4. Material och metoder

4.1. Växtmaterial

Afrikanska S. aurea-frön som användes för denna studie köptes från en fackhandel i Italien. Plantorna odlades i Laboratory of Plant Biology and Pharmaceutical Botany vid University of Cagliari (UNICA). Efter 5 veckor placerades de i ett "Planta Medica"-växthus, enligt artens ekofysiologiska behov. Plantorna samlades sedan in efter två års tillväxt under sin blomningsperiod. Antenndelarna placerades omedelbart i en lufttvingad ventilationsugn (FD 115, BINDER) tills de var helt torkade (när de nådde en konstant vikt). Ett kupongexemplar deponerades på Herbarium Karalitanum (CAG) vid University of Cagliari, Italien, med kupongnummer (6/23.8/V1).

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en stark rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranfunktionen. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en bra rensande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenereringen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinacoside i Cistanche en betydande förmåga att avlägsna DPPH-fria radikaler och har förmågan att avlägsna reaktiva syrearter och förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning, och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tymin-fria radikaler.

Klicka på Cistanche Tubulosa Supplement

【För mer information: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.2. Eterisk oljeanalys

Den eteriska oljan erhölls genom 3 timmars hydrodestillation med en apparat av Clevenger-typ, enligt riktlinjerna för Europeiska farmakopén [89]. Den efterföljande analysen med gaskromatografi med flamjoniseringsdetektion (GC-FID) och gaskromatografi/masspektrometri (GC-MS) utfördes enligt [13]. Kortfattat, för GC-analysen användes en HP 5 kapillärkolonn, med en experimentell procedur på 82 minuter vid olika temperaturer, från 60 ◦C till 246 ◦C med en hastighet av 3 ◦C/min, som sedan hölls vid 246 ◦C i 20 min. Helium (renhet större än eller lika med 99,9999 procent) användes som en bärargas med en flödeshastighet på 1 ml/min. Totalt 1 µL av det utspädda provet (1:100 i n-hexan, vikt/vikt) injicerades av en autosampler med ett uppdelningsförhållande på 1:20. När det gäller MS-förhållandena användes en 240 ◦C överföringsledning, 200 ◦C EI-jonkälla och 150 ◦C kvadrupoltemperatur, med joniseringsenergi på 70 eV och 3,2 skanningar s-1 vid m/z av skanningen intervall (från 30 till 480). MSD ChemStation programvara (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, CA, USA) användes för att hantera och utarbeta kromatogram och masspektra. Slutligen identifierades de erhållna föreningarna genom jämförelse av NIST02 och Adams bibliotek [37,38]. Resultaten korskontrollerades ytterligare genom att jämföra föreningarnas experimentella retentionsindex (RI) med de semipolära faserna som RI rapporterade i litteraturen. Experimentella RI bestämdes med hjälp av två standardblandningar av n-alkaner som referens (C8-C20 respektive C21-C40) med linjär interpolation [90]. Procentandelen av de rapporterade komponenterna beräknades på GC-toppareor utan FID-responsfaktorkorrigering.

4.3. Antifungal aktivitet

Sju dermatofytstammar testades med avseende på S. aurea EO antifungal aktivitet. Tre kliniska stammar erhölls från nagel- och hudisolering: Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 och Microsporum canis FF1. Medan de återstående fyra dermatofytstammarna tillhörde Colección Espanõla de Cultivos Tipo (CECT): T. mentagrophytes var. interdigital CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 och M. gypseum CECT 2908. Alla stammar odlades i Sabouraud dextrosagar (SDA) eller Potatis dextrosagar (PDA) före varje test för att säkerställa renhet och livsduglighet.

Minimala hämmande koncentrationer (MIC) och den minimala letala koncentrationen (MLC) av EO utfördes enligt de modifieringar som föreslås av CLSI-protokollet för mikrospädning [91]. Kortfattat späddes EO i DMSO (5–0,32 µL/ml) och sattes sedan till de sterila provrören. Inokulum framställdes genom att justera grumligheten till 0.5 McFarland och späddes sedan i RPMI-1640 utan glutamin och med 3-(N-morfolino)propansulfonsyra (MOPS) pH 7.{ {10}} till en koncentration av 1–2 × 104 CFU/mL, som sedan sattes till provrören som innehöll EO. Rören inkuberades sedan i 7 dagar vid 30 ºC. Efteråt utvärderades rören för svamptillväxt och den lägsta koncentrationen där ingen tillväxt observerades ansågs vara den lägsta hämmande koncentrationen (MIC). Den lägsta koncentrationen där ingen tillväxt observerades efter plätering av de negativa rören i SDA i 7 dagar vid 30 ºC ansågs vara den minsta dödliga koncentrationen (MLC). En antifungal referensförening, flukonazol (Pfizer), användes för att kontrollera känsligheten hos de testade mikroorganismerna. Resultaten erhölls från tre oberoende experiment utförda i duplikat, och resultaten uttrycktes som medelvärde. Negativa och positiva kontroller inkluderades också, representerade av ett icke-inokulerat medium respektive inokulerat medium med maximal DMSO-koncentration (1 procent).

4.4. Antiinflammatorisk aktivitet

4.4.1. Cell kultur

Den musleukemiska makrofagen RAW 264.7-cellinjen, som tillhörde American Type Culture Collection (ATCC TIB-71), odlades som tidigare rapporterats av vår grupp [92].

4.4.2. Kväveoxidproduktion

NO-produktionen utvärderades genom att bedöma koncentrationen av nitrater i odlingssupernatanter med Griess-reagenset [93]. Celler (0,6 × 106 celler/brunn) odlades i 48-brunnsodlingsplattor. Makrofager stabiliserades över natten, förbehandlades sedan i 1 timme med EO (0.08–1,25 µL/mL) utspädd i DMSO och aktiverades därefter med 50 ng/ml LPS i 24 timmar. LPS-stimulerade makrofager och obehandlade makrofager användes som positiva respektive negativa kontroller. Griess-reaktionen utfördes som tidigare beskrivits i vår grupp [92]. DMSO vid den högsta använda koncentrationen (0,4 procent) hade redan av vår grupp visat sig inte ha någon antiinflammatorisk eller cytotoxicitetsaktivitet (data visas inte).

4.4.3. Uttryck av pro-inflammatoriska proteiner, iNOS och COX-2 

RAW 264,7-celler (1,2 × 106 celler/brunn) odlades i 6-brunnsplattor och stabiliserades över natten. Sedan utsattes dessa celler för 1 timmes inkubation med EO vid en koncentration av 1,25 µL/ml, följt av 24 timmars LPS-aktivering (50 ng/ml). En negativ kontroll utgjordes av de obehandlade cellerna och en positiv kontroll utgjordes av endast LPS-behandlade celler. Framställning av cellysat följde protokollet som tidigare utförts av Zuzarte et al. [92]

Innehållet av inducerbart kväveoxidsyntas (iNOS) och cyklooxygenas{{0}} (COX-2) bedömdes med Western blot-analys som tidigare beskrivits [13]. För proteinseparation utfördes en elektroforetisk körning med 10 % (v/v) SDS-polyakrylamidgeler vid 130 V under 1,5 timmar. Proteinlinjerna blottades följaktligen till polyvinylidenfluoridmembran (tidigare aktiverade med metanol) vid 400 mA under 3 timmar. Membranen inkuberades sedan i 1 timme vid rumstemperatur med icke-specifika IgGs med 5 procent (vikt/volym) skummjölk i TBS-T. De inkuberades ytterligare över natten vid 4 ◦C med specifika anti-iNOS (1:500; FoU-system) eller anti-COX-2 (1:5000; Abcam, Cambridge, Storbritannien) antikroppar . Slutligen tvättades de i 30 minuter med TBS-T (10 minuter, 3 gånger) och inkuberades i 1 timme vid rumstemperatur med sekundära antikroppar (1:40, 000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA Konjugerad med pepparrotsperoxidas. Detekteringen av immunkomplex utfördes av en kemiluminescensskanner (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, USA). Antikroppar mot tubulin (1:20 000; Sigma, St. Louis, MO, USA) användes som laddningskontroll. ImageLab mjukvaruversion 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA) användes för proteinkvantifiering.

4.5. Cellmigrering

Den embryonala fibroblastcellinjen från mus NIH 3T3 (ATCC CRL-1658) odlades som tidigare beskrivits i [6].

4.5.2. Cellmigreringsanalys

Cellmigrering utfördes med användning av skrapsåranalysen enligt Martinotti et al. [94] med små modifieringar, som tidigare rapporterats [13]. Kortfattat såddes NIH 3T3-fibroblaster vid 2,5 × 1 05 celler/ml och fick nå sammanflytning. Efteråt tillfogades såret en 200 µL pipettspets och icke-vidhäftande celler avlägsnades genom tvättning med PBS pH 7,4. DMEM med 2 procent FBS med eller utan EO (1,25 µL/ml) tillsatt. Bilderna togs 0, 12 och 18 timmar efter repning med hjälp av ett faskontrastmikroskop, och sårområdet mättes med ImageJ/Fiji-programvara. Resultaten som presenterades erhölls med hjälp av följande ekvation:

4.6. Cellviabilitet

Effekten av olika koncentrationer av EO på livsdugligheten hos makrofager och fibroblaster bedömdes med hjälp av resazurinreduktionsanalysen, som tidigare rapporterats [6].

4.7. Etoposid-inducerad senescens

Åldrande utvärderades med användning av etoposid som en åldringsinducerare, som rapporterats på annat håll [95], med vissa modifieringar. Kortfattat, efter 24 timmars etoposid, inkuberades cellerna ytterligare under 72 timmar i närvaro eller frånvaro (CT) av S. aurea EO. Beta-galaktosidas utvärderades med användning av ett kommersiellt tillgängligt kit enligt tillverkarens protokoll (#9860, Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, USA). Den distinkta blåfärgningen indikerar beta-galaktosidasaktivitet. Efter färgframkallningar fotograferades brunnarna för efterföljande bildanalys. ImageJ programvara användes för kvantitativ analys genom att bedöma andelen åldrande celler.

