Resultat från studien German Chronic Kidney Disease (GCKD) Support Association of Relative Telomere Length with Mortality in a Large Cohort of Patients with Moderate Chronic Kidney Disease
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nephrology. Publicerad av Elsevier Inc. Detta är en artikel med öppen tillgång under CC BY-licensen
Telomerlängden är känd för att vara omvänt associerad med åldrande och har föreslagits som en markör för åldranderelaterade sjukdomar. Telomernötning kan påskyndas av oxidativ stress och inflammation, båda är vanliga hos patienter med kronisk njursjukdom. Här undersökte vi om relativ telomerlängd är associerad med dödlighet i en stor kohort av patienter med kronisk njursjukdom stadium G3 och A1-3 eller G1-2 med öppen proteinuri (A3) vid inskrivningen. Relativ telomerlängd kvantifierades i perifert blod genom en kvantitativ PCR-metod hos 4 955 patienter från GCKD-studien, en pågående prospektiv observationskohort. Fullständig fyraårsuppföljning var tillgänglig från 4 926 patienter där vi registrerade 354 dödsfall. Relativ telomerlängd var en stark och oberoende prediktor för dödlighet av alla orsaker. Varje minskning av 0.1 relativ telomerlängdsenhet var starkt associerad med en 14 procents ökad risk för dödsfall (riskkvot 1,14 [95 procent konfidensintervall 1.06-1.22]) i en modell justerad för ålder, kön, baslinje eGFR, urinalbumin/kreatininförhållande, diabetes mellitus, utbredd hjärt-kärlsjukdom, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, rökning, body mass index, systoliskt och diastoliskt blodtryck, C-reaktivt protein och serumalbumin. Detta översattes till en 75 procent högre risk för de lägsta jämfört med den högsta kvartilen av relativ telomerlängd. Sambandet drevs huvudsakligen av 117 dödsfall i hjärt-kärlsjukdomar (1,20 [1.05-1.35]) samt 67 dödsfall på grund av infektioner (1.27 [1.07-1.50]). Således stödjer våra fynd ett samband mellan kortare telomerlängd med dödlighet av alla orsaker, kardiovaskulär dödlighet och död på grund av infektioner hos patienter med måttlig kronisk njursjukdom.
NYCKELORD:kronisk njursjukdom; infektioner; dödlighet; relativ telomerlängd
Kronisk njursjukdom(CKD) är en komplex sjukdom och dess ärftlighet har uppskattats till 30 procent –70 procent.
Emellertid förklarar index enkelnukleotidpolymorfismer vid de identifierade loci endast en mindre del av ärftligheten, och ytterligare genetiska bidragsgivare kan saknas. Hittills har endast ett fåtal små studier undersökt sambandet mellan TL och njursjukdom. Vissa studier fann att kort TL korrelerar med nedsatt njurfunktion i den allmänna befolkningen, 18,19 såväl som hos hjärtsviktspatienter.20 Vi beskrev nyligen signifikant kortare relativ TL (RTL) hos patienter med måttligt svår CKD som har utbredd kardiovaskulär sjukdom ( CVD),21 samt ett samband med varaktighet22 och progression av CKD.23 Patienter som har nått njursvikt behandlade med hemodialys beskrivs ha reducerad TL jämfört med friska kontroller,24–27 och reducerad TL är omvänt associerat med mortalitet. 28 Endast ett fåtal undersökningar har utförts på icke-dialysberoende njurpatienter.21–23,29,30 Såvitt vi vet är den aktuella studien den första prospektiva studien som undersöker sambandet mellan leukocyt-RTL och dödsorsaker i en stor icke-dialysberoende CKD-kohort.
