Antioxidant och anti-hudåldringspotential för utvalda thailändska växter: in vitro-utvärdering och in silico-målförutsägelse del 2

3. Diskussion

Hudens åldrande är en naturligt förekommande process hos alla människor. Men många livsstilar och miljöfaktorer kan också påskynda denna process som leder till för tidigt åldrad hud [19]. ROS är välkänt som en viktig patogen faktor i hudens åldrandeprocess. Ansamlingen av ROS kan uppreglera uttrycket av både elastas och tyrosinas enzymer, vilket sedan leder till rynkor, bristande elasticitet och hyperpigmentering [20-22]. Alla dessa är vanliga egenskaper hos hudens åldrande [4]. Här undersökte vår studie antioxidant-, anti-elastas- och anti-tyrosinasegenskaperna hos växtextrakt från 16 thailändska växtarter och avslöjade lovande naturliga föreningar för den potentiella utvecklingen av nya behandlingar mot hudens åldrande.

Glykosid av cistanche kan också öka aktiviteten av SOD i hjärt- och levervävnader och avsevärt minska innehållet av lipofuscin och MDA i varje vävnad, effektivt rensa upp olika reaktiva syreradikaler (OH-, H₂O₂, etc.) och skydda mot DNA-skador orsakade av OH-radikaler. Cistanche-fenyletanoidglykosider har en robust rensande förmåga av fria radikaler, en högre reducerande förmåga än vitamin C, förbättrar aktiviteten av SOD i spermiesuspension, minskar innehållet av MDA och har en viss skyddande effekt på spermiemembranfunktionen. Cistanche-polysackarider kan öka aktiviteten av SOD och GSH-Px i erytrocyter och lungvävnader hos experimentellt åldrande möss orsakade av D-galaktos, samt minska innehållet av MDA och kollagen i lungor och plasma, och öka innehållet av elastin, har en god renande effekt på DPPH, förlänger hypoxitiden hos åldrande möss, förbättrar aktiviteten av SOD i serum och fördröjer den fysiologiska degenerationen av lungor hos experimentellt åldrande möss. Med cellulär morfologisk degeneration har experiment visat att Cistanche har den goda antioxidantförmågan och har potential att vara ett läkemedel för att förebygga och behandla åldrande hudsjukdomar. Samtidigt har echinakosid i Cistanche en betydande förmåga att ta bort DPPH-fria radikaler och kan avlägsna reaktiva syrearter, förhindra friradikal-inducerad kollagennedbrytning och har även en god reparationseffekt på anjonskada av tyminfria radikaler.

Klicka på cistanche tubulosa tillägg

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Elastas är ett proteasenzym som är primärt ansvarigt för nedbrytningen av elastin, ett viktigt protein som finns i ECM. Elastin är avgörande för att ge elasticitet till huden på grund av dess elastiska rekylegenskaper [13]. Därför kan hämningen av elastasaktivitet hjälpa till att förhindra hudförlust av elasticitet och rynkor [23]. Vårt resultat fann att A. occidentale var den mest potenta elastashämmaren, följt av G. zeylanicum och S. alata, i rangordning efter IC50-värden. Dessutom avslöjade dockningsresultaten att fem föreningar som härrör från dessa tre växter har lägre bindningsenergier än EGCG (positiv kontroll) och FRW (original inhibitor), där föreningarna som uppvisar den lägre bindningsenergin ansågs ha bättre hämning (tabell S4) [ 24]. Dessa föreningar är flavonoider, som inkluderar en tetramer av proantocyanidin [25], amentoflavon [25], rutin [26,27], agathisflavon [26] från A. occidentale och kaempferol 3-O-gentiobiosid från S. alata [28] (Tabell S3). Resultaten antydde att alla fem föreningarna var ansvariga för anti-elastasaktivitet och kan betraktas som lovande kandidater för utvecklingen av anti-hudåldring. Vi fann emellertid att ingen av föreningarna från G. zeylanicum visade stark bindningsaffinitet jämfört med kontrollliganderna, även om dess extrakt visade näst mest aktivitet genom in vitro-analys. Detta kan bero på den synergistiska effekten av föreningar i blandningen snarare än den individuella effekten av varje fytokemisk komponent.

