Inriktning på katepsin B med cykloastragenol förbättrar antitumörimmuniteten hos CD8 T-celler via hämmande av MHC-I-nedbrytning del 2

CAG hämmar CTSB-medierad MHC-I lysosomal nedbrytning

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en stark rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranets funktion. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en god renande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenerationen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinacoside i Cistanche en betydande förmåga att avlägsna DPPH-fria radikaler och har förmågan att avlägsna reaktiva syrearter och förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning, och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tymin-fria radikaler.

Klicka på maca ginseng cistanche sjöhäst

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Tidigare studier har visat att MHC-I huvudsakligen bryts ned i lysosomer under tumörprogression, vilket leder till tumörimmunflykt.12 13 Vi spekulerar i om CAG också kan reglera uttrycket av MHC-I på cellmembranet genom dess målprotein CTSB . Vi använde först RNA-interferens för att slå ner uttrycket av CTSB i MC38-cellinjen, och resultaten visade att gen- och proteinuttrycksnivåerna för H2-k1 ökade efter att CTSB tystats (figur 5A, B). På liknande sätt, efter knockdown och överuttryck av CTSB i den humana HCT-116-cellinjen, ökade mRNA- eller proteinexpressionsnivåerna av HLA-A (figur 5C, D) respektive minskade (figur 5E, F). Samtidigt fann vi att tumörceller med högt uttryck av CTSB uttryckte lägre HLA-A-nivåer, medan celler efter CTSB-knockdown ökade uttrycket av HLA-A (figur 5G). Dessa resultat indikerar att CTSB utövar en negativ regulatorisk effekt på uttrycket av MHC-I. Sedan behandlade vi MC38-cellinjen med CAG och fann att CAG främjade uttrycket av MHC-I och hade ingen effekt på CTSB (figur 5H, I), vilket överensstämde med de tidigare resultaten av studier på tumörvävnader. Dessutom fann vi att efter CAG-behandling samlades H2-Kd från cellen till dess membran (figur 5J), vilket ytterligare bekräftade vår gissning att CAG kan hämma nedbrytningen av MHC-I-molekylen och få den att samlas vid cellmembran, vilket är lättare att fånga upp av immunceller. För att ytterligare validera vår hypotes använde vi ett Co-IP-experiment för att undersöka om CTSB binder till MHC-I och leder till dess nedbrytning. Vi fann att CAG kunde hämma bindningen av CTSB och MHC i mus-MC38-celler (figur 5K), och uttrycket av MHC-I ökar också signifikant. Vi observerade också samma fenomen i humana HCT116-celler (figur 5L). Därefter, för att ytterligare bekräfta om CAG främjar MHC-I-uttryck och cellmembranaggregation genom CTSB, transfekterade vi CTSB-mutantplasmid till humana HCT-116-celler. Resultaten visade att efter transfektering av Y75A-, A77V- och G198V-mutantplasmider förstördes CAG:s funktion att förstärka CD74- och HLA-A-genexpression (figur 5M), och MHC-I-molekyler aggregerade från cellmembran till lysosomer (figur 5N). Detta resultat visade att CAG hämmade nedbrytningen av MHC-I i lysosomer medierade av CTSB och främjade återaggregationen av MHC-I till cellmembranet.

Kombinationen av CAG och PD-1 antikropp förbättrar effektivt CD8 plus T-cellernas tumördödande förmåga

Tumörimmunflykt orsakas huvudsakligen av förlust av tumörcellantigenpresentationsfunktionen och hämning av immunkontrollpunkter. Enligt våra resultat spekulerade vi om CAG kan användas i kombination med PD-1-antikroppen för att döda tumörer, både för att åtgärda bristerna i tumörantigenpresentationen och lösa utarmningen av CD8 plus T-celler orsakad av PD{ {2}}/ PD-L1 väg. Sålunda transplanterade vi MC38-cancerceller till C57BL/6-möss och bildade en kombinationsgrupp av PD-1-antikropp och CAG. Resultaten visade att kombinationsgruppen av CAG- och PD-1-antikroppar uppvisade bättre antitumöreffekter än CAG- och PD-1-grupperna (figur 6A–D). Dessutom observerade vi en signifikant ökning av antalet infiltrerade H2-Kd plus-celler, CD45 plus-celler och CD8 plus-celler i tumörvävnader (figur 6E–G), och uttrycket av de antigenpresentationsrelaterade generna H2-K1, Psmb8 och B2m förbättrades också (figur 6H–J). Samtidigt förbättrades uttrycket av Ifng- och Tnf-gener också signifikant (figur 6K, L), och immunhistokemisk färgning visade att uttrycket av H2-Kd ökade signifikant (figur 6M).