Cistanche fördel: förbättra njurfunktionen
RESULTAT
Baslinjeegenskaper hos studiepopulationen
RTL kvantifierades i perifert blod genom en kvantitativ polymeraskedjereaktionsmetod hos 4955 patienter från tyskaKronisk njursjukdomstudie. En fullständig {0}}årsuppföljning var tillgänglig från 4926 patienter. Baslinjekarakteristika för dessa 4926 patienter enligt kvartiler av RTL ges i tabell 1. RTL varierade från ett minimum av {{10}}.40 till ett maximum av 2.31 (kompletterande figur S1) ), med ett medelvärde ± SD på 0.95 ±0.19 och en median på 0.92 (1:a kvartilen ¼ 0.82; 3:e kvartilen ¼ 1 .05). RTL var negativt korrelerad med ålder (r ¼ –{{30}},36, P < 0,001)="" och="" positivt="" korrelerad="" med="" uppskattad="" glomerulär="" filtrationshastighet="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" och="" urinalbumin–="" kreatininkvot="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" när="" vi="" justerade="" rtl="" för="" ålder="" och="" kön="" observerade="" vi="" inte="" längre="" en="" signifikant="" korrelation="" med="" egfr="" och="">
Prospektiv uppföljning och dödlighet
Totalt 354 dödsfall inträffade under en medianuppföljningsperiod på 4 år (1483 dagar). Dödsorsakerna var hjärt-kärlsjukdom inklusive hjärtinfarkt, kranskärlssjukdom, plötslig hjärtdöd, kongestiv hjärtsvikt, lungemboli, hjärtklaffsjukdom och ischemisk stroke (117 patienter, 33,1 procent), infektioner (67 patienter, 18,9 procent), icke-ischemisk cerebrovaskulär orsaker (9 patienter, 2,5 procent), perifer kärlsjukdom (7 patienter, 2,0 procent), njursvikt (8 patienter, 2,3 procent), olika andra orsaker (103 patienter, 29,1 procent) och okända orsaker ( 43 patienter, 12,1 procent).
Kumulativa incidensdiagram visar att incidensen av dödlighet av alla orsaker (Figur 1a) ökar med kortare RTL, med den högsta incidensen med lägsta RTL-kvartilen. I de kumulativa incidensfunktionskurvorna för kardiovaskulär (Figur 1b) och infektionsmortalitet (Figur 1c) var skillnaden mellan kvartilerna mindre uttalad, men kvartilernas ordning var densamma.
Figur 1|Kumulativ incidensfunktion för (a) dödlighet av alla orsaker, (b) dödlighet i kardiovaskulär sjukdom (CVD) och (c) död på grund av infektioner, med kvartiler (Q) av relativ telomerlängd (RTL). Q1 är kvartilen inklusive patienter med kortast RTL.
Resultat av Cox-regressionsmodeller som tillämpar olika justeringar ges i tabell 2 och visade ett signifikant samband mellan kortare RTL och risken för dödlighet av alla orsaker. Utvärderad kontinuerligt, var varje minskning av 0.1 RTL-enheter associerad med en 16 procents ökad risk för dödsfall i en modell justerad för ålder och kön (hazard ratio [HR], 1,16; 95 procent konfidensintervall [CI], 1.08–1.24; P ¼ 1.7e-05). Sambandet förblev signifikant efter en utökad justering för eGFR, urinalbumin–kreatininkvot, diabetes mellitus och utbredd hjärt-kärlsjukdom (modell 2: HR, 1,16; 95 procent CI, 1,08–1,24) samt de ytterligare CVD-riskfaktorerna låg densitet lipoproteinkolesterol, högdensitetslipoproteinkolesterol, rökning, body mass index, systoliskt blodtryck, diastoliskt blodtryck, C-reaktivt protein och serumalbumin vid baslinjen (modell 3: HR, 1,14; 95 procent CI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Icke-linjära P-splineanalyser ges i figur 2 och avslöjade en nästan linjär association av RTL med dödlighet av alla orsaker. Patienter med den kortaste RTL (1:a kvartilen) hade en 75 procent högre risk för dödlighet av alla orsaker jämfört med de i kvartilen med den längsta RTL (kompletterande tabell S1, helt justerad modell: HR, 1,75; 95 procent KI, 1,22–2,50 P ¼ 0,0024).
