Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Kina; 2. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Kina)

Abstrakt:Mål: Att studera struktur-aktivitetsförhållandena för fenyletanoidglykosider i växter av Cistanche salsa på antioxidativ aktivitet. Metoder: Genom analyssystemen av DPPH •, antioxidantaktiviteten hos sex fenyletanoidglykosider från växter avCistanchesalsa var fast besluten att undersöka sambandet mellan antioxidantaktiviteterna och phenylethanoid glykosider zs strukturella egenskaper. Resultat: Den antioxidativa aktiviteten av fenyletanoidglykosider var variant med dosberoende effekt. Sekvensen för styrkan av den antioxidativa aktiviteten hos de sex komponenterna visade sig vara2 ^Acetylakteosid > Akteosid Tubulosid BN Isoakteosid > Echinakosid > Cistanosid A. Slutsats: Den antioxidativa aktiviteten av fenyletanoidglykosider är relaterad till antalet fenoliska hydroxyler, steriskt hinder, 2-acetyl på mitten av glukopyranos, och platsen för fenolisk hydroxyl. Dessutom kan det vara relaterat till den j3-omättade ketonen av fenol-2-propenyl.

Nyckelord: Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, Beck; Fenyletanoidglykosider; Antioxidativ aktivitet; Struktur-aktivitet; DPPH

Echinacoside

Den traditionella kinesiska medicinenCistancheär Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, en torkad köttig stjälk med fjäll och blad. Den publicerades först i "Shen Nongs Materia Medica". Frekvensen av förekomst är den högsta, näst efter ginseng i anti-aging och anti-aging kinesisk medicin recept, och det har rykte om "öken ginseng". Fenyletanoilglykosider är karakteristiska komponenter förCistanchesläktets växter. För närvarande har mer än 30 sådana föreningar isolerats från detta släkte. Farmakologiska studier har i grunden gjort det klart att dessa föreningar är den huvudsakliga materiella basen förCistancheatt utöva farmakologiska aktiviteter).

Dibensopikrylradikal (DPPH •) är en relativt stabil fri radikal med en fri elektron på sitt N. Metanollösningen av DPPH- är lila med en maximal absorptionstopp vid 517nm. När det finns en renare av fria radikaler försvinner dess absorption gradvis på grund av dess enelektronparning. Dess grad av missfärgning är kvantitativt relaterad till antalet elektroner som den accepterar. Därför kan användningen av spektrofotometri för att detektera förändringen i absorbans av DPPH efter reaktion med provlösningen användas för att testa provets förmåga att ta bort fria radikaler och motstå oxidation (3). För närvarande har det förekommit rapporter om antioxidantforskning av fenetylalkoholglykosider i auberginepuré för att avlägsna fria radikaler, men det finns ingen analys av struktur-aktivitetssambandet mellan dess antioxidantegenskaper och aktiva substanser. I denna artikel används DPPH • fria radikalanalysmetoden för första gången för att testa antioxidantaktiviteten hos 6 fenetylalkoholglykosidmonomerer i Rouhuanrong. Baserat på de strukturella egenskaperna och aktivitetsbestämningsresultaten för dessa föreningar, dras preliminärt slutsatser om fenetylalkoholglykosidkomponenterna. Struktur-aktivitetsförhållande av antioxidantaktivitet.

1 Apparater och material

Echinacoside, cistanche glykosid A,verbascoside, isoverbasinglykosid, 2,-acetylverbascosid, tubantocyanin B-referensämne (isolerad och framställd från Cistanche salsa, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr-data överensstämmer med litteraturvärdet, innehållet bestäms av HPLC-området normaliseringsmetod, renheten är större än 95 procent, strukturformeln visas i figur 1 och tabell 1); Diphenyl picryl radikal (DPPH •) köptes från Sigma; andra reagens Alla av dem är inhemskt rena.

SpectraMax M5 multifunktionell fullvågsdetektor för biologisk aktivitet (Anthos Co. Österrike), 96-brunnsodlingsplatta (Costar), AB104-N elektronisk balans]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Figur 1 Strukturformlerna för sex fenetanoilglykosider i Cistanche

Tabell 1 Substituenter i 6 fenetanolglykosidföreningar i Cistanche

Notera: Ac är acetyl, Cf är trans-kaffeoyl, Glc * pD-gluviolanos och Rha är aL-ramnos

2 Beredning av testlösning

DPPH • Bered en stamlösning med en koncentration av 1,3 x 10'2mol/L med etanol, förvara den i kylskåp, späd stamlösningen med etanol till 1-3 xl{{7} }^mol/L omedelbart före användning; 6 sorters fenetylalkoholglykosider Referensämnet och vitamin C formuleras till en lösning med en koncentration av 0.05-50.0 ptg/ml med etanol.

