Vad kan Acteoside in Cistanche göra med benign prostatahyperplasi?

Forskningen av akteosid på verkan hämmade benign prostatahyperplasi hos råttor

NYCKELORD: Cistanche, akteosid, benign prostatahyperplasi, apoptos.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ABSTRAKT:

Råttmodellen för beg nin prostatahyperplasi etablerades och tre dosgrupper avakteosidadministrerades oralt under 4 veckor för att studera effekten avakteosiddestillerad frånCistanchetubulosa påapoptosoch ultramikrostruktur prostatakörteln hos råttor medbenign prostatahyperplasi. Den ultrastrukturella förändringen av prostatakörteln observerades genom transmissionselektronmikroskopi. Resultaten visade detApoptosav normal råttprostata var inte uppenbar, det fanns en låg

frekvensen av prostataapoptosi modellgruppen, i högdosenakteosidfrånCistanchetubulosabehandling, råttprostataapoptosvar betydligt högre än modellens.

I processen med godartad prostatahyperplasi, cellapoptosär en av de mekanismer som för närvarande uppmärksammas. Genkodning bestämmer det och gör det möjligt för celler att kontrollera programmerad celldöd genom att svara på specifika signaler.

Efter att prostatan utvecklats till vuxenstorlek, bibehålls proliferationshastigheten för prostataceller på 1 procent till 2 procent genom balansen av den genomsnittliga hastigheten avapoptos. När balansen är bruten anses det vara orsaken tillgodartad prostata hyperplasi. Under normala förhållanden är nivåerna av östrogen och androgen och normal cirkulation i prostatan ett slags självbalanstillstånd som existerar i proliferationsprocessen ochapoptos. När balansen mellan spridning ochapoptosär ur balans kommer det att leda till ytterligare tillväxt och expansion av körteln, vilket främst orsakar expansionen av epitelcellsutrymmet [1].

I detta experiment etablerade vi en råttprostatahyperplasimodell för att observera och analysera effekten avakteosid(koaktionsliknande glykosid), en av de kemiska komponenterna iCistanchepåapoptosoch ultrastrukturella förändringar av råttprostataceller, för att utvärdera effekten avakteosidEffekten av att hämma prostatahyperplasi ger en vetenskaplig grund för utveckling och användning av nya användningsområden för kinesisk medicinCistanche.

Deakteosiddestillerad frånCistanchekan påverkagodartadprostatahyperplasi.

Material och metoder

Försöksdjur

Femtio SD-hanråttor i åldern 6-7 veckor, ren kvalitet, väger 80-100 g, tillhandahålls av Center for Comparative Medicine vid Yangzhou University.

Reagens och läkemedel

Testosteronpropionatinjektion är från Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd., specifikationen är 25 mg·ml^-1, och batchnumret är 060708. PI-färglösning är från Yangzhou University Testing Center. Innehållet av Aktiside är 945 g·kg^-1, utarbetad av Institutionen för kinesisk medicinanalys, China Pharmaceutical University.

Experimentell utrustning

Philips Tecnai 12 transmissionselektronmikroskop är från Philips i Nederländerna; FACSAria flödescytometer är från BD i USA.

Grupperingar och modellering

Efter kastrering enligt litteraturmetoden [3] injicerades råttor med 5 mg·(kg·d)^-1testosteronpropionat på ryggen av råttorna i 4 veckor för att etablera en prostatahyperplasimodell. Modellråttorna delades slumpmässigt in i modellgrupper: modell plusakteosidhögdosgrupp, modell plusakteosidmedeldosgrupp, modell plusakteosidlågdosgrupp, tio råttor i varje grupp; ytterligare tio normala råttor var som kontrollgrupp.

Administrationsmetod

En vecka efter modellering,akteosidhög-, medel- och lågdosgrupper gavs 60, 30, 15 mg·(kg·d)^-1genom sondmatning, respektive. Modellgruppen och kontrollgruppen tillsattes en lika stor volym normal koksaltlösning en gång om dagen i fyra veckor, vägdes en gång i veckan och justerade dosen efter kroppsvikten.

