosider av CistancheHPG Höga doser avPhenylethanoid Glycosides of CistancheMPGCmediumdoser av fenyletanoidglykosider av CistancheLPGlåga doser avPhenylethanoid Glycosides of CistancheTtestosteronE2EstradiolLHluteiniserande hormoner follikelstimulerande hormon

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche på menopausalt syndrom

1. Introduktion

Cistanche, de torkade köttiga stjälkarna med fjällande blad av Cistanche deserticola YC Ma och C. tubulosa (Schrenk) Wight (Chen et al., 2013), är en berömd drog och flitigt använt i tusentals år. Den kommer från "Shen Nong's Herbal Classic" (Liu et al., 2013), salt i smaken och varm i naturen. Det har effekten att tonifiera njuren, starka tillskott till levern och njurarna, fylla på essens och blod, fukta tarmarna för att lindra förstoppning och annan effekt. Det används främst för att behandla brist på njur-yang (som leder till impotens), prospermi, kall sperma och sterilitet på grund av kyla i livmodern, förstoppning, enures, frekvens av miktion och en annan sjukdom. Modern forskning visar att det kan förbättra människans immunitet, minne och inlärningsförmåga med anti-aging, antiinflammatoriska, anti-trötthet och andra effekter (Li et al., 2010, Rashid et al., 2017).

MPS är ett syndrom av störningar i det autonoma nervsystemet som orsakas av östrogenutsöndringsstörning och åtföljs av neuropsykiatriska symtom. Den har olika grader av värmevallningar, irritabilitet, yrsel, tinnitus, hjärtklappning, sömnlöshet, etc., med synlig osteoporos, minnesförlust, kognitiv försämring, hjärt- och kärlsjukdomar i den sena perioden. Den främsta orsaken är den gradvisa nedgången och försvinnandet av ovariefunktion (Ia, 2016). För närvarande kan den huvudsakliga användningen av hormonersättningsterapi (HRT) för behandling av MPS, direkt tillskott av östrogen, långvarig HRT orsaka vaginal blödning, ömhet i brösten, endometriecancer, bröstcancer och andra negativa effekter. Dessutom är effekten ännu inte tillfredsställande – dosen av östrogen på immunsystemet har fortfarande hämmad effekt (Ma et al., 2016, Nawaz et al., 2017). Särskilt den senaste upptäckten visar att det kan öka risken för kardiovaskulära och cerebrovaskulära sjukdomar och andra allvarliga biverkningar som avsevärt begränsar den kliniska tillämpningen. I den akuta efterfrågan på marknaden, mer och mer uppmärksamhet från den traditionella kinesiska (TCM) medicinen för att söka efter behandling av MPS-läkemedel (Halim och Phang, 2017, Mustafa et al., 2017). TCM behandlar MPS med en lång historia (Zhang och Miao, 2011), genom att reglera hypotalamus-hypofys-ovarieaxeln (HPOA), återhämtning av äggstocksfunktionen och fördröjningen av äggstockarnas åldrande. Det har visat sig att majoriteten av läkemedel av njure yang har en bättre terapeutisk effekt på MPS (Wei och Miao, 2013).

Cistancheär den högsta frekvensen av droger som fyller på njure yang för tidigare dynastier (Tu et al., 2011). De viktigaste effektiva komponenterna iCistancheär fenyletanoidglykosider, med androgeneffekt. Det är förkroppsligandet av modern medicin njuryang (Zhao och Pan, 2013), med de högsta aktiva ingredienserna i Cistanche (Yan et al., 2012). Det är främst genom två sätt att fungera (Wumaierjiang och Yao, 2016). För det första har den funktionen att stärka hypotalamus-hypofys-binjurefunktionen och främja frisättningen av neurotransmittorer och hormoner i kroppen; för det andra har den funktionen att motverka trötthet, vilket förbättrar kroppens funktion. Effekten av den fyllande njuren av Cistanche skiljer sig från de allmänna njurläkemedlen som Epimedium brevicornum Maxim, Morinda officinalis How.Cistancheskadar inte yin men fyller på njuren. Det visas inte med rättvisa, muntorrhet och andra symtom för långvarig användning.

