Studien av Cistanche Deserticola-skivor och den vinångbehandlade produkten från Cistanche Deserticola

Skillnaden mellan kemiska komponenter och biologiska aktiviteter för råproduktskivorna och den vinångbearbetade produkten från Cistanche

Kontakt: emily.li@wecistanche.com

Ying Zhang,1,2 Yuewu Wang,3 Song Yang,1 Yunfeng Xiao,3 Haibin Guan,2 Xin Yue,2 Xiaoqin Wang,2 och Xiangri Li 1

Abstrakt

Som en välkänd kinesisk örtmedicin, denCistanche deserticolahar använts för behandling av njurbristsyndrom i Kina i tusentals år. Både råprodukten avCistanche deserticola skivor(RCD) och dessVinångbearbetad produkt(WSCD) används kliniskt för olika effekter. I denna studie, påverkan av ångningsprocessen med vin (SPW) frånCistanche deserticolapå kemiska sammansättningar och biologiska effekter undersöktes. Principal component analysis (PCA) och kvantitativ analys användes för att studera skillnaderna i de kemiska sammansättningarna. Effekterna av närande njurar undersöktes också för att jämföra skillnaderna mellan RCD (Cistanche deserticola skivor)och WSCD (Vinångbearbetad produkt). PCA-resultaten indikerade att den uppenbara separationen uppnåddes i RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD (Vinångbearbetad produkt). Resultaten av den kvantitativa analysen visade att WSCD har högre mängder totala polysackarider, totalt PhG, isoacteosid och osmanthusid B än RCD(Cistanche deserticola skivor), medan innehållet av 2'-acetylakteosid och acteosid minskade efter SPW. Jämförelsen av RCD och WSCD på biologiska aktiviteter visade att båda kunde återställa nivån av könshormon i modellen med njur-yang-brist och förbättra antioxidanteffekten. WSCD(Vinångbearbetad produkt)var mycket bättre på att öka inälvornas viktnjureoch sädesblåsa. Resultaten visade att SPW ändrade sina kemiska komponenter och förbättrade dess biologiska aktiviteter.

1. Introduktion

Cistanche deserticolaär en vanlig traditionell kinesisk medicin och har allmänt använts som en tonic i Kina och Japan i många år, allmänt känd som "Desert ginseng."Cistanche deserticolaspelades först in som en toppklass i "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" omkring 100 f.Kr. och användes för att behandla olika sjukdomar inklusive njurbrist, impotens, kvinnlig infertilitet, sjuklig leukorré, riklig metrorragi (vita) , kall känsla i länd och knän, och kronisk förstoppning hos äldre [1]. Hittills har flera huvudbeståndsdelar isolerats, såsom polysackarider [2, 3], fenyletanoidglykosider (PhGs) [1, 4], iridoider [1] och lignanoider [1, 5]. Bland dem har PhG och polysackarider visat sig vara de huvudsakliga biologiskt aktiva komponenterna iCistanche deserticola[6–9]. Moderna farmakologiska experiment har visat att Cistanche deserticola kan öka produktionen av testosteron och skydda spermier, stimulera cellproliferation och öka cellöverlevnadshastigheten, uppvisa markanta aktiviteter för sexuell styrka, förbättra minnet, anti-aging, rensning av fria radikaler och neuroskydd [10 –13].

För att minska toxiciteten och/eller förstärka effekterna bör de flesta av de traditionella kinesiska örterna bearbetas före receptet. De traditionella processtegen inkluderar rengöring, vattenprocess (malning i vatten, ångning och rostning) och eldprocess (omrörning med vin, vinäger, salt eller honung) [14]. Under processen kan de kemiska komponenterna ändras: det relativa innehållet av vissa komponenter kan ändras eller nya komponenter kan bildas [15]. ProcessenCistanche deserticolahar en lång historia ochCistanche deserticolabör bearbetas genom blötläggning i risvinet, ångning enligt beskrivningen i kinesisk farmakopé (2015 års upplaga) [16]. SPW har visat sig påverka deras effekter på njurmeridianen enligt teorin om traditionell kinesisk medicin (TCM) [17]. WSCD(Vinångbearbetad produkt)är först dokumenterad i "Lei Gongs Treatise on Preparation and Boiling of Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" i de norra och södra dynastierna i Kina. WSCD används bättre för att behandla njurbrister och skydda sperma som registrerats i "Taiping Shenghui Fang" i Songdynastin i Kina. Det fanns dock inga jämförande studier på de kemiska komponenterna mellan RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)än så länge.