Provtagning och bearbetning

• Material och provberedning: 24 timmar efter den senaste administreringen, väg de fastande råttorna och avliva råttorna genom cervikal dislokation. Öppna omedelbart nedre delen av buken, dra av vävnaderna runt prostatan, frigör prostatan och ta en del av prostatan för användning i ett isbad. Vävnadshomogenisator homogeniserad, preparerad prostata encellssuspension och färgad med propidiumjodid enstegsmetod [4]; en annan del av prostatavävnaden fixerades i 25 g·L^-1glutaraldehyd för att förbereda ultratunna sektioner.

• Förbered en enstaka cellsuspension: Under aseptiska förhållanden, ta bort råttprostatan helt och hållet och flytta den till en petriskål, tvätta blodet och blodpropparna på ytan av prostatavävnaden med PBS och ta bort det omgivande fettet, överflödiga fibrer och cellen. membran. Från samma råttprostata togs färsk prostatavävnad med storleken cirka {{0}},5 cm3 och skars i bitar för att förbereda en prostatacellsuspension [5]. Placera prostatavävnadsblocket i en petriskål och tillsätt en liten mängd PBS; använd oftalmologisk sax för att klippa vävnaden i ett isbad, mal homogenisatorn till en suspension, tillsätt 10 mL PBS, pipettera vävnadshomogenatet och använd 0,074 mm porstorlek nylonnät filtrerades in i provröret, centrifugerades vid {{7} } r min^-1under 3 min, och fällningen tvättades tre gånger med PBS, varje gång vid 500 r min.^-1kortvarig låghastighetscentrifugering för att avlägsna cellskräp, till 0.037 mm porstorlek nylonnätfilter för att ta bort cellklumpar. Räkna cellerna och justera cellkoncentrationen till 2×109 celler·L^-1. Färga med 1 mL PI-färgningslösning, skydda mot ljus vid 4 grader i 10 min.

• Beredning av ultratunna snitt: För beredning av ultratunna vävnadssnitt, se litteratur [6].

• 
  

Resultat och analys

Effekten avakteosidom apoptos av råttprostata

Figur 1 visar toppen avapoptosdetekteras med flödescytometri, vilket visar detakteosidhar en pro-apoptotisk effekt. Den statistiska analysen av cellenapoptosresultat visade att råttcellenapoptosfrekvensen ökade signifikant (24,7±1,85) procent och (16,1±1,04) procent efter behandling med höga, medelhöga och låga doser avakteosid. , (14,5±0.68) procent , och normalgruppen (1.1±0.{{10}}6) procent , modellgrupp (9.5±0.5) procent , positiv grupp (9,83±0,76) Skillnaden i procentuell jämförelse är signifikant (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="">apoptos, är effekten starkare än effekten av det positiva kontrollläkemedlet Qianliekang (Figur 2).

Effekten avakteosidpå ultrastrukturen av prostatahyperplasiceller.

Elektronmikroskopiobservationer visar att den normala råttprostatan har fullständiga kärnor, uppenbarligen nukleoler, och enhetlig nukleär kromatinfördelning; det grova endoplasmatiska retikulumet har samma storlek, är snyggt arrangerat och har ingen vakuolation. Det finns inga fingerliknande mikrovilli på epitelets yta, ingen svullnad av mitokondrier och få sekret i kaviteten. Kärnorna i prostataceller i modellgruppen deformerades och krympte, och cytoplasman var riklig. Det grova endoplasmatiska retikulumet expanderades till en cystliknande form och cystan fylldes med högdensitetsproteinpartiklar. Mitokondrierna var lätt svullna (det fanns också vakuoler), Det finns sekret med medeldensitet i hålrummet och täta runda sekretgranuler hittades i vissa celler. Hos råttor behandlade medakteosid, kärnan var intakt jämfört med modellgruppen. Kärnan koncentrerades, kärndensiteten ökades, heterokromatin ackumulerades, cytoplasman hade vakuoler och de grova endoplasmatiska retikulumvakuolerna reducerades. Den låga dosenakteosidgruppen hade något skrynkliga kärnor. Krympning, oregelbunden, rikare cytoplasma och minskat grovt endoplasmatiskt retikulum (Figur 3).