Förutom elastas anses melanin vara ett annat viktigt mål för behandling av hudens åldrande. Melanin är en viktig komponent i hud-, hår- och ögonfärgen som syntetiseras av melanogenes i melanocyten. Däremot kan överproduktion av melanin orsaka hudsjukdomar, inklusive fräknar, melasma, åldersfläckar och hyperpigmentering, vilket leder till ett för tidigt åldrande utseende [12]. Vid melanogenes är tyrosinas det kritiska enzymet i det hastighetsbegränsande steget. Därför kan nedregleringen av tyrosinasaktivitet leda till minskad melaninproduktion [29]. Våra resultat visade att G. zeylanicum var den mest potenta tyrosinashämmaren, följt av A. catechu och A. occidentale, enligt IC50-värden. Överraskande nog visade de flesta av föreningarna (47 av 48 föreningar) i dessa tre växter lägre bindningsenergi mot tyrosinas än KA (positiv kontroll) och tropolon (ursprunglig hämmare) (tabell S5). Bland de 47 föreningarna var 16 härledda från G. zeylanicum, 12 härleddes från A. catechu och 29 härleddes från A. occidentale, varav 10 av dem kan hittas i mer än en växt (tabell S3). Men i motsats till bindningen av föreningen med elastas, är de identifierade potentiella föreningarna mot tyrosinas från en mängd olika fytokemiska klasser. När det gäller graden av bindningsenergier mot tyrosinas, är föreningarna som anses vara de bästa fem hämmarna o-kumarsyra [30] (fenolsyra), en tetramer av proantocyanidin [25] (flavonoid), koffeinsyra [30] (fenolsyra), ferulsyra [30] (fenol) och areka tannin A1 [31] (tannin), i stigande ordningsföljd (tabell S5). Resultaten som erhållits från in vitro-screening och dockningsanalys i denna studie har bekräftat de anti-hudåldrande egenskaperna hos fyra thailändska medicinalväxter och föreslår deras potentiella härledda föreningar som kan vara ansvariga för de observerade aktiviteterna. Ytterligare studier om fraktionering, såväl som identifiering och isolering av bioaktiva föreningar i dessa lovande växtextrakt, krävs kritiskt för att bevisa närvaron av våra föreslagna molekyler som senare skulle kunna utvecklas för behandling av åldrande hud [14].

A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum och S. alata är växter som används i traditionell medicin och finns i den tropiska zonen i Sydostasien, inklusive Thailand [32–36]. Dessa växter visades särskilt för flera antioxidantrelaterade aktiviteter. A. catechu frukt är ett populärt tuggbart föremål med betelblad, vilket är berusande och lätt beroendeframkallande [36]. Det används för behandling av brännsår och hudsår och fungerar som en sammandragande [35,37]. Det har rapporterats för potenta antioxidanter och antiinflammatoriska effekter mot oxidativ stress-inducerad leverskada hos råttor [38]. A. occidentale och G. zeylanicum, tillhörande södra Thailand, används som mat och lokal medicinalväxt [32,33]. A. occidentale blad används för att behandla hudutslag, klåda, sår och feber, medan G. zeylanicum blad används för att behandla reumatoid artrit, influensa, dysenteri och dyspepsi [32,33,39]. Bladextrakten av A. occidentale och G. zeylanicum uppvisade neuroprotektiva effekter mot glutamat och H2O2-inducerad oxidativ skada [32,40]. Dessutom utövade råextrakt från bladen på båda växterna antioxidativ stress och anti-aging egenskaper i nematoden Caenorhabditis elegans [33,41,42]. Blad av S. alata används för behandling av hudutslag, mykos och dermatit [34]. Bladextrakt från denna växt kunde öka både enzymatiska och icke-enzymatiska antioxidantsystem och förhindra lever- och njurvävnad från skador orsakade av oxidativ stress under diabetes i en råttmodell [43].

I överensstämmelse med tidigare rapporter visar våra resultat att A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum och S. alata uppvisar antioxidantpotential, bortsett från aktiviteterna mot hudens åldrande-relaterade enzymer. Vi fann att dessa växter är rika på totala fenoler och flavonoider med hög antioxidantkapacitet mot DPPH- och ABTS-radikaler, förutom S. alata, som endast visade en måttlig nivå i både mängder och aktiviteter. Fenoler och flavonoider är två välkända klasser av sekundära växtmetaboliter som är huvudansvariga för antioxidantaktivitet [44,45]. Detta överensstämde med våra resultat att det totala fenol- och flavonoidinnehållet visade en signifikant positiv korrelation med fria radikaler-fångande aktiviteter (Figur S1). Intressant nog visade korrelationsanalysen också att innehållet av totala fenol- och flavonoidföreningar i de studerade växtextrakten var positivt korrelerade med både elastas- och tyrosinasinhibering. Korrelationsstyrkan visade sig dock vara högre med fenoler än med flavonoider. Friradikalfångande aktiviteter visades ha en hög korrelation till de enzyminhiberande aktiviteterna hos extrakten. Dessa resultat tyder på att högt fenolinnehåll och antioxidantaktivitet kan leda till stark hämning av elastas- och tyrosinasenzymer. Möjligheten för protein-polyfenol-interaktioner bör dock också vara ett problem. Vissa polyfenoler kan direkt orsaka enzymutfällning via deras förmåga att binda till prolinrika proteiner, vilket resulterar i vätebindningsbildning med enzymet och därigenom leder till icke-selektiv hämning [46].

4. Material och metoder

4.1. Kemikalier och reagenser

Folin-Ciocalteus fenolreagens, aluminiumklorid (AlCl3), dimetylsulfoxid (DMSO), natriumacetat (NaOAc), quercetin, 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,{{5} } azinobis-(3-etylbenstiazolin-6-sulfonsyra) (ABTS), L-askorbinsyra, kaliumpersulfat (K2S2O8), elastas från bukspottkörteln från svin, epigallokatekingallat (EGCG), Nsuccinyl-Ala-Ala- Ala-p-nitroanilid (SANA), tyrosinas från svamp, kojinsyra (KA) och 3,4-dihydroxi-L-fenylalanin (L-DOPA) köptes från Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Natriumkarbonat (Na2CO3) köptes från Merck (Darmstadt, Tyskland). Gallsyra köptes från TCI America (Portland, OR, USA). Dikaliumfosfat (K2HPO4) och monobasiskt kaliumfosfat (KH2PO4) köptes från HiMedia (Mumbai, Indien). Tris-bas köptes från Vivantis Technologies (Shah Alam, Malaysia). Etanol och metanol köptes från RCI Labscan (Bangkok, Thailand). Alla kemikalier och reagens var analytiska kvaliteter.