4.8. Statistisk analys 

Experimenten utfördes åtminstone i duplikat för tre oberoende experiment. Medelvärden ± SEM (standardfel av medelvärdet) presenteras i resultaten. Statistisk signifikans för antiinflammatoriska, cellviabilitets- och senescensanalyser utvärderades genom en enkelriktad variansanalys (ANOVA) och Dunnetts post hoc-test med GraphPad Prism version 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA , USA). Medan den statistiska signifikansen för cellmigrationsanalyser bedömdes med tvåvägs ANOVA följt av Sydáks multipla jämförelsetester, accepterades p-värden < 0.05 som statistiskt signifikanta.

5. Slutsatser

Detta arbete förstärker de gynnsamma effekter som vanligtvis tillskrivs Salvia spp. genom att validera några av de traditionella användningarna som tillskrivs S. aurea. Dessutom beskrevs en unik kemisk sammansättning med 1,8-cineol, -pinen, cis-tujon, kamfer, (E)-karyofyllen, trans-tujon, -pinen, kamfen och -humulen som huvudföreningar. Vi rapporterar häri att EO utövar svampdödande, antiinflammatoriska och sårläkande effekter, vilket validerar de traditionella användningarna förknippade med denna art för behandling av hudinfektioner, inflammationsrelaterade sjukdomar och sår.

Dessutom rapporterar denna studie, för första gången, att denna art kunde utöva antisenescenseffekter, vilket ytterligare främjade intresset för denna art. Därför belyser dessa resultat S. aureas roll för att lindra inflammation och hudrelaterade infektioner, vilket förstärker intresset för dermo-kosmetika. Även om denna studie har visat att produktionen av högvärdiga metaboliter med relevanta biologiska aktiviteter kan främjas genom odling, är en noggrann kemisk analys av den odlade växten väsentlig, med tanke på den extrema variationen i den kemiska profilen som ett resultat av genetiska och miljömässiga faktorer. (stress, markegenskaper, skördesäsong).

Författarbidrag:LS och AM; validering, DM, EC, MJG, MTC och SP; formell analys, JMA-S., MJG och AP; utredning, JMA-S., AM och AP; resurser, AM, MTC och LS; datakurering, AP; skrivning—original utkast förberedelse, EC, DM, JMA-S., AP och AM; skriva – granskning och redigering, EC, DM, MTC, LS och AM; visualisering, JMA-S.; övervakning, LS och AM; projektadministration, LS; finansieringsförvärv, LS och MTC Alla författare har läst och samtyckt till den publicerade versionen av manuskriptet.

Finansiering: Detta arbete finansierades av COMPETE 2020—Operational Program for Competitiveness and Internationalization och portugisiska nationella fonder via FCT—Fundação para a Ciência ea Tecnologia, under projekten UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 och LA5/P 2020.

Erkännanden: Författarna tackar tacksamt för det värdefulla bidraget från Daniela Standen, The International Study and Language Institute (The University of Reading, Storbritannien, d.standen@reading.ac.uk) för teknisk support.

Referenser

1. Kaur, N.; Ahmed, T. Bioaktiva sekundära metaboliter av medicinska och aromatiska växter och deras sjukdomsbekämpande egenskaper. I medicinska och aromatiska växter; Springer Nature: Basingstoke, Storbritannien, 2021; s. 113–142. ISBN 978-3-030-58974-5.

2. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-De-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Rodrigues, A.; Martinez-De-Oliveira, J. Antifungal aktivitet av den eteriska oljan från Thymus pulegioides på Candida, Aspergillus och dermatofytarter. J. Med. Microbiol. 2006, 55, 1367–1373. [CrossRef]

3. Santos, EL; Freitas, PR; Araújo, ACJ; Almeida, RS; Tintino, SR; Paulo, CLR; Silva, ACA; Silva, LE; do Amaral, W.; Deschamps, C.; et al. Förbättrad antibakteriell effekt av antibiotika av den eteriska oljan från Aloysia gratissima (Gillies & Hook.) Tronc. och dess huvudbeståndsdel beta-karyofyllen. Phytomedicine Plus 2021, 1, 100100. [CrossRef]

4. Edris, AE Farmaceutiska och terapeutiska potentialer hos eteriska oljor och deras flyktiga beståndsdelar: En översikt. Phytother. Res. 2007, 21, 308–323. [CrossRef]

5. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Farmakologiska egenskaper hos Salvia Officinalis och dess komponenter. J. Tradit. Komplement. Med. 2017, 7, 433–440. [CrossRef]

6. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Kemisk sammansättning och biologisk aktivitet av eterisk olja av Teucrium sodium L. subsp. kardioider (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) från ön Sardinien (Italien). Nat. Driva. Res. 2022, 36, 5828–5835. [CrossRef]

7. Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Salgueiro, L.; Maxia, A. Antifungal aktivitet och kemisk sammansättning av den eteriska oljan från luftdelarna av två nya Teucrium capitatum L. kemotyper från ön Sardinien, Italien. Nat. Driva. Res. 2020, 35, 6007–6013. [CrossRef]

8. Piras, A.; Porcedda, S.; Falconieri, D.; Maxia, A.; Gonçalves, M.; Cavaleiro, C.; Goncalves, MJ; Salgueiro, L. Antifungal aktivitet av eterisk olja från Mentha spicata L. och Mentha pulegium L. som växer vilt på ön Sardinien (Italien). Nat. Driva. Res. 2021, 35, 993–999. [CrossRef]

9. Walker, JB; Sytsma, KJ Staminal evolution i släktet Salvia (Lamiaceae): Molekylära fylogenetiska bevis för flera ursprung för staminal spaken. Ann. Bot. 2007, 100, 375–391. [CrossRef]

10. Waller, SB; Cleff, MB; Serra, EF; Silva, AL; dos Reis Gomes, A.; de Mello, JRB; de Faria, RO; Meireles, MCA Växter från familjen Lamiaceae som en källa till svampdödande molekyler inom human- och veterinärmedicin. Microb. Patog. 2017, 104, 232–237. [CrossRef]

11. Cocco, E.; Maccioni, D.; Sanjust, E.; Falconieri, D.; Farris, E.; Maxia, A. Etnofarmakobotanik och mångfald av endemiska medelhavsväxter i Marmilla subregion, Sardinien, Italien. Plants 2022, 11, 3165. [CrossRef]

12. Afonso, AF; Pereira, OR; Fernandes, Â.; Calhelha, RC; Silva, AMS; Ferreira, RCF; Cardoso, SM Fytokemisk sammansättning och bioaktiva effekter av Salvia africana, Salvia Officinalis "Icterina" och Salvia mexicana vattenhaltiga extrakt. Molecules 2019, 24, 4327. [CrossRef]

13. Alves-Silva, JM; Cocco, E.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Silva, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Cruz, MT; Maxia, A.; Salgueiro, L. Avtäckande av den kemiska sammansättningen och biologiska egenskaperna hos Salvia cacaliifolia Benth. eterisk olja. Plants 2023, 12, 359. [CrossRef]

14. Nkomo, MM; Katerere, DD; Vismer, HH; Cruz, TT; Balayssac, SS; Malet-Martino, MM; Makunga, NN Fusarium-hämning av vilda populationer av medicinalväxten Salvia africana-lutea L. kopplad till metabolomisk profilering. BMC komplement. Altern. Med. 2014, 14, 99. [CrossRef]

15. Codd, LE Flora of Southern Africa: Del. 4 Lamiaceae; Botaniskt forskningsinstitut: Pretoria, Sydafrika, 1985; Volym 28, ISBN 0621082686.

16. Makunga, NP; Van Staden, J. Ett effektivt system för produktion av klonala plantor av den medicinskt viktiga aromatiska växten: Salvia africana-lutea L. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2007, 92, 63–72. [CrossRef]

17. Aston Philander, L. En etnobotani av Western Cape Rasta bush medicin. J. Etnopharmacol. 2011, 138, 578–594. [CrossRef]

18. Watt, JM; Breyer-Brandwijk, MG De medicinska och giftiga växterna i södra och östra Afrika: Att vara en redogörelse för deras medicinska och andra användningsområden, kemiska sammansättning, farmakologiska effekter och toxikologi hos människor och djur; E. & S. Livingstone: Edinburgh, Storbritannien, 1962.

19. Gupta, AK; Cooper, EA Uppdatering av svampdödande behandling av dermatofytos. Mycopathologia 2008, 166, 353–367. [CrossRef]

20. Matiz, C.; Friedlander, SF Subkutana vävnadsinfektioner och bölder. I principer och praxis för infektionssjukdomar hos barn; Elsevier: Amsterdam, Nederländerna, 2012; s. 454–462.e2. [CrossRef]

21. De Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, NY; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Júnior, W.; Sousa, M. da GT de; Benard, G.; Criado, PR Toll-like receptors (TLR) 2 och 4 uttryck av keratinocyter från patienter med lokaliserad och spridd dermatofytos. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo 2015, 57, 57–61. [CrossRef]

22. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT Trichophyton rubrum framkallar fagocytiska och pro-inflammatoriska svar i humana monocyter genom Toll-Like Receptor 2. Front. Microbiol. 2019, 10, 2589. [CrossRef]

23. Sun, S.-C. Den icke-kanoniska NF-B-vägen i immunitet och inflammation. Nat. Rev. Immunol. 2017, 17, 545–558. [CrossRef]

24. Rao, KMK Molekylära mekanismer som reglerar inos-uttryck i olika celltyper. J. Toxicol. Environ. Hälsa del B 2000, 3, 27–58. [CrossRef]

25. Minghetti, L. Cyclooxygenase-2 (COX-2) vid inflammatoriska och degenerativa hjärnsjukdomar. J. Neuropatol. Exp. Neurol. 2004, 63, 901–910. [CrossRef]

26. Sharma, A.; Gupta, S. Skyddande manifestation av herbonanoceuticals som antimykotika: En möjlig läkemedelskandidat för dermatofytisk infektion. Health Sci. Rep. 2022, 5, e775. [CrossRef]

27. Guo, S.; DiPietro, LA Faktorer som påverkar sårläkning. J. Dent. Res. 2010, 89, 219–229. [CrossRef]

28. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Kemisk sammansättning och svampdödande aktivitet hos de eteriska oljorna i Lavandula viridis LHér. J. Med. Microbiol. 2011, 60, 612–618. [CrossRef]

29. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, MP; Lopes, L.; Rossi, A. Dermatofytresistens mot svampdödande läkemedel: Mekanismer och prospekt. Främre. Microbiol. 2018, 9, 1108. [CrossRef]

30. Mourad, A.; Perfekt, JR Kriget mot kryptokokkos: En översyn av den svampdödande arsenalen. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2018, 113, 7. [CrossRef]

31. Vonkeman, HE; van de Laar, MAFJ Nonsteroidala antiinflammatoriska läkemedel: Biverkningar och deras förebyggande. Semin. Artrit Rheum. 2010, 39, 294–312. [CrossRef]

32. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Viljoen, AM Säsongsvariation i eterisk oljesammansättning, oljetoxicitet och den biologiska aktiviteten hos lösningsmedelsextrakt från tre sydafrikanska Salvia-arter. S. Afr. J. Bot. 2008, 74, 230–237. [CrossRef]

33. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Viljoen, AM; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Tilney, PM; Barroso, JG Kemisk sammansättning, bladtrikomtyper och biologiska aktiviteter av eteriska oljor från fyra besläktade Salvia-arter som är inhemska i södra Afrika. J. Essent. Oil Res. 2006, 18, 72–79. [CrossRef]

34. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancini, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. Flyktiga ämnen och antifungal-antibakteriell-antiviral aktivitet av sydafrikanska Salvia spp. eteriska oljor odlade under enhetliga förhållanden. Molecules 2021, 26, 2826. [CrossRef]

35. Cowling, RM; Rundel, PW; Lamont, BB; Arroyo, MK; Arianoutsou, M. Växtmångfald i medelhavsklimatregioner. Trender Ecol. Evol. 1996, 11, 362-366. [CrossRef]

36. Médail, F. Ekosystem: Medelhavet. I Encyclopedia of Ecology, volym 3; Elservier Inc.: Oxford, Storbritannien, 2008; Volym 5, s. 2296–2308.

37. Adams, RP Identifiering av eteriska oljekomponenter genom gaskromatografi/kvadrupolmasspektrometri, 4:e upplagan; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, USA, 2007.

38. National Institute of Standards and Technology Mass Spectral Library (NIST/EPA/NIH).

39. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolysackaride aktiverar Toll-like Receptor 4 (TLR4)-medierad NF-KB-signalväg och proinflammatoriskt svar i humana pericyter. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457–2468. [CrossRef]

40. Manning, J.; Goldblatt, P. Plants of the Greater Cape Floristic Region. 1: Core Cape Flora; South African National Biodiversity Institute: Pretoria, Sydafrika, 2012; ISBN 1919976744.

41. Lim Ah Tock, MJ; Kamatou, GPP; Combrinck, S.; Sandasi, M.; Viljoen, AM En kemometrisk bedömning av variationen av eterisk olja av tre Salvia-arter som är inhemska i Sydafrika. Phytochemistry 2020, 172, 112249. [CrossRef]

42. Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF; Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF Eterisk oljas kemiska sammansättning och farmakologiska egenskaper. I eteriska oljor — Naturens oljor; El-Shemy, H., Ed.; IntechOpen: London, Storbritannien, 2020; s. 13–36. ISBN 978-1-78984-641-6.

43. Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Scheffer, JJC Faktorer som påverkar produktionen av sekundär metabolit i växter: Flyktiga komponenter och eteriska oljor. Smak. Fragr. J. 2008, 23, 213–226. [CrossRef]

44. van Vuuren, S.; Ramburrun, S.; Kamatou, G.; Viljoen, A. Inhemska sydafrikanska eteriska oljor som potentiella antimikrobiella medel för att behandla fotlukt (bromodos). S. Afr. J. Bot. 2019, 126, 354–361. [CrossRef]

45. Scott, G.; Springfield, EP; Coldrey, N. En farmakognostisk studie av 26 sydafrikanska växtarter som används som traditionella läkemedel. Pharm Biol. 2004, 42, 186–213. [CrossRef]

46. ​​Oosthuizen, CB; Gasa, N.; Hamilton, CJ; Lall, N. Hämning av mykotioldisulfidreduktas och mykobakteriell biofilm av utvalda sydafrikanska växter. S. Afr. J. Bot. 2019, 120, 291–297. [CrossRef]

47. Alves, M.; Gonçalves, MJ; Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Salgueiro, L. Avslöjar den antifungala potentialen hos två eteriska oljor av iberisk timjan: Effekt på C. albicans groddrör och utförda biofilmer. Främre. Pharmacol. 2019, 10, 446. [CrossRef]

48. Shukla, R.; Singh, P.; Prakash, B.; Dubey, NK Antifungal, aflatoxin-hämning och antioxidantaktivitet av Callistemon lanceolatus (Sm.) Söt eterisk olja och dess huvudkomponent 1,8-cineol mot svampisolat från kikärtsfrön. Livsmedelskontroll 2012, 25, 27–33. [CrossRef]

49. Yu, D.; Wang, J.; Shao, X.; Xu, F.; Wang, H. Antifungala verkningssätt av tea tree-olja och dess två karakteristiska komponenter mot Botrytis cinerea. J. Appl. Microbiol. 2015, 119, 1253–1262. [CrossRef]

50. Morcia, C.; Malnati, M.; Terzi, V. In vitro antifungal aktivitet av terpinen-4-ol, eugenol, karvon, 1,8-cineol (eukalyptol) och tymol mot mykotoxigena växtpatogener. Food Addit. Contam. Del A 2011, 29, 415–422. [CrossRef]

51. Kim, H.-M.; Kwon, H.; Kim, K.; Lee, S.-E. Antifungala och anti-aflatoxigena aktiviteter av 1,8-cineol och t-cinnamaldehyd på Aspergillus afflatus. Appl. Sci. 2018, 8, 1655. [CrossRef]

52. da Silva, ACR; Lopes, PM; de Azevedo, MMB; Costa, DCM; Alviano, CS; Alviano, DS Biologiska aktiviteter av a-pinen och -pinen enantiomerer. Molecules 2012, 17, 6305–6316. [CrossRef]

53. Jang, S.-K.; Lee, S.-Y.; Kim, S.-H.; Hong, C.-Y.; Park, M.-J.; Choi, I.-G. Antifungala aktiviteter av eteriska oljor från sex barrträd mot Aspergillus fumigatus. J. Korean Wood Sci. Technol. 2012, 40, 133–140. [CrossRef]

54. de Macêdo Andrade, AC; Rosalen, PL; Freires, IA; Scotti, L.; Scotti, MT; Aquino, SG; de Castro, RD Antifungal aktivitet, verkningssätt, dockningsförutsägelse och antibiofilmeffekter av (plus )- -pinenenantiomerer mot Candida spp. Curr. Topp. Med. Chem. 2018, 18, 2481–2490. [CrossRef]

55. Shin, S. Antifungala aktiviteter av eteriska oljor från Glehnia littoralis enbart och i kombination med ketokonazol. Nat. Driva. Sci. 2005, 11, 92–96.

56. Iraji, A.; Yazdanpanah, S.; Alizadeh, F.; Mirzamohammadi, S.; Ghasemi, Y.; Pakshir, K.; Yang, Y.; Zomorodian, K. Screening av de svampdödande aktiviteterna hos monoterpener och deras isomerer mot Candida-arter. J. Appl. Microbiol. 2020, 129, 1541–1551. [CrossRef]

57. Jaafar, M.; Mitri, S.; Na'was, T. Hämning av gramnegativ bakterietillväxt och biofilmbildning av alfa-tujon. IOSR J. Pharm. Biol. Sci. 2018, 13, 2. [CrossRef]

58. Teker, T.; Sefer, Ö.; Gazda ˘glı, A.; Yörük, E.; Varol, G.˙I.; Albayrak, G. -thujone uppvisar svampdödande aktivitet mot F. graminearum genom att inducera oxidativ stress, apoptos, epigenetiska förändringar och minskad toxinsyntes. Eur. J. Plant Pathol. 2021, 160, 611–622. [CrossRef]

59. Huo, H.; Gu, Y.; Cao, Y.; Liu, N.; Jia, P.; Kong, W. Antifungal aktivitet av kamfer mot fyra fytopatogener av Fusarium. S. Afr. J. Bot. 2022, 148, 437–445. [CrossRef]

60. Wu, K.; Lin, Y.; Chai, X.; Duan, X.; Zhao, X.; Chun, C. Mekanismer för antibakteriell verkan i ångfas av eterisk olja från Cinnamomum camphora var. linaloofera Fujita mot Escherichia coli. Food Sci. Nutr. 2019, 7, 2546–2555. [CrossRef]

61. Magiatis, P.; Skaltsounis, A.-L.; Chinou, I.; Haroutounian, SA Kemisk sammansättning och in vitro antimikrobiell aktivitet av eteriska oljor från tre grekiska Achillea-arter. Z. Für Nat. C 2002, 57, 287-290. [CrossRef] [PubMed]

62. Dahham, S.; Tabana, Y.; Iqbal, M.; Ahamed, M.; Ezzat, M.; Majid, A.; Majid, A. Anticancer-, antioxidant- och antimikrobiella egenskaperna hos sesquiterpene-caryophyllene från den eteriska oljan från Aquilaria crassna. Molecules 2015, 20, 11808–11829. [CrossRef]

63. Pieri, FA; de Castro Souza, MC; Vermelho, LLR; Vermelho, MLR; Perciano, PG; Vargas, FS; Borges, APB; da Veiga-Junior, VF; Moreira, MAS Användning av karyofyllen för att bekämpa bakteriell tandplackbildning hos hundar. BMC Vet. Res. 2016, 12, 216. [CrossRef]

64. Goren, AC; Piozzi, F.; Akcicek, E.; Kılıç, T.; Çarıkçı, S.; Mozio ˘glu, E.; Setzer, WN Eterisk oljesammansättning av tjugotvå Stachys-arter (bergste) och deras biologiska aktiviteter. Phytochem. Lett. 2011, 4, 448–453. [CrossRef]

65. Yadav, N.; Chandra, H. Undertryckande av inflammatoriska och infektionssvar i lungmakrofager av eukalyptusolja och dess beståndsdel 1,8-cineol: Rollen hos mönsterigenkänningsreceptorerna TREM-1 och NLRP3, MAP-kinasregulatorn MKP{{5 }} och NFκB. PLoS ONE 2017, 12, e0188232. [CrossRef]

66. Öl, AM; Zagorchev, P.; Filipova, DM; Lukanov, J. Effekter av 1,8-cineol på aktiviteten av cyklooxygenas och cyklooxygenas 1 och cyklooxygenas 2 isoformer. Nat. Driva. Chem. Res. 2017, 5, 1000253. [CrossRef]

67. Bastos, VPD; Gomes, AS; Lima, FJB; Brito, TS; Soares, PMG; Pinho, JPM; Silva, CS; Santos, AA; Souza, MHLP; Magalhães, PJC inhalerad 1,8-cineol minskar inflammatoriska parametrar i luftvägarna hos ovalbumin-utmanade marsvin. Grundläggande. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2011, 108, 34–39. [CrossRef]

68. Juergens, LJ; Racké, K.; Tuleta, I.; Stoeber, M.; Juergens, UR Antiinflammatoriska effekter av 1,8-cineol (eukalyptol) förbättrar glukokortikoideffekter in vitro: En ny metod för steroidsparande tilläggsterapi för KOL och astma? Synergy 2017, 5, 1–8. [CrossRef]

69. Santos, FA; Rao, VSN Antiinflammatoriska och antinociceptiva effekter av 1,8-cineol, en terpenoidoxid som finns i många eteriska oljor från växter. Phytother. Res. 2000, 14, 240–244. [CrossRef]

70. Mohammed, HA; Mohammed, SAA; Khan, O.; Ali, HM Aktuell eukalyptolsalva påskyndar sårläkning och utövar antioxidant- och antiinflammatoriska effekter i råttors hudbränningsmodell. J. Oleo Sci. 2022, 71, ess22214. [CrossRef]

71. Juergens, UR; Dethlefsen, U.; Steinkamp, ​​G.; Gillissen, A.; Repges, R.; Vetter, H. Antiinflammatorisk aktivitet av 1.8-cineol (eukalyptol) vid bronkial astma: En dubbelblind placebokontrollerad studie. Respir. Med. 2003, 97, 250–256. [CrossRef]

72. Lima, PR; de Melo, TS; Carvalho, KMMB; de Oliveira, Í.B.; Arruda, BR; de Castro Brito, GA; Rao, VS; Santos, FA 1,8-cineole (eukalyptol) lindrar cerulein-inducerad akut pankreatit via modulering av cytokiner, oxidativ stress och NF-KB-aktivitet hos möss. Life Sci. 2013, 92, 1195–1201. [CrossRef]

73. Coté, H.; Boucher, M.-A.; Pichette, A.; Legault, J. Antiinflammatorisk, antioxidant, antibiotika och cytotoxiska aktiviteter av Tanacetum vulgare l. eterisk olja och dess beståndsdelar. Medicines 2017, 4, 34. [CrossRef]

74. Rufino, AT; Ribeiro, M.; Judas, F.; Salgueiro, L.; Lopes, MC; Cavaleiro, C.; Mendes, AF Antiinflammatorisk och kondroskyddande aktivitet av (plus)- -pinen: Strukturell och enantiomerisk selektivitet. J. Nat. Driva. 2014, 77, 264–269. [CrossRef]

75. Schepetkin, IA; Kushnarenko, SV; Özek, G.; Kirpotina, LN; Utegenova, GA; Kotukhov, YA; Danilova, AN; Özek, T.; Baser, KHC; Quinn, MT Hämning av mänskliga neutrofila svar av den eteriska oljan från Artemisia kotuchovii och dess beståndsdelar. J. Agric. Food Chem. 2015, 63, 4999–5007. [CrossRef]

76. dos Santos, E.; Leitão, MM; Aguero Ito, CN; Silva-Filho, SE; Arena, AC; de Souza Silva-Comar, FM; Nakamura Cuman, RK; Oliveira, RJ; Nazari Formagio, AS; Leite Kassuya, CA Analgetiska och antiinflammatoriska artikulära effekter av eterisk olja och kamfer isolerade från Ocimum kilimandscharicum Gürke-blad. J. Etnopharmacol. 2021, 269, 113697. [CrossRef]

77. Adhikari, A.; Bhandari, S.; Pandey, DP Antiinflammatoriska föreningar kamfer och metylsalicylat från traditionellt använda smärtläkande växt Equisetum arvense LJ Nepal Chem. Soc. 2019, 40, 1–4. [CrossRef]

78. Silva-Filho, S.; de Souza Silva-Comar, F.; Wiirzler, L.; do Pinho, R.; Greenspan, R.; Bersani-Amado, C.; Cuman, R. Effekt av kamfer på beteendet hos leukocyter in vitro och in vivo i det akuta inflammatoriska svaret. Trop. J. Pharm. Res. 2015, 13, 2031. [CrossRef]

79. Cho, JY; Chang, H.-J.; Lee, S.-K.; Kim, H.-J.; Hwang, J.-K.; Chun, HS Förbättring av dextransulfatnatrium-inducerad kolit hos möss genom oral administrering av -karyofyllen, en seskviterpen. Life Sci. 2007, 80, 932–939. [CrossRef]

80. Gushiken, LFS; Beserra, FP; Hussni, MF; Gonzaga, MT; Ribeiro, VP; de Souza, PF; Campos, JCL; Massaro, TNC; Hussni, CA; Takahira, RK; et al. Beta-karyofyllen som en antioxidant, antiinflammatorisk och återepiteliseringsaktivitet i en sårexcisionsmodell för råtthud. Oxid. Med. Cell Longev. 2022, 2022, 1–21. [CrossRef]