Moderna farmakologiska undersökningar har indikerat att WSCD kan tonifiera njuren för att säkra essensen genom att stimulera hypotalamus-hypofys-gonadaxeln i varierande grad och är van vid behandling av brist i njuren såsom brist på njure-yang [18]. Men hittills har skillnaderna i biologiska aktiviteter mellan RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)har inte undersökts. Nyligen, för att underlätta den experimentella forskningen, har djurmodellen med njure-yang-brist duplicerats genom att injicera råttor med en hög dos hydrokortison, där råttor kommer att visa symtom som mycket liknar de som beskrivs i njure-yang-brist på TCM [19, 20] . Råttor med njur-yang-brist har alltid vissa symtom som viktminskning, minskad matkonsumtion, svaghet, ökat vattenintag och minskad aktivitet. Baserat på denna djurmodell upptäcktes skillnaderna i närande-njureffekter mellan RCD och WSCD och avslöjade till och med den vetenskapliga essensen av den traditionella kinesiska processen.

Cistanche deserticola har många funktioner

2. Material och metoder

2.1. Material och kemikalier

Standardsubstansen såsom akteosid, isoakteosid, echinakosid, cistanosid A och 2'-acetylakteosid köptes från Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Shanghai, Kina). Cistanosid F, cistanosid C, osmanthusid B och tubulosid B köptes från Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, Kina). Renheten i alla standarder var inte mindre än 98 procent. Metanol och acetonitril av HPLC-kvalitet köptes från Aladdin Chemistry Inc. (Shanghai, Kina). Avjoniserat vatten erhölls med ett MilliQ50 SP Reagent Water System (Bedford, MA, USA) för att bereda prover och mobila lösningar. Alla andra organiska lösningsmedel som användes i denna studie var av analytisk kvalitet och köptes från Shanghai Chemical Co. Ltd (Shanghai, Kina).

2.2. Samling av prover

Allt det råaCistanche deserticola(7 partier av prover) samlades in av Inner Mongolia Medical University från Inner Mongolia och Ningxia-provinserna. Alla identifierades somcistanche deserticolaYC Ma av Xiao-qin Wang, professor vid farmakognosiavdelningen vid Inre Mongoliets medicinska universitet. Ett kupongexemplar deponerades vid School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University. Efter insamling, blomställningarna avCistanche deserticolatogs bort, stjälkarna skivades och torkades vid rumstemperatur med luft, och sedan delades skivorna slumpmässigt upp i två grupper i varje sats: en är RCD(Cistanche deserticola skivor)och den andra används för framställning av WSCD(Vinångbearbetad produkt).

WSCD(Vinångbearbetad produkt)framställdes i labbet enligt kinesisk farmakopé (2015 års upplaga) [16], vilket innebär att den skivade RCD(Cistanche deserticola skivor)blötlades i risvin med en stängd behållare i 6 timmar tills de var mjuka, ångades i ett vattenbad i ytterligare 12 timmar tills ytan blev svart och torkades vid rumstemperatur med luft.

2.3. Principal Component Analysis (PCA)

Principal component analysis (PCA) är en sofistikerad teknik som ofta används för att reducera dimensionerna av multivariata problem. Det minskar dimensionaliteten hos den ursprungliga datamängden genom att förklara korrelationen mellan ett stort antal variabler i termer av ett mindre antal underliggande faktorer utan betydande förlust av information. I denna studie, skillnaderna mellan RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)utfördes av oövervakad PCA med SIMCA 13.0-programvaran baserad på de relativa toppareorna i HPLC-kromatografin. Med hjälp av PCA fann man de viktigaste kemikaliernas inverkan på klassificeringen bland olika prover.

2.4. Provberedning

2.4.1. Extraktberedning för djur

RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)valdes från de prover som samlades in och preparerades enligt beskrivningen i avsnitt 2.2.

Lufttorkad och skivad RCD(Cistanche deserticola skivor)pulveriserades med en pulveriserare (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), vägde exakt 1,0 kg och blötlades i 50 procent etanol i 30 minuter, och förhållandet mellan växt/etanol som användes var 1/ 10 (vikt/vikt). Och sedan extraherades den under återflöde två gånger under 1 timme varje gång. De två extrakten kombinerades och filtrerades och etanolen utvanns under reducerat tryck vid 60 grader. Det totala råextraktet av PhG torkades i vakuum vid 60°C och renades med makroporöst harts. Slutligen erhölls PhGs-extraktet av RCD och vägdes noggrant.

PhGs-extraktet av WSCD(Vinångbearbetad produkt)erhölls enligt samma procedur ovan.

Sedimenten från att extrahera PhGs lufttorkades och avkokades två gånger i 1,5 h varje gång med 20 gånger vatten. De två extrakten kombinerades och centrifugerades vid 4000 rpm under 10 min, och supernatanten koncentrerades och fälldes ut med 95 % etanol. Efter centrifugering torkades fällningen i vakuum vid 60 grader. Slutligen polysackaridextraktet av RCD(Cistanche deserticola skivor)erhölls och vägdes noggrant.

Polysackaridextraktet av WSCD(Vinångbearbetad produkt)erhölls enligt samma procedur ovan.

PhG och polysackaridextrakt av RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)Blandades suspensioner i vatten, respektive när råttorna behandlades oralt.

2.4.2. Provberedning för bestämning av PhG

PhGs-extrakten i avsnitt 2.4.1 vägdes noggrant som 0,15 g och extraherades genom ultraljudbehandling med 50mL 50 procent vattenhaltig metanollösning under 40 min. Efter kylning fylldes viktförlusten på med 50 procent metanol. Alla prover och lösningsmedel filtrerades genom ett 0,45 μm membran före analys. Innehållet i fyra PhGs i RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)bestämdes med hjälp av HPLC, och de totala PhGs bestämdes med användning av UV-spektrofotometri.

2.4.3. Provberedning för bestämning av polysackarid

Polysackaridextrakten i avsnitt 2.4.1 vägdes noggrant som 0.10 g och extraherades genom ultraljudsbehandling med 50 ml varmt vatten under 40 minuter; efter kylning fylldes viktminskningen på med vatten. Alla prover och lösningsmedel filtrerades genom ett 0,45 μm membran före analys.

2.5. Kromatografiskt tillstånd för HPLC och bestämning av de fyra PhG

Den kromatografiska separationen utfördes i ett UltiMate 300{{40}} HPLC-system (Thermo Fisher Scientific, USA), utrustat med en dubbelgradientpump, ett kolonnfack och en DAD-detektor. Data samlades in och bearbetades med ett ChromeLeon Chromatography Data System. Proverna separerades på en Agilent Zorbax SB-C18 (250mm×4,6 mm, 5 μm) med en C18-skyddskolonn (4,6mm×12,5 mm, 5 μm). Den mobila fasen bestod av acetonitril (A) och 0,1 procent fosforsyralösning (B) med en flödeshastighet av 1 ml/min. Gradientelueringen är som följer: initial 0–13 min, linjär förändring från AB (5:95, v/v) till AB (15:85, v/v); 13–25 min, linjär förändring till AB (20:80, v/v); 25–43 min, linjär förändring till AB (25:75, v/v). Detektorns våglängd övervakades vid 330 nm. Kolonntemperaturen var inställd på 30 grader och provvolymen som injicerades var 10 μL [21]. Stamlösningen innehållande fyra referensstandarder framställdes genom att lösa upp referensstandarderna i 50 procent metanol till en slutkoncentration av 0,20 mg/ml för 2-acetylakteosid, 0,20 mg/ml för akteosid, 0,05 mg/ml för osmanthusid B, och 0,10 mg/ml för isoakteosid. Lösningen späddes sedan till fem olika koncentrationer med tre replikat för att upprätta kalibreringskurvor. Provinnehållet uttrycktes i g/kg råvikt.

Studien av skivor av Cistanche deserticola och den vinångbehandlade produkten från Cistanche deserticola

2.6. Bestämning av totalt PhG

De totala PhGs bestämdes med hjälp av UV-spektrofotometrimetoden vid våglängden 330nm i UV1000-spektrofotometern (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). Stamlösningen framställdes genom att lösa echinakosidstandarder i 50 procent metanol till en slutkoncentration av 0,10 mg/ml och späddes sedan till fem olika koncentrationer med tre replikat för att upprätta kalibreringskurvor.

2.7. Bestämning av polysackarider

Bestämningen av polysackarider utfördes med användning av fenol-svavelsyrametoden. 1 ml av provlösningen placerades i ett 20 ml provrör med en glaspropp, och 1 ml 6-procentig fenollösning och 5 ml koncentrerad svavelsyra tillsattes och skakades i 5 minuter. Blandningen överfördes till ett kokande vattenbad under 10 min och kyldes till rumstemperatur för ultraviolett detektion. Den ultravioletta absorptionen övervakades vid 480 nm i en UV1000 spektrofotometer. Referensstandarden för vattenfri D-glukos vägdes noggrant och löstes i destillerat vatten till en slutlig koncentration av 0,10 mg/ml. Därefter späddes lösningen till fem olika koncentrationer med tre replikat för att upprätta kalibreringskurvor.

2.8. Djurförsök

2.8.1. Djur och bostäder

SD-hanråttor av sexuell mognad (180-200 g) köptes från Xinglong (Beijing) Experimental Animal Farm (ålder: 6 veckor gamla) och försöksdjurslicensen var SCXK (Jing):2016-0003. Alla djurförsök godkändes av Inner Mongolia Medical University Animals Research Committee och utfördes enligt National Institute of Healths riktlinjer angående principerna för djurvård (2004). Alla djur hölls i ett barriärsystem med en reglerad temperatur på 21–23 grader och en relativ luftfuktighet på 40–65 procent och på en 12 timmars mörk/ljus-cykel. Råttorna fick ad libitum mat och vatten och acklimatiserades till ovanstående miljö under en vecka.

