Bestämning av totalt saponinerinnehåll i Boschniakia Rossica och Herba Cistanches genom spektrofotometri Ⅰ

Abstrakt:

Mål Denna kvantitativa metod är fastställd av totala saponiner i Boschniakia rossica ochHerba cistanchesoch innehållet itotala saponiner bestäms． Metoder Salidroside valdes som referensämne, färgreaktion användes med vanillin och perklorsyra. Därefter bestämdes innehållet av totala saponiner i Boschniakia rossica och Herba cistanches vid 523nm med spektrofotometri. Ｒresultat Salidrosidkurvan var linjär över intervallet 0. 05133 - 0． 2567mg·ml－ 1med korrelationen av 0． 9992, och den linjära regressionsekvationen var Y=1． 611X + 0． 0573． För Boschniakia rossica var den genomsnittliga återvinningen av salidrosid 99. 68 % med ＲSD på 1． 68 % (n=6); och för Herba-avstånd var den genomsnittliga återvinningen av salidrosid 101. 18 % med ett ＲSD på 0． 94 % (n=6)． Slutsats Metoden är korrekt, enkel och pålitlig. Så det kan användas för att bestämma innehållet av totala saponiner i Boschniakia rossica och Herba cistanches.

Nyckelord:Boschniakia rossica;Herba cistanches; Totala saponiner; Bestämning; Spektrofotometri; Salidroside

HUR LÅNGE TAR DET FÖR CISTANCHE ATT ARBETA?

Cistanche deserticola Y. C. Ma och Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov är parasitiska medicinalväxter som tillhör familjen Orobanchiaceae. Cistanche deserticola är en parasitisk växt som lever på rötterna av Haloxylon ammodendron, ett ökenträd. Den tillverkas huvudsakligen i Xinjiang och Alxa League, Inre Mongoliet. Den är känd som "ökenginseng" på grund av dess låga avkastning och höga medicinska värde. Gräshoppa [1] tillverkas i nordöstra delen av mitt land [2]. Enligt folklore har den effekten av odödlighet, så den heter det nordöstra "Eternal Age Grass". Det används för impotens på grund av njurbrist, förkylningsvärk i midja och knän, torrhet i tarmarna och förstoppning. Det kan ge näring till och stärka kroppen, fördröja åldrandet och är en autentisk medicinsk resurs i nordöstra delen av landet [3]. De två har liknande effekter, och båda har effekterna att tonifiera njurarna, stärka yang, fukta tarmarna och laxermedel [4]. Enligt uppgifterna om Cistanche deserticola i Li Shizhens "Compendium of Materia Medica" från Mingdynastin, "Det här ämnet är styrkande men inte hårt, så det kallas lugnt. Det är sällsynt att få det från Congrong, så det är fyllt med Cistanche deserticola." Det vill säga, Cistanche deserticola användes en gång som ett alternativt medicinskt material till Cistanche deserticola. , Modern forskning har visat att både Cistanche deserticola och Estuary deserticola har farmakologiska effekter såsom anti-aging [5, 6], anti-fatigue [7, 8], förbättrar immunförsvaret [9, 10] och förbättrar minnet [{{ 12}}].

Innehållet av totalglykosider i Grasshopper och Cistanche deserticola har värdet av en fördjupad studie. Båda innehåller saponiner, flyktiga oljor, sockerarter, aminosyror och andra komponenter. Forskare har rapporterat jämförande studier på komponenterna i flyktiga oljor, sockerarter, aminosyror och andra komponenter av de två [4, 14, 15], men bestämning av den totala glykosidhalten i de två. Det har inte funnits några rapporter i litteraturen . Huvudkomponenterna i Cistanche deserticola är fenylpropanoidglykosider (serier av glukosider A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], och Cistanche deserticola är fenyletanoidglykosider (serier av Cistanche deserticola) )[17,18], saponinerna hos de två är lika, och de delar en liknande komponent, salidrosid. Vi tror att glykosider är viktiga aktiva ingredienser i båda, och vi utforskar användningen av spektrofotometri för att bestämma innehållet av totala glykosider. , för att ge en teoretisk grund för vidareutveckling och användning av Echinacea deserticola och Cistanche deserticola resurser.

1 Material och instrument

1. 1 Material och reagens: Amaranth officinale, samlad från runt Changbai Mountain, identifierad som en växt av familjen Orobanaceae

Den torkade hela växten av Orobanche coerulescens, tvätta provet och dränera vattnet

Separera, placera i en torklåda med konstant temperatur vid 40 grader, torka till konstant vikt, krossa, passera genom en 40 mesh sikt och förbered

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., identifierad som listad

Cistanche deserticola Y. C. Ma's torkade kött

Stjälkar, tvättade, lufttorkade, torkade till konstant vikt, krossade, passerade genom en 40-nätsikt, ställ åt sidan; röd

Crassuside referenssubstans (tillhandahålls av China Institute of Pharmaceutical and Biological Products, batchnummer 110818

- 200404, för innehållsbestämning); alla experimentella reagenser som används är av inhemsk analytisk kvalitet.