Därför klargjorde denna studie huvudsakligen antitumörmekanismen för CAG, främst genom att hämma nedbrytningen av MHC-I medierad av CTSB, främja aggregationen av MHC-I-molekyler till cellmembranet och sedan förbättra antigenpresentationsförmågan hos cancerceller. Dessutom, i kombination med PD-1-antikropp, kunde den döda cancerceller mycket effektivt (figur 6N).

CAG främjar uttryck av MHC-I i organoider av kolorektal cancer och förbättrar avdödningsförmågan hos CD8 T-celler

För att ytterligare undersöka om den farmakologiska effekten av CAG kan tillämpas kliniskt, användes humana kolorektala cancerorganoider. Vi fann att organoider inkuberade med CAG ökade uttrycket av MHC-I (figur 7A), och uttrycket av antigenpresenterande relaterade gener ANXA1, B2M och HLA-A ökade också (figur 7B). I de tidigare experimenten fann vi att CAG förstärkte den dödande effekten av CD8 T-celler genom att främja antigenpresentationen av tumörceller, och effekten var överlägsen när den kombinerades med PD-1-antikroppen. För att ytterligare verifiera dessa resultat samlade vi in ​​det perifera blodet från friska människor och isolerade CD8 T-celler och inkuberade dem sedan med CAG-stimulerade organoider i 24 timmar (figur 7C). Resultaten visade att jämfört med DMSO-gruppen drev CD8 T-celler i tumörorganoider behandlade med CAG inte längre bort utan var mer koncentrerade på ytan av organoider; samtidigt fanns det färre bortdrivna CD8 T-celler i CAG- och PD-1-grupperna (figur 7D). Vi fann att IFN-G som utsöndras av aktiverade CD8 T-celler förbättrades på motsvarande sätt (figur 7E–H).

Hittills har vi funnit att CAG främjade det antigenpresenterande uttrycket av tumörer för att förbättra antitumöreffekten av CD8 T-celler, och kombinationen av CAG och PD-1-antikropp hade en överlägsen antitumöreffekt. Dessutom analyserade vi tjocktarmscancerdata i databasen Cancer Genome Atlas (TCGA) och fann att de antigenpresentationsrelaterade generna HLA-A, HLA-B, HLA-C, CD74 och B2M visade låga uttrycksnivåer i tumörer, och överlevnaden för dessa gener med lågt uttryck var mycket dålig (figur 7I, J, figur 7A–H).

Därför fann vi att det uppreglerade uttrycket av HLA-A, CD74 och andra gener av CAG var fördelaktigt för tumörpatienter. Dessutom fann vi att patienter med högt uttryck av HLA-A, såväl som IFNG, hade en högre överlevnadsfrekvens (figur 7K); patienter med högt uttryck av HLA-A och lågt uttryck av PDCD1 hade också en bättre överlevnadsfrekvens (figur 7L). Alla dessa fynd tyder på att CAG skulle vara läkemedelskandidat för behandling av kolorektal cancer.

