Samtidig bestämning av echinakosid och 2,3,5,4'-tetrahydroxistilben-2-Ο- -D-glukosid i Congrong Tongbian oral vätska med HPLC

Abstrakt:Målet var att samtidigt bestämma echinakosid och 2,3,5,4'-tetrahydroxistilben-2-Ο- -D-glukosid i Congrong digestive oral vätska med HPLC. Tech Mate C18-ST (4,6 mm×250.0 mm, 5 μm) kolonn användes med gradienteluering med acetonitril-0.2 % myrsyralösning; detektionsvåglängden var 330nm; flödeshastigheten var 1,0 mL/min. Resultaten visade att echinakosid och 2,3,5,4'-tetrahydroxistilben-2-Ο- -D-glukosid i provet gav en bra upplösning från de intilliggande kromatografiska topparna med ett bra linjärt samband inom området 0 .159 3-0.955 8 ug och 0.385 3-4.623 5 ug. Den etablerade metoden är enkel och exakt och kan användas för att bestämma echinakosid och stilbenglykosid i Congrong matsmältningsvätska.

Nyckelord:Congrong Degestive oral vätska;echinakosid; 2,3,5,4'-tetrahydroxistilben-2-Ο- -D-glukosid; HPLC

ORGANISKT CISTANCHEEXTRAKT MED 30 % ECHINACOSID OCH 12 % ACTEOSIDE

De nuvarande kvalitetsstandarderna förCistanche RongDigestive Oral Liquid har problem som enkla testartiklar, dålig funktionalitet och besvärliga och tidskrävande operationer. Utöver de allmänna inspektionsartiklarna har standarden endast tunnskiktsidentifieringsartiklar för Polygonum multiflorum och Citrus aurantium samt Polygonum multiflorum och Citrus aurantium. Den faktiska identifieringsmetoden för tunnskiktskromatografi är inte tillräckligt rigorös och har dålig funktionsduglighet. Innehållsbestämningsobjektet använder ultraviolett spektrofotometri för att detektera 1,8-dihydroxiantrakinon i Cistanche purpurea oral vätska. Eftersom denna metod kräver flera återflödesextraktioner är operationen besvärlig och tidskrävande, och reproducerbarheten och noggrannheten är dålig. Kvaliteten på de ursprungliga medicinska materialen kan inte kontrolleras, och kvalitetskontrollen av kungdrogen Cistanche deserticola saknas. I detta standardforskningsarbete, fastställandet avechinaceaside i Cistanche deserticolaochstilbenglykosid i Polygonum multiflorumi Cistanche deserticola Oral Liquid studerades. Baserat på formelns sammansättning och processens egenskaper etablerades en högpresterande flytande fas. Den kromatografiska metoden användes för att bestämma echinakosid och stilbenglykosider i Cistanche Rong digestive Oral Liquid, och dess innehållsgränser formulerades för att ytterligare förbättra och förbättra kvalitetskontrollstandarderna. Bestämningsmetoden är enkel och snabb, och innehållsgränserna är rimligt formulerade. Efter metodologisk verifiering är noggrannheten, precisionen, linjäriteten, hållbarheten och intervallnoggrannheten bra, och de kan användas för att bestämma innehållet i Cistanche Rong Tongbang Oral Liquid [1-5].

1 Instrument och reagens

1.1 Instrument

Waters högpresterande vätskekromatograf (2695 och ARC); 1/100,000 elektronisk balans (MS205DU), 1/10,000 elektronisk balans (ME204E, Mettler-Toledo).

1.2 Testa läkemedel och reagenser

Echinacea-sida (batchnummer 110670-201706, renhet 89,7 %); stilbenglykosid (batchnummer 110844-201915, renhet 90,7%), allt tillhandahållet av China Institute of Food and Drug Control; Cistanche purpurea oral vätska (batchnummer 20191204, 20191205, 20191206, 20200404, 20200405, 20200406, 20200407, 20200408, 20200408, 0902 i företaget, 0902 Gansu; metanol, etc. är kromatografiskt rena; vatten är ultrarent vatten; andra reagenser är av analytisk kvalitet.

2 Metoder och resultat

2.1 Kromatografiska förhållanden

Använd Tech Mate C{{0}}ST (4,6 mm × 250.0 mm, 5 μm) som kromatografisk kolumn, använd acetonitril som mobil fas A och använd 0,2 % myrsyralösning som mobil fas B. Utför gradienteluering enligt bestämmelserna i Tabell 1; kolonntemperatur Temperaturen är 35 grader; detekteringsvåglängden är 330 nm; flödeshastigheten är 1,0 ml/min; injektionsvolymen för testprovet och referenssubstansen är 10 µL vardera; antalet teoretiska plattor bör inte vara mindre än 4000 baserat på echinaceaside-toppen.