1. 2 Instrument 752N UV-synlig spektrofotometer (Shanghai Jingke); Tu-1901 par

Beam UV-spektrofotometer (Beijing Puxi General Co., Ltd.); elektronisk analytisk balans

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Höghastighets universalkross (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 metoder

2. 1 Beredning av referenslösning

Använd en analytisk våg för att noggrant väga salidroside 15. 40mg, lös upp i metanol och överför till en 25-mätkolv och justera volymen till markeringen. Förbered att innehålla 0,0 % salidrosid per ml. 616 mg-lösningen används som referenslösning och försluts i kylskåpet för senare användning.

2. 2 Beredning av testlösning

Använd en analytisk våg för att exakt väga de medicinska pulvren från Grasshopper och Cistanche deserticola. 2. 0g, placera den i en rundbottnad kolv, tillsätt 40 ml 90 % etanol, värme- och återflödesextraktion av Grasshopper en gång, och värm och återloppskoka Cistanche deserticola två gånger, varje extraktionstid är 1,5 timmar, efter sugfiltrering, kombinera filtratet, koncentrera till torrhet i ett vattenbad, tillsätt 25 ml vatten för att lösas upp, extrahera 3 gånger med petroleumeter, 25 ml varje gång, kassera petroleumetervätskan i det övre skiktet och fortsätt sedan att extrahera 3 gånger med vattenmättad n-butanol. 25 ml varje gång, kombinera tre n-butanolextrakt, indunsta n-butanolvätskan i ett vattenbad i ett dragskåp, späd den med metanol i en 10 ml mätkolv, blanda väl, mät sedan noggrant 1 ml av lösningen och späd den med metanol till 25 ml volym. flaska, blanda väl och använd den som en testlösning för senare användning.

2. 3. Val av mätvåglängd

kommer 1. Placera 25 ml av referenslösningen och testlösningen i graderade provrör med proppar, indunsta metanollösningsmedlet i ett vattenbad med konstant temperatur vid 60 grader och tillsätt 0. 2 ml 5% vanillin-isättikalösning och 0,8 ml perklorsyralösning reagerades i ett 60 graders vattenbad under 15 min. Ta ut provröret och kyl det omedelbart med isvatten i 5 min. Tillsätt 5 ml isättika och skaka väl [20]. Bered referenslösningen med metanol på samma sätt. Lösningen efter färgutveckling utsattes för våglängdsscanning och den maximala absorptionsvåglängden på 523 nm efter färgreaktionen av salidrosid valdes mellan 400 och 800 nm som mätvåglängden för totala glykosider av Escherichia coli och Cistanche deserticola. Skanningsmönstren för kontrollämnet och testämnet visas i figur 1.

2. 4. Undersökning av linjärt samband: Använd en pipett för att exakt rita referenslösningen 0. 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2． 5 ml placerades i provrör med propp numrerade 1 till 5, och färgreaktionen utfördes enligt stegen i "2. 3". Ett blankexperiment utfördes med metanol under parallella förhållanden och absorbansen mättes vid en våglängd av 523 nm. Absorbansen A (Y ) är ordinatan, koncentration mg·ml-1

(X) är abskissan, linjär regression utförs och regressionsekvationen är Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), visar resultatet att masskoncentrationen av salidrosid är 0. Det linjära sambandet är bra inom intervallet 05133-0.2567mg·ml-1. Resultaten visas i figur 2.

2. 5 Stabilitetstest

Mät noggrant upp en lämplig mängd av testlösningen av Grasshopper och Cistanche deserticola, framkalla färgen enligt metoden under "2.3" och mät absorbansvärdet jämnt 6 gånger inom 30 minuter. Detta visar att inom 30 minuter efter färgutvecklingen kommer Grasshopper och Cistanche deserticola. Testlösningens stabilitet är relativt god. Resultaten visas i tabell 1.

2. 6 Precisionstest

Mät noggrant en lämplig mängd av referenslösningen, framkalla färgen enligt metoden under "2.3" ovan och mät absorbansen 6 gånger kontinuerligt. Resultaten visas i tabell 2. Resultaten visar att precisionen hos detta experimentella instrument är god.

Figur 1 Tunnskiktsskanningsmönster av salidrosidreferenssubstans (A), gräshoppatestlösning (B) och cistanche deserticola testlösning (C)

2. 7. Repeterbarhetstest.

Väg exakt 6 portioner gräshoppa och cistanche deserticola-pulver, varje portion innehåller 2, 0g, efter uppvärmning och återflödesextraktion med den optimala extraktionsprocessen som har bestämts, följ stegen under "2. 3" och mät absorbans vid en våglängd av 523nm. Mätresultaten visas i tabell 3 och tabell 4.

2. 8. Provåtervinningshastighetstest.

Väg noggrant 6 prover av Grasshopper och Cistanche deserticola med känd viktprocent av totala glykosider. Varje prov är 12 mg. Tillsätt noggrant 2 ml salidrosidreferenslösning. Följ "2. 2" Extrahera provet under objektet, bestäm det totala glykosidinnehållet efter färgutveckling enligt punkten "2.3", och beräkna återvinningsgraden för provet. Resultaten visas i tabell 5 och tabell 6.