Stereologisk studie av njur- och binjurekörtelstrukturen hos rödbent rapphöna (Alectoris Chukar)

Bakgrund

Rapphöna är en stor fågelart som på senare tid har fått allt större betydelse som alternativ födokälla och viltdjur inom jaktturism. Här syftade vi till att undersöka den histologiska strukturen och stereologiska egenskaperna hos njurarna och binjurarna hos den rödbenta rapphönan.

Material och metoder

Sju friska vuxna rödbenta rapphöns (Alectoris chukar) av båda könen användes i denna studie. Alectoris chukarerna perfunderades med intrakardiell metod och hölls i 10 procent formaldehyd i 72 timmar för optimal fixering. Vävnaderna inbäddades i paraffin efter rutinmässiga ljusmikroskopiska processer. Sedan togs 5-µm tjocka snitt, som färgades med hematoxylin och eosin, fotograferades och undersöktes i ljusmikroskop. Den modifierade Cavalieri-principen användes för volymberäkning som stereologisk analys. Totala vävnadsvolymförhållanden beräknades med hjälp av ett punktnät som tillhandahålls av Shtereom 1.5-paketerade programmet. Mann Whitney U-test användes för jämförelser mellan grupper. Signifikansnivån sattes till 5 procent SPSS (ver: 13) statistisk programvara användes för alla statistiska analyser.

Resultat

Den renala histologiska strukturen befanns likna den hos andra fågelarter och innehöll en glomerulär struktur av blandad typ (däggdjur, reptiler). Man fann också att binjurehistologin inte var i form av separata lager utan sammansatt av cellgrupper med olika egenskaper. Stereologisk njurvolymbedömning visade statistiskt liknande höger och vänster njurstorlek (p > {{0}}.05). Vid bedömning av binjurevolymen var även höger och vänster binjurevolym statistiskt lika (p > 0,05).

Slutsatser

De erhållna uppgifterna i denna studie tros bidra till förståelsen av den stereologiska, morfologiska och histologiska strukturen hos njuren och binjuren med rödbent rapphöna (Alectoris chukar). (Folia Morphol 2021; 80: 1: 210–214)

Klicka här för att hämtafördelarna med Cistanche 

Nyckelord

binjure; njure; rapphöna; stereologi;effekterna av Cistanche.

Introduktion

Apphönan är det vanliga namnet för att tillhöra arterna Alectoris och Perdix i familjen Phasianidae [4]. Rapphönan är en stor fågelart som på senare tid fått allt större betydelse som alternativ födokälla och viltdjur inom jaktturism.

Njurarna är belägna på båda sidor av bukaortan och inferior vena cava i den dorsala delen av bukhålan, och binjurarna är placerade på kranialpolen på båda njurarna [16]. Njurarna hos fågelarter har en mellanstruktur mellan däggdjur och reptiler. Fågelarterna har inte njurbäcken, urinblåsa eller urinrör [14]. Histologiskt har deras njurar ett multilobulerat mönster och isolerad cortex och medulla som är åtskilda av en fin bindväv. De har två typer av nefronstrukturer. Den första betecknas som däggdjurs- eller märgtyp och är sammansatt av en renal corpuscle, en proximal convoluted tubuli, en distal convoluted tubuli, en uppsamlings tubuli och tunna och tjocka segment av Henles ögla. Den andra typen är reptiltypen även kallad kortikala typen, som har en mindre njurkropp men ingen Henles loop; dessutom finns det en kort sektion mellan den proximala hopslingrade tubuli och distala slingrande tubuli, som kallas den mellanliggande tubuli [13]. Binjurarna är anatomiska strukturer som spelar en viktig roll för att anpassa sig till alla typer av stress och, genom hormoner de producerar, bidrar de till många metaboliska processer. Hos fågelarter är formen på binjurarna mycket varierande, med inter-arter och även inter-individuella variationer är möjliga. Experimentellt avlägsnande av binjurar resulterar i fåglarnas död [16]. Det visades i en genomgång av litteraturen att det har gjorts anatomiska studier på rödbent rapphöna, men inte specifikt på dess njur- och binjurestruktur. Den syftade till att utföra en detaljerad histologisk och stereologisk studie av rödbenta rapphönas njur- och binjurekörtelstrukturer i denna studie.

Cistanche-tillskott

Material och metoder

Sju friska vuxna rödbenta rapphöns (Alectoris chukar) av båda könen användes i denna studie. Djuren erhölls från Van Yuzuncu Yil University Wildlife Protection Centre. Det godkändes av Van Yuzuncu Yil University Local Ethics Committee (27/06/2019/06) och överensstämde med studieprocedurerna. Apphönsen bedövades med 10 mg//kg Xylazine HCL (Rompun 2 procent, 50 ml, Bayer) och med 40 mg/kg im Ketamine HCL (Ketalar 50 mg/ml, 10 ml injektionsflaska, Pfizer). Djuren perfunderades med intrakardiell metod och dissekerade vävnader hölls i 10 procent formaldehyd i 72 timmar för optimal fixering [18]. Vävnaderna inbäddades i paraffin efter fullbordandet av rutinmässiga histologiska ljusmikroskopiprocedurer. Sedan erhölls 5- µm tjocka sektioner. Det första avsnittet valdes slumpmässigt ut och sedan togs det 40:e avsnittet. Sektionerna färgades med hematoxylin och eosin, fotograferades och undersöktes i ett ljusmikroskop.

Stereologisk analys

Stereologi, slumpmässig och systematisk provtagning används för att få opartisk och kvantitativ information. Bland stereologiska analyser användes den modifierade Cavalieri-principen för volymberäkning. Sedan beräknades totala vävnadsvolymförhållanden med användning av ett punktnät tillhandahållet av Shtereom 1.5-paketerade programmet (Fig. 1). Volymberäkning utfördes med hjälp av följande formel: V(obj)=t × a/p × ∑P. V(obj) är volymen av objektivet, t är snitttjockleken, a/p representerar arean för varje punkt på punkträkningsrutnätet och Sp är det totala antalet punkter som träffar njur- och binjureområdena [9, 10] . Felkoefficienten (CE) och variationskoefficienten (CV) användes för att bestämma den optimala provstorleken i varje grupp i den stereologiska standardmetoden [8]. Värdena för CE och CV i vår studie var av litteraturdata.

Statistisk analys

Beskrivande statistik inkluderade median, medelvärde, standardavvikelse, minimum och maximum. Skillnader mellan grupper analyserades med Mann-Whitney U-testet. Signifikansnivån sattes till 5 procent. Alla statistiska analyser utfördes med SPSS (ver.13) statistiska programpaket.

Resultat

Den stereologiska analysen visade att vänster och höger njure hade liknande storlekar. En stereologisk volymberäkning visade en höger njurvolym på 2,28 mm3 och en vänster njurvolym på 3,02 mm3. En jämförelse av båda njurvolymerna visade en liten men statistiskt icke-signifikant skillnad mellan båda njurarna (p > 0,05) (tabell 1). Den mikroskopiska undersökningen av de histologiska sektionerna visade att njuren var sammansatt av lobuler, var och en sammansatt av de kortikala och märgdelarna och inkapslade av bindväv innehållande blodkärl. Njurstrukturen bestod av 60 procent cortex och 40 procent medulla på höger sida och 80 procent cortex och 20 procent medulla på vänster njure. Nefronerna hade struktur två typer av nefroner, reptil- och däggdjursnefroner (Fig. 2). Antalet reptilnefroner var större än däggdjursnefroner. De två nefrontyperna hade också olika fördelning så att de var fler i cortex men det fanns bara tubala strukturer i medulla. Nefronen av däggdjurstyp var belägna i den djupa cortexen, nära märgkonen, medan reptilnephronerna var belägna i de perifera och mellersta delarna av cortex, inriktade i en hästskoform runt den centrala venen (fig. 3).

Undersökning av binjurekörtelstrukturen visade att vänster och höger binjurar hade vissa skillnader i form men inte i storlek, och en stereologisk volymbedömning visade att volymen av båda binjurarna var {{0}},02 mm3 (p > 0,05) (tabell 1). En allmän histologisk undersökning visade att binjuren inte hade tre distinkta olika lager utan endast cellulär differentiering (mörk, ljusfärgad; med olika kärnstrukturer); körtlarna var inkapslade av en bindväv som innehöll blodkärlskapsel som separerade dem från njurarna. Binjuren hade en separat kärltillförsel (Fig. 4).

Diskussion

Det visades att njurstrukturen hos rödbent rapphöna liknade den hos andra fågelarter i denna studie. Rödbent rapphöna hade två njurar inkapslade av bindväv innehållande blodkärlsslidor och sammansatta av flera lobuler innehållande de kortikala och medullära delarna. Den stereologiska volymbedömningen har visat att höger och vänster njurstorlek var statistiskt lika. Tidigare studier på höger och vänster njurstorlek hos fågelarter har visat varierande resultat. En studie rapporterade att det inte fanns någon skillnad mellan höger och vänster njurstorlek [6] medan en annan studie rapporterade en skillnad mellan vänster och höger njurstorlek [17]. På liknande sätt har studier som bedömer kortikala och märgvolymer hos fågelarter rapporterat varierande resultat. En studie har rapporterat att 90 procent av den totala volymen av fågelnjurar bestod av cortex och 2 procent av medulla [3]; en annan har rapporterat motsvarande siffror på 77 procent respektive 10 procent [19]. Det konstaterades att kortikalkvoten liknade litteraturdata, men medullärkvoten var något högre i denna studie. Casotti och Braun [5] rapporterade att njurvolymen varierade beroende på fågelarternas livsmiljö. Litteraturdata tyder på att en fågels njurform, storlek och struktur förändras av dess diet, fylogeni och miljöfaktorer [17]. Alla djur var i samma region och klimatförhållanden (maximal temperatur 30–33 grader). Den grundläggande njurstrukturen består av nefroner. Fågelnjuren skiljer sig från däggdjursnjuren eftersom den är sammansatt av två typer av nefroner som liknar däggdjurs- och reptilnefroner [2, 12]. På liknande sätt observerades i vår studie två typer av nefroner. Tidigare studier har visat att fler reptilnefroner finns i periferin av lobulen, en liten njurkropp och ingen ögla av Henle. Det har rapporterats att däggdjursnephronerna är större och hade en mer komplex njurkropp och är belägna djupt i cortex som gränsar till medulla; dessutom innehåller de en ögla av Henle och är mindre till antalet [1]. Häri visades ett liknande antal och fördelning av nefroner. Nefronerna är ansvariga för filtrering, reabsorption och utsöndring och bildar därigenom urin. Fågelns nefroner är sammansatta av en glomerulus, en proximal tubuli, en distal tubuli och samlingskanaler [14]. Denna studie visade också liknande resultat.

Den aktuella studien visade att binjurarna var belägna vid njurarnas kraniala pol och medialt till dem, som Nickel et al. [15] har rapporterat. Det visade sig att binjurehistologin inte var i form av separata lager utan sammansatt av cellgrupper med olika egenskaper (med en mörk eller ljus färg och varierande kärnstruktur). Det visades också att höger och vänster binjurar hade olika former och det fanns även interindividuella skillnader. Binjuren separerades från njurvävnaden med en bindvävsskida och hade en separat kärlförsörjning. Resultaten av denna studie kommer från tidigare studier på fågelarter [16]. Bland studierna på binjurarnas storlek, Humayun et al. [11] och Wells och Wight [20] rapporterade att den vänstra binjuren var större än den högra hos kycklingar av båda könen, medan Ozudogru et al. [16] samt Elbajory [7] rapporterade att den högra binjuren var större än den vänstra. Binjurarnas vikt, längd, bredd och tjocklek varierar med flera faktorer, såsom art, ras, ålder, hälsotillstånd och miljö [11]. I denna studie upptäcktes att det inte finns någon skillnad mellan stereologiskt beräknade volymer mellan höger och vänster binjure.