2.8.2. Dosering och provtagning

Råttorna överfördes till individuella metaboliska burar och delades slumpmässigt in i 6 grupper (= 10 i varje grupp). De gavs en intramuskulär injektion av 15 mg/kg hydrokortisonnatriumsuccinat (köpt från Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, Kina) under 2 veckor förutom grupp 1 som injicerades med en lika stor volym fysiologisk saltlösning. På den 14:e dagen samlades kroppsvikten, matkonsumtionen, vattenintaget, urinvolymen och spontan aktivitet inom 5 minuter för att säkerställa om modellen för njur-yang-brist var framgångsrik. Från den 15:e dagen behandlades 6 grupper enligt följande: grupp 1 och grupp 2 (modellgrupp, M) behandlades med en lika stor volym destillerat vatten, grupp 3 (PhGs-extrakt av RCD(Cistanche deserticola skivor)grupp, PR) behandlades med 0,42 g/kg PhGs-extrakt av RCD, vilket var lika med cirka 1,8 g/kg av råvaranCistanche deserticolaoch de andra grupperna var desamma, grupp 4 (PhGs-extrakt av WSCD(Vinångbearbetad produkt)grupp, PW) behandlades en dos av 0,49 g/kg PhGs extrakt av WSCD(Vinångbearbetad produkt)grupp 5 (polysackaridextrakt av RCD(Cistanche deserticola skivor)grupp, SR) behandlades med 0.18 g/kg polysackaridextraktet av RCD, och grupp 6 var (polysackaridextrakt av WSCD(Vinångbearbetad produkt)grupp, SW) behandlades en dos av 0,22 g/kg polysackaridextraktet av WSCD. Alla råttor behandlades med magperfusion per dag. Efter en månads behandling nekades råttorna mat i 12 timmar före blodprovtagning. Nästa dag sövdes alla råttor och avlivades. Under testningen vägdes råttorna en gång i veckan för justering av dosen och vägdes igen innan de avlivades. Blodprover togs i ett Eppendorf-rör med 10 procent EDTA-2Na-lösning. Serumet separerades via centrifugering vid 2000 rpm under 15 minuter och lagrades vid -80 grad för vidare användning. Dessutom togs njurar, testiklar, bitestiklarna, prostatakörteln och sädesblåsan bort och vägdes snabbt. Efter vägning frystes testiklarna i flytande kväve för bestämning av SOD och MDA.

2.9. Hormon- och antioxidanteffektanalys

Nivåerna av testosteron (T) och östradiol (E2) bestämdes i Qingdao Kechuang Quality Inspection Center genom radioimmunitet och kolorimetrisk metod. De frusna testiklarna vägdes och blandades med 20 gånger kall fysiologisk saltlösning (W/W). Testikelhomogenatet erhållet genom vävnadshomogenat i isbadet centrifugerades för att erhålla supernatanten. Innehållet i SOD och MDA i testikeln bestämdes med SOD- och MDA-kit enligt instruktionerna.

2.10. Statistisk analys

Betydelsen av skillnader mellan grupper jämfördes genom ett envägs ANOVA-test följt av Scheffes test med en signifikansgräns på 0.05 med SPSS-mjukvaran 25.0. Alla data uttrycktes som medelvärde ± standardavvikelse (SD) (n=3).

3. Resultat

3.1. Analysen av PhG-förändringar efter SPW med PCA

För att jämföra PhG-förändringarna efter SPW valdes 9 kromatografiska toppar ut som karakteristiska toppar och identifierades. Deras strukturer visades i figur 1, vars relativa toppareor beräknades för kvantitativt uttryck. HPLC-kromatogrammet som visas i figur 2, vilket indikerade att det relativa innehållet av huvudsakliga PhG ändrades under SPW. PCA-analys på de relativa toppareorna för 9 komponenter erhölls för att urskilja olika prover. RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)var långt ifrån varandra i plotten av poängen (Figur 3(a)), vilket indikerade att proverna klassificerades i två kluster. Så man tror att innehållet i de kemiska beståndsdelarna var olika. För att ytterligare hitta de potentiella kemiska markörerna för diskrimineringen utfördes en utökad statistisk analys för att generera laddnings-Bi-diagrammet (Figur 3(b)). Topparna 2, 3, 4, 6 och 7 kommer att minska efter SPW medan topparna 5, 8 och 9 kommer att öka, och alla var de viktigaste komponenterna för att särskilja RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt). De relativa innehållen av topp 1 varieras inte mycket efter SPW.