2. Material och metoder

2.1. Material och reagens

Cistanche(Batch nr. 20130501) köptes från Anhui, Dechang Pharmaceutical Pieces Co., Ltd. Proverna identifierades av professor Chen Suiqing (Henan University of Chinese Medicine, identifiering av kinesisk läkemedelsdisciplin) som de torkade köttiga stjälkarna med fjällande blad avCistanchedeserticolaY. C. Ma, samt de torkade köttiga stjälkarna med fjällande blad av C. tubulosa (Schrenk) Wight, respektive. GC (batch nr. 120303) levererades av Shanxi star Pharmaceutical Co., Ltd.; Echinakosid-referenssubstans (batchnr.111670-200503) levererades av National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products; AB-8 makroporöst absorptionsharts (batchnr. 20130618) levererades av Tianjin Guangfu vid Institute of Superfine Chemical Industry; Natriumkarboximetylcellulosa (batch nr. 20120418, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Co., Ltd.), Benzylpenicillin Sodium for Injection (batch nr. c1206807, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikationen: 4 miljoner enheter), 0,9 procent natrium Kloridinjektion (batch nr. 1301265303, Chen Xin Pharmaceutical Co., Ltd; specifikationer: 250 ml), klorhydrat (batch nr. 20120827, Tianjin Institute of Fine Chemical Industry), E2 ELISA analyskit (batch nr. 0001A3, R1001A3 Kina), T ELISA analyskit (batch nr. 20131001A, R&D Systems China), LH ELISA assay kit (batch nr 20131001A, R&D Systems China), FSH ELISA analyskit (batch nr 20131001A, R&D Systems China).

2.2. Provberedning

2.2.1. Beredningsmetoder

Tillvägagångssättet för provberedning var följande: Genom litteraturmetoderna (Gu et al., 2011) var vi under ledning av Feng Suxiang (Farmaceutisk analyskurs, Henan University of Chinese Medicine). DeCistanchekrossas till måltiden, med metoderna för återflödesextraktion för att extrahera 2 gånger med mängden etylalkohol (halten av etylalkoholen var 70 procent). Tiden för återflödesextraktion var 1,5 h för en gångs skull, och kombinerade sedan alkoholextraktionsvätskan 2 gånger. Extraktionsvätskan dekomprimerades och berikades utan alkoholsmak, och det destillerade vattnet användes för att dispergera (koncentrationen är 0,5 g/ml, som provlösning. Provlösningen installerades i AB-8-hartset med flöde (förhållandet mellan provlösningen och hartset var 1:10), efter att ha stått i 5 timmar tills provlösningen var helt adsorberad. Och sedan först med 10 gånger kolonnvolymen destillerat vatten för att tvätta AB{{12} } harts med provlösningen överlämnades det till vattnet; för det andra, med 10 gånger kolonnvolymen av etylalkoholen (halten av etylalkoholen är 10 procent), avlägsnades föroreningarna; för det tredje, med 7 gånger av kolonnvolymen av etylalkoholen (halten av etylalkoholen var 60 procent) till eluering, samlade vi upp eluatet och torkade eluatet, det vill säga pulvret avPhenylethanoid Glycosides of Cistanche.

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche på menopausalt syndrom

2.2.2. Val av bestämmande våglängd

Välj {{0}}.5 mL kontrollproduktlösning och tillsätt 5 procent natriumnitritlösning 1 mL till kontrollprodukten. Skaka sedan och tyst plats i 6 min. Efter det, tillsätt 10 procent aluminiumnitratlösning till ovanstående blandning. Skaka sedan och tyst på platsen i 6 min. Tillsätt 10 procent natriumhydroxid 10 ml till ovanstående blandning, blandningens volym fixerades till 25 ml med vattnet. Skaka och tyst plats i 18 minuter, som kontrollproduktlösning. Välj 0,5 mlPhenylethanoid Glycosides of Cistanchelösning, som ovanstående metodkonfiguration, som testlösning. Blankprovet var blanklösningen med undantag för kontrollproduktlösningen och provlösningen, såsom ovanstående metodkonfiguration. I UV-spektrofotometern med våglängdsområdet 200–800 nm användes hela våglängden för att skanna ovanstående 3 lösningar. Kontrollproduktlösningen och provlösningen hade den maximala absorptionstoppen vid 507 nm, så våglängden på 507 nm bestämdes som absorptionsvåglängden.

EfterPhenylethanoid Glycosides of Cistanchelösning (1) och Echinacoside referenssubstans (2) (superposition kontrast), färgen dök upp (se nästa bild)

2.2.3. Metod för innehållsdetektering

Väg noggrant 1 ml i väntan på att lösningen bestäms, tillsätt 1 ml 5 procent natriumnitritlösning till kontrollprodukten, skaka och ställ tyst i 6 minuter. Och tillsätt sedan 10 procent aluminiumnitratlösning till ovanstående blandning. Skaka och lägg tyst i 6 min. Tillsätt 10 ml 10 procent natriumhydroxid till ovanstående blandning och blandningens volym fixerades till 25 ml med vattnet. Skaka och tyst plats i 18 min; blanklösningen framställdes med samma metod med blindprovet utan provlösning. Med UV-spektrofotometri för att bestämma vid spektrofotometri på 507 nm.

2.2.4. Metodundersökning

2.2.4.1. Beredning av kontrolllösningen och provlösningen

Beredning av kontrolllösningen: Väg noggrant 3.06 mg echinakosid med torkning till konstant vikt som referensämne och lägg den i mätkolven på 25 ml. Använd sedan 70 procent etanollösning utspädd till skalan och skaka blandningen som kontrolllösning. Innehållet av kontrolllösningen var 0,1224 mg/ml.

Beredning av provlösningen: Väg exakt 5 mgPhenylethanoid Glycosides of Cistancheoch lägg den i mätkolven på 10 ml. Använd sedan 70 procent etanollösning utspädd till skalan och skaka blandningen som provlösning.

2.2.4.2. Förberedelse av standardkurva

Rita noggrant kontrolllösningen för {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10 }}, 5.0 och 6.0 mL, enligt "Val av bestämning av våglängd", och mätte absorbansen. Regressionsekvationen erhölls genom att använda koncentrationen till absorbansen: Y=20.296X − 0.0015 (r=0.9994), och det linjära området var 4.90–29.4 ug/ml.

2.2.4.3. Precisionstest

Parallellt bestämde absorbansen av provlösningen 6 gånger enligt punkten "Metod för innehållsdetektering". Efter beräkning av absorbansens relativa standardavvikelse var absorbansen 0.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0 .297 och 0.297, och den genomsnittliga absorbansen var 0.298, med RSD=0.330 procent (n=6).

2.2.4.4. Stabilitetstest

Bestäm absorbansen för provlösningen efter att lösningen var helt färgad i {{0}}, 15, 30, 50 och 60 min enligt punkten "Metod för innehållsdetektering". Efter beräkning av den relativa standardavvikelsen för absorbansen var absorbansen 0.300, 0.296, 0.295 och 0.295, och den genomsnittliga absorbansen var 0.299, med RSD=1.362 procent (n {{17 }}).

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche på menopausalt syndrom

2.2.4.5. Upprepade tester

Bered 6 provlösningar enligt punkten "Beredning av provlösningen", och beräkna absorbansen och innehållet enligt punkten "Metod för innehållsdetektering". Innehållet var 65,2 procent , 65,6 procent , 66,7 procent , 67,2 procent respektive 66,5 procent och det genomsnittliga innehållet var 66,2 procent , med RSD=1.142 procent (n=6).

2.2.4.6. Provåtervinningshastighetstest

Precisionsväg 9 stycken av provlösningen så att innehållet var känt, och varje stycke var 0,5 mL. Tillsätt 200, 250 respektive 300 ul standardlösning i provlösningen. Beräkna återvinningsgraden och den relativa standardavvikelsen förPhenylethanoid Glycosides of Cistancheoch återvinningsgraden var 101,45 procent , 99,26 procent , 98,94 procent , 101,83 procent , 99,05 procent , 99,47 procent , 98,72 procent , 99,17 procent och 100,64 procent . Den genomsnittliga återhämtningsgraden var 99,84 procent , med RSD=1.164 procent (n=9).

2.2.5. Bestämning av innehållet i provet

Förbered 3 provlösningar enligt punkten "Beredning av provlösningen". Beräkna sedan absorbansen enligt punkten "Metod för innehållsdetektering" vid spektrofotometrin på 507 nm, och beräkna innehållet. Tabell 1 visar resultaten.

Tabell 1. Resultat avPhenylethanoid Glycosides of Cistancheinnehåll.

2.3. Försöksdjur

KM honmöss (20–25 g) köptes från Wuhan Institute of Biological Products. Djurtillståndsnummer: 42000400000611, labbcertifikatet nr SYXK (Henan) 2010-001.

2.4. Experimentellt instrument

Höghastighetsbordscentrifug, Shanghai Antings vetenskapliga instrumentfabrik, modell: TGL-168; Elektronisk analytisk våg, Ohaus (Shanghai), modell: AR1140/C; Testinstrument för autonoma aktiviteter för möss, Chengdu Taming Science and Technology Limited Company, modell: ZZ-6; Mörkinstrument, Chengdu Taming Technology Co., Ltd., modell: BA-200; Enzymmärkesinstrument, USA BIO-RAD, modell: 680; Elektriskt mikroskop, japanska OLYMPUS Company, modell: BX61.

2.5. Experimentell djurmodell

100 KM möss (23–25 g) vägdes och intraperitoneal injektion av 10 procent Hydrat av kloraldehyd (0,03 ml/10 g), bukfixering efter anestesi. 12 möss valdes slumpmässigt ut som den tomma kontrollgruppen (BC), med skenoperationen; andra utfördes med MPS-modellen. Under baksidan av musens sista revben, klipp av mösshåren vid skärningspunkten mellan den mittaxillära linjen och avstånd från laterala ryggraden ca 1 cm. Efter desinficering, öppna huden och ryggmuskeln ca 0,5–1 cm, fann vi en mjölkvit fettmassa i synfältet av snittet och äggstocken var inbäddad i fettet. Dra försiktigt ut fettet ur snittet med pincett, och separera fettet, det kunde konstateras att den tunna tråden oregelbunden gulröd äggstock. Först var äggstockarna under äggledaren (inklusive fett) med en tunn tråd ligerad, och ta sedan bort äggstockarna. Efter operationen fördes livmodern tillbaka in i bukhålan. Sy musklerna och huden och de bilaterala äggstockarna avlägsnades med samma metod. Försiktig matning efter operation, intramuskulär injektion av penicillin 200 tusen U/kg, vid infekterad, en gång om dagen i 3 dagar. Efter operation i 5 dagar testades mössen vaginal utstryk, en gång om dagen i 5 dagar, för att fastställa om äggstockarna var helt borttagna.

2.6. Experimentell gruppering

Mössen hade brunst genom att de vaginala utstrykarna övergavs och 72 möss med fullständig kastrering delades slumpmässigt in i fem grupper (n=12 per grupp), nämligen modellgrupp (MG), GC, HPGC, MPGC och LPGC.

2.7. Dispenseringsmetod

{{0}},5 procent CMC: Natriumkarboximetylcellulosa 4 g, med destillerat vatten som 800 ml. Läkemedelsdosen av HPGC, MPGC och LPGC var 200, 100 respektive 50 mg/kg (doseringsvolym: 0,1 ml/10 g). Väg PGC på 2000 mg, 1000 mg och 500 mg, upplöst med en liten mängd 0,5 procent CMC. Ställ sedan in volymen på 100 ml och blanda suspensionen. Läkemedelsdosen av GC var 675 mg/kg, med 9 piller av GC upplösta med en liten mängd av 0,5 procent CMC. Ställ sedan in volymen på 40 ml och blandade suspensionen.

2.8. Drogadministration

Djur i varje grupp administrerades motsvarande läkemedel den 10 dagen efter operationen. GC-gruppen administrerades GC-suspension som 675 mg/kg, och HPGC-, MPGC- och LPGC-grupperna administrerades HPGC, MPGC, LPGC-suspension som 200 mg/kg, 100 mg/kg och 50 mg/kg. BC- och MG-grupperna administrerades med samma volym av 0,5 % CMC-lösning en gång om dagen i 21 dagar.

2.9. Fastställande av den självständiga verksamheten och antalet stående

Möss i varje grupp som administrerades i 18 dagar sattes i det oberoende aktivitetsinstrumentet, anpassade sig till miljön under 1 min. Bestäm sedan antalet självständiga aktiviteter och stående inom 5 min.

2.10. Bestämning av den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret

Möss i varje grupp administrerades i 19 dagar, vilket fick mössen att vända sig mot den lilla dörren in i mörkrummet in i bestämningslådan. Efter 24 timmar (administrerat i 20 dagar), bestäm den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret inom 5 min.

2.11. Beräkning av viscera index

Möss efter den sista administreringen av 2 timmar (fastade i 12 timmar). Efter att ha tagit blod, offrades mössen och dissekerades. Ta bort tymus, mjälte och livmoder och väg organets våta vikt. Beräkna sedan inälvsindex (Inälvsindex=Organ våtvikt mg/kroppsvikt g).

2.12. Mätning av innehållet av E2, T, LH, FSH

Möss, efter den sista administreringen på 2 timmar (fastade i 12 timmar), vägdes och togs sedan blod. Separera serumet och bestäm innehållet av E2, T, LH och FSH i serumet som specifikationen.

2.13. Observation av de morfologiska förändringarna i livmodern

Enligt förändringarna av experimentmössen i endometriet, körtlarna och muskelskiktet användes de semikvantitativa kriterierna för att mäta livmodern. Den patologiska organisationsmorfologin kunde delas in i fyra nivåer: nivån "−" innebar att endometriepitelcellerna, körtlarna och muskelskiktet var normala; nivån av " plus " den lilla delen av endometriepitelceller och körtlar var atrofi, och muskellagret var normalt; nivån "plus plus" innebar att en del av endometriepitelceller och körtlar var atrofi, och muskellagret hade en liten atrofi; nivån av " plus plus plus " innebar att endometriepitelcellerna och körtlarna atrofi signifikant, och muskellagret var atrofi.

2.14. Mätning av tjockleken på tymisk cortex

Medeltjockleken av tymisk cortex mättes med mikrometern till mössen.

2.15. Mätning av tjockleken på mjältknöl

Tjockleken på mjältknölen på båda sidorna mättes med mikrometern med den centrala artären som mitt. Beräkna sedan medelvärdet som tjockleken på mjältknölen.

2.16. Beräkning av antalet basofila celler och hypofysens främre cell

Beräkna numret på den basofila cellen och den främre hypofyscellen i ett område på 10,000 μm2 kvadratiska rektangulära ramar under ett synfält med hög effekt.

2.17. Statistisk analys

All data analyserades av SPSS 17.0 statistiska paket för statistisk analys av medicinska data. Mätdata användes som medel för att addera och subtrahera standardavvikelsen. (^-x± s). Grupperna jämfördes med enkelfaktoranalys (ANOVA) av varians, och varianshomogeniteten användes LSD-analysmetoderna, variansens heterogenitet användes i Games-Howell, och datumet för betygsdata användes Ridit-testet .