DISKUSSION

Immunflykt är en kritisk orsak till att immunsystemet inte lyckas kontrollera tumörtillväxt, men hur flyktvarianter uppstår under immunterapi är fortfarande dåligt förstått.34 Studier har visat att förlust av tumörantigenpresenterande funktion, epigenetiska förändringar, uttryck av antiapoptotika proteiner och immunsuppressiva receptorer är nära besläktade med tumörimmunflykt. 6 7 35–37 Under de senaste åren, även om immunterapi representerad av PD-1-antikroppen har gjort stora genombrott, har fenomenen med läkemedelsresistens och osvarbar behandling av kolorektal cancer lett till stort missnöje.38 39 Att hitta kemikalier som kan främja presentationen av tumörantigen och synergisera med PD-1-antikroppen kan därför bättre förhindra att tumörens immunförsvar tar sig ut.

Nyligen genomförda studier har funnit att aktiva molekyler från traditionell kinesisk medicin spelar en effektiv roll vid behandling av sjukdomar, såsom celastrol vid behandling av metabolt syndrom,32 andrografolid vid kolit och cancer,40 baicalin vid lipidsänkande och trifolirhizin vid tumörkontroll. 41 42 CAG är en aktiv molekyl i A. membranaceus och har funktionerna kardiovaskulära sjukdomar, leverskydd, antibakteriell och behandling av abdominal aortaaneurysm.18 43–45 Det finns dock lite forskning om det i området för kolorektal cancer. Därför syftade vi till att undersöka om och hur CAG hämmar tillväxten av murin tjocktarmscancer

Utvecklingen av scRNA-seq och scATAC-seq-teknologier har avsevärt avancerat forskningen om sjukdomar.46–48 Därför använde vi encellig multi-omics-teknologi för att analysera den specifika antitumörmekanismen för CAG. Det visade sig att CAG främjade den antigenpresenterande funktionen hos cancerceller, och funktionerna hos CD8 plus T-celler, CD4 plus T-celler och NK-celler i lymfocyter förbättrades i varierande grad. Å andra sidan var Spp1 plus TAM-celler i myeloidceller mer benägna att transformera det inflammatoriska svaret, och hypoxisignalen hämmades signifikant efter CAG-behandling. Dessa resultat överensstämmer med de resultat som rapporterats i tidigare studier, hämningen av Spp1 plus TAM-hypoxisignal och förstärkning av inflammatorisk respons kan hämma tillväxten av tumörer.49 Därför spekulerade vi att CAG främjar den antigenpresenterande funktionen hos cancerceller, så motsvarande CD8 plus T-celler och makrofager kan känna igen och döda cancerceller effektivt. Vi verifierade ytterligare vår gissning med in vitro-experiment. Flödescytometrianalys visade också att CAG ökar infiltrationen av CD45-immunceller, inklusive CD8 plus T-celler och NK-celler. Dessutom förstärks också förmågan hos IFN- och GZMB som utsöndras av CD8 plus T-celler avsevärt av CAG. För att avgöra om CD8 T-celler eller makrofager spelar en viktig roll i antitumörexperimentet med CAG, testade vi vår gissning med transplanterade tumörer i nakna möss. På grund av utvecklingsstörning av T-celler orsakad av immunisering av tymus hos nakna möss medan makrofagernas funktion fortfarande existerar. Resultaten visade dock att CAG inte effektivt kunde döda transplanterade tumörer i nakna möss. Dessa resultat tyder på att CAG kan förbättra den dödande effekten av CD8 plus T-celler på tumörer genom att främja antigenpresentationen av cancerceller.

Därefter undersökte vi hur CAG främjar antigenpresentationen av cancerceller med TRAP-teknik för att hitta målproteinet för CAG för att förklara fenomenet. CTSB är ett cysteinhydrolas som kan interagera med andra proteiner och brytas ned i lysosomer.50 Vi spekulerade i att det kunde interagera med antigenpresentationsrelaterade proteiner för att orsaka nedbrytning. Och det har rapporterats att MHC-I-molekylen bryts ned i lysosomer, vilket resulterar i förlust av tumörcellantigenpresenterande funktion.13 Därför misstänkte vi att CTSB kunde binda till MHC-I-molekylen och orsaka dess nedbrytning i lysosomer. Vi verifierade denna hypotes att CAG kunde förhindra nedbrytningen av MHC-I genom att hämma interaktionen mellan CTSB och MHC-I. Organoider är en effektiv modell för att studera utvecklingen av tumörsjukdomar och har stor betydelse för att främja behandlingen av kliniska tumörpatienter genom att undersöka effekten av läkemedel på tillväxten av tumörorganoider och den specifika mekanismen.51 52 Genom våra experiment, fann vi att antikroppar i kombination med CAG och PD-1 har en god förmåga att hämma tumörtillväxt oavsett om det är i mustransplanterade tumörmodeller eller humana koloncancerorganoider. Bristen på denna studie är det begränsade antalet xenograftprover och patientorganoider. Även om det finns liknande slutsatser mellan murina modeller och mänskliga organoider, behövs ytterligare undersökningar.