Därefter analyserade vi vad som driver sambandet mellan RTL och dödlighet av alla orsaker (tabell 2). Vi utvärderade de två vanligaste specifika dödsorsakerna och observerade att varje minskning av 0.1 RTL-enheter var associerad med en 20 procents ökad risk för CVD-död i den helt justerade modellen (HR, 1,2) 0; 95 procent KI, 1.05–1,35; P ¼ 0,0052). Minskad RTL var också signifikant omvänt associerad med död på grund av infektioner. Varje 0,1-enhetsminskning av RTL var associerad med en 1,27-faldigt högre risk för dödsfall på grund av infektioner (HR, 1,27; 95 procent CI, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Om man tittar på uppskattningarna för de olika kvartilerna i tilläggstabell S1 avslöjades för dödsfall på grund av infektioner att uppskattningarna för var och en av kvartilerna 1, 2 och 3 var lika förhöjda jämfört med den för kvartil 4. Analysen med andra dödsorsaker som såväl som okända dödsorsaker var uppenbarligen för heterogena och avslöjade inte något samband med RTL (data visas inte).
Grafen över de skalade Schoenfeld-resterna och testet på proportionella riskantaganden antydde inte några tidsvarierande effekter för RTL på något av de undersökta resultaten. Underdistributions-HR för både kardiovaskulär och infektionsdöd, rapporterade i tilläggstabell S2, är endast något försvagade jämfört med de orsaksspecifika HR:erna.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 i de helt justerade modellerna). Med tanke på att vi nyligen observerade ett U-format samband mellan varaktigheten av CKD och RTL,22 utförde vi en känslighetsanalys som dessutom justerade för varaktigheten av CKD vid baslinjen definierad som mindre än 6 månader, mellan 6 månader och 5 år och mer än 5 år. Denna ytterligare justering resulterade i endast marginella förändringar av HRs som erhölls för alla 3 endpoints (kompletterande tabell S3).
Cistanche fördel: förbättra njurfunktionen
DISKUSSION
Resultaten av denna studie visade ett signifikant samband mellan RTL och dödlighet av alla orsaker i en icke-dialysberoende CKD-kohort. Kortare RTL var associerad med en högre risk för dödlighet oberoende av njurfunktion och traditionella CVD riskfaktorer. Denna association drevs av död på grund av CVD såväl som död på grund av infektioner.
Samband med dödlighet av alla orsaker
Tidigare studier,5,6,31–35med få undantag,36,37 har visat ett negativt samband mellan RTL och dödlighet av alla orsaker i den allmänna befolkningen. Den största studien hittills (n ¼ 64 637) utfördes av Rode et al., med en justerad HR för dödlighet på 1,40 för decilen med den kortaste kontra decilen med den längsta RTL.35I enlighet med dessa resultat visade vår studie med varje minskning av 0.1 RTL-enheter en 14 procent högre risk för dödlighet av alla orsaker, vilket översätts till en 75 procent högre risk för de lägsta jämfört med de högsta kvartil av RTL. Såvitt vi vet har endast Carrero et al.28har undersökt sambandet mellan RTL och mortalitetsrisk hos CKD-patienter. De studerade 175 patienter med njursjukdom i slutstadiet som behandlats med hemodialys, av vilka 70 dog under en median av 31 månaders observation. Författarna observerade att TL oberoende förutspådde patientöverlevnad efter ytterligare justering för ålder, kön och inflammation. Den aktuella studien utvidgar dessa observationer till den mycket större gruppen av individer med CKD som inte behöver dialys.
Figur 2|Justerade olinjära splines (och 95 procents konfidensband) för sambandet mellan ökande relativ telomerlängd (RTL) och hazard ratio (HR) för (a) dödlighet av alla orsaker, (b) kardiovaskulär död och (c) död på grund av infektioner . HR ges som log-skala på skatterna. Grayline: justeringsmodell 1 (justerad för ålder och kön). Blueline: justeringsmodell 3 (justerad för ålder, kön, uppskattad [forts.]