3. Resultat

3.1. Effekten av de oberoende aktiviteterna och antalet stående i möss

Fig. 1, Fig. 2 visar data för de oberoende aktiviteterna och antalet stående. Det visar att MG-möss är anmärkningsvärt reducerade jämfört med BC (P < 0.01),="" vilket="" återspeglar="" att="" nyfikenheten="" på="" den="" fräscha="" miljön="" är="" reducerad.="" mössen="" i="" gc,="" hpgc,="" mpgc="" och="" lpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" förbättra="" de="" oberoende="" aktiviteterna="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0.01);="" de="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" förbättra="" de="" oberoende="" aktiviteterna="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0,01);="" de="" i="" lpgc="" kan="" förbättra="" antalet="" stående="" lite="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 1. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de oberoende aktiviteterna hos mössen. De oberoende aktiviteterna registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

Fig. 2. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på antalet stående i mössen. Antalet stående registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

3.2. Effekten av den latenta perioden av att först gå in i mörkerrummet och det elektriska numret

Som visas i Fig. 3, Fig. 4, visade data för den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret att MG-möss är anmärkningsvärt reducerade jämfört med BC (P < 0).{{4="" }}1),="" vilket="" återspeglar="" nedgången="" i="" minnet="" hos="" mps-mössen.="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" den="" latenta="" perioden="" för="" första="" inträde="" i="" mörkrummet="" och="" minska="" det="" elektriska="" numret="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0,01),="" samt="" förbättra="" minnet.3.2.="" effekten="" av="" den="" latenta="" perioden="" av="" att="" först="" gå="" in="" i="" mörkerrummet="" och="" det="" elektriska="">

Som visas i Fig. 3, Fig. 4, visade data för den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret att MG-möss är anmärkningsvärt reducerade jämfört med BC (P < 0).{{4="" }}1),="" vilket="" återspeglar="" nedgången="" i="" minnet="" hos="" mps-mössen.="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" den="" latenta="" perioden="" för="" att="" först="" gå="" in="" i="" mörkrummet="" och="" minska="" det="" elektriska="" numret="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><0,01), samt="" förbättra="">

Fig. 3. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på den latenta perioden då mössen först kommer in i det mörka rummet. Den latenta perioden för första inträde i det mörka rummet registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

Fig. 4. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på det elektriska numret i mössen. Det elektriska talet rapporteras som medelvärde ± SE För varje grupp,^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01 jämfört med modellgrupp, med ANOVA med LSD-analysen.

3.3. Effekt av viscera index

Som visas i fig. 5 visar data för inälvsindex för livmodern, tymus och mjälte att MG-möss är anmärkningsvärt reducerad jämfört med BC (P < 0.01),="" vilket="" återspeglar="" livmodern.="" och="" immunorganet="" hos="" mps-möss="" är="" atrofierat.="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" förbättra="" visceraindexet="" för="" livmodern,="" tymus="" och="" mjälte="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" mössen="" i="" lpgc="" har="" något="" förbättrat="" viscera="" index="" av="" livmodern="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 5. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på visceraindex i mössen. Visceraindexen registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

3.4. Effekt av innehållet av E2, T, LH och FSH

Som visas i fig. 6 visar data för nivån av E2 och T att MG-möss är anmärkningsvärt reducerade, och data för nivån av LH och FSH visar att MG-möss är anmärkningsvärt ökade jämfört med BC (P < 0.01),="" återspeglade="" det="" att="" könshormonnivåerna="" i="" serum="" är="" störda="" i="" mps-mössen.="" alla="" grupper="" av="" möss="" minskar="" signifikant="" med="" nivån="" av="" lh="" i="" serum="" jämfört="" med="" bc="" (p="">< 0.01).="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" förbättra="" e2,="" t="" och="" minska="" nivån="" av="" lh,="" fsh="" i="" serum="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0,01).="" mössen="" i="" lpgc="" kan="" förbättra="" e2="" något="" och="" minska="" nivån="" av="" fsh="" i="" serum="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 6. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på E2, T, LH, FSH i mössen. Nivån av E2, T, LH och FSH registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

3.5. Observation av de patologiska morfologiska förändringarna i livmodern

Som visas i Fig. 7, Fig. 8, med mikrometerskalan, visar de morfologiska förändringarna av livmodern att MG-möss har signifikanta patologiska förändringar i livmodern jämfört med BC (P < 0.0="" 1).="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" förbättra="" de="" patologiska="" morfologiska="" förändringarna="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" mössen="" i="" mpgc="" kan="" förbättra="" de="" patologiska="" morfologiska="" förändringarna="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 7. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de patologiska morfologiska förändringarna av livmodern hos mössen. Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som foton för varje grupp.

Fig. 8. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de patologiska morfologiska förändringarna hos mössen. Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som de semikvantitativa kriterierna för att mäta livmodern, och den patologiska organisationsmorfologin kan delas in i fyra nivåer för varje grupp och beräkna antalet möss.

Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som de semikvantitativa kriterierna för att mäta livmodern, och den patologiska organisationsmorfologin kan delas in i fyra nivåer för varje grupp och beräkna antalet möss.

3.6. Mätning av tjockleken på tymisk cortex

Som visas i Fig. 9, Fig. 10, med mikrometerskalan, visar datumet för tjockleken på tymisk cortex att MG-möss är signifikant reducerade jämfört med BC (P < 0).="" 01),="" vilket="" indikerar="" att="" volymen="" av="" tymus="" minskar="" efter="" att="" mps-modellmöss="" har="" etablerats.="" mössen="" i="" hpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" tjockleken="" på="" tymisk="" cortex="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0,01).="" mössen="" i="" mpgc="" kan="" öka="" tjockleken="" på="" tymisk="" cortex="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 9. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de patologiska morfologiska förändringarna av tymus hos mössen. Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som foton för varje grupp.

Fig. 10. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på tjockleken av tymisk cortex hos mössen. Tjockleken på tymisk cortex registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

3.7. Mät tjockleken på mjältknöl

Som visas i fig. 11, fig. 12, med mikrometerskalan, visar datumet för tjockleken på mjältknöl att MG-möss är signifikant reducerade jämfört med BC (P < 0.01="" ),="" vilket="" indikerar="" att="" volymen="" av="" mjälte="" minskar="" efter="" etablering="" av="" mps-modellmöss.="" mössen="" i="" hpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" tjockleken="" på="" mjältknöl="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" mössen="" i="" mpgc="" kan="" öka="" tjockleken="" på="" mjältknöl="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 11. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de patologiska morfologiska förändringarna av mjälte hos mössen. Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som foton för varje grupp.

Fig. 12. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på tjockleken av mjältknölar i mössen. Tjockleken på mjältknölen registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

3.8. Beräkna antalet basofila celler och hypofysens främre cell

Som visas i Fig. 13, Fig. 14, visar datumet för numret av den basofila cellen och den främre hypofyscellen att MG-möss är signifikant reducerade jämfört med BC (P < 0.0="" 1),="" vilket="" indikerar="" att="" antalet="" cellkälla="" för="" sekretoriskt="" gonadotropin="" minskar="" efter="" att="" mps-modellmöss="" har="" etablerats.="" alla="" mottagna="" läkemedelsgrupper="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" antalet="" basofila="" celler="" jämfört="" med="" mg="" (p="">< 0.01).="" mössen="" i="" gc,="" hpgc="" och="" mpgc="" kan="" anmärkningsvärt="" öka="" antalet="" främre="" hypofysceller="" jämfört="" med="" mg="" (p=""><>

Fig. 13. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på de patologiska morfologiska förändringarna av hypofysen hos mössen. Förändringarna av den patologiska morfologiska rapporteras som foton för varje grupp.

Fig. 14. Effekter av GC, HPGC, MPGC och LPGC på antalet basofila celler och den främre hypofyscellen i mössen. Antalet basofila celler och den främre hypofysen registreras som medelvärde ± SD för varje grupp. Jämfört med modellgruppen^☆P < 0.05 och^☆☆P < 0.01, använde ANOVA med LSD-analysmetoderna.

4. Diskussion

Uppteckningar avmenopausalt syndromi gamla böcker är huvudsakligen utspridda i beskrivningen av "liljasjukdomen", "sicksack" syndrom, "melankoli", "onormal menstruation" och andra (Chen et al., 2015, Ma och Chen, 2015). För kvinnan över fyrtio år skars Yin Qi till hälften; Tiangui har torkat upp; njurens Qi minskade gradvis; Yin Jing var bristfällig; balansen mellan Yin och Yang gick förlorad. Dess huvudsakliga prestation var när menstruationsstörningar eller klimakteriet uppträder såsom tidvattenfeber och svettning, känslomässig irritabilitet, rastlöshet, hjärtklappning och sömnlöshet, ryggsmärtor, ödem i ansikte och lemmar, yrsel, tinnitus och hudkänsla som en myrkrypningssjukdom. Den kraftiga nedgången av njurens Qi är den inneboende orsaken till att menstruationen kommer eller avbryts. Njurbrist är grundorsaken till dettamenopausalt syndrom(Tan et al., 2013), och njuren är ursprunget till mänskligt liv, kallat den "medfödda grunden". Uppgången och fallet av njuressens dominerar tillväxten och reproduktionsfunktionen av mognad och nedgång (Wang och Huang, 2011). Studier har visat att nedgången i äggstockarnas funktion är essensen av njurbristsyndrom, och obalansen i njurens Yin och Yang är nära relaterad till störningen av endokrin sekretion och dysfunktion i det autonoma nervsystemet. Förändringen av E2, FSH och LH är ett uttryck för njurbrist och njur-Yin och Yang-obalans (Shi et al., 2007). Tonifierande njur-yang-läkemedel används för att reglera hormonnivån i hypotalamus-hypofysäggstocksaxeln eller spelar en direkt roll för att reglera ovariefunktionen. Modern kinesisk medicin anser att etiologin och patogenesen avmenopausalt syndromär njurbrist (Razali och Said, 2017).