Här beskriver vi den specifika mekanismen genom vilken CAG hämmar tillväxten av tjocktarmscancer, främst genom att hämma nedbrytningen av MHC-I medierad av CTSB, för att förbättra antitumörimmuniteten hos CD8 plus T-celler. Å ena sidan främjar det antigenpresentationen av cancerceller, och å andra sidan lindrar det utarmningstillståndet för CD8 plus T-celler. De experimentella resultaten bekräftade också att kombinationen av CAG och PD-1-antikropp hade en överlägsen antitumöreffekt.

Sammanfattningsvis, så vitt vi vet, visar dessa fynd att CTSB-nedreglering ger antitumörimmunitet. Vår forskning förklarade också den specifika mekanismen för CAG för att hämma tillväxten av kolorektal cancer. Det är värt att nämna att CAG har stor potential som hälsoprodukt på den europeiska och amerikanska marknaden. Våra forskningsresultat ger en potentiell läkemedelskandidat mot cancer.

Författartillhörighet

1 State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, Chemistry and Biomedicine Innovation Center (ChemBIC), Institutionen för bioteknik och farmaceutiska vetenskaper, School of Life Sciences, Nanjing University, Nanjing, Jiangsu, Kina

2 Bioinformatik Institutionen för prediktiv medicin, Institutet för biomedicinsk informatik, Cell Signal Transduction Laboratory, School of Basic Medical Sciences, Henan University, Kaifeng, Henan, Folkrepubliken Kina

3 Jiangsu Collaborative Innovation Centre of Traditional Chinese Medicine in Prevention and Treatment of Tumor, The First Clinical College, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing, Jiangsu, Kina

4 Department of General Surgery, Shanghai Jiao Tong University anslutna Sixth People's Hospital, Shanghai, Folkrepubliken Kina

5 Jiangsu Provincial Key Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, State Key Laboratory of Natural Medicines, China Pharmaceutical University, Nanjing, Jiangsu, Kina

6 Genergy Bio-technology (Shanghai) Co. Ltd, Shanghai, Kina

7 Jiangsu Key Laboratory of New Drug Research and Clinical Pharmacy, Xuzhou Medical University, Xuzhou, Jiangsu, Kina

BidragsgivareYS, HC och DS utformade detta projekt och utformade studien. GD, BW och XS utförde experimenten och analyserade data. LZ och HC analyserade scRNA-seq och scATAC-seq-data. DS och HC gav metodstöd och konceptuella råd. YS och GD skrev manuskriptet. YS, som garant, bär det fulla ansvaret för arbetet och/eller genomförandet av studien och har rätt att få tillgång till uppgifterna och kontrollera frigivningsbeslutet.

FinansieringDetta arbete stöddes av National Key Research and Development Project (2017YFC1700602), National Natural Science Foundation of China (nr 81930117, 81872877, 82074318), Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions and Mountain-Climbing University Project of Nanjing University Project (N/A), Natural Science Foundation Project of Shanghai, Scientific and Technological Innovation Action Plan (nr. 22ZR1447400).

Konkurrerande intressenIngen deklarerad.

Patientmedgivande för publiceringInte tillämpbar.

EtikgodkännandeStudien av organoider i tjocktarmscancer hos människa godkändes av forsknings- och etiska kommittén vid Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine och uppfyllde alla relevanta etiska föreskrifter (2020-NL-094- 02). Deltagarna gav informerat samtycke till att delta i studien innan de deltog

Proveniens och referentgranskningEj beställd; externt peer-reviewed.