4.2. Växtmaterial och utvinning

Växterna i denna studie samlades in lokalt från trädgårdar eller köptes från lokala marknader efter behov. Tabell 1 visar det vetenskapliga namnet, delen som används och källan för varje växt. Dessa växter var botaniskt autentiserade och deras kupongexemplar deponerades i herbariet hos Kasin Suvatabhandhu, Institutionen för botanik, Naturvetenskapliga fakulteten, Chulalongkorn University, Bangkok, Thailand, eller identifierades av en botanist. Växtmaterialen tvättades, torkades vid 65 ◦C och maldes fint i en mekanisk kvarn. Extraktionen av den torkade växten (40 g) utfördes genom Soxhlet-extraktion eller macerationsmetod med användning av 400 ml etanol eller metanol. Extrakten filtrerades och indunstades till torrhet under vakuum. Sedan löstes de torkade resterna i DMSO som en 100 mg/ml stamlösning och lagrades vid -20 ◦C för vidare studier.

4.3. Bestämning av totalt fenolinnehåll

Den totala fenolhalten utfördes med Folin-Ciocalteu-metoden [47]. Kortfattat blandades 50 µL extrakt vid 1 mg/ml i avjoniserat vatten med 50 µL av 10 procent (vikt/volym) Folin-Ciocalteus fenolreagens i en 96-brunnsplatta och inkuberades i mörker vid rumstemperatur ( RT) i 20 min. Efter inkubationen sattes 50 µL av 7,5 % (vikt/volym) Na2CO3 till blandningen och inkuberades i ytterligare 20 minuter. Absorbansen mättes med en mikroplattläsare vid 760 nm. Den totala fenolhalten beräknades från en standardkalibreringskurva med användning av gallussyra från 1,56 till 100 µg/ml, och resultaten visas som mg gallussyraekvivalent (GAE) per g torrviktsextrakt.

4.4. Bestämning av totalt flavonoidinnehåll

Den totala flavonoidhalten utfördes med användning av aluminiumklorid (AlCl3) [47]. Kortfattat bereddes 50 µL extrakt vid 1 mg/ml i avjoniserat vatten till 200 µL med 95 procent etanol, och sedan tillsattes 10 µL 10 procent AlCl3 och 10 µL 1 M NaOAc till en 96-brunn tallrik. Plattan inkuberades i mörker vid RT under 40 minuter, och absorbansen mättes med en mikroplattläsare vid 415 nm. Den totala flavonoidhalten beräknades från en standardkalibreringskurva med användning av quercetin från 1,56 till 100 µg/ml, och resultaten visades som mg quercetinekvivalent (QE) per g torrviktsextrakt.

4.5. Bestämning av DPPH-radical scavenging-aktivitet

DPPH-radikalavlägsnande aktivitetsanalys utfördes som beskrivits tidigare [47]. DPPH•-arbetsreagenset framställdes med DPPH löst i absolut etanol. Kortfattat blandades 180 µL DPPH•-arbetslösning med 20 µL extrakt i en 96-brunnsplatta och inkuberades i mörker vid RT under 15 minuter, och absorbansen mättes med en mikroplattläsare vid 517 nm. Askorbinsyra från 1,56 till 100 µg/ml fungerade som standard. Radikalfångningsaktiviteten beräknades som den procentuella inhiberingen av fria radikaler med användning av följande ekvation:

Procentandelar av DPPH-rensande aktivitet för varje växtextrakt jämfördes med de för askorbinsyra. Resultaten uttrycktes som mg vitamin C ekvivalent antioxidantkapacitet (VCEAC) per g torrviktsextrakt. IC50 (halvmaximal inhiberande koncentration) bestämdes från grafen för procentuell inhibering mot koncentrationen av varje extrakt.

4.6. Bestämning av ABTS-radical scavenging-aktivitet

ABTS-analys för radikalfångande aktivitet utfördes som beskrivits tidigare [47]. ABTS• plus arbetsreagenset framställdes genom att blanda 7 mM ABTS• och 2,45 mM K2S2O8 i ett förhållande av 1:1, och blandningen fick stå i 16–18 timmar i mörker vid RT. ABTS• plus-arbetslösningen späddes med absolut etanol för att absorbansen skulle nå mellan 0.7 och 0.8 vid 734 nm. Kortfattat blandades 180 µL ABTS• plus arbetslösning med 20 µL extrakt i en 96-brunnsplatta och inkuberades i mörker vid RT under 30 minuter, och absorbansen mättes med en mikroplattläsare vid 734 nm. Askorbinsyra från 1,56 till 100 µg/ml fungerade som standard. Radikalfångningsaktiviteten beräknades som den procentuella inhiberingen av fria radikaler med användning av ekvation (1).

Procentandelen av ABTS-rensande aktivitet för varje växtextrakt jämfördes med de för askorbinsyra. Resultaten uttrycks som mg C-vitaminekvivalent antioxidantkapacitet (VCEAC) per g torrviktsextrakt. IC50 bestämdes från grafen för procentuell inhibering mot koncentrationen av varje extrakt.

4.7. Bestämning av anti-elastasaktivitet

Anti-elastasaktiviteten utvärderades genom elastashämningsanalysen med användning av det modifierade protokollet [13,48,49]. Kortfattat, 20 µL extrakt, 10 µL av 0,4 U/ml pankreas porcint elastas (PPE) och 140 µL 0,1 M Tris-HCL-buffert vid pH 8,0 tillsattes i en 96-brunnsplatta och förinkuberades vid RT under 20 min. Efter inkubation sattes 30 µL 2 mM SANA till reaktionsblandningen och inkuberades ytterligare under 30 minuter vid RT. Absorbansen mättes med en mikroplattläsare vid 734 nm. EGCG användes för att fungera som en positiv kontroll för hämning. Den negativa kontrollen innehöll 100 procent DMSO istället för extrakten. Den procentuella inhiberingen av elastasaktivitet beräknades med användning av ekvationen (1). IC50 bestämdes från grafen för procentuell elastashämning mot en koncentration av varje extrakt.

4.8. Bestämning av anti-tyrosinasaktivitet

Antityrosinasaktiviteten utfördes med dopakrommetoden med vissa modifieringar [8]. Kortfattat tillsattes 20 µL extrakt, 20 µL 200 U/mL svamptyrosinas och 140 µL 0,1 M fosfatbuffert vid pH 6,8 i 96-brunnsplattor och förinkuberades i RT för 20 min. Efter inkubation sattes 40 µL av 2,5 mM L-DOPA till reaktionsblandningen och inkuberades ytterligare under 20 minuter vid RT. Absorbansen avlästes med en mikroplattläsare vid 492 nm. KA användes för att fungera som en positiv kontroll för hämning. Den negativa kontrollen innehöll 100 procent DMSO istället för extrakten. Den procentuella inhiberingen av tyrosinasaktiviteten beräknades med användning av ekvationen (1). IC50 bestämdes från grafen för procentuell tyrosinasinhibering mot en koncentration av varje extrakt.

4.9. Molekylär dockning

4.9.1. Ligandframställning

En lista över fytokemiska föreningar från de tre mest effektiva växterna med stark hämning mot elastas eller tyrosinas valdes från den publicerade litteraturen [25-28,30-32,42,50-61] (tabell S3). Alla kemiska strukturer av föreningarna genererades från IUPAC-namnet med hjälp av BIOVIA Draw 2019 (BIOVIA, San Diego, CA, USA). Sedan rengjordes föreningarnas geometri och sparade filen till format pdb med Discovery Studio Visualizer (BIOVIA, San Diego, CA, USA). Dessa filer konverterades till formatet pdbqt med programvaran AutoDockTools-1.5.6 (The Scripps Research Institute, San Diego, CA, USA).

4.9.2. Proteinberedning

Röntgenkristallografiska strukturer av elastas (PDB ID: 3HGP) [62] och tyrosinas (PDB ID: 2Y9X) [63] erhölls från RCSB Protein Data Bank. Före dockningsstudien, med användning av Discovery Studio Visualizer, avlägsnades vattenmolekyler och den ursprungliga inhibitorn från proteinstrukturen, exklusive Cu2 plus i strukturer av tyrosinas. Dessa proteinstrukturer preparerades med den förberedda proteininställningen i AutoDockTools-1.5.6-programvaran. Alla saknade väten och Kollman-laddningar lades till proteinstrukturen och sparades i filen för att formatera pdbqt för dockningsstudie.

4.9.3. Molekylär dockning

Molekylära dockningsstudier utfördes med standardprotokollet i AutoDockTools{{0}}.5.6-programvaran. Gridplatser sattes med ett avstånd på 0,375 Å. Dimensionerna x–y–z sattes till 40 × 40 × 40 punkter för elastas och 60 × 60 × 60 punkter för tyrosinas. Rutnätsrutan för x-, y- och z-centra var 12,58, 9,36 och 2,251 för elastas och -10,044, -28,706 och -43,443 för tyrosinas. Dockningsstudien utfördes med hjälp av Lamarckian Genetic Algorithm (GA) med standardparametrar, och dockningsresultaten analyserades med AutoDockTools-1.5.6-programvara och Discovery Studio Visualizer.

4.10. Statistisk analys

Alla experiment utfördes i minst tre exemplar, och resultaten representerades som medel ± standardavvikelse (SD). IC50-värdena analyserades med programvaran SigmaPlot version 12.0. Korrelation mellan olika variabler uttrycktes som Pearsons korrelationskoefficienter (r). Korrelationen bestämdes med hjälp av GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA), och resultaten ansågs vara statistiskt signifikanta när p var mindre än 0.05 (p < 0,05).