Studien använde fullständig resektion av äggstockarna på båda sidor av ryggen för att reproducera MPS-mössmodellen. 90 procent östrogen av kvinnor utsöndrades av äggstocken och äggstocken togs bort. Det orsakade artificiellt nivån av östrogen som sänktes plötsligt och sedan simulerade MPS. Denna modell var den klassiska modellen, med hög framgångsfrekvens, stabilitet och tillförlitlighet, och så vidare. Genom självständiga aktiviteter och antalet stående, den latenta perioden för första inträde i mörkrummet och det elektriska numret, observerade vi förbättringen av inlärnings- och minnesfunktionen och nyfikenheten i den fräscha miljön av medicinen. Ovariefunktionen försämrades med minskad könshormonutsöndring. Dessutom ökade gonadotropinet hos MPS-patienter. Nivåerna av E2, T i serum var lägre än den personen utan MPS-symtomen, medan nivåerna av LH, FSH var signifikant högre än den personen utan MPS-symtomen. Därför, genom mätning av E2-, T-, FSH- och LH-nivåer i serum, kan det användas de visuella indikatorerna för identifiering av MPS, vilket återspeglar effekten av läkemedel på MPS-sjukdomen. Studien visade att ovariefunktionsnedgången var konnotationen av njurbrist, och förändringen av E2, T, FSH och LH var ett slags uttryck för njurbrist (Li et al., 2014, Cheng och Tian, ​​2012).Cistanchevar genom effekten av att fylla på njuren för att förbättra immuniteten (Zhang et al., 2009, Shareef et al., 2017).

Vi använde den njurpåfyllande medicinen för att behandla MPS, vilket var innovativt. Resultaten visade också att PGC kunde förbättra störningshormonnivån hos MPS-möss och öka nivåerna av E2, T, LH och FSH i serum. Samtidigt kan det förbättra de patologiska förändringarna i livmodern, brässen, mjälten och hypofysen hos möss, i enlighet med litteraturen att njurbrist är grundläggande vid MPS.

5. Sammanfattning

Våra studieresultat indikerade att PGC hade en bra terapeutisk effekt för MPS - det kan öka de oberoende aktiviteterna och antalet stående, den latenta perioden för första inträde i mörkrummet, inälvorna i tymus, mjälte och livmoder, E2, T as samt minska elnumret, LH och FSH. Fenyletanoidglykosiderna valdes iCistancheför den höga effektiviteten och bekvämligheten av MPS-forskningen för att förbättra behandlingen avperimenopausalt syndrom. Dess kvalitetsstandarder är lätta att kontrollera, vilket bidrar till innovativ forskning och industrialiseringsutveckling av läkemedel. Det ger ett nytt sätt att tänka för behandling av MPS.

Intressekonflikt

Författarna har ingen intressekonflikt att rapportera.

Erkännanden

Denna forskning stöddes av National Natural Science Foundation of China (81274154); Henan Science and Technology Innovation Team (2012IRTSTHN011); vetenskaps- och teknikinnovationsteamet i staden Zhengzhou (131PCXTD612); det viktigaste medicinska laboratoriet för omvandlingen av kinesisk medicin i staden Zhengzhou (121PYFZX1820).

Referenser

Chen et al., 2013 F. Chen, Z. Chen, XF Xing, SX Liu, TJ Zhang, CQ Chen Forskningsprocess iCistancheHerba Drug Eval. Res., 6 (2013), s. 469-475

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Chen et al., 2015 ZF Chen, XX Zhang, YY Zhao, X. Wang, YL Ren, HQ Liao, Y. Li, L. Zhao Datautvinning om akupunkturval vid behandling avperimenopausalt syndromWorld Chin. Med., 4 (2015), s. 482-489

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Cheng och Tian, ​​2012 K. Cheng, SL Tian Effekter av förebyggande elektroakupunktur av "Guanyuan"(CV4) och "Sanyinjiao"(SP6) på hypotalamus - hypofys - äggstocksaxel i ovarietomiserade råttorakupunktur. Res., 1 (2012), s. 15-19

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Gu et al., 2011 JH Gu, XH Yu, R. Wu, XK Zhao, L. Zhao Optimering av isolerings- och reningsteknologin för fenyletanoidglykosider frånCistancheTubulosa av Macroporous Adsorption Resin China Acad. J. Electron. Publ. House, 11 (2011), s. 1007-1009

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Halim och Phang, 2017 ANI Halim, IC Phang Salicylsyra mildrar pb-stress i Nicotiana tabacum Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), s. 16-19

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Ia, 2016 YM Ia Influensfaktorerna för perimenopausala kvinnors livskvalitet och motåtgärderna Chin. J. Clin. Rational Drug Use, 2B (2016), s. 154-155