Samband med CVD-dödlighet
Inga studier har hittills undersökt sambandet mellan RTL och CVD-mortalitet hos CKD-patienter, även om detta är den främsta dödsorsaken hos dessa patienter. Beroende på den undersökta etniciteten och på datajusteringsmodellerna rapporterade vissa, men inte alla, studier i den allmänna befolkningen ett samband mellan låga RTL- och CVD-resultat.33,38–41Starkt stöd för ett orsakssamband kom från en mendelsk randomiseringsstudie där genetiska varianter associerade med kortare RTL visade sig vara associerade med ischemisk hjärtsjukdom.40I den aktuella studien identifierade vi ett signifikant samband mellan RTL och kardiovaskulära dödsfall, med en 20 procent högre risk med varje minskning av RTL med 0.1 enheter, eller en 75 procent högre risk för dessa patienter i kvartilen med kortast TL jämfört med kvartilen med längst TL. Detta fynd är i linje med vår tidigare rapport om ett samband med vanliga kardiovaskulära händelser i denna patientpopulation: varje minskning av RTL med 0,1 enheter var signifikant associerad med 6 procent högre odds för utbredd hjärt-kärlsjukdom i en modell som justerade för ålder, kön, nuvarande rökning, högt blodtryck, diabetesstatus, lågdensitetslipoproteinkolesterol, högdensitet
lipoprotein kolesterol, C-reaktivt protein, eGFR och body mass index.21Den prospektiva uppföljningen av dessa patienter i föreliggande undersökning visade att särskilt den lägsta kvartilen av RTL var associerad med en markant ökad risk, medan de andra 3 kvartilerna visade mycket liknande uppskattningar (Figur 1b).
Samband med dödsfall på grund av infektioner
Även om experimentella bevis stöder en roll av cellåldring och kort TL vid nedsatt immunsvar, är epidemiologiska studier sparsamma, särskilt hos CKD-patienter. Helby et al. genomförde den största (n ¼ 75 309) prospektiva populationsbaserade studien som undersökte RTL och risken för sjukhusvistelse för infektionssjukdomar och risken för infektionsrelaterad död. Under 7 års uppföljning observerade de en högre risk för eventuella infektioner i kvartilen med den kortaste jämfört med kvartilen med den längsta RTL.42 Tidigare studier med mindre provstorlekar rapporterade motstridiga resultat.32,43,44Våra fynd hos CKD-patienter beskriver för första gången sambandet mellan kort RTL och högre risk för dödsfall på grund av infektioner i denna högriskpopulation.
Cistanche fördel: förbättra njurfunktionen
Potentiell mekanism
Den biologiska mekanismen som ligger bakom sambandet mellan RTL och dödlighet är fortfarande oklart. Sambandet som identifierats av vår studie klargör inte huruvida RTL-förkortning är kausalt relaterad till hjärt-kärlsjukdom och infektioner. En genomomfattande associationsstudie följt av en genetisk riskpoänganalys som kombinerar blyvarianter vid 7 genetiska loci visade dock ett samband mellan allelerna associerade med kortare RTL med ökad risk för kranskärlssjukdom. Detta fynd ger möjligt stöd för en potentiell orsaksroll för RTL i CVD.45,46Vidare kan cellulär senescens inducerad av telomernötning vara en utlösare av åderförkalkning såväl som åderförkalkning. Ansamlingen av åldrande celler i kärlet bidrar till bildning av aterosklerotisk plack och mediakalcifikationer, vilket resulterar i ökad artärstelhet som ett dominerande kännetecken för uremisk artärsjukdom.47De flesta av studierna har mätt RTL i DNA från perifera leukocyter. Emellertid har en nära korrelation visats mellan leukocyt och aortaväggsvävnad TL.48Därför kan cellulär senescens påverka endotelceller vilket leder till dysfunktion i kärlväggen och främja vidhäftningen av immunceller, en primär händelse vid åderförkalkning. Vidare aktiverar korta telomerer p53 och autofagi i hjärtfamiljsceller, vilket destabiliserar balansen mellan vila och spridning mot differentiering och åldrande, vilket leder till en utmattning av hjärtfaderceller.49Telomerdysfunktion har visat sig inducera djupgående p53-beroende repression av huvudregulatorerna för mitokondriell biogenes och funktion, vilket leder till bioenergetisk kompromiss på grund av nedsatt oxidativ fosforylering och generering av adenosintrifosfat.50,51
Det finns också flera kopplingar mellan RTL och infektioner. Förlusten av telomerer har observerats under T-cellsdifferentiering,52vid kroniska virusinfektioner,53och med åldern.54Vidare har kort leukocyt-TL rapporterats som en riskfaktor vid olika immunrelaterade sjukdomar55och diabetes.56Leukocytkortare TL orsakar cellåldring som följs av en minskning av immuncellernas proliferativa kapacitet. TL kan också vara involverad i åldersrelaterad nedgång i immunfunktion relaterad till otillräckligt svar på vacciner och akuta infektioner.57–59En potentiell roll för TL i infektioner stöds också av en nyligen genomförd genomomfattande associationsstudie i en kinesisk befolkning. Dorjee och kollegor observerade ett samband mellan en TL-reducerande allel och död på grund av luftvägsinfektion.60RTL-förslitning kan vara starkt utlöst av närvaron av förhöjd oxidativ stress, ett vanligt tillstånd vid kronisk lungsjukdom.61 Flera in vitro och in vivo studier visade att oxidativ stress påskyndar telomernötning.62,63Faktum är att telomerer, med sitt höga guanininnehåll, är mycket mottagliga för oxidativ skada,64och enkelsträngade DNA-avbrott inducerade av oxidativ stress kan vara en viktig faktor för telomerförkortning under DNA-replikation.65
Cistanche fördel: förbättra njurfunktionen
Styrkor och begränsningar
Styrkor med denna undersökning inkluderar den stora urvalsstorleken av en väldefinierad population med en medianuppföljning på 4 år med nästan ingen förlust till uppföljning, homogenitet i studiepopulationen och en centraliserad bedömning av TL och resultatmått. Speciellt mätningen av RTL är av yttersta vikt eftersom standardisering mellan laboratorier inte är lätt att genomföra och därför bör processen utföras i samma laboratorium under exakt samma förhållanden vad gäller protokoll, referensgen, instrument, personal,66 och DNA utvinningsförfarande.67
Det finns vissa begränsningar för denna studie. Först mättes RTL i perifera leukocyter. Det är känt att hastigheten för progression till åldrande skiljer sig mellan lymfocytundergrupper. 59Tyvärr fanns inga uppgifter tillgängliga om blodkroppstypssammansättning på tyskaKronisk njursjukdomstudie och det var därför inte möjligt att undersöka denna aspekt. Att känna till RTL från olika njurcellstyper skulle vara av intresse, men det är inte möjligt att få fram i en stor epidemiologisk studie eftersom detta skulle kräva vävnadsmaterial från biopsier. Den andra begränsningen inkluderar studiens observationsdesign, som inte tillåter klargörande av kausalitet eller biologisk mekanism. För det tredje rekryterade studien huvudsakligen CKD-patienter i stadium G3 eller A3, och resultaten kanske inte kan generaliseras till andra stadier av CKD. För det fjärde kan sambandet med specifika dödsorsaker ha begränsats av statistisk styrka men var fortfarande närvarande för de två specifika huvudorsakerna till dödsfall. Slutligen, även om våra analyser justerades för traditionella kardiovaskulära riskfaktorer såväl som njurfunktionsparametrar, kan vi inte utesluta möjligheten av kvarvarande confounding av okända eller omätta
variabler. Det var dock mycket intressant att se att de ålders- och könsjusterade skattningarna av RTL för olika utfall var mycket stabila med ytterligare justering för de andra variablerna, vilket tyder på att RTL är relativt oberoende av andra variabler när data justeras för ålder och kön.
Slutsatser
Kort relativ TL kvantifierad från perifera blodleukocyter var oberoende associerad med dödlighet av alla orsaker under 4 års uppföljning hos patienter med måttligt svår CKD. Denna association drevs av död på grund av CVD såväl som död på grund av infektioner.
Cistanche fördel: förbättra njurfunktionen
METODER
Studera befolkning
TyskenKronisk njursjukdom study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min per 1,73 m2 i närvaro av tydlig proteinuri (stadium G1–G2, A3). Uteslutningskriterier var icke-kaukasisk etnicitet, solid organ- eller benmärgstransplantation, aktiv malignitet inom 24 månader före screening, New York Heart Association Steg IV hjärtsvikt och laglig närvaro eller oförmåga att ge samtycke. De presenterade laboratorieparametrarna mättes alla från insamlade bioprover i ett centralt laboratorium som beskrivits tidigare.68 Information om sociodemografiska faktorer, medicinsk historia och familjehistoria, mediciner och hälsorelaterad livskvalitet erhölls av utbildad personal genom standardiserade frågeformulär. Prevalent kardiovaskulär sjukdom vid baslinjen definierades som en historia av icke-dödlig hjärtinfarkt, kranskärlsbypasstransplantation, perkutan transluminal kranskärlsangioplastik, stroke och ingrepp vid halspulsådrorna (karotisendarterektomi och/eller karotisballongangioplastik eller stentimplantation).
Alla deltagare lämnade skriftligt informerat samtycke, och studien godkändes av de etiska kommittéerna för alla deltagande institutioner och registrerades i det nationella registret för kliniska studier (DRKS 00003971). Alla metoder utfördes i enlighet med godkända riktlinjer och Helsingforsdeklarationen. Data samlas in och hanteras med hjälp av Askimed (https://www.askimed.com) som en molnbaserad webbplattform för insamling och hantering av fallrapportformulär och laboratoriedata.
Kliniska effektmått under prospektiv uppföljning
Som beskrivits nyligen följs 69 patienter på årsbasis av utbildad personal som alternerar ansikte mot ansikte med telefonbesök. Under dessa besök uppdateras data om sjukhusinläggningar, utfallshändelser och medicinsk historia som en del av en strukturerad intervju. Eventuella utskrivningsrapporter från sjukhuset samlas in från behandlande läkare och/eller sjukhus. Endpoints abstraheras kontinuerligt från dessa rapporter av en utbildad och övervakad endpoint-kommitté bestående av 3 oberoende läkare enligt en förspecificerad endpoint-katalog. Information om dödsorsaken hämtas från dessa rapporter såväl som från dödsintyg som samlas in från folkbokföringskontor närhelst studiepersonalen informeras om en studiedeltagares död.
Den aktuella analysen inkluderar alla slutpunkter som inträffade fram till 4-årsuppföljningen. Om en patient missade det 4-års uppföljningsbesöket inkluderade vi alla effektmått fram till 4,5 år efter respektive baslinjebesök. Därför var censurtiden antingen 4-års uppföljningsdatum eller 4,5 år efter baslinjen. Det primära resultatet var dödlighet av alla orsaker. För att utvärdera om identifierade samband kunde hänföras till en specifik dödsorsak ansågs dödsfall från kardiovaskulära orsaker och infektionssjukdomar som sekundära utfall. Gruppen av CVD-död inkluderade hjärtinfarkt, kranskärlssjukdom, plötslig hjärtdöd, kongestiv hjärtsvikt, lungemboli, hjärtklaffsjukdom och ischemisk stroke. Andra dödsorsaker registrerades också, men dessa undergrupper var inte tillräckligt stora för att genomföra ytterligare orsaksspecifika analyser.
Mätning av RTL
Genomiskt DNA extraherades från helblod i ett centralt laboratorium med Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Tyskland). Den aktuella analysen baserades på 4926 patienter för vilka mätningar av RTL i baslinjeblodprover och data om mortalitet fanns tillgängliga. RTL mättes i fyrdubbla med användning av en kvantitativ polymeraskedjereaktionsbaserad analys utvecklad av Cawthon70 och modifierad enligt tidigare beskrivning.71 DNA-prover kördes i 15-ml reaktioner innehållande 1x Quantifast TM SYBR Green PCR-mastermix (Qiagen, Hilden, Tyskland), 10 ng DNA, 1 mM telomerprimer eller 250 nm housekeeping gen 36B4 primer. Vi bestämde det relativa förhållandet mellan telomerupprepningskopietal (T) till enkelkopiagenkopianummer (36B4-gen, kodande för ribosomalt fosfoprotein PO, lokaliserat på kromosom 12; S). T/S-förhållandena är proportionella mot individuella RTL. Automatiseringen av denna procedur med hög genomströmning resulterade i mycket bra kvalitetskontrollåtgärder med en låg inter-assay-variationskoefficient för T/S-förhållandena. Ett kommersiellt tillgängligt DNA inkluderat i alla kvantitativa polymeraskedjereaktionsplattor användes för att kontrollera analysens prestanda under hela studien. Interassay-variationskoefficienten för T/S-förhållanden för detta prov analyserade i 112 oberoende experiment var 9,6 procent före normalisering och minskade till 4,0 procent efter normalisering (kompletterande figur S2).
Statistisk analys
Vi jämförde baslinjeegenskaper hos deltagarna (tabell 1) med Kruskal-Wallis-testet för kontinuerliga variabler och chi-kvadrattest för kategoriska variabler. Kumulativa incidensfunktionskurvor användes för att uppskatta den kumulativa incidensen av de olika dödsorsakerna som står för den konkurrerande risken.72 Cox proportional hazards regressionsmodeller utfördes för att utvärdera sambanden mellan RTL med 3 utfall: (i) dödlighet av alla orsaker, ( ii) död på grund av hjärt-kärlsjukdom och (iii) död på grund av infektioner. För båda orsaksspecifika effektmåtten (ii och iii) censurerades patienterna om döden inträffade av någon annan orsak. Dessutom undersöktes samband med dessa orsaksspecifika effektmått med hjälp av överlevnadsregression med konkurrerande risker, där alla dödsfall av andra orsaker betraktades som konkurrerande händelser. Därför rapporteras både orsaksspecifika HR och underavdelningar för dödsfall på grund av CVD eller infektioner. Cox proportionella riskmodeller monterades med hjälp av tre olika nivåer av justering: modell 1 justerad för ålder och kön; modell 2 dessutom justerad för baslinje eGFR, urin albumin-kreatinin ratio, utbredd CVD och diabetes; modell 3 ytterligare justerad för de traditionella CVD-riskfaktorerna för lågdensitetslipoproteinkolesterol, högdensitetslipoproteinkolesterol, body mass index, rökning, systoliskt och diastoliskt blodtryck, C-reaktivt protein och albumin. Valet av variabler som justerats för i de olika modellerna baserades på skillnaderna i de kliniska egenskaperna mellan kvartilerna av RTL som anges i tabell 1. I regressionsmodellerna analyserades RTL kontinuerligt och som en kategorisk prediktor (i kvartiler av RTL). Med tanke på att initiala resultat indikerade en högre risk, särskilt för låga värden på RTL, rapporteras den (orsaksspecifika) HR också för kvartilerna 1, 2 och 3 jämfört med kvartil 4 som referens (kompletterande tabell S1). Ytterligare nedströmsanalys baserades på visuell inspektion av P-spline för att härleda formen på sambandet mellan RTL och dödlighetsrisk. Vi använde Spearmans rankkorrelationskoefficient för att bedöma sambandet mellan studievariabler. Alla statistiska analyser utfördes med användning av R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-värden<0.05 were="" considered="" statistically="">
REFERENSER
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. En mycket konserverad repetitiv DNA-sekvens, (TTAGGG)(n), närvarande vid telomererna hos mänskliga kromosomer. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Telomerdynamik i mänskliga celler. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomerer som biomarkörer för åldrande och åldersrelaterade sjukdomar. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Telomerlängd vid Parkinsons sjukdom: en metaanalys. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Leukocyttelomerlängd och alla orsaker, hjärt- och kärlsjukdomar och cancerdödlighet: resultat från en metaanalys av data från enskilda deltagare av 2 stora prospektiva kohortstudier. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Telomerlängd och dödlighet av alla orsaker: en metaanalys. Åldrande Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomerer och telomeras i njurhälsa. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Finns det ett samband mellan inflammation, telomerasaktivitet och transkriptionsstatus för telomeras omvänt transkriptas vid njursvikt? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Genetisk mottaglighet för kronisk njursjukdom - några fler bitar för ärftlighetspusslet. Främre Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Den familjära klustringen av njursjukdom och relaterade fenotyper. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Genomomfattande studier för att identifiera riskfaktorer för njursjukdom med fokus på patienter med diabetes. Nephrol Dial Transplantation. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Insikter i njursjukdomar från genomomfattande associationsstudier. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Association av eGFR-relaterade loci identifierade av GWAS med incident CKD och ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM, et al. Genetiska loci som påverkar njurfunktionen och kronisk njursjukdom. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Nya loci associerade med njurfunktion och kronisk njursjukdom. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Genetiska associationer vid 53 loci framhäver celltyper och biologiska vägar som är relevanta för njurfunktionen. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et al. En katalog över genetiska loci associerade med njurfunktion från analyser av en miljon individer. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Samband mellan njurfunktion och telomerlängd: hjärt- och själsstudien. Am J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. Kort telomerlängd är associerad med nedsatt njurfunktion hos japanska personer med kardiovaskulär risk. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. Njurdysfunktion är associerad med kortare telomerlängd vid hjärtsvikt. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Association av relativ telomerlängd med kardiovaskulär sjukdom i en stor kronisk njursjukdomskohort: GCKD-studien. Åderförkalkning. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Har telomerer högre plasticitet än trott? Resultat från den tyska studien om kronisk njursjukdom (GCKD) som en högriskpopulation. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Association av relativ telomerlängd med progression av kronisk njursjukdom i två kohorter: effektmodifiering genom rökning och diabetes. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. För tidigt åldrande av cirkulerande T-celler hos patienter med njursjukdom i slutstadiet. Kidney Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Telomerisk G-svanslängd och sjukhusvistelse för kardiovaskulära händelser hos hemodialyspatienter. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Stressinducerad för tidig åldrande i mononukleära celler från patienter på långvarig hemodialys. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Telomerasaktiviteten är minskad i perifera mononukleära blodceller hos hemodialyspatienter. Am J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Telomernötning är associerad med inflammation, låga fetuin-A-nivåer och hög dödlighet hos vanliga hemodialyspatienter. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Telomernötning, njurfunktion och utbredd kronisk njursjukdom i USA. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Telomerasaktivitet hos patienter med stadium 2–5D kronisk njursjukdom. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Samband mellan fett, telomerlängd och dödlighet: data från NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Leukocyttelomerlängd och dödlighet i kardiovaskulär hälsostudie. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Leukocyttelomerlängd och dödlighet i National Health and Nutrition Examination Survey, 1999–2002. Epidemiologi. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Telomerlängd och dödlighet i Ludwigshafen risk och kardiovaskulär hälsa studie. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Leukocyttelomerlängd och dödlighet i perifert blod bland 64 637 individer från den allmänna befolkningen. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Leukocyttelomerlängd och dödlighet bland amerikanska vuxna: effektmodifiering genom fysisk aktivitetsbeteende. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et al. Leukocyttelomerlängd och epigenetisk baserad riskpoäng för dödlighet: samband med dödlighet av alla orsaker bland äldre vuxna. Epigenetik. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Samband mellan förkortad leukocyttelomerlängd och kardiometabola utfall: systematisk översikt och metaanalys. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Leukocyttelomerlängd och risk för hjärt-kärlsjukdom: systematisk översikt och metaanalys. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Kort telomerlängd och
ischemisk hjärtsjukdom: observationsstudier och genetiska studier på 290 022 individer. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Leukocyttelomerlängd och kardiovaskulär sjukdom hos afroamerikaner: Jackson Heart Study. Åderförkalkning. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. Kortare leukocyttelomerlängd är associerad med en högre risk för infektioner: en prospektiv studie av 75 309 individer från den allmänna befolkningen. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Samband mellan telomerlängd i blod och dödlighet hos personer som är 60 år eller äldre. Lansett. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Samband mellan telomerlängd, specifika dödsorsaker och år av hälsosamt liv i hälsa, åldrande och kroppssammansättning: en befolkningsbaserad kohortstudie. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Identifiering av sju loci som påverkar genomsnittlig telomerlängd och deras samband med sjukdom. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Telomerlängd och risk för hjärt-kärlsjukdom. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. CDKN2A/p16INK4a-uttryck är associerat med vaskulär progeri vid kronisk njursjukdom.
Åldrande (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Blodleukocyttelomer-DNA-innehåll förutsäger vaskulär telomer-DNA-innehåll hos människor med och utan vaskulär sjukdom. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Korta telomerer inducerar p53 och autofagi och modulerar åldersrelaterade förändringar i hjärtats stamcellers öde. Stamceller. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Transkriptionskoaktivatorerna PGC-la och PGC-lb kontrollerar överlappande program som krävs för perinatal mognad av hjärtat. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomerer och mitokondrier i det åldrande hjärtat. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Telomerfluorescensmätningar i granulocyter och T-lymfocytundergrupper pekar på en hög.