Diskussion

Apoptosär en process av programmerad celldöd i flercelliga organismer som reglerar utvecklingen av kroppen och upprätthåller stabiliteten i den inre miljön, och genetiska koder bestämmer det.

Apoptotiska celler har sina unika morfologiska och biologiska egenskaper: kärnkromatinkrympning, omfattande DNA-nedbrytning och fragmentering, fullskalig krympning av celler, krympning av cellmembran och yttre utsprång som täcker organeller (som mitokondrier och ribosomer), och nukleär bildning av karaktäristiska celler. fragment Apoptotiska kroppar, apoptotiska celler behåller inte bara en komplett cellmembranstruktur och funktion utan har också en komplett struktur av organeller, som skiljer sig från cellnekros.

Cellens molekylära mekanismapoptoshar hittills inte helt klarlagts. Studier [7] har visat att det finns många gener involverade i genregleringen av cellerapoptos.

Apoptosär processen förgodartadprostatahyperplasisom för närvarande väcker mer uppmärksamhet. Det bestäms av genkodning och gör det möjligt för celler att kontrollera celldöd genom att svara på specifika signaler [1]. Efter att prostatan utvecklats till vuxenstorlek, bibehålls proliferationshastigheten för prostataceller på 1 procent till 2 procent genom resten avapoptosBetygsätta. Förstörelsen av denna balans har alltid ansetts vara orsaken tillgodartadprostatahyperplasi[8]. Under normala förhållanden är nivån av östrogen och androgen och regelbunden cirkulation i prostatan ett slags självbalanstillstånd som existerar i proliferationsprocessen ochapoptos. När spridningen ochapoptosär i obalans kommer det att få körtlarna att växa och expandera ytterligare, främst på grund av expansionen av epitelcellsutrymmet [9]. Avbrottet i denna balans kan bero på förändringar i androgennivåer eller funktioner; det kan också bero på någon respons som produceras av AR-stimulering av DHT eller förändringar i DHT-medierade tillväxtfaktornivåer [2]. I denna studie upptäckte FCM cellapoptosoch fann attapoptosfrekvensen av prostataceller hos råttor som ges höga doser avakteosidökat betydligt. Elektronmikroskopiresultat visade att kärnorna i prostataceller i modellgruppen deformerades, det grova endoplasmatiska retikulumet var kraftigt expanderat i en cystaliknande form och cystan fylldes med högdensitetsproteinpartiklar och vakuolering hittades. Mitokondrierna var lätt svullna och relaterade studier[ 10-11 ] Rapporten är konsekvent.

Efterakteosidintervention var graden av prostatahyperplasi hos råttor lägre. Högdosgruppen visade också tidiga tecken påapoptos: kärnan av prostataceller förblev intakt och endoplasmatiska retikulumvakuoler var signifikant lägre. Kondensering av kärnor, ökad kärndensitet, ackumulering av heterokromatin, liknande karakteriseringen av prostatavävnadsceller hos råttor efter kastrering [12-13]. Det visar detakteosidfråncistanchekan inducera cellapoptoshos råttor med prostatahyperplasi, reglera och återställa balansen i prostatacellenapoptosoch proliferation, och spelar en roll i att hämma prostatacellproliferation. Resultaten av denna studie och tidigare studier [14] indikerar att den hämmande effekten avakteosid, en kemisk komponent avCistanchetubulosa, på prostatahyperplasi kan vara relaterat till dess främjande av cellapoptos, minskning av AR och TGF-UR1 överuttryck. Den detaljerade verkningsmekanismen behöver fortfarande studeras ytterligare.

Referenser:

Källan är från författarna: Sun Weidong1, Chen fei², Sun yun² (1. Yangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. School of Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu)