Studien av Cistanche Deserticola-extrakt som reglerar M2-liknande makrofagpolarisering för att minska cellmigrering och kolonibildning vid bröstcancer

Sammanfattning: Mål Att utforska den reglerande mekanismen för etanolextrakt av Cistanche deserticola epimedium brevican på makrofagpolarisering in vitro och dess effekt på M{{0}}liknande makrofager som främjar 4T1-cellmigration och kolonibildning. Metoder CCK-8-metoden användes för att detektera effekten av olika koncentrationer av etanolextrakt av Cistanche deserticola deserticola på aktiviteten av benmärgshärledda makrofager (BMDM), och bestämma den säkra koncentrationen av etanolextrakt av Cistanche deserticola deserticola deserticola; Western blotting och qRT PCR användes för att detektera effekten av etanolextrakt av Cistanche deserticola deserticola på uttrycket av arginas-1 (Arg-1) och CD163, markörerna för M2-liknande makrofager; QRT PCR användes för att detektera effekten av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola på inflammatorisk zon 1 (Fizz1) och peroxisomproliferatoraktiverad receptor (PPAR) av M2-tumörassocierade makrofager (TAMs) relaterade gener (peroxisom-proliferatoraktiverad mottagare, PPAR ）, effekterna av kitinas 3-som 3 (Ym1), kemokin 24 (CCL24), makrofag Galaktos typ C-typ Lektin 2 (MGL2) och interferon regulatorisk faktor 4 (IRF4) mRNA-uttryck; Effekten av etanolextrakt av Cistanche deserticola deserticola på M2 TAMs som främjar 4T1-cellmigrering detekterades genom skraptest; Effekten av etanolextrakt av Cistanche deserticola deserticola på tillväxten av 4T1-celler stimulerade av M2 TAMs detekterades genom koloniexperiment. Resultaten visade att etanolextraktet av Epimedium hade inga toxiska eller biverkningar på BMDM-celler vid en koncentration av 0,015 625 till 2,000 000 mg/ml; Etanolextraktet av Cistanche deserticola hämmar signifikant de M2 ​​TAMs-relaterade generna Arg{{ 36}}, CD163, Fizz1, PPAR , Uttrycket av CCL24, Ym1, MGL2 och IRF4 (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

Nyckelord: Cistanche deserticola; Makrofager; M2-polarisation; Bröstcancer; Migration; Kolonibildning; Bensoinsyra; koniferylaldehyd; Emodin; Vaniljsyra

Effekter av Cistanche-Antitumor

Bröstcancer är den huvudsakliga maligna tumören som äventyrar kvinnors hälsa, och även den näst vanligaste orsaken till cancerdöd i världen [1-2]. I det sena stadiet av bröstcancer finns lung- och levermetastaser. När organmetastaser inträffar kommer överlevnadsgraden och livskvaliteten för patienter att minska kraftigt [3]. Förstahandsbehandlingen av bröstcancer bygger huvudsakligen på kemoterapi av antracyklin, paklitaxel och andra cellgifter, men läkemedelsresistens uppstår ofta under behandlingen. Därför är det mycket viktigt att utforska den patologiska mekanismen för bröstcancer och hitta effektiva behandlingsmetoder. Makrofager är avgörande för förekomsten och utvecklingen av olika tumörer [4-5], och biomarkörer för makrofager kan fungera som prognostiska indikatorer. Den höga frekvensen av makrofaginfiltration är relaterad till den dåliga prognosen för bröstcancer. Tumörassocierade makrofager (TAM) är den mest typiska typen av tumörinfiltrerande immunceller. De spelar en viktig roll från tidig cancer i bröstcancer till progression, särskilt metastaser [6]. TAM är involverade i metastaser, angiogenes, matrixremodellering, invasion och immunsuppression av bröstcancer. Traditionell kinesisk medicin spelar en viktig roll i hela behandlingsförloppet för bröstcancer. Traditionell kinesisk medicin har egenskaperna hos flera komponenter, vägar och mål, vilket kan minska antalet återfall och metastaser hos tumörpatienter, förbättra deras livskvalitet och förlänga deras överlevnadstid. Cistanche deserticola deserticornu Maxim. Det är en Berberidaceae-växt av Ranunculales. Den är söt och söt i smaken, varm till sin natur och följer de två kanalerna lever och njure. Det har effekterna att stärka muskler och skelett, tonifiera njurens yang, skydda det kardiovaskulära systemet [7], främja benbildning [8], reglera immunförsvaret [9] och hämma cancer [10]. Forskning visar att alkoholextraktet av Cistanche deserticola kan hämma spridningen av bröstcancerceller [11], men forskningen om hur alkoholextraktet av Epimedium påverkar den tumörimmuna mikromiljön av bröstcancer har inte rapporterats. Därför avser denna studie att undersöka effekten av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola på M2-liknande makrofager och dess reglering på 4T1 bröstcancercellmigration och kolonibildning, för att tillhandahålla experimentell grund och teoretisk vägledning för uppföljningen klinisk tillämpning av Epimedium.

