Utforska effekterna av Cistanche-fenyletanoidglykosider på icke-alkoholisk fettleversjukdom baserat på nätverksfarmakologi och cellulära experiment

Abstrakt

Mål: För att undersöka de förbättrande effekterna av Cistanche-fenyletanoidglykosider på icke-alkoholisk fettleversjukdom (NAFLD).

Metoder: Nätverksfarmakologi användes för att förutsäga de potentiella mekanismerna för Cistanche fenyletanoidglykosider mot NAFLD. En NAFLD-modell in vitro etablerades genom att inducera HepG2-celler med fria fettsyror (FFA). Cellviabiliteten utvärderades med CCK-8-analysen; Oljeröd O-färgning användes för att observera lipidackumulering; triglycerid (TG) och total kolesterol (TC) nivåer mättes med användning av analyskit; JC-1-färgning användes för att bedöma mitokondriell membranpotential; intracellulära ROS-nivåer utvärderades med DCFH-DA fluorescerande sond; apoptos detekterades med användning av Hoechst 33342-färgning; och uttrycket av TNF-, PI3K-, Akt- och Bax-proteiner mättes med Western blot.

Resultat: Tio aktiva föreningar och 77 potentiella mål relaterade till anti-NAFLD-effekter identifierades, med kärnmål inklusive TNF, NFKB1 och TLR4. Föreningarna visade god bindningsaffinitet med målen, speciellt TNF. Jämfört med modellgruppen reducerade Cistanche-fenyletanoidglykosider signifikant FFA-inducerad lipidackumulering i HepG2-celler (P < 0,01), minskade intracellulära TG-, TC- och ROS-nivåer (P < 0,01), återställd mitokondriell membranpotential, lindrad mitokondriell membranpotential, minskad mitokondriell proteinuttryck (P

Slutsats: Cistanche-fenyletanoidglykosider utövar anti-NAFLD-effekter genom att förbättra FFA-inducerad lipidackumulering, mitokondriell dysfunktion, oxidativ stress och apoptos i HepG2-celler. Dessa effekter kan vara associerade med TNF/PI3K/Akt-signaleringsvägen.

Nyckelord: Cistanche fenyletanoidglykosider; icke-alkoholisk fettleversjukdom (NAFLD); lipidmetabolism; oxidativ stress;apoptos; TNF/PI3K/Akt signalväg; nätverksfarmakologi; cellexperiment

Cistanche Benefits in depression

Cistanche fenyletanoidglykosider

catalog cistanche

Höghalt Cistanche-extrakt till salu

Kontakta oss köp nu

1. Introduktion

Icke-alkoholisk fettleversjukdom (NAFLD) är en kronisk leversjukdom som kännetecknas av leversteatos utan överdriven alkoholkonsumtion. Prevalensen i Kina har nått 32,9%. Dess patogenes involverar flera mekanismer, inklusive insulinresistens, oxidativ stress och obalans i tarmmikrobiota. Kliniska symtom inkluderar trötthet, obehag i leverområdet och buksmärtor, och i svåra fall kan det utvecklas till alkoholfri steatohepatit (NASH).

För närvarande är livsstilsinterventioner den primära behandlingen för NAFLD. Även om FDA godkände det första läkemedlet för NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), 2024, har det potentiella negativa effekter som leverskada och kardiovaskulära risker. Därför finns det ett akut behov av att hitta säkra och effektiva behandlingar för NAFLD.

Echinacoside in cistanche 7

Traditionell kinesisk medicin (TCM), med dess egenskaper av flera komponenter, flera mål och flera vägar, överensstämmer väl med den komplexa patogenesen av NAFLD och erbjuder unika fördelar i behandlingen.

Cistanche deserticolaochCistanche tubulosaär medicinalväxter från familjen Orobanchaceae, listade iShennong Bencao Jing. Deras köttiga stjälkar, rika på fjäll, används traditionellt för att tonifiera levern och njurarna, fylla på essens och blod och fukta tarmarna. De primära aktiva komponenterna - fenyletanoidglykosider - har antiinflammatoriska, lipidsänkande och leverskyddande egenskaper. Systematiska studier av deras effekter mot NAFLD saknas dock fortfarande.

Denna studie syftar till att analysera den farmakologiska grunden och potentiella mekanismerna för Cistanche fenyletanoidglykosider vid behandling av NAFLD med hjälp av nätverksfarmakologi, och att ytterligare utforska deras mekanismer genom cellulära experiment, vilket ger en teoretisk grund för utvecklingen av nya läkemedel.

Echinacoside in cistanche 11

2. Material

2.1 Nätverksfarmakologiverktyg

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatik: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB PDB: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 Celllinje

HepG2 humana levercancerceller, köpta från Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reagens och läkemedel

Cistanche-fenyletanoidglykosider (batchnr. 201610, renhet större än eller lika med 80 %, innehållande 44,5 % echinakosid och 16,1 % verbaskosid), köpta från Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Stamlösning beredd vid 6,40 mg/ml, filtrerad vid –20 mg/ml.

Ytterligare reagens inkluderar:

Fetalt bovint serum (FBS), DMEM-medium, penicillin-streptomycin, Oil Red O-färgningskit, BCA-kit, ROS-detektionskit, Hoechst 33342, BSA-V, natriumoleat, natriumpalmitat, TG- och TC-analyssatser, CCK-8-analys för mitochondrial-antikroppar, NF-membran, JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -aktin och sekundära HRP-konjugerade antikroppar.