81. Brito, LF; Oliveira, HBM; Neves Selis, N.; Souza, CLS; Júnior, MNS; Souza, EP; da Silva, LSC; Souza Nascimento, F.; Amorim, AT; Campos, GB; et al. Antiinflammatorisk aktivitet av -karyofyllen kombinerat med dokosahexaensyra i en modell av sepsis inducerad av Staphylococcus aureus hos möss. J. Sci. Food Agric. 2019, 99, 5870–5880. [CrossRef]

82. Sousa, LFB; Oliveira, HBM; das Neves Selis, N.; Morbeck, LLB; Santos, TC; da Silva, LSC; Viana, JCS; Reis, MM; Sam uteplats, BA; Campos, GB; et al. -karyofyllen och dokosahexaensyra, isolerade eller associerade, har potentiella antinociceptiva och antiinflammatoriska effekter in vitro och in vivo. Sci. Rep. 2022, 12, 19199. [CrossRef]

83. Scandiffio, R.; Geddo, F.; Cottone, E.; Querio, G.; Antoniotti, S.; Gallo, MP; Maffei, ME; Bovolin, P. Skyddseffekter av (e)- -karyofyllen (bcp) vid kronisk inflammation. Näringsämnen 2020, 12, 3273. [CrossRef]

84. Salas-Oropeza, J.; Jimenez-Estrada, M.; Perez-Torres, A.; Castell-Rodriguez, AE; Becerril-Millan, R.; Rodriguez-Monroy, MA; Jarquin-Yañez, K.; Canales-Martinez, MM Sårläkningsaktivitet av -pinen och -phellandren. Molecules 2021, 26, 2488. [CrossRef]

85. Rocha Caldas, GF; da Silva Oliveira, AR; Araújo, AV; Lafayette, SSL; Albuquerque, GS; da Costa Silva-Neto, J.; Costa-Silva, JH; Ferreira, F.; da Costa, JGM; Wanderley, AG Gastroskyddande mekanismer för monoterpen 1,8-cineol (eukalyptol). PLoS ONE 2015, 10, e0134558. [CrossRef]

86. Chabane, S.; Boudjelal, A.; Napoli, E.; Benkhaled, A.; Ruberto, G. Fytokemisk sammansättning, antioxidant och sårläkningsaktiviteter av Teucrium polium subsp. capitatum (L.) Briq. eterisk olja. J. Essent. Oil Res. 2021, 33, 143–151. [CrossRef]

87. Tran, TA; Ho, MT; Sång, YW; Cho, M.; Cho, SK Kamfer inducerar proliferativa och anti-åldrande aktiviteter i humana primära dermala fibroblaster och hämmar uv-inducerad rynkorbildning i mushud. Phytother. Res. 2015, 29, 1917–1925. [CrossRef]

88. Rodenak-Kladniew, B.; Castro, A.; Stärkel, P.; Galle, M.; Crespo, R. 1,8-Cineole främjar G0/G1-cellcykelstopp och oxidativ stress-inducerad senescens i HepG2-celler och sensibiliserar celler för anti-åldringsläkemedel. Life Sci. 2020, 243, 117271. [CrossRef]

89. Europarådets direktorat för läkemedelskvalitet och hälsovård. Europeiska farmakopén; EDQM: Strasbourg, Frankrike, 2010; ISBN 978-92-871-6700-2.

90. Van den Dool, H.; Kratz, PD En generalisering av retentionsindexsystemet inklusive linjär temperaturprogrammerad gas-vätskefördelningskromatografi. J. Chromatogr. 1963, 11, 463–471. [CrossRef]

91. CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute. Referensmetod för utspädning av buljong Antifungal känslighetstestning av filamentösa svampar. CLSI Document M38-A2, Approved Standard, 2nd ed.; Clinical and Laboratory Standards Institute: Wayne, PA, USA, 2008; Volym 28, ISBN 1-56238-668-9.

92. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Nya insikter om den antiinflammatoriska potentialen och säkerhetsprofilen för Thymus carnosus och Thymus camphoratus eteriska oljor och deras huvudföreningar. J. Etnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [CrossRef]

93. Green, LC; Wagner, DA; Glogowski, J.; Skeppare, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Analys av nitrat, nitrit och [15N] nitrat i biologiska vätskor. Anal. Biochem. 1982, 126, 131-138. [CrossRef]

94. Martinotti, S.; Ranzato, E. Scratch sårläkningsanalys. I epidermala celler: metoder inom molekylärbiologi; Turksen, K., Ed.; Humana: New York, NY, USA, 2019; Volym 2109, s. 225–229. [CrossRef]

95. Moreira, P.; Sousa, FJ; Matos, P.; Brites, GS; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Figueirinha, A.; Salgueiro, L.; Batista, MT; Branco, PC; et al. Kemisk sammansättning och effekt mot hudförändringar av bioaktiva extrakt erhållna genom hydrodestillation av Eucalyptus globulus blad. Pharmaceutics 2022, 14, 561. [CrossRef]

【För mer information: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】