DatatillgänglighetsförklaringAll data som är relevant för studien ingår i artikeln eller laddas upp som kompletterande information online.

Kompletterande materialDetta innehåll har tillhandahållits av författaren/författarna. Den har inte granskats av BMJ Publishing Group Limited (BMJ) och kanske inte har granskats av experter. Eventuella åsikter eller rekommendationer som diskuteras är endast författarens/författarnas och stöds inte av BMJ. BMJ frånsäger sig allt ansvar och ansvar som härrör från all tillit till innehållet. Där innehållet innehåller översatt material, garanterar inte BMJ översättningarnas noggrannhet och tillförlitlighet (inklusive men inte begränsat till lokala bestämmelser, kliniska riktlinjer, terminologi, läkemedelsnamn och läkemedelsdoser), och ansvarar inte för eventuella fel och/ eller utelämnanden som härrör från översättning och anpassning eller på annat sätt.

Fri tillgångDetta är en artikel med öppen tillgång som distribueras av licensen Creative Commons Attribution Non-Commercial (CC BY-NC 4.0), som tillåter andra att distribuera, remixa, anpassa, bygga vidare på detta arbete icke-kommersiellt och licensiera sina härledda verk på olika villkor, förutsatt att originalverket är korrekt citerat, lämplig kredit ges, eventuella ändringar indikeras och användningen är icke-kommersiell.

REFERENSER

1 Siegel RL, Miller KD, Fuchs HE, et al. Cancerstatistik, 2022. CA A Cancer J Clinicians 2022;72:7–33.

2 Kuipers EJ, Grady WM, Lieberman D, et al. Kolorektal cancer. Nat Rev Dis Primers 2015;1:15065.

3 Biller LH, Schrag D. Diagnostik och behandling av metastaserad kolorektal cancer. JAMA 2021;325:669–85.

4 Oliveira AF, Bretes L, Furtado I. Genomgång av PD-1/PD-L1-hämmare vid metastaserad dMMR/MSI-H kolorektal cancer. Front Oncol 2019;9:396.

5 Das M, Zhu C, Kuchroo VK. Tim-3 och dess roll i att reglera antitumörimmunitet. Immunol Rev 2017;276:97–111.

6 Jiang X, Wang J, Deng X, et al. Tumörmikromiljöns roll i PD-L1/PD-1-förmedlad tumörimmunflykt. Mol Cancer 2019;18:10.

7 Dhatchinamoorthy K, Colbert JD, Rock KL. Cancerimmunundandragande genom förlust av MHC klass I-antigenpresentation. Front Immunol 2021;12:636568.

8 Zhu Y, Qian Y, Li Z, et al. Neoantigen-reaktiv T-cell: en framväxande roll i adoptiv cellulär immunterapi. MedComm 2021;2:207–20.

9 Vries JE, Yssel H, Spits H. Samspel mellan TCR/CD3-komplexet och CD4 eller CD8 vid aktiveringen av cytotoxiska T-lymfocyter. Immunol Rev 1989;109:119-42.

10 Huang J, Meyer C, Zhu C. T-cellantigenigenkänning vid cellmembranet. Mol Immunol 2012;52:155–64.

11 Allison JP. CD28-B7-interaktioner i T-cellsaktivering. Curr Opin Immunol 1994;6:414–9.

12 Liu X, Bao X, Hu M, et al. Hämning av PCSK9 potentierar immunkontrollpunktsterapi för cancer. Naturen 2020;588:693–8.

13 Yamamoto K, Venida A, Yano J, et al. Autofagi främjar immunundandragande av cancer i bukspottkörteln genom att nedbryta MHC-I. Naturen 2020;581:100–5.

14 Chen X, Zhao Y, Luo W, et al. Celastrol inducerar ROS-medierad apoptos via direkt inriktning mot peroxiredoxin-2 i magcancerceller. Theranostics 2020;10:10290–308.