Figur 1 Kemiska strukturer av PhGs iCistanche deserticolaYC Ma.

Figur 2 HPLC-kromatogram av standardsubstans (a), RCD(Cistanche deserticola skivor)(b) och WSCD(Vinångbearbetad produkt)(c). Toppar: (1) cistanosid F, (2) echinakosid, (3) cistanosid A, (4) acteosid, (5) isoacteosid, (6) cistanosid C, (7) 2'-acetylakteosid, (8) osmanthusid B, och (9) tubulosid B.

Figur 3 PCA poäng plot (a) och laddning Bi plot (b) av RCD(Cistanche deserticola skivor)(grön cirkel) och WSCD (röd cirkel). RCD och WSCD klassificerades i två kluster. Topparna 2, 3, 4, 6 och 7 är de viktigaste komponenterna för att skilja RCD och WSCD, som kommer att minska under SPW; topparna 5, 8 och 9 är också de viktigaste komponenterna för skillnaderna mellan RCD och WSCD(Vinångbearbetad produkt), vilket kommer att öka under SPW.

3.2. Innehållet i totala polysackarider och PhG ändrades efter SPW

Som visas i figur 3(b), hade 8 komponenter (5, 8 och 9 ökade och 2, 3, 4, 6 och 7 minskade) förändrats signifikant och hade en stor inverkan på provklustringen. Bland dem hade isoacteosid och Osmanthusid B ökat mest medan 2′-acetylacteosid och acteosid minskade mest. Så innehållet av isoakteosid, Osmanthusid B, 2'-acetylakteosid och acteosid bestämdes med HPLC. Som visas i figur 1 var topp 4 akteosid, topp 5 var isoakteosid, topp 7 var 2'-acetylakteosid och topp 8 var osmanthusid B. Den totala PhGs i RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)bestämdes med UV-metoden och den totala mängden polysackarider utfördes med användning av fenol-svavelsyrametoden, resultaten visades i tabell 1, isoacteosid, Osmanthusid B, totala polysackarider och PhGs i WSCD hade ökat signifikant jämfört med RCD. 2'-acetylakteosid och acteosid hade minskat signifikant.

Tabell 1 Innehållet av polysackarider och PhG i RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD(Vinångbearbetad produkt)(mg/g) (n=3).

Notera. Betydande skillnader med RCD(Cistanche deserticola skivor)betecknades som *p < 0.05.

3.3. Den hydrokortisoninducerade modellen för njur-Yang-brist gjordes

Jämfört med normal grupp, efter 2 veckors intramuskulär injektion av 15 mg/kg hydrokortisonnatriumsuccinat, minskade kroppsvikten, matkonsumtionen och den spontana aktiviteten signifikant (P<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

Tabell 2 Indikatorerna förändrades efter intramuskulär injektion av hydrokortisonnatriumsuccinat, (n=10).

Notera. Signifikanta skillnader med N-gruppen betecknades som^# p<>

Figur 4 Nivåerna för T och E2: (a) nivån på T och (b) nivån på E2. Signifikanta skillnader med M-gruppen betecknades som^∗p < 0.05.="" signifikanta="" skillnader="" med="" n-gruppen="" betecknades="">^#p < 0.05.

3.4. Effekten av extrakt på den genomsnittliga vikten och indexet för inälvor

Alla råttor och deras inälvor vägdes och sedan beräknades det genomsnittliga inälvsindexet.

Jämfört med N-gruppen hade M-gruppen signifikant minskat inälvsvikterna för njure, sädesblåsa, epididymis och testikel, vilket också indikerade att den hydrokortisoninducerade modellen för njur-yangbrist var framgångsrik. Jämfört med M-gruppen hade all observerad visceravikt ökat i PW- och SR-gruppen, PR-gruppen hade ökad vikt av testikel, bitestikel, sädesblåsa och prostatakörtel, och SW-gruppen hade ökad vikt av njure, testikel, bitestikel, och sädesblåsa. Jämfört med PR-grupperna var PW-gruppen bättre i njurarna, sädesblåsan och prostatakörteln. Det fanns ingen signifikant skillnad mellan SR- och SW-grupperna i vikten av testikel, epididymis, sädesblåsa och prostatakörtel. Resultaten visades i tabell 3.

Tabell 3 Visceravikten (g) (n=10).

Notera. Signifikanta skillnader med M-gruppen betecknades som^∗p < 0.05.="" signifikanta="" skillnader="" med="" n-gruppen="" betecknades="">^#p < 0.05.

Jämfört med N-gruppen minskade visceraindexen för njure, testikel, epididymis och sädesblåsan i M-gruppen. Jämfört med M-gruppen hade PW- och SR-gruppen ökat indexet för njure, testikel, prostatakörtel och sädesblåsa, PR-grupperna hade ökat indexet för testikeln, prostatakörteln och sädesblåsan, och SW-gruppen hade ökade indexet för njure, testikel och sädesblåsa. Jämfört med PR-grupperna var PW-gruppen bättre i njurarna, sädesblåsan och prostatakörteln. SW- och SR-grupperna hade ett liknande index för njure, testikel, sädesblåsa och epididymis. Resultaten visades i tabell 4.

Tabell 4 Genomsnittligt visceraindex (g/100g) (n=10).

Notera. Signifikanta skillnader med M-gruppen betecknades som^∗p < 0.05.="" signifikanta="" skillnader="" med="" n-gruppen="" betecknades="">^#p < 0.05.

3.5. Effekten av extrakt på nivån av hormon (T och )

Som visas i figur 4, jämfört med M-gruppen, hade nivåerna av T och E2 i alla behandlingsgrupper (PW, PR, SW och SR-gruppen) ökat signifikant (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Effekten av extrakt på antioxidanteffekt

SOD är ett viktigt antioxidantenzym. MDA är produkten av lipidperoxidation som är indikatorn för att återspegla graden av oxidantskada. Innehållet i SOD och MDA återspeglar omfattningen av oxidant- och antioxidantförmåga. Som visas i figur 5, jämfört med M-gruppen, hade antioxidanteffekten i alla behandlingsgrupper (PW, PR, SW och SR) förbättrats. SW-gruppen hade störstantioxidanteffekt.

Figur 5 Innehållet i MDA och SOD: (a) innehållet av MDA och (b) innehållet av SOD. Signifikanta skillnader med M-gruppen betecknades som^∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>

4. Diskussion

Före klinisk applicering bör råmaterialen utsättas för traditionell kinesisk processteknik. Ångkokning är en av de traditionella behandlingsmetoderna för vissa kinesiska medicinalväxter, vilket ger en svart färg som produceras av Maillard-reaktionen [22], vilket ökar mängden av vissa bioaktiva komponenter [23] och farmakologiska aktiviteter. WSCD(Vinångbearbetad produkt)som en av processprodukterna är bättre när det gäller närande njurar jämfört med RCD(Cistanche deserticola skivor)som dokumenterats i 2015 års upplaga av kinesisk farmakopé. I denna studie indikerade PCA-resultaten att SPW hade ändrat den kemiska profilen för RCD(Cistanche deserticola skivor). Dessutom hade 8 komponenter i PhGs förändrats avsevärt. Det totala antalet PhG, det totala antalet polysackarider, isoakteosid och Osmanthusid B hade ökat mest, medan 2′-acetylakteosid och acteosid minskade efter SPW. Resultaten visade att SPW kunde förändra de kemiska beståndsdelarna i RCD(Cistanche deserticola skivor). Innehållet av PhG med 1,3,4-trisubstituerade glukopyranosyldelar (såsom acteosid, 2'-acetylacteosid och cistanosid C) minskade i WSCD(Vinångbearbetad produkt)dock ökade koncentrationerna av deras isomerer med 1,3,5-trisubstituerad glukopyranosyldel (såsom isoacteosid och tubulosid B), vilket indikerade att omvandlingen av kemiska beståndsdelar kan ske under SPW, och hydrolysreaktionen kommer att vara en av skälen. De föreslagna transformationsvägarna visades i figur 6. Ökningen av polysackarider efter SPW hade också rapporterats i ginseng [24].

Figur 6 Föreslagna transformationsvägar för PhGs i Cistanche deserticola YC Ma under SPW.

Cistanche deserticoladokumenterades för att stärka njuren och vända minskningen av testosteronnivån och ha antioxidanteffekt och antiinflammatorisk verkan [25], och PhGs och polysackarider var de två huvudsakliga biologiskt aktiva komponenterna i Cistanche deserticola. Som PhGs hade isoacteosiden och Osmanthuside B antioxiderande och antiinflammatoriska effekter [26, 27]. Så, jämförelsen av farmakologiska effekter i testosteronnivå och antioxidanteffekt av RCD och WSCD(Vinångbearbetad produkt)studerades. I modellen med hydrokortison-inducerad njur-yang-brist stördes det endokrina och nivån av könshormon minskade kraftigt i blodet. I denna studie visade resultaten av könshormonanalys att både RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD kunde avsevärt öka nivåerna av T och E2, och både PhG och polysackarider visade förbättringen av könshormoner. WSCD var bättre än RCD(Cistanche deserticola skivor), särskilt i PhG-extraktgrupper. Resultaten av visceraindexen visade att både PhG och polysackarider kan förbättra visceravikterna och deras viktindex. I PhG-extraktgrupper, WSCD(Vinångbearbetad produkt)är bättre än RCD när det gäller att öka vikten och indexet för njurar och sädesblåsor. För övrigt,Cistanche deserticolahar en betydande antioxidanteffekt, speciellt polysackaridextraktgrupperna med WSCD. Som diskuterats ovan, både RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD kan förbättra njur-yang-bristsyndromet; WSCD är dock bättre än RCD när det gäller att öka nivån av T, E2, vikterna och indexen för bitestiklarna och testiklarna. Resultaten av studien av de farmakologiska effekterna visade att SPW hade förändrat de kemiska komponenterna i PhG och ökat innehållet av polysackarider, vilket i sin tur ökade könshormonnivån och ökadeantioxidanteffekt.

5. Sammanfattning

Studien var att upptäcka förändringen av PhGs, totala polysackarider och den farmakologiska effekten vid RCD(Cistanche deserticola skivor)och WSCD på råttan med njur-yang-brist, särskilt på hormonnivå och antioxidanteffekt. Denna studie har visat att processen med traditionella kinesiska örter kan förändra deras kemiska beståndsdelar och påverka deras bioaktivitet. Det stöds också att råvaror och förädlade produkter ordinerades olika på kliniken.

Datatillgänglighet

De data som används för att stödja resultaten av denna studie är tillgängliga från motsvarande författare på begäran.

Intressekonflikt

Författarna förklarar att de inte har några intressekonflikter.

Författarbidrag

Ying Zhang och Song Yang designade experimenten. Ying Zhang, Yuewu Wang och Yunfeng Xiao genomförde provinsamlingen och beredningen. Ying Zhang analyserade uppgifterna och utarbetade uppsatsen. Xiangri Li och Xiaoqin Wang ansvarade för studiehandledning. Alla författare deltog i att skriva och ge feedback på uppsatsen. Alla författare har läst och godkänt den slutliga uppsatsen.

Erkännanden

Detta arbete stöddes av bidrag från bearbetningsprocedurerna för de beredda skivorna av kinesiska rådroger (nr YP-PZ-2014). Speciellt tack till Wenjia Qu och Tianying Jia för deras stora hjälp med insamlingen avCistanche deserticola.

Referenser

1. Y. Jiang och P.-F. Tu, "Analysis of chemical constituents in Cistanche species," Journal of Chromatography A, vol. 1216, nr. 11, s. 1970–1979, 2009.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

2. W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. Liang, Y.-J. Zhang och X.-Q. Jiao, "Strukturanalys av vattenlöslig polysackarid SPA isolerad från stammen avCistanche deserticolaMa," Chemical Journal of Chinese Universities, vol. 26, nr 3, s. 461–463, 2005.

Se på: Google Scholar

3. Q. Dong, J. Yao, J.-N. Fang och K. Ding, "Strukturell karakterisering och immunologisk aktivitet av två kallvatten extraherbara polysackarider frånCistanche deserticolaYC Ma," Carbohydrate Research, vol. 342, nr 10, s. 1343–1349, 2007.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

4. X.-M. Wu och P.-F. Tu, "Isolering och karakterisering av -(1→6)-glukaner frånCistanche deserticola," Journal of Asian Natural Products Research, vol. 7, nr 6, s. 823–828, 2005.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

5. B. Košíková, A. Ebringerová och R. Naran, "Karakterisering av lignin-kolhydratfraktioner isolerade från träparasitenCistanche deserticolaYC Ma." Holzforschung, vol. 53, nr 1, s. 33–38, 1999.

Se på: Google Scholar

6. G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu och C. Li, "Tubulosid B från Cistanche salsa räddar PC12-neuroncellerna från 1-metyl-4-fenylpyridiniumjoninducerad apoptos och oxidativ stress," Planta Medica, vol. 68, nr. 11, s. 966–970, 2002.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

7. M. Deng, J.-Y. Zhao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang och Z.-B. Li, "Skyddande effekt av tubulosid B på TNF alfa-inducerad apoptos i neuronala celler," Acta Pharmacologica Sinica, vol. 25, nr. 10, s. 1276–1284, 2004.

Se på: Google Scholar

8. X. Geng, L. Song, X. Pu och P. Tu, "Neuroprotective effects of phenylethanoid glycosider from Cistanches salsa against 1-methyl-4-phenyl-1,2,3 ,6-tetrahydropyridin (MPTP)-inducerad dopaminerg toxicitet i C57-möss," Biological & Pharmaceutical Bulletin, vol. 27, nr. 6, s. 797–801, 2004.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

9. H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng och ZH Wang, "Echinacoside förhindrar de striatala extracellulära nivåerna av monoaminneurotransmittorer från att minska i 6-hydroxidopaminskada råttor," Journal of Ethnopharmacology, vol. . 114, nr. 3, s. 285–289, 2007.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

10 J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia och R. Zheng, "Farmakologiska aktiviteter och mekanismer för naturliga fenylpropanoidglykosider," Die Pharmazie, vol. 58, nr. 11, s. 767–775, 2003.