Cistanche pulver hälsofördelar - Antitumor

Klicka här för att se produkter från Cistanche

【Be om mer】 E-post:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Material

1.1 Djur och cell

SPF Grade Hone C57BL/6 Mus, 8 veckor gammal, köpt från Sibeifu (Beijing) Biotechnology Co., Ltd., med djurcertifikat nummer 110324210105240115. Mössen föds upp på djurexperimentellt centrum vid det femte medicinska centret på General Hospital of folkets befrielsearmé. Under hela experimentperioden fick mössen gratis mat och vatten och fick en cykel i 12-timme ljus/12-timme. Djurförsök utfördes enligt riktlinjerna för vård och användning av försöksdjur och godkändes av det femte medicinska centret vid Folkets befrielsearmés allmänna sjukhus. Det etiska godkännandenumret för djurförsök är IACUC-2021-0007. 4T1-celler köptes från Shanghai Fuheng Biotechnology Co., Ltd.

Experimentell studie på Cistanche deserticola

1.2 Läkemedlet

Cistanche deserticola identifierades av forskaren Xiao Xiaohe som Epimedium E., en växt av Berberidaceae torra löv från Brevicornum Maxim. Ta Cistanche deserticola deserticola blad, krossa dem och passera dem genom sikt nr 4, väg dem exakt, tillsätt utspädd etanol, utför ultraljudsbehandlingen (effekt 400 W, frekvens 50 kHz) i 1 timme, kyl dem, väg dem igen, använd utspädd etanol för att kompensera den förlorade vikten, skaka dem, filtrera dem, ta det fortsatta filtratet, frys in och torka dem för att få Cistanche deserticola deserticola-extrakt. 1.3 Läkemedel och reagens arginas-1 (Arg-1) antikropp (batchnummer: 93668) köptes från CST Company i USA; - Aktinantikroppen (batchnummer 20536 1-AP) köptes från Protentech Company; Den HRP-märkta get-anti-kanin-IgG-sekundära antikroppen (batchnummer J111-035-003) köptes från Jackson Immuno Research; Trizol-reagens (satsnummer BSC51M1) köptes från företaget Biolux; CCK-8-reagens (batchnummer KTA1020-1000T) köptes från Abbkine Company; Interleukin 4 (IL-4) faktor (batchnummer 96-214-14-20) köptes från Peprotech.

1.4 Instrument

QB-9002 Seismic Plate Instrument (Haimen Qilin Bell Company); Epoch enzymkopplad immunosorbentanalys och P100 plus nukleinsyrakoncentrationsanalysator (Bio Tek Company, USA); Quantstudio 6 Flex fluorescens kvantitativt PCR-instrument (Thermo Fisher Scientific, USA); MINI6K palmcentrifug (Hangzhou Aosheng Company); Vortex-Genie 2 vibrator (Scientific Industries, USA).