Cistanche piller

Slutsatser

De erhållna uppgifterna i denna studie tros bidra till förståelsen av den stereologiska, morfologiska och histologiska strukturen hos njuren och binjuren med rödbent rapphöna (Alectoris chukar). Vi tror att den kommer att vara en vägledning för studierna om rödbent rapphöna (Alectoris chukar).

Hur Cistanche-extrakt kan hjälpa till att förbättra njursjukdom?

Cistanche-extrakt är ett populärt örttillskott som traditionellt har använts i kinesisk medicin i århundraden för att förbättra övergripande hälsa och välbefinnande. På senare tid har vetenskapliga studier visat att Cistanche-extrakt också kan hjälpa till att förbättra njursjukdom.

Njursjukdom är ett allvarligt medicinskt tillstånd som drabbar cirka 10 procent av världens befolkning. Njurarna är vitala organ som ansvarar för att filtrera ut slaggprodukter ur blodet och reglera vätskebalansen, elektrolyter och syra-basbalansen. När njurarna är skadade eller fungerar dåligt kan det leda till en rad komplikationer inklusive högt blodtryck, anemi, skelettsjukdomar och till och med hjärt-kärlsjukdomar.

Forskning tyder på att Cistanche-extrakt kan erbjuda flera potentiella fördelar för individer med njursjukdom. Ett av de viktigaste sätten på vilket Cistanche-extrakt kan hjälpa till att förbättra njursjukdom är genom att minska inflammation. Kronisk njursjukdom (CKD) kännetecknas ofta av ihållande inflammation i njurarna, vilket kan orsaka ytterligare skador med tiden. Cistanche-extrakt har visat sig innehålla antiinflammatoriska föreningar som kan hjälpa till att minska inflammation i njurarna och förbättra deras övergripande funktion.

Ett annat sätt på vilket Cistanche-extrakt kan hjälpa till att förbättra njursjukdom är genom att minska oxidativ stress. Oxidativ stress uppstår när det finns ett överskott av reaktiva syrearter (ROS) i kroppen, vilket leder till cellskador och dysfunktion. Forskning tyder på att Cistanche-extrakt kan minska oxidativ stress i njurarna genom att öka antioxidantaktiviteten, hjälpa till att förhindra ytterligare skador och främja läkning.

Cistanche-extrakt kan också hjälpa till att förbättra njursjukdom genom att främja njurcellsregenerering. Njurceller är ansvariga för att upprätthålla en sund njurfunktion och reparera eventuella skador. Cistanche-extrakt har visat sig innehålla bioaktiva ämnen som kan öka spridningen av njurceller, främja självläkning och återställa den totala njurfunktionen.

Cistanche pulver

Slutligen kan Cistanche-extrakt också vara effektivt för att förhindra eller minska utvecklingen av kronisk njursjukdom genom att främja vasodilatation och förbättra blodflödet till njurarna. Detta ökade blodflöde kan ge njurarna det syre och de näringsämnen de behöver för att fungera korrekt och reparera eventuella skador.

Sammantaget är Cistanche-extrakt ett lovande naturligt botemedel för individer som vill förbättra sin njurhälsa. Dess förmåga att minska inflammation, förbättra antioxidantaktivitet, främja självläkning och öka blodflödet kan bidra till att förhindra eller bromsa utvecklingen av kronisk njursjukdom och förbättra den totala njurfunktionen. Men som med alla växtbaserade kosttillskott är det viktigt att rådgöra med en vårdgivare innan du införlivar Cistanche-extrakt i din rutin för att säkerställa dess säkerhet och lämplighet för dina individuella behov.

Referenser

1. Akaydın Y, Ozcan Z. Hindi (Meleagris gallopavo) böbreğinin yapısı üzerinde ışık ve elektron mikroskobik çalışmalar. Ankara Üniv Vet Fak Derg. 2005; 52(1): 149–155.