Se på: Google Scholar

11. G. Fu, H. Pang och YH Wong, "Naturligt förekommande phenylethanoid glycosider: Potential leads for new therapeutics," Current Medicinal Chemistry, vol. 15, nr. 25, s. 2592–2613, 2008.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

12. X.-W. Wang, X.-F. Wang och L.-Y. Wu, "Förbättring av minnet av möss av fenyletanoidglykosider avCistanche deserticola," Chinese Pharmacological Bulletin, nr 19, s. 41-42, 2002.

Se på: Google Scholar

13. J.-X. Xie och C.-F. Wu, "Effekten av etanolextrakt avCistanche deserticolaom innehållet av monoaminneurotransmittorer i råtthjärnan," Chinese Traditional and Herbal Drugs, nr 24, s. 417–419, 1993.

Se på: Google Scholar

14. H. Wu och C.-J. Hu, Chinese Medicine Process Discipline, People's Medical Publishing House, Peking, Kina, 2012.

15. ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., "En unik fråga i standardiseringen av kinesisk materia medica: bearbetning," Planta Medica, vol. 76, nr. 17, s. 1975–1986, 2010.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

16. Chinese Pharmacopoeia Commission, Pharmacopoeia of the People's Republic of China 2015, vol. IV, Folkrepubliken Kinas farmakopé, Peking, Kina, 2015.

17. J.-M. Chen, Enlightening Primer of Materia Medical, Traditional Chinese Medicine Ancient Books Press, Peking, Kina, 2009.

18. B.-R. Li och Y.-C. Hon, "Effekter av tonifierande njurläkemedel på hypotalamus-hypofys-gonad (HPG) axel," Journal of Traditional Chinese Medicine, nr. 7, s. 63–65, 1984.

Se på: Google Scholar

19. M. Chen, L. Zhao och W. Jia, "Metabonomisk studie av de biokemiska profilerna för en hydrokortisoninducerad djurmodell," Journal of Proteome Research, vol. 4, nr. 6, s. 2391–2396, 2005.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

20. Q. Chen och N.-Y. Yi, "Djurmodellerna och drogerna för Yin-brist och Yang-brist," i Experimentell metodik för farmakologisk forskning i traditionell kinesisk medicin, People's Health Publishing House, Peking, Kina, 1993.

Se på: Google Scholar

21. Z.-G. Ma, Z.-L. Yang, P. Li och C.-H. Li, "Samtidig bestämning av åtta fenyletanoidglykosider i olika arter av släktet Cistanche genom högpresterande vätskekromatografi," Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, vol. 31, nr. 18, s. 2838–2850, 2008.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

22. Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song och A. Lu, "Maillard-reaktion involverad i ångprocessen av roten av Polygonum multiflorum," Planta Medica, vol. 75, nr. 1, s. 84–88, 2009.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

23. W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "Traditionell bearbetning påverkar starkt metabolitsammansättningen genom hydrolys i Rehmannia glutinosa-rötter," Chemical & Pharmaceutical Bulletin, vol. 59, nr. 5, s. 546–552, 2011.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

24. Y. Jin, Y.-J. Kim, J.-N. Jeon et al., "Effekten av vit, röd och svart ginseng på fysikalisk-kemiska egenskaper och ginsenosider," Plant Foods for Human Nutrition, vol. 70, nej. 2, s. 141–145, 2015.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

25. T. Wang, X.-Y. Zhang och W.-Y. Xie, "Cistanche deserticolaYC Ma, 'desert Ginseng': A review," American Journal of Chinese Medicine, vol. 40, nr 6, s. 1123–1141, 2012.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

26. S.-Y. Nam, H.-Y. Kim, M.-S. Yoou et al., "Anti-inflammatoriska effekter av isoacteosid från Abeliophyllum distichum," Immunopharmacology and Immunotoxicology, vol. 37, nr. 3, s. 258–264, 2015.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

27. S. Chae, JS Kim, KA Kang, et al., "Antioxidant aktivitet av isoacteoside från Clerodendron trichotomum," Journal of Toxicology and Environmental Health, del A. Aktuella frågor, vol. 68, nr. 5, s. 389–400, 2005.

Visa på: Publisher Site|Google Scholar

Från: Evidensbaserad komplementär och alternativ medicin / 2019 / Artikel

Volym 2019 |Artikel-ID 2167947|https://doi.org/10.1155/2019/2167947