2 metoder

2.1 Komponentanalys av alkoholextrakt av Cistanche deserticola

2.1.1 Provberedning Tillsätt metanol till alkoholextraktet av Cistanche deserticola för att bereda en 5 mg/ml suspension, extrahera den med ultraljud i 40 min, ta 1 mL och centrifugera den vid 12 000 r/min i 10 min. , ta supernatanten efter centrifugering, passera 0,22 μM filtermembran, prov in i UPLC-MS/MS. Komponenterna i Cistanche deserticola samlades in genom den farmakologiska databasen och analysplattformen för traditionell kinesisk medicin (TCMSP). MS-resultaten analyserades med hjälp av Progression QI-dataplattformen (baserad på NPATLAS- och GNPS-databaser), och resultaten jämfördes med Cistanche deserticola-komponenthämtningen för icke-målinriktad komponentanalys.

2.1.2 Kromatografiska förhållanden:

Acquisition UPLC BEH C18 kromatografikolonn (100 mm × 2,1 mm, 1,7 µm), den mobila fasen är dubbeldestillerat vatten (A) - acetonitril (B), gradienteluering: 0-3 minuter, 5 procent B; 3 till 35 minuter, 5 procent till 95 procent B; 35-42 minuter, 95 procent -5 procent B. Den volymetriska flödeshastigheten är 0,3 ml/min; Injektionsvolymen är 5 μL; Temperaturen på kolumntemperaturlådan är 40 grader. 2.1.3 Masspektrometriförhållanden: elektrosprayjonkälla (ESI) används för detektering i positiv jonläge, och kapillärtemperaturen är 275 grader; Mantelgasvolymflödeshastighet 20 Arb; Hjälpgasvolymflöde 5 Arb; Jonkällans spänning är 5 kV. 2.2 Cellodling Benmärgshärledda makrofager (BMDM) isolerades från lårbensbenmärgen hos 8-veckogamla C57BL/6-honmöss. De odlades i DMEM-medium innehållande 10 procent fetalt bovint serum, 1 procent penicillin/streptomycin och musmakrofagkolonistimulerande faktor M-CSF (50 ng/ml) och placerades i en inkubator vid 37 grader och 5 procent CO2 i 6 dagar.

Digerera celler med 0,25 procent trypsin EDTA (2:1) med en hastighet av 1,2 × Inokulera 106/ml densitet i en brunnsplatta över natten. På den andra dagen, efter tillsats av alkoholextraktet av Cistanche deserticola under 1 timme, stimulerades cellerna med IL-4 (20 ng/ml) under 24 timmar.

2.3 CCK{{0}}-metoden användes för att detektera cytotoxiciteten hos alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola till BMDM-celler × Inokulera 106/ml densitet i 96-brunnars plattor, placera i inkubatorn över natten, behandla celler med olika masskoncentrationer (0, 0.015 625, {{10}}.031 25, 0.{{ 9}}, 0,125, 0,25, 0,5, 1, 2, 4 mg/ml) alkoholextrakt av Cistanche deserticola i 24 timmar. Kassera odlingsmediet, tillsätt CCK-8-odlingsmediumlösning (1:10), inkubera i inkubatorn i 1 timme, mät absorbansen (A) vid 450 nm med en mikroplattläsare och detektera toxiciteten av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola till celler.

2.4Western blotting användes för att detektera uttrycket av Arg{{0}}-protein i BMDM-celler. Kontrollgruppen, modellgruppen och alkoholextraktgruppen av Cistanche deserticola med olika masskoncentrationer (0.062 5, 0.125, 0.25 mg/ml) sattes upp. Läkemedlet administrerades enligt metoden under "2.2". Celler uppsamlades och RIPA-lysat tillsattes för att extrahera protein. Proteinprovet utsattes för 10 procent natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektrofores, överfördes till PVDF-membran, förseglades i TBST innehållande 5 procent skummjölk under 1 timme, tillsattes med primär antikropp och inkuberades över natten vid 4 grader; Efter tvätt med TBST, inkubera med sekundär antikropp och utveckla med hjälp av förbättrat kemiluminescensdetektionsreagens.

2.5 qRT PCR användes för att detektera BMDM cell kemotaktisk faktor 24 (CCL24), inflammatorisk zon 1 (Fizz1), kitinas 3-liknande 3 (Ym1), makrofag galaktos typ C-typ Lektin 2 (MGL2) och Peroxisome proliferator- aktiverad receptor (peroxisom-proliferatoraktiverad mottagare , PPAR ）, interferon regulatorisk faktor 4 (IRF4), Arg-1 och CD163 mRNA-uttryck sattes i kontrollgruppen, modellgruppen och olika masskoncentrationer ({{17} }.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) alkoholextrakt av Cistanche deserticola enligt "2.2"

2.6Framställning av konditionerat medium Referensmetod [12]: BMDM odlades enligt metoden under "2.2". Efter att cellfröplattan fästs tillsattes ett serumfritt medium innehållande Cistanche deserticola alkoholextrakt (0,25 mg/ml) och IL-4 (20 ng/ml) ) tillsattes 1 timme senare. Efter 24 timmar, samla upp supernatanten som det konditionerade mediet. Det konditionerade mediet centrifugerades vid 2000 r/min för att fälla ut fragmenten, aspirerades och lagrades vid -80 grader för cellmigreringsexperiment. BMDM odlades enligt metoden under "2.2", och DMEM-medium innehållande alkoholextrakt av Cistanche deserticola (0,25 mg/ml) tillsattes efter att cellfröplattan fästs på väggen och IL-4 (20 ng) /ml) tillsattes en timme senare. Efter 24 timmar, samla upp supernatanten som det konditionerade mediet. Centrifugera det konditionerade mediet 2000 för att fälla ut fragment, aspirera supernatanten och lagra den vid -80 grad för cellkoloniexperiment.2.7 Cellmigreringsexperiment Placera {{0}}hålpluggen för sårläkning i en 12-hålplatta och 4T1-cellerna behandlas med 3,6 × 105/ml vaccination . Efter att cellerna fastnat på väggen över natten, ta bort plugin-programmet och tvätta bort de flytande döda cellerna med PBS. Lägg till serumfritt medium som innehåller 50 procent konditionerat medium. Inkubera i en inkubator i 24 timmar. Vid 0 och 24h, ta bilder med ett inverterat mikroskop, analysera bilderna med Image J och beräkna cellmigreringshastigheten. Cellmigreringshastighet=(0 timmars sårområde -24 timmars sårområde)/0 timmars sårområde

2.8Cellkoloniexperiment 1000 4T1-celler inokulerades i varje brunn på plattor med 6 brunnar och inkuberades med medium innehållande 50 procent konditionerat medium i 8 dagar. Fixa med 2 procent paraformaldehyd, färga med 1 procent kristallviolett, ta foton och analysera bilderna med Image J.

2.9Statistisk analys utfördes med GraphPad Prism 8-programvara, med mätdata uttryckta som xs ±, och jämförelser mellan grupper med envägs ANOVA.

3. Resultat

3.1 Sammansättningsanalysen av alkoholextraktet av Cistanche deserticola deserticola visas i figur 1 och tabell 2. Alkoholextraktet av Cistanche deserticola deserticola innehåller bensoesyra, koniferylaldehyd, Emodin, vaniljsyra, hyalin och lepirudin A.

Tabell 1 Primersekvenser

Figur 1 Analys av alkoholextrakt från Cistanche deserticola deserticola

Tabell 2 Komponentanalys av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola

3.2Cytotoxicitet av Cistanche deserticola alkoholextrakt på BMDM Resultaten visade att 0.015 625 - 2 mg/mL Cistanche deserticola alkoholextrakt inte hade någon toxisk effekt på BMDMs celler efter behandling av BMDMs celler med olika koncentrationer av Cistanche deserticola alkoholextrakt under 24 timmar (Figur 2).