2. Aslan S. Üriner sistem. In, Aslan S (Ed): Kanatlı Histolojisi. Dora Basım Yayın Dağıtım, Bursa, Turkiet. 2018: 85–98.

3. Batah AL. Morfologisk och histologisk studie för njurarna hos sothönsfågel (Fulica atra). Bas J Vet Res. 2012; 11(1): 128–136.

4. Can M, Ozdemir D. Kaya kekliği (Alectoris graeca) plexus sacralis'i üzerinde makro-anatomik araştırmalar. Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2012; 18(1): 141–146.

5. Casotti G, Braun E. Njuranatomi hos sparvar från olika miljöer. J Morphol. 2000; 243(3): 283–291.

6. Dhyaa AA, Ali FR, Azhar SK, et al. Jämförande anatomiska och histologiska egenskaper hos njuren hos harrier (Circus aeruginous), kyckling (Gallus domesticus) och gräsand (Anas platyrhynchos). Irakisk J Vet Sci. 2014; 38(1): 107–113.

7. Elbajory SIA. Morfometrisk studie av binjuren hos den vuxna sudanesiska kycklingen (Gallus domesticus) och ankan (Anas platyrhynchos). Curr Res J Biol Sci. 2012; 4: 239-241.

8. Gundersen HJ, Jensen EB. Effektiviteten av systematisk provtagning inom stereologi och dess förutsägelse. J Microsc. 1987; 147 (Pt 3): 229–263.

9. Gundersen HJ, Bendtsen TF, Korbo L, et al. Några nya, enkla och effektiva stereologiska metoder och deras användning i patologisk forskning och diagnostik. APMIS. 1988; 96(5): 379–394.

10. Howard CV, Reed MG. Opartisk stereologi, tredimensionella mätningar i mikroskopi. BIOS Scientific Publishers, Oxford, Storbritannien 1998: 39–68.

11. Humayun K, Aoyama M, Sugita S. Morfologiska och histologiska studier på binjuren hos kycklingen (Gallus domesticus). J Poult Sci. 2012; 49(1): 39–45.

12. Kocamıs H, Aslan S, Deprem T. Kazların böbrek yapısı üzerine histolojik ve histometrik inceleme. Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2003; 9(2): 157–160.

13. Koral Tasci S, Gulmez N, Aslan S, et al. Immunhistokemisk lokalisering av katalas i gäss (Anser anser) njure. Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2020; 26(1): 41–46.

14. Mutus R. Tavuk ve bıldırcında böbrek arterleri. İstanbul Üniv Vet Fak Derg. 1995; 21(1): 59–67.

15. Nickel R, Schummer A, Seiferle E. Tamfåglarnas anatomi. 1:a uppl. Verlag Paul Parley, Berlin, Tyskland 1977: 40–61.

16. Ozudogru Z, Özdemir D, Balkaya H, et al. Civcivlerde Adrenal Bezin Gelişimi Üzerine Farklı Fotoperiyotların Etkisi. Ataturk Univ Vet Bil Derg. 2017; 12(3): 250–258.

17. Richardson KC, Wooller RD, Casotti G. De relativa storlekarna och asymmetrin hos njurarna hos passerinfåglar från Australien och Nordamerika. J Anat. 1991; 175: 181–185, indexerad i Pubmed: 2050563.

18. Romeis B. Mikroskopisk teknik. R.Oldenburg, München, Tyskland 1948: 51–52.

19. Warui CN. Ljusmikroskopisk morfometri av njurarna hos fjorton fågelarter. J Anat. 1989; 162: 19–31, indexerad i Pubmed: 2808116.

20. Wells JW, Wight PAL. Binjurarna, I fysiologi och biokemi hos tamhöns. Bell DJ och Freeman GM eds. Academic Press, London 1971: 489–520.

N. Colcimen 1, G. Cakmak 2

1. Institutionen för histologi och embryologi, Medicinska fakulteten, Van Yuzuncu Yil University, Van, Turkiet.

2. Institutionen för anatomi, fakulteten för veterinärmedicin, Van Yuzuncu Yil University, Van, Turkiet.