5. Slutsatser

Sammanfattningsvis avslöjade våra fynd fyra thailändska medicinalväxter som innehåller lovande kandidatföreningar för utveckling som medel mot åldrande av huden. Bladextrakten av A. occidentale och G. zeylanicum uppvisade stark hämmande verkan mot både elastas- och tyrosinasenzym, medan extrakten av S. alata-blad och A. catechu-frukt uppvisade sin aktivitet starkare endast mot elastas respektive tyrosinas. Flera föreningar härrörande från dessa växter bekräftades också för deras förmåga att binda till båda enzymerna genom molekylär dockningsstudie. Dessutom har G. zeylanicum-blad, A. occidentale-blad och A. catechu-frukt betydande antioxidantpotential mot fria radikaler med höga mängder fenoler och flavonoider. Sammantaget identifieras A. catechu-frukt, A. occidentale-blad, G. zeylanicum-blad och S. alata-blad som naturliga källor till antioxidanter, anti-elastas och anti-tyrosinas, som anses potentiellt användbara för behandling mot åldrande av huden.

Författarbidrag:Konceptualisering, AP; Utredning och formell analys, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR och CS; Validering, PR och AP; Visualisering, KC och SC (Sawarin Chumpolphant); Skriva—Original Draft Preparation, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS och AP; Skriva—Recension och redigering, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS, SC (Siriporn Chuchawankul), TT och AP; Supervision, TT och AP; Software, SC (Siriporn Chuchawankul) och TT; Resurser, TT och AP; Finansieringsförvärv, AP Alla författare har läst och samtyckt till den publicerade versionen av manuskriptet.

Finansiering: Denna forskning fick ekonomiskt stöd av Thailand Science Research and Innovation Fund Chulalongkorn University (CU_FRB65_hea (91)_198_53_01 och kontoret för Permanent Secretary, Ministry of Högre utbildning, vetenskap, forskning och innovation (bidragsnummer RGNS 63- 003). KC vill också tacka 90-årsjubileet för Chulalongkorn University Fund (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund).

Datatillgänglighetsförklaring:Inte tillämpbar.

Erkännanden: Författarna är tacksamma till Maneewan Suwatronnakorn, Somchai Issaravanich och Chatrawee Duangjan för deras vänliga hjälp vid beredning av växtextrakt. Vi är också tacksamma mot Nijsiri Ruangrungsi och Chanida Palanuvej för deras hjälp med växtidentifiering och Dicson Sheeja Malar för deras hjälp med den engelska redigeringen av manuskriptet. AP är tacksamma för Grants for Development of New Faculty Staff, Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund, Chulalongkorn University.

Intressekonflikt:Författarna förklarar ingen intressekonflikt.

Referenser

1. Kligman, AM Vad är hudens "sanna" funktion? Exp. Dermatol. 2002, 11, 159.

2. Zhang, S.; Duan, E. Kampen mot hudens åldrande: Vägen från bänk till säng. Celltransplantation. 2018, 27, 729–738. [CrossRef] [PubMed]

3. Farage, MA; Miller, KW; Elsner, P.; Maibach, HI Egenskaper hos den åldrande huden. Adv. Sårvård 2013, 2, 5–10. [CrossRef] [PubMed]

4. Farage, MA; Miller, KW; Maibach, HI (Eds.) Degenerativa förändringar i åldrande hud. I Textbook of Aging Skin; Springer: Berlin/Heidelberg, Tyskland, 2017; s. 15–30.

5. Vierkötter, A.; Krutmann, J. Miljöpåverkan på hudens åldrande och etniska specifika manifestationer. Dermatoendocrinology 2012, 4, 227–231. [CrossRef] [PubMed]

6. Shin, J.-W.; Kwon, S.-H.; Choi, J.-Y.; Na, J.-I.; Huh, C.-H.; Choi, H.-R.; Park, K.-C. Molekylära mekanismer för dermalt åldrande och antiaging-metoder. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 2126. [CrossRef]

7. Rinnerhaler, M.; Bischof, J.; Streubel, M.; Trost, A.; Richter, K. Oxidativ stress i åldrande mänsklig hud. Biomolecules 2015, 5, 545–589. [CrossRef]

8. Chatatikun, M.; Chiabchalard, A. Thailändska växter med höga antioxidantnivåer, fria radikaler rensande aktivitet, anti-tyrosinas och anti-kollagenas aktivitet. BMC komplement. Altern. Med. 2017, 17, 487. [CrossRef]

9. Lephart, ED Hudens åldrande och oxidativ stress: Equols anti-aging effekter via biokemiska och molekylära mekanismer. Åldrande Res. Upps. 2016, 31, 36–54. [CrossRef]

10. Peng, H.-Y.; Lin, C.-C.; Wang, H.-Y.; Shih, Y.; Chou, S.-T. Melanogenesförändringseffekterna av Achillea millefolium L. eterisk olja och linalylacetat: Involvering av oxidativ stress och JNK- och ERK-signalvägarna i melanomceller. PLoS ONE 2014, 9, e95186. [CrossRef]

11. Park, JH; Ku, HJ; Lee, JH; Park, J.-W. IDH2-brist påskyndar hudpigmentering hos möss genom att förstärka melanogenesen. Redox Biol. 2018, 17, 16–24. [CrossRef]

12. Jiratchayamaethasakul, C.; Ding, Y.; Hwang, O.; Im, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-W.; Lee, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Lee, S.-H. In vitro-screening av elastas, kollagenas, hyaluronidas och tyrosinashämmande och antioxidanta aktiviteter av 22 halofytväxtextrakt för nya kosmetika. Fisk. Aquat. Sci. 2020, 23, 6. [CrossRef]