15 Kong N, Chen X, Feng J, et al. Baicalin inducerar ferroptos i blåscancerceller genom att nedreglera FTH1. Acta Pharm Sin B 2021;11:4045–54.

16 Deng G, Chen W, Wang P, et al. Hämning av NLRP3-inflammasommedierad pyroptos i makrofager av cykloastragenol bidrar till förbättringen av imiquimod-inducerad psoriasisliknande hudinflammation hos möss. Int Immunopharmacol 2019;74:105682.

17 Li M, Li S-chun, Dou B-kai, et al. Cykloastragenol uppreglerar SIRT1-uttryck, dämpar apoptos och undertrycker neuroinflammation efter hjärnischemi. Acta Pharmacol Sin 2020;41:1025–32.

18 Chen C, Ni Y, Jiang B, et al. Anti-aging derivat av cykloastragenol producerade genom biotransformation. Nat Prod Res 2021;35:2685–90.

19 Fauce SR, Jamieson BD, Chin AC, et al. Telomerasbaserad farmakologisk förbättring av den antivirala funktionen hos human CD8 plus T-lymfocyter. J Immunol 2008;181:7400–6.

20 Wang B, Wang Y, Sun X, et al. CXCR6 krävs för antitumöreffektiviteten hos intratumorala CD8 plus T-celler. J Immunother Cancer 2021;9:e003100.

21 Butler A, Hoffman P, Smibert P, et al. Integrering av transkriptomiska encelliga data över olika förhållanden, teknologier och arter. Nat Biotechnol 2018;36:411–20.

22 Yu G, Wang LG, Han Y, et al. clusterProfiler: ett R-paket för att jämföra biologiska teman bland genkluster. OMICS: A Journal of Integrative Biology 2012;16:284–7.

23 Stuart T, Butler A, Hoffman P, et al. Omfattande integration av encellsdata. Cell 2019;177:1888–902.

24 Granja JM, Corces MR, Pierce SE, et al. ArchR är ett skalbart mjukvarupaket för integrerad encellskromatintillgänglighetsanalys. Nat Genet 2021;53:403–11.

25 Korsunsky I, Millard N, Fan J, et al. Snabb, känslig och korrekt integration av encellsdata med harmoni. Nat Methods 2019;16:1289–96.

26 Trapnell C, Cacchiarelli D, Grimsby J, et al. Dynamiken och regulatorerna av cellödebeslut avslöjas av den pseudo-temporala ordningen av enstaka celler. Nat Biotechnol 2014;32:381–6.

27 Qiu X, Hill A, Packer J, et al. Encellig mRNA kvantifiering och differentiell analys med folkräkning. Nat Methods 2017;14:309–15.

28 Qiu X, Mao Q, Tang Y, et al. Omvänd grafinbäddning löser komplexa encellsbanor. Nat Methods 2017;14:979–82.

29 Patel AP, Tirosh I, Trombetta JJ, et al. Encellig RNA-seq belyser intratumoral heterogenitet i primärt glioblastom. Science 2014;344:1396–401.

30 Subramanian A, Tamayo P, Mootha VK, et al. Analys av anrikning av genuppsättning: en kunskapsbaserad metod för tolkning av genomomfattande uttrycksprofiler. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:15545–50.

31 Tian Y, Wan N, Ding M. Chemoproteomics kartlägger glykolytiska mål i cancerceller. bioRxiv 2020.

32 Zhu Y, Wan N, Shan X, et al. Celastrol riktar sig mot adenylylcyklas-associerat protein 1 för att minska makrofagmedierad inflammation och lindra metaboliskt syndrom inducerat av fettrik kost hos möss. Acta Pharm Sin B 2021;11:1200–12.

33 Driehuis E, Kretzschmar K, Clevers H. Etablering av patienthärledda cancerorganoider för läkemedelsscreeningstillämpningar. Nat Protoc 2020;15:3380–409.

34 Lin KY, Lu D, Hung CF, et al. Ektopiskt uttryck av vaskulär celladhesionsmolekyl-1 som en ny mekanism för tumörimmunundvikande. Cancer Res 2007;67:1832–41.