2.2 Beredning av lösning

Beredning av referenslösning: Ta lämpliga mängder echinaceaside-referensämne och stilbenglykosid-referensämne, väg dem noggrant och tillsätt 70% metanol för att framställa en blandad lösning innehållande 70 ug echinaceaside och 150 ug. stilbenglykosid per 1 ml. , det är allt. Beredning av testlösningen: Skaka produkten väl, ta cirka 0,3 g, väg den noggrant, lägg den i en 25 ml brun mätflaska, tillsätt en lämplig mängd 70 % metanol, sonikera i 30 minuter, låt den svalna, tillsätt 70 % metanol för att späda till Skala, skaka väl, filtrera och ta det återstående filtratet för att få det. Beredning av negativ provlösning: Väg exakt ca 0,3 g av det negativa provet och förbered det enligt beredningsmetoden för testlösningen.

Figur 1 HPLC-kromatogram av Congrong digestive oral vätska

2.3 Metodöversikt

2.3.1 Arbetskurva och linjärt område

Rita den blandade referenslösningen exakt och tillsätt 70 % metanol för att förbereda en serie blandade referenslösningar. Dra exakt 1{{20}} µL av var och en av ovanstående serie av kontrolllösningar, injicera den i vätskekromatografen och mät toppareans integrerade värde. Ta koncentrationen av referenslösningen (µg/ml) som ordinatan (x) och toppareans integrerade värde som abskissan (y). Rita en graf för att få en rät linje som går genom origo. Regressionsekvationen är y1=1.510 4×106x-1.177 2×105 (r=0.999 9), {{10} }.644 0×106x-6.3836×105 (r=0.999 9). Resultaten visar att echinaceaside och stilbenglykosid har ett bra linjärt samband i massintervallet 0.159 3 till 0.955 8 ug och 0.385 3 till 4.623 5 ug.

Cistanche Tubulosa

2.3.2 Precisionstest

Dra exakt 10 µL av den blandade referenslösningen och upprepa injektionen 6 gånger under "2.1" kromatografiska förhållanden. RSD för toppareorna av echinakosid och stilbenglykosid uppmättes till 0,66 % respektive 0,59 %, vilket indikerar att instrumentets precision är bra.

2.3.3 Stabilitetstest

Enligt metoden under "2.1", ta denna produkt (batchnummer 20191205) för att göra en testlösning, injicera prover för mätning vid 0 h, 4 h, 8 h, 12 h, 20 h och 24 timmar efter beredning och registrera topparean. , är den relativa standardavvikelsen mellan 2,37 % och 2,79 %. Resultaten visar att testlösningen är stabil inom 24 timmar.

2.3.4 Repeterbarhetstest

Ta 6 alikvoter av samma sats av testprover (satsnummer 20191205) och injicera prover för mätning enligt de kromatografiska förhållandena under "2.1". Resultat Den relativa standardavvikelsen för echinaceaside var 1,48 %, med god repeterbarhet; den relativa standardavvikelsen för stilbenglykosid var 1,10 %, med god repeterbarhet.

Cistanche Tubulosa

2.3.5 Bestämning av återvinningsgrad

Använd provtillsats och återvinning för att tillhandahålla 50% av provmängden (0,3 g) av testprovet och provinnehållet på 1.0:0 .5, 1.{{10}}:1.0, 1.0:1.5, respektive, och absorberar referensämnets reservlösning 1 (echinacea-glykosidhalten är exakt 0.431 5 mg/mL) 1.0 mL, 2.0 mL och 3.0 mL vardera, och tillsätt sedan referensämnesstamlösning 2 (stilbenglykosid) noggrant masskoncentration 0,8678 mg/ml) 1,25 mL, 2,50 mL respektive 3,75 mL. Tillsätt till 25 mL mätkolvar respektive med hjälp av

Föna med en kväveblåsare. Väg sedan noggrant 9 prover av samma batch med känt innehåll (batchnummer 20191205, echinaceaside-innehållet är 7.810 2 mg/g, stilbenglykosidinnehållet är 14.232 4 mg/ g), och provtagningsmängden för varje prov är. Provmängden av testprovet är cirka 0,15 g. Tillsätt den till ovanstående mätkolv. Förbered den enligt metoden under testlösningen. Mät det enligt lagen. Beräkna återvinningsgraden. Resultatet är enkelt.

Den genomsnittliga återvinningen av stilbenglykosider och stilbenglykosider var 98,28 % respektive 98,43 %, och RSD:erna var 1,56 % respektive 0,97 %, vilket indikerar god instrumentnoggrannhet.

OM DU ÄR INTRESSERAD AV DENNA ARTIKEL KAN DU KONTAKTA OSS:

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Handla för fler specifikationer:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop