Renoskyddande effekter av en Cistanche-baserad Bushen Kaixuan Tongluo-formel i Db/db-möss via aktivering av CAMP/PKA/CREB-signalvägen

3. Resultat

3.1 Effekter av den Cistanche-baserade Bushen Kaixuan Tongluo-formeln på det allmänna tillståndet hos db/db-möss

Möss i den tomma gruppen var aktiva och hade glansig päls. Däremot verkade möss i modellgruppen överviktiga, slöa och betydligt mindre aktiva. Möss i behandlingsgrupperna visade varierande grad av förbättring av allmäntillståndet jämfört med modellgruppen.

 

 

 

Cistanche-baserad Bushen Kaixuan Tongluo-formel om njur- och leverhälsa

 

3.2 Effekter av formeln på kroppsvikten hos db/db möss

Under hela experimentperioden ökade kroppsvikten hos möss i modellgruppen signifikant jämfört med den tomma gruppen (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Cistanche-baserad formelgruppen visade den mest uttalade effekten. (Se tabell 2)

3.3 Effekter på njurfunktionen

Jämfört med den tomma gruppen visade serumkreatinin (Scr) i modellgruppen en uppåtgående trend, men inte statistiskt signifikant, medan blodureakväve (BUN), urinalbumin (uALB) och albumin-till-kreatinin-kvoten (ACR) var signifikant förhöjda (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Effekter på leverfunktion och lipidmetabolism

Jämfört med blankgruppen ökade ALT, ASAT, totalkolesterol (TC) och triglycerider (TG) signifikant i modellgruppen (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Effekter på glukosmetabolism

Jämfört med den tomma gruppen var nivåerna av fasteblodsocker (FBG), leptin (LEP), glykosylerat serumprotein (GSP) och insulin (INS) signifikant förhöjda i modellgruppen (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Cistanche-baserad formelgrupp som visar den bästa effekten. (Se tabell 5)

 

3.6 Effekter på njurhistopatologi

HAN färgar: Den tomma gruppen visade normal njurarkitektur med regelbunden glomerulär morfologi och intakta tubulära epitelceller. Modellgruppen uppvisade oregelbundna glomeruli, måttlig mesangial cellproliferation, inflammatorisk infiltration och vakuolär degeneration i tubulära epitelceller. Dessa patologiska egenskaper lindrades i grupperna med låg-, medel- och högdosformel och irbesartan. (Se bild 1)

PAS-färgning: Den blanka gruppen visade minimal extracellulär matris (ECM) avsättning. Modellgruppen hade märkt ECM-ackumulering och förtjockade basalmembran. Behandlingsgrupperna visade varierande grad av förbättring. (Se bild 2)

Masson färgning: Den tomma gruppen avslöjade normal glomerulär struktur med minimal kollagenavsättning. Modellgruppen visade omfattande blåfärgat kollagen i glomeruli och njurinterstitium. De patologiska förändringarna lindrades i alla behandlingsgrupper. (Se bild 3)

 

3.7 Effekter på uttryck av p-PKA och p-CREB i njurvävnad

Jämfört med den tomma gruppen minskade p-PKA- och p-CREB-färgning i njurvävnaderna i modellgruppen signifikant (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 Effekter på p-PKA, PKA, p-CREB, CREB och Bcl-2 proteinuttryck

Jämfört med den tomma gruppen visade modellgruppen signifikant minskat uttryck av p-PKA/PKA, p-CREB/CREB och Bcl-2 (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Cistanche-baserad formelgrupp (P<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Diskussion

Även om litteratur om traditionell kinesisk medicin (TCM) inte uttryckligen beskriver diabetisk njursjukdom (DKD), stämmer symtom som skummande urin med TCM-tillstånd som "urin grumlighet" och "guan ge." Baserat på årtionden av klinisk erfarenhet utvecklade professor Lü CuiyanBushen Kaixuan Tongluo Formel, använderCistanchei stället för Astragalus som monarkörten för tonifiering av Qi och Yang, tillsammans med Aconite för att värma njuren och omvandla grumlighet.

Salvia och Hirudo agerar som vårdande örter för att aktivera blod och avblockera säkerheter, medan Saposhnikovia, Bombyx batryticatus och cikadslough driver ut vind och patogener. Rehmannia och Cornus ger näring åt njuressens; Achyranthes styr örter nedåt; Rosa laevigata, Euryale, Rubus och Cnidium konsoliderar essensen; Dioscorea stärker mjälte och njure. Kombinationen uppnår tonifiering av mjälte-njure, avlägsnande av grumlighet och stasisupplösning, vilket visar lovande klinisk effekt.

Moderna farmakologiska studier indikerar att formelns komponenter verkar på flera mål för att förbättra njurfunktionen:

Tanshinone IIAochhirudinhämmar TGF-/Smad-signalering, minskar fibros och mikrocirkulationsrubbningar

Saposhnikovia polysackaridernedreglera NF-KB-medierad inflammation

Iridoidglykosider från Cornusaktivera Nrf2/ARE-vägen för att förbättra antioxidantenzymer

Achyranthes sterolermodulerar PI3K/Akt-vägen, hämmar podocytapoptos

Dioscinaktiverar AMPK/mTOR för att reglera autofagi och epitelcellsmetabolism

DecAMP signalväg, central för cellulär energimetabolism och genuttryck, är avgörande för njurhomeostas. Adenylatcyklas (AC) genererar cAMP, som allosteriskt aktiverar PKA; aktiverad PKA fosforylerar CREB för att bilda p-CREB, som translokerar till kärnan och initierar transkription av målgener som t.ex.Bcl-2, främjar anti-apoptotiska effekter och minskar njurskador.

I DKD stör ihållande hyperglykemi cAMP-balansen genom att hämma AC-funktionen och förstärka PDE-medierad nedbrytning, vilket leder till minskade cAMP-nivåer. Detta försämrar PKA/CREB-signalering, äventyrar mitokondriell funktion, antioxidantförsvar och anti-apoptotisk genuttryck, accelererar glomerulär skleros och interstitiell fibros.

Forskning visar detaktivera cAMP/PKA-vägenhjälper till att bibehålla podocytslitsmembranets integritet och minska proteinuri. Dessutom,CREBtranskriptionellt inducerar antioxidantenzymer somSOD2, mildrar tubulär oxidativ stress.Bcl-2minskar också mitokondriellt ROS-läckage, skyddar podocyter och tubulära celler under hyperglykemi.

Att återställa normala glukosnivåer minskar AGE-ackumulering, lindrar förtjockning av basalmembranet och podocytskada. Förbättring av lipidprofiler minskar njurlipiddeposition och makrofaginfiltration, vilket fördröjer fibrosprogression.

Dock,forskning om hur Bushen Kaixuan Tongluo-formeln påverkar DKD via cAMP-vägen är fortfarande begränsad.

I denna studie användes db/db-möss för att simulera mänsklig DKD. DeCistanche-baserad formelsignifikant förbättrad njurfunktion, allmäntillstånd och metabola störningar hos möss, med gynnsamma leversäkerhetsprofiler. Histopatologi visade minskad glomerulär basalmembranförtjockning, mesangial expansion och interstitiell kollagenavlagring - kännetecknande DKD-lesioner.

På molekylär nivå, formelnuppreglerat mRNA och proteinuttryck av PKA, CREB och Bcl-2förstärkning av fosforylering av PKA och CREB, därigenomaktivera cAMP-vägen, förbättrar antioxidantkapaciteten och återställer filtreringsbarriärfunktionen.

Slutsats

DeCistanche-baserad Bushen Kaixuan Tongluo Formula:

Förbättrar lever- och njurfunktionen

Korrigerar glukos- och lipidmetaboliska störningar

AktiverarcAMP/PKA/CREB signalväg

Minskar njurfibros och oxidativ stress

Ger njurskydd vid DKD

Dessa fynd ger en farmakologisk grund för dess kliniska tillämpning och stödjer inriktning på cAMP-vägen som en potentiell strategi för DKD-behandling. Framtida forskning bör utforska nedströms molekyler som BDNF för att ytterligare belysa mekanismen.