13. Thring, TS; Hili, P.; Naughton, DP Anti-kollagenas, anti-elastas och antioxidantaktiviteter av extrakt från 21 växter. BMC komplement. Altern. Med. 2009, 9, 27. [CrossRef] [PubMed]

14. Bravo, K.; Alzate, F.; Osorio, E. Frukter av utvalda vilda och odlade andinska växter som källor till potentiella föreningar med antioxidant- och anti-aging-aktivitet. Ind. Crops Prod. 2016, 85, 341–352. [CrossRef]

15. Kunwar, RM; Shrestha, KP; Bussmann, RW Traditionell örtmedicin i Far-west Nepal: En farmakologisk bedömning. J. Etnobiol. Ethnomedicine 2010, 6, 35. [CrossRef] [PubMed]

16. Singh, G.; Passsari, AK; Leo, VV; Mishra, VK; Subbarayan, S.; Singh, BP; Kumar, B.; Kumar, S.; Gupta, VK; Lalhlenmawia, H. Utvärdering av fenolhaltsvariabilitet tillsammans med antioxidant-, antimikrobiella och cytotoxiska potentialen hos utvalda traditionella medicinalväxter från Indien. Främre. Plant Sci. 2016, 7, 407. [CrossRef]

17. Byun, N.-y.; Heo, M.-R.; Yim, S.-H. Korrelation av anti-rynk- och fria radikalers antioxidantaktiviteter hos Areca-nötter med fenol- och flavonoidinnehåll. Food Sci. Technol. 2021, 41, 1041–1049. [CrossRef]

18. Sellar, T.; Arulrajah, AA; Lanka, V. Socialt stöds roll vid jobbutbrändhet i klädföretaget. Int. Buss. Res. 2019, 12, 110–118. [CrossRef]

19. Vierkötter, A.; Schikowski, T.; Ranft, U.; Sugiri, D.; Matsui, M.; Krämer, U.; Krutmann, J. Exponering för luftburna partiklar och yttre åldrande av huden. J. Investig. Dermatol. 2010, 130, 2719–2726. [CrossRef]

20. Lee, A.-Y. Avvikelser i hudpigmentering och deras möjliga samband med hudens åldrande. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 3727. [CrossRef]

21. Popoola, OK; Marnewick, JL; Rautenbach, F.; Ameer, F.; Iwuoha, EI; Hussein, AA Hämning av oxidativ stress och hudens åldranderelaterade enzymer av prenylerade chalconer och andra flavonoider från Helichrysum teretifolium. Molecules 2015, 20, 7143–7155. [CrossRef]

22. Tu, Y.; Quan, T. Oxidativ stress och mänsklig huds åldrande av bindväv. Cosmetics 2016, 3, 28. [CrossRef]

23. Azmi, N.; Hashim, P.; Hashim, DM; Halimoon, N.; Majid, NMN Anti-elastas-, anti-tyrosinas- och matrixmetalloproteinas-1-hämmande aktivitet av daggmaskextrakt som potentiellt nytt anti-aging-medel. Asiatisk Pac. J. Trop. Biomed. 2014, 4, S348–S352. [CrossRef] [PubMed]

24. Rangsinth, P.; Sillapachaiyaporn, C.; Nilkhet, S.; Tencomnao, T.; Ung, AT; Chuchawankul, S. Svamphärledda bioaktiva föreningar fungerar potentiellt som hämmare av SARS-CoV-2 huvudproteas: An in silico approach. J. Tradit. Komplement. Med. 2021, 11, 158–172. [CrossRef] [PubMed]

25. Konan, NA; Bacchi, EM Antiulcerogen effekt och akut toxicitet av ett hydroetanolextrakt från cashewlöven (Anacardium occidentale L.). J. Etnopharmacol. 2007, 112, 237–242. [CrossRef] [PubMed]

26. Ajileye, O.; Obuotor, E.; Akinkunmi, E.; Aderogba, M. Isolering och karakterisering av antioxidanter och antimikrobiella föreningar från Anacardium occidentale L.(Anacardiaceae) bladextrakt. J. King Saud Univ. Sci. 2015, 27, 244–252. [CrossRef]

27. Chotphruethipong, L.; Benjakul, S.; Kijroongrojana, K. Optimering av extraktion av antioxidativa fenolföreningar från cashewblad (Anacardium occidentale L.) med hjälp av responsytmetodik. J. Food Biochem. 2017, 41, e12379. [CrossRef]

28. Moriyama, H.; Iizuka, T.; Nagai, M.; Miyazaki, H.; Satoh, T. Antiinflammatorisk aktivitet av värmebehandlat Cassia alata bladextrakt och dess flavonoidglykosid. Yakugaku Zasshi 2003, 123, 607–611. [CrossRef]

29. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Anti-melanogen effekt av Croton roxburghii och Croton-substratblad i -MSH-stimulerade B16F10-celler. J. Tradit. Komplement. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef]

30. Wang, R.; Pan, F.; Henne.; Kuang, F.; Wang, L.; Lin, X. Arecanut (Areca catechu L.) fröextrakt extraherat med konventionella och miljövänliga lösningsmedel: Förhållandet mellan fytokemiska sammansättningar och biologiska aktiviteter genom multivariat analys. J. Appl. Res. Med. Aromat. Plants 2021, 25, 100336. [CrossRef]

31. Nonaka, G.-i.; Hsu, F.-L.; Nishioka, I. Strukturer av dimera, trimera och tetramera procyanidiner från Areca catechu LJ Chem. Soc. Chem. Commun. 1981, 15, 781-783. [CrossRef]

32. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Anacardium Occidentale, L. Leaf Extracts Protect Against Glutamate/H2O2-Inducerad oxidativ toxicitet och inducerar neuritutväxt: Involvering av SIRT1/Nrf2-signalväg och Teneurin 4 Transmembrane Protein. Främre. Pharmacol. 2021, 12, 627738. [CrossRef] [PubMed]

33. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Glochidion zeylanicum bladextrakt uppvisar livslängdsförlängande och oxidativ stressbeständighetsegenskaper i Caenorhabditis elegans via DAF-16/FoxO och SKN-1/Nrf-2 signalvägar. Phytomedicine 2019, 64, 153061. [CrossRef] [PubMed]

34. Oladeji, OS; Adelowo, FE; Oluyori, AP; Bankole, DT Etnobotanisk beskrivning och biologiska aktiviteter av Senna alata. Evid. Baserat komplement. Alternativ. Med. 2020, 2020, 2580259. [CrossRef] [PubMed]

35. Peng, W.; Liu, Y.-J.; Wu, N.; Sun, T.; Han, X.-Y.; Gao, Y.-X.; Wu, C.-J. Areca catechu L.(Arecaceae): En genomgång av dess traditionella användningsområden, botanik, fytokemi, farmakologi och toxikologi. J. Etnopharmacol. 2015, 164, 340–356. [CrossRef]

36. Salehi, B.; Konovalov, DA; Fru, P.; Kapewangolo, P.; Peron, G.; Ksenija, MS; Cardoso, SM; Pereira, OR; Nigam, M.; Nicola, S. Areca catechu—Från gård till mat och biomedicinska tillämpningar. Phytother. Res. 2020, 34, 2140–2158. [CrossRef]

37. Verma, DK; Bharat, M.; Nayak, D.; Shanbhag, T.; Shanbhag, V.; Rajput, RS Areca catechu: Effekt av aktuellt etanolextrakt på läkning av brännsår hos albinoråttor. Int. J. Pharmacol. Clin. Sci. 2012, 1, 74–78.

38. Pithayanukul, P.; Nithitanakool, S.; Bavovada, R. Hepatoskyddande potential av extrakt från frön av Areca catechu och nötgall från Quercus infectoria. Molecules 2009, 14, 4987–5000. [CrossRef]

39. Salehi, B.; Gültekin-Özgüven, M.; Kirkin, C.; Özçelik, B.; Morais-Braga, MFB; Carneiro, JNP; Bezerra, CF; Silva, TGd; Coutinho, HDM; Amina, B. Antioxidant-, antimikrobiella och anticancereffekter av anakardiumväxter: ett etnofarmakologiskt perspektiv. Främre. Endokrinol. 2020, 11, 295. [CrossRef]

40. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Neuroskyddande effekter av Glochidion zeylanicum bladextrakt mot H2O2/Glutamat-inducerad toxicitet i odlade neuronala celler och A-inducerad toxicitet i Caenorhabditis elegans. Biology 2021, 10, 800. [CrossRef]

41. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Livslängdsförlängande och oxidativ stressbeständighet hos bladextrakt från Anacardium occidentale L. i Caenorhabditis elegans. Oxid. Med. Cell. Longev. 2019, 2019, 9012396. [CrossRef]

42. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Data om effekterna av Glochidion zeylanicum bladextrakt i Caenorhabditis elegans. Data Brief 2019, 26, 104461. [CrossRef] [PubMed]

43. Sugumar, M.; Doss, DVA; Maddisetty, PP Hepato-njurskyddande effekter av hydroetanolextrakt av Senna alata på enzymatiska och icke-enzymatiska antioxidantsystem hos streptozotocin-inducerade diabetiska råttor. Integr. Med. Res. 2016, 5, 276–283. [CrossRef] [PubMed]

44. Aryal, S.; Baniya, MK; Danekhu, K.; Kunwar, P.; Gurung, R.; Koirala, N. Totalt fenolinnehåll, flavonoidinnehåll och antioxidantpotential hos vilda grönsaker från västra Nepal. Plants 2019, 8, 96. [CrossRef] [PubMed]

45. Panche, A.; Diwan, A.; Chandra, S. Flavonoider: En översikt. J. Nutr. Sci. 2016, 5, e47. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Tazeddinova, D.; Rahman, M.; Hamdan, SB; Matin, MM; Bin Bakri, MK; Rahman, MM Växtbaserade polyfenolföreningar med protein: en prospektiv översyn. BioResources 2022, 17, 1–25. [CrossRef]

47. Prasansuklab, A.; Tencomnao, T. Acanthus ebracteate bladextrakt ger neuronala cellskydd mot oxidativ stress skada inducerad av glutamat. BMC komplement. Altern. Med. 2018, 18, 278. [CrossRef]

48. Abhijit, S.; Manjushree, D. Anti-hyaluronidas, anti-elastasaktiviteten hos Garcinia indica. Int. J. Bot. 2010, 6, 299–303.

49. Widowati, W.; Rani, AP; Hamzah, RA; Arumwardana, S.; Afifah, E.; Kusuma, HSW; Rihibiha, DD; Nufus, H.; Amalia, A. Antioxidant- och antiaging-analyser av Hibiscus sabdariffa-extrakt och dess föreningar. Nat. Driva. Sci. 2017, 23, 192–200. [CrossRef]

50. Fernand, VE; Dinh, DT; Washington, SJ; Fakayode, SO; Losso, JN; van Ravenswaay, RO; Warner, IM Bestämning av farmakologiskt aktiva föreningar i rotextrakt av Cassia alata L. med hjälp av högpresterande vätskekromatografi. Talanta 2008, 74, 896–902. [CrossRef]

51. Jain, V.; Garg, A.; Parascandola, M.; Chaturvedi, P.; Khariwala, SS; Stepanov, I. Analys av alkaloider i produkter innehållande arekanötter genom vätskekromatografi – tandemmasspektrometri. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 1977–1983. [CrossRef]

52. Liu, A.; Xu, L.; Zou, Z.; Yang, S. Studier av kemiska beståndsdelar från blad av Cassia alata. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2009, 34, 861–863. [PubMed]

53. Ming-Yue, W.; Jin-Hui, L.; Jian-Guo, L. Bestämning av polyfenoler i Areca catechu med HPLC. Nat. Driva. Res. Dev. 2011, 23, 101.

54. Mohammed, AR; Ali, A.; Aboul-Enein, S.; Mohamed, F.; Abou, E.; Magdy, M.; Mohammed, A. Fytokemisk, cytotoxicitet och antioxidantundersökning av Cassia alata-blad som växer i Egypten. J. Innov. Pharm. Biol. Sci 2017, 4, 97–105.

55. Okpuzor, J.; Ogbunugafor, H.; Kareem, G.; Igwo-Ezikpe, M. In vitro-undersökning av antioxidantfenolföreningar i extrakt av Senna alata. Res. J. Phytochem. 2009, 3, 68–76. [CrossRef]

56. Pongnimitprasert, N.; Wadchien, K.; Chinpaisal, C.; Satiraphan, M.; Wetwitayaklung, P. Antiinflammatoriska effekter av rhein och råextrakt från Cassia alata L. i HaCaT-celler. Sci. Eng. Health Stud. 2018, 12, 19–32.

57. Promgool, T.; Pancharoen, O.; Deachathai, S. Antibakteriella och antioxidativa föreningar från Cassia alata Linn. Songklanakarin J. Sci. Technol. 2014, 36, 459–463.

58. Singh, B.; Nadkarni, JR; Vishwakarma, RA; Bharate, SB; Nivsarkar, M.; Anandjiwala, S. Det hydroalkoholiska extraktet av Cassia alata (Linn.) blad och dess huvudförening rhein uppvisar antiallergisk aktivitet via mastcellstabilisering och lipoxygenashämning. J. Etnopharmacol. 2012, 141, 469–473. [CrossRef]

59. Wu, Q.; Yang, Y.; Simon, JE Kvalitativ och kvantitativ HPLC/MS-bestämning av proantocyanidiner i arecanöt (Areca catechu). Chem. Biodiverser. 2007, 4, 2817–2826. [CrossRef]

60. Zhang, W.-M.; Huang, W.-Y.; Chen, W.-X.; Han, L.; Zhang, H.-D. Optimering av extraktionsförhållanden för arecafröpolyfenoler och utvärdering av deras antioxidantaktiviteter. Molecules 2014, 19, 16416–16427. [CrossRef]

61. Zhang, X.; Mei, W.; Zeng, Y.; Liu, J. Fenoliska beståndsdelar från frukterna av Areca catechu och deras antibakteriella aktiviteter. J. Trop. Subtrop. Bot. 2009, 17, 74–76.

62. Tamada, T.; Kinoshita, T.; Kurihara, K.; Adachi, M.; Ohhara, T.; Imai, K.; Kuroki, R.; Tada, T. Kombinerad neutron- och röntgenanalys med hög upplösning av hämmat elastas bekräftar oxyanjonhålet på det aktiva stället men reglerar mot en lågbarriärvätebindning. J. Am. Chem. Soc. 2009, 131, 11033–11040. [CrossRef] [PubMed]

63. Ismaya, WT; Rozeboom, HJ; Weijn, A.; Mes, JJ; Fusetti, F.; Wichers, HJ; Dijkstra, BW Kristallstruktur av Agaricus bisporus svamptyrosinas: Identiteten för tetramersubenheterna och interaktion med tropolon. Biochemistry 2011, 50, 5477–5486. [CrossRef] [PubMed]

Ansvarsfriskrivning/Utgivarens anmärkning:Uttalandena, åsikterna och data som finns i alla publikationer är endast de av enskilda författare och bidragsgivare och inte från MDPI och/eller redaktörerna. MDPI och/eller redaktören/redaktörerna frånsäger sig ansvar för eventuella skador på personer eller egendom till följd av idéer, metoder, instruktioner eller produkter som hänvisas till i innehållet.

【För mer information:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】