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2010 Y. Li, YY Song, HQ Zhang Framsteg inom forskning om kemiska beståndsdelar och medicinsk aktivitet hosCistancheHaka. Wild Plant Resour., 1 (2010), s. 7-11

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2014 Y. Li, L. Xu, Z. Qian, K. Cheng Effekter av elektroakupunkturstimulering av "Sanyinjiao"(SP6) på hypotalamus-hypofys - äggstocksaxel i perimenopausala råttor akupunktur. Res., 3 (2014), s. 198-201

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Liu et al., 2013 X. Liu, CM Li, JD Gao, R. Wu Forskningens framsteg förCistancheHaka. J. Tradit. Med. Sci. Technol., 5 (2013), s. 575-577

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Ma et al., 2016 XZ Ma, QY Li, QF Chen, SN Li Forskningsframsteg för TCM-behandling avperimenopausalt syndromWorld J. Integr. Tradit. Western Med., 9 (2016), s. 1329-1332

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Ma och Chen, 2015 K. Ma, YX Chen Diskussion om strategin för behandling avperimenopausalt syndrommed kinesisk och västerländsk medicin, Kina J. Chin. Material, 2 (2015), s. 3899-3906

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Mustafa et al., 2017 G. Mustafa, R. Arif1, A. Atta, S. Sharif, A. Jamil Bioaktiva föreningar från medicinalväxter och deras betydelse för läkemedelsupptäckten i Pakistan Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), s. 17-26

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Nawaz et al., 2017 S. Nawaz, M. Shareef, H. Shahid, M. Mushtaq, M. Sarfraz En genomgång av den antihyperlipidemiska effekten av syntetiska fenoliska föreningar Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), s. 22-26

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Rashid et al., 2017 M. Rashid, MI Saleem, F. Deeba, MS Khan, SA Mahfooz, AA Butt, MW Abbas Säsongens effekt på förekomsten av mastit hos get hos skalbaggar i Faisalabad premiss Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), s. 19-21

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Razali och Said, 2017 MAA Razali, FM Said Rött pigmentproduktion av monascus purpureus i bioreaktor med rörd trumma Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), s. 13-15

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Shareef et al., 2017 M. Shareef, M. Jamal, M. Sarfraz En genomgång av antibakteriell aktivitet hos Nigella sativa i tarmen hos broilerkycklingar Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), s. 27-32

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Shi et al., 2007 HB Shi, YB Miao, SL Zhong, W. Wang, LP Wang Effekten av Fuchun Granule på det neuroendokrina systemet hos råttor med yinbrist i klimakteriet Chin. J. Tradit. Med. Sci. Technol., 1 (2007), s. 16-17

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Tan et al., 2013 XJ Tan, WH Li, YQ Zeng, SL Xu, J. Qin, JM Cui, NG Shi Diskutera underhållet avperimenopausalt syndromfrån patogenesen av njurbrist Lishizhen Med. Materia Medica Res., 9 (2013), s. 2212-2213

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Tu et al., 2011 PF Tu, Y. Jiang, YH Guo, XB Li, YZ Tian Studie omCistanchedeserticola och dess industriutveckling Chin. J. Pharmacol., 12 (2011), s. 882-886

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Wang och Huang, 2011 J. Wang, H. Huang Traditionell kinesisk medicin och traditionell kinesisk kultur Clin. J. Tradit. Haka. Med., 2 (2011), s. 95-105

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Wei och Miao, 2013 ZZ Wei, MS Miao Karakteristisk analys av förstärkande njure traditionell kinesisk medicin vid behandling avperimenopausalt syndromKina J. Chin. Med., 11 (2013), s. 1688-1691

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Wumaierjiang och Yao, 2016 YHF Wumaierjiang, G. Yao Framsteg i en experimentell studie om effekten avCistancheHunan J. Tradit. Haka. Med., 4 (2016), s. 193-195

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Yan et al., 2012 GH Yan, JH Tian, ​​BW Long, N. Li Framsteg inom fenyletanoidglykosider frånCistancheCentral South Pharm., 9 (2012), s. 692-695

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Zhao och Pan, 2013 W. Zhao, YN Pan Framsteg inom forskning om farmakologisk aktivitet av fenyletanoidglykosider iCistancheAsien-Stillahavsområdet. Med., 5 (2013), s. 77-79

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Zhang och Miao, 2011 Y. Zhang, MS Miao Studie av allmänt använd traditionell kinesisk medicin som tonifierar njure-yang vid behandling av klimakteriets syndrom China J. Chin. Med., 9 (2011), s. 1084-1087

Visa post i ScopusGoogle Scholar

Zhang et al., 2009 YZ Zhang, LL Yang, HF Song, Du. Yimin Anti-stress farmakologisk verkan avCistanchedeserticola och mekanismen: forskningsframsteg J. Int. Pharmaceut. Res., 5 (2009), s. 344-347

CrossRefView Record i ScopusGoogle Scholar

Från: Saudi Pharmaceutical Journal

Volym 25, nummer 4, maj 2017, sidor 537-547