Fig. 2 Cytotoxicitet av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola till BMDM (xs ±, n=3)

3.3 Etanolextrakt av Cistanche deserticola hämmar M2-polarisering av makrofager in vitro. I BMDM M0-makrofager är markörerna Arg-1 och CD163 för M2-liknande makrofager lågt uttryckta, och uttrycket ökas signifikant efter induktion av IL-4, vilket indikerar att BMDM framgångsrikt polariserar till M2-liknande makrofager. Western blotting och qRT PCR-tekniker användes för att verifiera att alkoholextraktet av Cistanche deserticola kan modulera uttrycket av Arg-1 och CD163 inducerat av IL-4 på ett dosberoende sätt (Figur 3), vilket indikerar att alkoholextraktet från Cistanche deserticola direkt kan hämma M2-liknande polarisering av makrofager. För att ytterligare utforska effekten av alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola på M2-polarisering av makrofager, användes qRT PCR för att studera M2-liknande makrofagrelaterade gener Fizz1 och PPAR. Transkriptionsnivåerna för Ym1, CCL24, MGL2 och IRF4 visas i figur 4. Jämfört med modellgruppen, mRNA-expressionsnivåerna för Fizz1, Ym1, CCL24 och IRF4 i alkoholextraktet av Cistanche deserticola (0.062 5, 0.125, { {29}}.25 mg/ml) minskade signifikant (P<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 Etanolextraktet från Cistanche deserticola försvagar främjandet av M2-liknande makrofager vid 4T1-cellmigrering. Skraptestet användes för att observera effekten av supernatanten av Cistanche deserticola etanolextrakt på migrationsförmågan hos bröstcancerceller. BMDM inkuberades i ett serumfritt medium innehållande IL-4 och alkoholextrakt av Cistanche deserticola deserticola under 24 timmar, och supernatanten samlades upp som ett konditionerat medium. 4T1 odlades i serumfritt medium innehållande 50 procent konditionerat medium, som visas i figur 5, det konditionerade mediet uppsamlat med BMDM behandlat med IL-4 enbart främjade signifikant migrationen av 4T1-celler (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4. Diskussion

Fördelarna med cistanche tubulosa-Antitumor

För närvarande är bröstcancer fortfarande ett globalt folkhälsoproblem. Förekomsten av bröstcancer ökar år för år och unga, vilket allvarligt hotar kvinnors hälsa [13]. Traditionell kinesisk medicin tror att i de tidiga stadierna av tumörer, på grund av kroppens oförmåga att skingra qi på grund av yang-brist, är yin qi otillräcklig och kan inte bilda normal spermieansamling. Onormal ackumulering leder dock till patologiska produkter som slem turbiditet och blodstas, vilket leder till omvandling av toxiner till tumörer [14]. Cistanche deserticola deserticola, som ett viktigt läkemedel för tonifiering av yang, har effekterna att tonifiera vital energi och njuryang och kan reglera immunitet. Det är en allmänt använd njurtonifierande kinesisk medicin i klinisk praxis. Nu används det ofta för att behandla bröstcancer och används ofta som en högfrekvent sammansatt medicin. En av kännetecknen för cancer är immunförsvar. De immunceller som bör bekämpa tumörer är specifikt sexuell hämning av omgivande vävnader och tumörmikromiljö, vilket leder till okontrollerad tillväxt och spridning av tumörer [15]. Fler och fler bevis visar att när det finns i tumörens mikromiljö, medfödda immunceller (makrofager, neutrofiler, dendritiska celler, medfödda lymfoida celler, benmärgshärledda sexuella hämningsceller och NK-celler) och adaptiva immunceller (T-celler och B-celler ) bidrar till tumörprogression [16]. Makrofager är oumbärliga mediatorer av vävnadshomeostas, och deras polarisering mot alternativa aktiverade makrofager (M2-typ) kan främja cancercellsproliferation, angiogenes och metastaser. Därför har reglering av TAM och upprätthållande av deras homeostas blivit ett fokus för tumörbehandling [17]. TAM är involverade i metastaser, angiogenes, matrixremodellering, invasion och immunsuppression av bröstcancer. TAM:er är huvudsakligen uppdelade i två olika fenotyper, nämligen klassiskt aktiverade M1-liknande makrofager och alternativt aktiverade M2-liknande makrofager [18]. I godartade eller icke-funktionella tumörer är de flesta TAMs klassiskt aktiverade M1-liknande makrofager, som är interferon-, IFN- ） eller Lipopolysackaride (LPS)-aktivering, vilket främjar TAM för att producera proinflammatoriska faktorer och fagocytos av tumörceller. M2-liknande makrofager kan aktiveras av Th2-cytokiner som IL-4 för att producera ett stort antal antiinflammatoriska faktorer, som direkt främjar utvecklingen av bröstcancer [19]. Därför är strategin för immunterapi för bröstcancer att vända eller hämma polariseringen av M2-liknande makrofager. Arg-1 är en markör för M2-liknande makrofager, och dess överuttryck är associerat med dålig prognos hos cancerpatienter [20].