35 Kriegsman BA, Vangala P, Chen BJ, et al. Frekvent förlust av IRF2 i cancer leder till immunundandragande genom minskad MHC klass I-antigenpresentation och ökat PD-L1-uttryck. Ji 2019;203:1999–2010.

36 Gomez S, Tabernacki T, Kobyra J, et al. Kombinera epigenetisk och immunterapi för att övervinna cancerresistens. Semin Cancer Biol 2020;65:99–113.

37 Mandal R, Barrón JC, Kostova I. Caspase-8: det tveeggade svärdet. Biochim Biophys Acta Rev Cancer 1873;2020:188357.

38 Qin S, Xu L, Yi M, et al. Nya mål för immunkontrollpunkter: gå bortom PD-1 och CTLA-4. Mol Cancer 2019;18:155.

39 Lizardo DY, Kuang C, Hao S, et al. Immunterapis effekt på kolorektal cancer som inte matchar reparationsbrist: från bänk till säng. Biochim Biophys Acta Rev Cancer 2020;1874:188447.

40 Guo W, Sun Y, Liu W, et al. Liten molekyldriven mitofagi-medierad NLRP3-inflammasomhämning är ansvarig för förebyggandet av kolit-associerad cancer. Autophagy 2014;10:972–85.

41 Dai J, Liang K, Zhao S, et al. Chemoproteomics avslöjar att baicalin aktiverar lever-CPT1 för att lindra dietinducerad fetma och leversteatos. Proc Natl Acad Sci USA 2018;115:E5896–905.

42 Sun D, ​​Tao W, Zhang F, et al. Trifolirhizin inducerar autofagiberoende apoptos vid tjocktarmscancer via AMPK/mTOR-signalering. Sig Transduct Target Ther 2020;5:174.

43 Gu M, Zhang S, Zhao Y, et al. Cykloastragenol förbättrar leversteatos genom att aktivera farnesoid X-receptorsignalering. Farmakologisk forskning 2017;121:22–32.

44 Wang J, Wu ML, Cao SP, et al. Cykloastragenol förbättrar experimentella hjärtskador hos råttor genom att främja myokardial autofagi via hämning av AKT1-RPS6KB1-signalering. Biomed Pharmacother 2018;107:1074–81.

45 Wang Y, Chen C, Wang Q, et al. Hämmande effekter av cykloastragenol på abdominal aortaaneurysm och dess relaterade mekanismer. Br J Pharmacol 2019;176:282–96.

46 Lee JJ, Bernard V, Semaan A, et al. Belysning av tumör-stromal heterogenitet och ligand-receptor-interaktomen genom enkelcellstranskriptomik i verkliga pankreascancerbiopsier. Clin Cancer Res 2021;27:5912–21.

47 Zhang L, Li Z, Skrzypczynska KM, et al. Encellsanalyser informerar om mekanismer för Myeloid-Targeted terapier vid tjocktarmscancer. Cell 2020;181:442–59.

48 Gao J, Wu Z, Zhao M, et al. Allosterisk hämning avslöjar SHP2-förmedlad tumörimmunsuppression vid tjocktarmscancer genom encellig transkriptomik. Acta Pharm Sin B 2022;12:149–66.

49 Wei J, Chen Z, Hu M, et al. Karakteriserande intercellulär kommunikation av pan-cancer avslöjar SPP1 plus tumörassocierade makrofager expanderade i hypoxi och främjar cancermalignitet genom encellig RNA-Seq Data. Front Cell Dev Biol 2021;9:749210.

50 Chen X, Yu C, Kang R, et al. Cellulära nedbrytningssystem vid ferroptos. Celldöd skiljer sig 2021;28:1135–48.

51 Puschhof J, Pleguezuelos-Manzano C, Martinez-Silgado A, et al. Intestinala organoida samkulturer med mikrober. Nat Protoc 2021;16:4633–49.

52 Lee SH, Hu W, Matulay JT, et al. Tumörutveckling och läkemedelssvar i patienthärledda organoidmodeller av blåscancer. Cell 2018;173:515–28.

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】