Akteosid

3 metoder och resultat

3. 1 Metod Tillsätt först 10 |xL prov till provbrunnarna, tillsätt 10|jlL etanol till blankbrunnarna och tillsätt sedan 190 jiL DPPH • med en koncentration av 1,3 xlO^mol/L och placera dem i mörkret i rumstemperatur i 30 minuter. Använd SpectraMax M5 multifunktionsdetektor för biologisk aktivitet i full våglängd för att mäta absorbansen (A) vid 517 nm. Varje absorbans mättes 3 gånger parallellt och medelvärdet togs. Clearance rate beräknas enligt följande: clearance rate ( procent )=(A blank-A prov)/A blank x 100 procent

3.2 Resultat Resultaten av bestämningen visas i tabell 2. Det framgår av tabell 2 att de sex fenetylalkoholglykosiderna i olika koncentrationer har olika grader av renande effekter på DPPH • och deras förmåga att avlägsna fria radikaler har en signifikant dos- effektförhållande med koncentrationen. Glykosid på DP PH • Storleken på den renande effekten ökar med ökningen av koncentrationen.

Tabell 2 Clearance-hastigheten för prover med olika koncentrationer på DPPH • («=3)

Obs: Den positiva kontrollen är askorbinsyra (vitamin C), provnumret är 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glykosid A. Effekterna av de sex fenetylalkoholglykosiderna i samma koncentration som den positiva kontrollen Vitamin C är något lägre än de av vitamin C.

verbascoside

4. Diskussion

Resultaten av denna studie bekräftade vidare att fenetylalkoholglykosider i allmänhet har antioxidantaktivitet. Genom att analysera och jämföra deras kemiska strukturer, verbascoside, iso-verbasin glycoside, 2'-acetyl verbasin glycoside och tube anorthosite B är alla glykosider, medan echinacoside ochcistancheA är triglycerider, med stort steriskt hinder. Den ökade steriska hindereffekten gör echinakosid och solanakosid A svåra att närma sig fria radikaler, så deras antioxidantkapacitet är relativt svag; den strukturella skillnaden mellan echinakosid och striata: echinakosid A är endast R5 i den förra är en fenolisk hydroxylgrupp och den senare är en metoxigrupp. Den o-fenoliska hydroxylgruppen anses vara en viktig funktionell grupp för antioxidantaktivitet. Difenolhydroxylgruppen försvinner, och antioxidanteffekten reduceras avsevärt. Genom att analysera föreningens struktur och kombinera mätresultaten drar man slutsatsen att antioxidantaktiviteten hos fenetylglykosiderna i auberginepastan är relaterad till antalet aglykoner och fenoliska hydroxylgrupper på fenylakryloylgruppen, kopplingspositionen för fenolen. hydroxylgrupp, storleken på föreningens steriska hinder och den centrala glukosen 2 Det finns ett visst samband mellan substitutionen av acetylgruppen vid positionen, vilket också kan vara relaterat till det a,/3 omättade ketonstrukturfragmentet på styrenacylgruppen, men den har litet samband med substitutionspositionen för fenylakryloylgruppen.

DPPH • är en relativt stabil fri radikal centrerad på N, med stark absorption vid 517nm. Efter tillsats av testsubstansen, genom att detektera förändringen i absorbans vid 517 nm efter att DPPH • radikaler reagerar med provlösningen, kan provets förmåga att avlägsna fria radikaler och antioxidation verifieras. Experiment visar att användningen av DPPH • för att upprätta en in vitro modell för skador på fria radikaler inte kräver komplicerad utrustning och dyra reagens. Den är enkel och lätt att använda, känslig, pålitlig och reproducerbar. Det är en bra metod för att screena fria radikaler.

Vitamin C är för närvarande erkänt som en mycket aktiv och allmänt använd antioxidant. Därför valde detta experiment C-vitamin som en positiv kontroll för antioxidantkapaciteten hos fenetylalkoholglykosider för att avlägsna fria radikaler.

referenser

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Forskning om de kemiska beståndsdelarna i Cistanche. Forskningsframsteg[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Framsteg i forskning om de farmakologiska aktiviteterna hos Cistanche-växter[J]. Chinese Herbal Medicine, 2003, 34(9): Bifogad 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. En enkel metod för screening av fria radikaler [J]. Chinese Herbal Medicine, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Bestämning av antioxidantaktiviteten hos Chuanling, Rhodiola Rosea och Huang Zhi genom difenylpiratradikalspektrofotometri [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.