Kinesisk ört cistanche-Antitumor

CD163 är en specifik markör för M2-liknande makrofager [21], som är associerad med tumörmetastaser. CD163 plus TAM inducerar epitelial-mesenkymal övergång (EMT) och främjar migration av cancerceller [22]. Resultaten av denna studie indikerar att extraktet av Cistanche deserticola deserticola spelar en roll i att reglera immunitet i viss utsträckning, hämmar uttrycket av Arg-1 och CD163, ytmarkörerna för M2-liknande makrofager, och inhibering av M2-typ polarisering av makrofager. PPAR Det är en metabolisk sensor som reglerar lipidhomeostas genom aktivering av olika fettsyror och fettsyraderivat (som Palmitinsyra) [23]. PPAR Relaterat till M2-polarisering av makrofager, PPAR har blivit den huvudsakliga regulatorn av M2-polarisering i makrofager [24], PPAR-ligander har visat sig ha starka hämmande effekter på tumörtillväxt in vivo [25]. Fizz1 och Ym1 är båda M2-liknande makrofagmarkörgener, och Fizz1 och Ym1 är involverade i fibros under vävnadsreparation [26]. M2-liknande makrofager producerar en stor mängd CCL24 in vitro [27], och det ökade uttrycket av CCL24 kan främja tumörproliferation, migration och invasion [28]. IRF4 är en medlem av IRF-familjen. Den deltar i M2-polariseringsprocessen för makrofager och fungerar som en negativ regulator av Toll-liknande receptorsignaler genom att kombinera med MyD88-adaptermolekylen [29]. MGL2 är en medlem av galaktos typ C-lektinfamiljen av makrofager, och det uttrycks också i makrofager stimulerade under alternativa aktiveringsförhållanden [30]. Resultaten av denna studie indikerar att extraktet av Cistanche deserticola deserticola hämmar den M2-liknande makrofagrelaterade genen PPAR. Uttrycket av Fizz1, Ym1, CCL24, IRF4 och MGL2 hämmar M2-typ polarisering av makrofager, vilket indikerar att Epimedium kan fungera som ett effektivt hämmare av M2-liknande makrofager. Fler och fler bevis tyder på att M2-liknande makrofager kan främja cancermetastaser och tillväxt [31]. Konditionerade medier från M2-liknande makrofager kan simulera tumörmikromiljön och inducera tumörmigrering och tillväxt, vilket liknar makrofager isolerade från maligna tumörer [12]. IL-4 kan främja makrofagpolarisering mot M2-typen och främja tumörproliferation och angiogenes [18]. Denna studie visade korrelationen mellan makrofagpolarisering och antitumöreffekten av Cistanche deserticola deserticola. Konditionerade media från IL-4-aktiverade makrofager främjade migrationen och tillväxten av 4T1-celler, och efter samintervention med Cistanche deserticola, vände denna M2-aktiverade tumörfrämjande effekt, vilket indikerar att IL{{55} }aktiverad M2-polarisation eliminerades av Cistanche deserticola.

Denna studie visade korrelationen mellan makrofagpolarisering och antitumöreffekten av Cistanche deserticola deserticola. Konditionerade media från IL-4-aktiverade makrofager främjade migrationen och tillväxten av 4T1-celler, och efter samintervention med Cistanche deserticola, vände denna M2-aktiverade tumörfrämjande effekt, vilket indikerar att IL{{7} }aktiverad M2-polarisation eliminerades av Epimedium. Denna studie fann att Cistanche deserticola-extrakt hämmar cellmigration och kolonibildning av bröstcancer genom att reglera polariseringen av makrofager in vitro, vilket indikerar att Cistanche deserticolas behandling av bröstcancer kan vara relaterad till regleringen av tumörmikromiljön, och Epimedium kan fungera som en regulator av tumörmikromiljön på metastasstället genom att påverka makrofager, vilket ger nya mekanismer för antitumörfunktionen hos Cistanche deserticola. Den avslöjar den nya potentiella mekanismen för Cistanche deserticola för cancerbehandling, vilket kan bidra till att minska incidensen av cancer och cancerrelaterad dödlighet. I framtiden kommer forskargruppen att ytterligare utforska effekten av Cistanche deserticola på tillväxt och metastasering av bröstcancer efter hämning av M2-polarisering av makrofager in vivo, för att ytterligare förklara antitumörmekanismen hos Cistanche deserticola och ge grunden för klinisk tillämpning av Cistanche deserticola vid behandling av tumörsjukdomar.

Referenser

Referenser

[1] GBD 2019 Cancer Risk Factors Collaborators. Den globala bördan av cancer som kan tillskrivas riskfaktorer, 2010-19: En systematisk analys för Global Burden of Disease Study 2019 [J]. Lancet, 2022, 400(10352): 563-591.

[2] Yin L, Duan JJ, Bian XW, et al. Trippelnegativ bröstcancermolekylär subtypning och behandlingsframsteg [J]. Breast Cancer Res, 2020, 22(1): 61.

[3] Medeiros B, Allan A L. Molecular mechanisms of breast cancer metastasis to the lung: Clinical and experimental perspectives [J]. Int J Mol Sci, 2019, 20(9): 2272.

[4] Pathria P, Louis TL, Varner J A. Inriktning på tumörassocierade makrofager i cancer [J]. Trender Immunol, 2019, 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ, Chen YB, Xu LJ, et al. Ökad infiltration av makrofager till radioresistenta lungcancerceller bidrar till utvecklingen av tumörcellers ytterligare resistens mot de cytotoxiska effekterna av NK-celler [J]. Int J Oncol, 2018, 53(1): 317-328.

[6] Tariq M, Zhang JQ, Liang GK, et al. Makrofagerpolarisering: Anti-cancerstrategier för att rikta in sig på tumörassocierade makrofager i bröstcancer [J]. J Cell Biochem, 2017, 118(9): 2484-2501.

[7] Ma Li Effekter av Cistanche deserticola glykosid på stromalcellshärledd faktor -1 (SDF-1) och dess receptor CXCR-4 hos råttor med akut mellersta cerebral artärinfarkt [D] Nanjing : Nanjings universitet för kinesisk medicin, 2014

[8] Hao Fuliang Effekten och mekanismen av Cistanche deserticola-glykosid på reparation och läkning av kaninskalledefekter [D] Shijiazhuang: Hebei Medical University, 2013

[9] He J, Zang SL, Liu N, et al. Epimediumpolysackarider dämpar hematotoxicitet genom att minska oxidativ stress och förbättra immunfunktionen hos mössmodeller av benseninducerad benmärgssvikt [J]. Biomed Pharmacother, 2020, 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying, et al Forskningsframsteg om mekanismen för Cistanche deserticola Aktiv ingrediens vid behandling av bröstcancer [J] Kinesisk örtmedicin, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11]Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Studie om anti-proliferation av bröstcancerceller av Cistanche deserticola och frazilextrakt in vitro [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F, Cui WQ, Wei Y, et al. Astragaloside IV hämmar lungcancerprogression och metastasering genom att modulera makrofagpolarisering genom AMPK-signalering [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL, Cuzick J, Phillips KA. Nyckelsteg för effektivt förebyggande av bröstcancer [J]. Nat Rev Cancer, 2020, 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei, Tian Sisheng Utforskning av "Yang Dominating Yin Following" i malign tumörmetastas baserat på teorin om förgasning [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2021, 32 (1): 164-166

[15] Denk D, Petrocelli V, Conche C, et al. Expansion av T-minnesstamceller med överlägsen antitumörimmunitet genom urolitin A-inducerad mitofagi [J]. Immunity, 2022, 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC, Shevde LA. Tumörens mikromiljö modulerar medfödd cancerprogression [J]. Cancer Res, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG, Ruffel B. Makrofager som regulatorer av tumörimmunitet och immunterapi [J]. Nat Rev Immunol, 2019, 19(6): 369-382.

[18] Dong R, Gong YL, Meng W, et al. Inblandningen av M2 makrofagpolarisationshämning i fenretinidmedierade kemopreventiva effekter på tjocktarmscancer [J]. Cancer Lett, 2017, 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A, et al. Den kritiska rollen för p38 MAPK i IL-4-inducerade alternativ aktivering av peritoneala makrofager [J]. Eur J Immunol, 2015, 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG, Lian J, Yang M, et al. Överuttryck av arginas-1 är en indikator på dålig prognos hos patienter med kolorektal cancer [J]. Pathol Res Pract, 2019, 215(6): 152383.

[21] Tao SF, Chen Q, Lin C, et al. Linc00514 främjar bröstcancermetastaser och M2-polarisering av tumörassocierade makrofager via den Jagged1-medierade Notch-signalvägen [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 191.

[22] Wei C, Yang CG, Wang SY, et al. Överhörning mellan cancerceller och tumörassocierade makrofager krävs för mesenkymal cirkulerande tumörcellsmedierad kolorektal cancermetastas [J]. Mol Cancer, 2019, 18(1): 64.

[23] Francque S, Szabo G, Abdelmalek MF, et al. Nonalkoholisk steatohepatit: Rollen av peroxisomproliferatoraktiverade receptorer [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2021, 18(1): 24-39.

[24] Tian Y, Yang CM, Yao QY, et al. Procyanidin B2 aktiverar PPAR för att inducera M2-polarisering i musmakrofager [J]. Front Immunol, 2019, 10: 1895.

[25] Takada I, Makishima M. Peroxisomproliferatoraktiverade receptoragonister och antagonister: En patentöversikt (2014- närvarande) [J]. Expert Opin Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S, Miyata J, Kabata H, et al. TLR7-agonist undertrycker grupp 2 medfödd lymfoid cell-medierad inflammation via IL -27-producerande interstitiell makrofager [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2021, 65(3): 309-318.

[27] Makita N, Hizukuri Y, Yamashiro K, et al. IL-10 förstärker fenotypen av M2-makrofager som induceras av IL-4 och ger förmågan att öka eosinofil migration [J]. Int Immunol, 2015, 27(3): 131-141.

[28] Jin L, Liu WR, Tian MX, et al. CCL24 bidrar till HCC-malignitet via RhoB-VEGFA-VEGFR2 angiogenesvägen och indikerar dålig prognos [J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T, Takeuchi O, Vandenbon A, et al. Jmjd3-Irf4-axeln reglerar M2-makrofagerpolarisering och värdsvar mot helmintinfektion [J]. Nat Immunol, 2010, 11(10): 936-944.

[30] Raes G, Brys L, Dahal BK, et al. Makrofager galaktos typ C-lektiner som nya markörer för alternativt aktiverade makrofager framkallade av parasitinfektioner och allergisk luftvägsinflammation [J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A, et al. Cancerrelaterad inflammation [J]. Nature, 2008, 454(7203): 436-444.