Neuroprotektiva effekter av fyra fenyletanoidglykosider på H2O2-inducerad apoptos på PC12-celler via Nrf2/ARE-vägen
Mar 04, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com
Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao och Baiyi Lu 1,*
1. Introduktion
Oxidativ stress, som är en obalans i antioxidanthomeostas, inducerar lipidperoxidation, skador på protein och DNA, cellåldring och celldöd. Denna process bidrar sannolikt till flera neurodegenerativa störningar, såsom Alzheimers sjukdom (AD), Parkinsons sjukdom (PD) och ischemi/reperfusion [1]. Väteperoxid (H2O2), som är en av de huvudsakliga reaktiva syrearterna (ROS), är känd för att orsaka lipidperoxidation och DNA-skador [2]. Dessutom är H2O2 en endogen källa till fria hydroxylradikaler som bidrar till bakgrundsnivån av cellulär oxidativ stress [3,4]. Därför kan terapeutiska strategier för att förhindra oxidativ stress-inducerad apoptos ha potential vid behandling av neurodegenerativa sjukdomar.
Nukleär faktor erytroid 2-relaterad faktor 2 (Nrf2), är en transkriptionsfaktor som är starkt associerad med oxidativ stress. Aktivering av Nrf2 inducerar transkriptionen av många antioxidant- och avgiftningsgener, inklusive hemoxygenas-1 (HO-1), NAD(P)H kinonoxidoreduktas 1, antiinflammatorisk [13] och immunmodulerande [14] ] bioaktiviteter. Osmanthusfragrans är en vanlig ingrediens i flera asiatiska livsmedel och har länge konsumerats. Vi har tidigare visat att O.fragrans blomextrakt förbättrade rumslig inlärning och minne, hämmade oxidativ skada och uppvisade neuroprotektiva aktiviteter i d-galaktos-inducerat åldrande i en ICR-musmodell [15]. Salidrosid, acteosid och isoacteosid är de huvudsakliga PhG-svaren för antioxidantaktiviteten hos O.fragrans blomextrakt [16].
Studier av den neuroprotektiva effekten av PhG har gett önskvärda resultat. Salidrosid reducerade signifikant cellapoptos av PC12-celler som exponerades i MPP plus [17,18]. Acteosid lindrade också MPP plus-inducerad apoptos och oxidativ stress i PC12-celler [19] och Ap25-35-inducerad SH-SY5Y-cellskada [20]. Echinakosid undersöktes på tumörnekrosfaktor-a (TNFa)-inducerad apoptos i SH-SY5Y-celler [21], MPTP-inducerad dopaminerg toxicitet i möss [22], glutamatskadade primära kulturer av råttkortikala celler [23], och { {19}}OHDA-inducerad skada i PC12-celler [24]. Resultaten indikerade att PhGs uppvisade en cytoprotektiv effekt och är potentiella medel för att behandla neurodegenerativa sjukdomar. Studier har visat att PhGs antioxidantegenskaper ligger bakom många andra bioaktiviteter för dessa föreningar [25]. Men få studier har undersökt den molekylära mekanismen för PhGs mot oxidativ toxicitet.
I vår studie valde vi fyra typiska PhGs enligt följande: salidrosid (fenyletanoida monosackarider), acteosid (fenyletanoida disackarider), isoacteosid (fenyletanoida disackarider) och echinakosid (fenyletanoida trisackarider). Vi använde en modell för neuronal död med differentierade PC12-celler [26] för att undersöka den skyddande effekten och molekylära mekanismen för PhG på den H2O2--inducerade PC12-cellmodellen. Vi visade att PhG aktiverade Nrf2/ARE-vägen genom att binda till Kelch-liknande ECH-associerat protein 1 (Keap1). Denna process uppreglerade antioxidantenzymerna och ökade motståndet hos PC12-celler mot oxidativ stress.
Behandling av neurodegenerativa störningar:PhG från cistanche
2. Resultat
2.1. PhGs undertryckt H2O2-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler
Cytotoxiska effekter av H2O2 och PhGs (0.1,1,5 och 10 卩g/mL) på PC12-celler testades. Resultaten visade att H2O2 inducerade förlust av PC12-cellviabilitet på koncentrationsberoende och tidsberoende sätt (Figur 1A). Exponering av PC12-celler för 200 H2O2 under 2 timmar resulterade i cellviabilitet på 57,4 procent. Förbehandling av celler med PhG vid 0.1,1, 5 och 10 昭/ml hade ingen effekt på cellviabiliteten (Figur 1B) och markant skyddade PC12-celler från H2O2-inducerade skador genom att förbättra cellviabilitet som 9.549-22.141 procent , 12.092-25.289 procent , 1.470-9.289 procent respektive 3.411-11.441 procent ( Figur IC). Förbehandling med salidrosid (0,1 ^g/ml), isoakteosid (0,1, 1, 5 och 10 ^g/ml), echinakosid (0,1,1 och 5 ^g/mL) visade dock ingen signifikant skillnad på HzOz-inducerade celler skada. Förbehandling av celler med PhG förbättrade också den morfologiska egenskapen inducerad av H2O2 (Figur 1D).
Figur 1.PhGs undertryckte H2O2-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler. Cellviabilitet detekterades med MTT-analys. Cytotoxisk effekt av H2O2 (A) och PhGs (B) vid olika koncentrationer på PC12-celler. (C) PhG-försvagat H2O2-inducerad minskning av cellviabilitet. PC12-celler inkuberades med PhGs (0.1 och 10 mg/ml) i 24 timmar och inkuberades sedan med 200 pM H2O2 i ytterligare 2 h efter att PhG togs bort. (D) Morfologisk observation. Celler efter behandling observerades med ett faskontrastmikroskop (x100), CK: normal grupp, H2O2: H2O2-behandlad grupp, HL: salidrosid lågdosbehandlad grupp, HH: salidrosid högdosbehandlad grupp, ML: acteosid lågdosbehandlad grupp, MH: högdos behandlad grupp med akteosid, IL: grupp behandlad med låg dos med isoakteosid, IH: grupp behandlad med hög dos med isoakteosid, SL: grupp behandlad med låg dos med echinakosid, SH: grupp behandlad med hög dos med echinakosid. ** p < 0,01="" mot="" obehandlad="" grupp;="" #="" p="">< 0,05,="" mot="" h2o2-behandlad="" grupp;="" ##="" p="">< 0,01,="" mot="" h2o2-behandlad="">
2.2. PhGs undertryckt H2O2-inducerad intracellulär ackumulering av ROS, lipidperoxidation (MDA) och ökad superoxiddismutas (SOD)-aktiviteter i PC12-celler
Exponering av PC12-celler för 200 pM H2O2 under 2 timmar ökade ROS-nivåer, MDA-innehåll och minskade SOD-aktivitet (Figur 2). PhGs förbehandling dämpade ROS-nivån, salidrosid och acteosid, och den höga dosen av isoacteosid och echinacosid förbehandling försvagade signifikant ROS-nivån (p < 0,01).="" salidrosidförbehandling="" visade="" ingen="" effekt="" på="" mda-innehåll,="" men="" akteosidförbehandling="" försvagade="" mda-halten="" signifikant="" (p="">< 0,05).="" isoacteosid="" och="" echinacosid="" förbehandling="" dämpade="" signifikant="" mda-halten="" till="" en="">
Figur 2.PhG blockerade ROS- och MDA-ackumulering och ökade aktiviteterna av SOD i PC12-celler. PC12-celler inkuberades med PhGs (0.1 och 10 4g/mL) i 24 timmar och inkuberades sedan med 200 |^M H2O2 för ytterligare en 2 timmar efter att PhG togs bort. (A) PhG blockerade ROS- och MDA-ackumulering. (B) PhG blockerade MDA-ackumulering. (C) PhGs ökade SODs aktiviteter. CK: normal grupp, Modell: H2O2-behandlad grupp, Salidrosid: salidrosidbehandlad grupp, Acteosid: akteosidbehandlad grupp, Isoakteosid: isoakteosidbehandlad grupp, Echinakosid: echinakosidbehandlad grupp. ** p < 0.01="" kontra="" obehandlad="" grupp;="" #="" p="">< 0,05,="" mot="" h2o2-behandlad="" grupp,="" ##="" p="">< 0,01,="" mot="" h2o2-behandlad="">
2.3.PhGs omvänd H2O2-inducerad apoptos i PC12-celler
H2O2-behandling (200 |1M) under 2 timmar ökade signifikant apoptos i PC12-celler, med en total apoptotisk hastighet på upp till 16,02 procent (Figur 3). Men förbehandling med PhGs (0,1 och 10 µg/ml) under 24 timmar minskade apoptoshastigheten på ett koncentrationsberoende sätt (p < 0,01).="" salidrosid,="" acteosid,="" isoacteosid="" och="" echinacosid="" minskade="" markant="" procentandelen="" cellapoptos="" med="" 4.750-6.627="" procent="" ,="" 4.413-5.800="" procent="" ,="" 6.593-10.047="" procent="" ,="" och="" 1.530-7.510="" procent="">
Figur 3. PhG reverserade H2O2-inducerad apoptos i PC12-celler. PC12-celler inkuberades med PhGs (0.1 och 10 卩g/ml) i 24 timmar och inkuberades sedan med 200 pM H2O2 i ytterligare 2 timmar efter PhG togs bort. Därefter mättes apoptos med flödescytometri med användning av en PI/FITC-fluorescerande sond. CK: normal grupp, Modell: H2O2-behandlad grupp, Salidrosid: salidrosidbehandlad grupp, Acteosid: akteosidbehandlad grupp, Isoakteosid: isoakteosidbehandlad grupp, Echinakosid: echinakosidbehandlad grupp. ** p < 0,01="" mot="" obehandlad="" grupp;="" ##="" p="">< 0,01,="" mot="" h2o2-behandlad="">
2.4. PhGs Reversed H2O2-Inducerad nedreglering av proteinuttryck av HO-1, NQO1, GCLC och GCLM
HO{{0}}, NQO1 och glutamat-cysteinligas (GCL) är viktiga cellulära antioxidantenzymer, och HO-1, NQO1 och katalytiska eller modifierade underenheter av GCL (GCLC eller GCLM) är Nrf2-reglerade nedströmsgener [27]. Proteinuttryck av HO-1, NQO1, GCLC och GCLM observerades efter behandling. En uppenbar skillnad hittades mellan proteinuttrycket av HO-1 och NQO1 med eller utan H2O2 (Figur 6A-C) (p < 0.01).="" phgs="" (0.1="" och="" 10="" p^g/ml)="" vände="" den="" h2o2-inducerade="" nedregleringen="" av="" proteinuttryck="" av="" ho-1="" (förutom="" salidrosid="" vid="" {{32}="" }.1="" pg/ml),="" nqo1="" (förutom="" akteosid="" vid="" 0.1="" pg/ml)="" (p="">< {{40}}.01).="" h2o2="" nedreglerade="" också="" gclc-="" och="" gclm-proteinuttryck="" (p="">< 0.05)="" (figur="" 6a,d,e).="" phg="" (0.1="" och="" 10="" pg/ml)="" omvänd="" h2o2-inducerad="" nedreglering="" av="" proteinuttryck="" av="" gclc="" (förutom="" echinacoside="" vid="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01)="" och="" gclm="" (förutom="" salidrosid="" vid="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01).="" sedan="" användes="" de="" kemiska="" hämmarna="" för="" ho-1="" för="" att="" ytterligare="" utvärdera="" antioxidantenzymernas="" roller="" för="" att="" reglera="" skyddet="" av="" phg="" mot="" h2o2-inducerad="" cytotoxicitet.="" phgs="" (0,1="" och="" 10="" pg/ml)="" förhindrade="" h2o2-inducerad="" cytotoxicitet,="" men="" sådan="" skyddande="" effekt="" vändes="" av="" ho-1-hämmaren="" znpp="" (p="">< 0,01)="" vid="" 20="" pm="" (figur="" 6f,="" p="">< 0,01)="">
2.5. Keap1 uttryck och molekylär dockningsanalys
Under fysiologiska förhållanden fungerar Keap1 som ett repressorprotein för Nrf2 genom att binda till Neh2-domänen av Nrf2 och rikta Nrf2 till ett Cul3-baserat E3 ubiquitinligas för ubiquitination och efterföljande nedbrytning av 26S-proteasomen [28]. Bindningskapaciteten till Keap1 av PhGs utvärderades genom molekylär dockningsanalys för att undersöka mekanismen under deras antioxidanteffekt.
Antioxidanteffekt: CistanchePhGs
3. Diskussion
Vi undersökte neuroskyddet av PhGs på H2O2-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler. Resultaten visar att PhGs-förbehandling signifikant undertryckte HzOz-inducerad cytotoxicitet, dämpade den intracellulära ROS-nivån, förbättrade nivån av intracellulära antioxidantenzymer och slutligen omvänd H2O2--inducerad cytotoxicitet i PC12-celler. Dessutom ökade PhGs den transkriptionella aktiveringen av Nrf2, reverserade den HzOz-inducerade nedregleringen av proteinuttrycket av HO-1, NQO1, GCLC och GCLM. Dessutom visade PhG potentiell interaktion med Nrf2-bindningsstället i Keap1-proteinet.
I H2O2-inducerad PC12-cellskada, ökade lipidperoxidation, som hänvisar till oxidativ nedbrytning av lipid, permeabiliteten av membran, vilket leder till cellskador [29]. MDA-bildning används ofta som index för lipidperoxidation [30]. H2O2 förbättrade ROS-produktionen och utmattade antioxidantförsvarsenzymer, såsom SOD, katalas och GPx. Denna process leder till oxidativ stress [31], som spelar en nyckelroll i orsaken till och utvecklingen av de flesta neurodegenerativa störningar. I enlighet med tidigare studier observerade vi en ökad nivå av ROS, minskade intracellulära antioxidantenzymer och förbättrad apoptos av PC12-celler efter H2O2-behandling. PhGs-förbehandling dämpade signifikant HzOz-inducerad ökning av intracellulär ROS, förbättrade intracellulära antioxidantenzymer och vände slutligen HzOz-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler.
Kuang et al. [32] rapporterade att echinakosid visade en signifikant neuroprotektiv effekt på H2O2-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler genom den mitokondriella apoptotiska vägen. I den här studien fann vi att echinakosid, salidrosid, acteosid och isoacteosid visade neuroprotektiva effekter genom att förbättra antioxidantaktiviteten hos PC12-celler eftersom de ökade den transkriptionella aktiveringen av Nrf2 och uppreglerade nedströms proteinuttrycket av HO-1, NQO1, GCLC och GCLM. Många studier har tydligt visat att aktivering av Nrf2-målgener, särskilt HO-1, i astrocyter och neuroner starkt skyddar mot inflammation, oxidativ skada och celldöd. HO-1-systemet har rapporterats vara mycket aktivt i det centrala nervsystemet, och dess modulering spelar tydligen en avgörande roll i patogenesen av neurodegenerativa störningar [33]. Nyligen genomförda studier har också klargjort rollen av Nrf2 i progressionen och risken för PD [9] och Keap1 som ett effektivt mål för reaktivering av Nrf2 i AD [34]. Resultaten stödjer nya bevis för Nrf2 som ett terapeutiskt mål vid neurodegenerativa sjukdomar.
Molekylär dockningsanalys visade att PhG kunde binda till Keap1, med följande bindningskapacitet: echinakosid > isoakteosid > akteosid > salidrosid. I enlighet med dessa resultat ledde PhGs förbehandling till Nrf2 nukleär translokation, med följande Nrf2 uttryck i kärnan: echinacoside > isoacteosid * acteosid > salidrosid. Vi antog att antalet glykosider påverkade det möjliga bindningssättet för PhGs och Keap1, och bindningsläget orsakade ytterligare frisättningen av Nrf2 från Keap1. Denna process resulterade i aktiveringen av Nrf2 och generna nedströms och skyddar slutligen PC12-celler från H2 O 2 -inducerad oxidativ stress.
Neuroprotektiva effekter av cistanchePhGs
4. Material och metoder
4.1. Kemiska föreningar och reagenser
Salidrosid (CAS-nr {{0}}), akteosid (CAS-nr 61276-17-3), isoakteosid (CAS-nr. 61303-13-7) och echinakosid (CAS-nr. {{3} }) köptes från YYuanye Biotechnology Company (Shanghai, Kina). PhGs löstes i PBS för att producera en 10 mg/ml stamlösning, som lagrades vid -20 grad. H2O2 köptes från Aladdin® (Shanghai, Kina). RPMI-1640 medium och fetalt bovint serum köptes från Hyclone (Logan, UT, USA), och 0,5 procent trypsin EDTA, penicillin och streptomycin köptes från Keyi (Hangzhou, Kina). MDA, SOD-diagnostiksatser, MTT och DCFH-DA köptes från Beyotime Institute of Biotechnology (Nanjing, Jiangsu, Kina). Annexin V-FITC/PI dubbelfärgningskit köptes från Solarbio Life Sciences (Peking, Kina). Antikroppar mot Nrf2, Histone H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM och p-aktin, anti-mus-pepparrotsperoxid (HRP) IgG och anti-kanin-HRP-IgG köptes från Abcam (London, Storbritannien). Hämmare av HO-1 och ZnPP köptes från Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). RNAiso Plus, PrimeScript™RT reagenskit med gDNA Eraser och SYBR® Premix Ex Taq™ II köptes från Takara (Shiga, Japan). Lipofectamine® RNAiMAX Transfection Reagent köptes från Thermo Fisher Scientific (Waltham, Storbritannien). Nrf2 siRNA-sekvenserna var enligt följande: framåt, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; och omvänd, UUAAGACACUGUAAUUCGG. Samtidigt var kontroll-siRNA-sekvenser enligt följande: framåt, UUCUCCGAACGUGUCACGU; och omvänd, ACGUGACACGUUCGGAGAA.
4.2. Cell kultur
Mus adrenal feokromocytomlinje (PC12-celler) erhölls från Institute of Biochemistry and Cell Biology, SIBS, (CAS, Shanghai, Kina). Cellerna hölls i RPMI-1640 (Hyclone) innehållande 10 procent fetalt bovint serum (Hyclone), 100 U/ml penicillin och 0,1 mg/ml streptomycin vid 37 grader med 5 procent CO2. Mediet byttes varannan dag.
4.3. Cell Viability Assay
PC12-celler såddes i 96-brunnsplattor med 2 x 104 celler/brunn. Efter fastsättning förinkuberades celler med eller utan inhibitor i 20 minuter, inkuberades med eller utan PhGs i 24 timmar och inkuberades sedan med H2O2 i ytterligare 2 timmar efter att PhGs avlägsnats. Efter inkubation behandlades cellerna med 5 mg/ml MTT under 4 timmar vid 37 grader, och mediet avlägsnades försiktigt. Formazankristallerna som hade bildats av överlevande celler löstes i 150 rL DMSO för att generera en blå färg [35], och absorbansen mättes vid 570 nm på en plattläsare. Kontroller använde samma koncentration av medium med enbart DMSO. Cellviabilitet normaliserades som procentandel kontroll.
Koncentrationerna av PhGs (0.1,1,5 och 10 Rg/ml) valdes beroende på cytotoxicitetsanalysen av PhG och den rapporterade cytoprotektiva effekten av echinacoside [32]. Enligt rapporten visades ingen cytotoxicitetseffekt under 10 Rg/ml, och echinakosid rapporterades visa cytoskyddande effekt i den HzOz-skadade cellmodellen.
4.4. Apoptosanalys
Apoptos detekterades med ett Annexin V-FITC/PI dubbelfärgningskit (Solarbio). PC12-celler såddes i 6-brunnsplattor med 2 x 105 celler/brunn. Efter fastsättning behandlades celler med PhGs (0,1 och 10 Rg/ml) i 24 timmar och inkuberades med H2O2 i ytterligare 2 timmar efter att PhGs avlägsnats. Efter inkubation tvättades cellerna i kall PBS, centrifugerades två gånger vid 1500 rpm under 10 minuter och återsuspenderades i 500 rL bindningsbuffert. FITC-märkt Annexin V (5 rL) och propidiumjodid.
Förkortningar
GCLC glutamat-cysteinligas-katalytisk subenhet
GCLM glutamat-cysteinligas-katalytisk modifieringssubenhet
H2O2 väteperoxid
HO-1 hem oxygenas 1
Keap1 Kelch ECH associationsprotein 1
NQO1 NAD(P)H kinonoxidoreduktas 1
Nrf2 nukleär faktor erytroid 2-relaterad faktor 2
PhGs salidrosid, acteosid, isoacteosid och echinacosid
ROS-reaktiva syrearter
ZnPP zink protoporfyrin
Cistanche deserticola extrakt: PHG av cistanche
Referenser
1. Sol, AY; Chen, YM Oxidativ stress och neurodegenerativa störningar. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]
2. Maheshwari, A.; Micro, MM; Aggarwal, A.; Sharma, RK; Nandan, D. Pathways involverade i testikelkönscellapoptos inducerad av H2O2 in vitro. FEBS J. 2009,276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]
3. Halliwell, B. Reaktiva syrearter och det centrala nervsystemet. J. Neurochem. 1992, 59,1609-1623. [CrossRef] [PubMed]
4. Richardson, JS; Subbarao, KV; Ang, LC Om den möjliga rollen av järn-inducerad peroxidation av fria radikaler i neural degeneration vid Alzheimers sjukdom. Ann. NY Acad. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]
5. Zhang, DD Mekanistiska studier av Nrf2-Keap1-signalvägen. Drug Metab. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]
6. Itoh, K.; Tong, KI; Yamamoto, M. Molekylär mekanism som aktiverar Nrf2-Keap1-väg i regleringen av adaptiv respons på elektrofiler. Fri radikal. Biol. Med. 2004, 36,1208-1213. [CrossRef] [PubMed]
7. Kong, AN; Owuor, E.; Yu, R.; Hebbar, V.; Chen, C.; Hu, R.; Mandlekar, S. Induktion av xenobiotiska enzymer genom kartkinasvägen och antioxidant- eller elektrofilresponselementet (ARE/EpRE). Drug Metab. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]
8. Buendia, I.; Michalska, P.; Navarro, E.; Gameiro, I.; Egea, J.; Leon, R. Nrf2-ARE-väg: Ett framväxande mål mot oxidativ stress och neuroinflammation i neurodegenerativa sjukdomar. Pharmacol. Ther. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]
9. Skibinski, G.; Hwang, V; Ando, DM; Daub, A.; Lee, AK; Ravisankar, A.; Modan, S.; Finucane, MM; Shabby, BA; Finkbeiner, S. Nrf2 mildrar LRRK2- och a-synuklein-inducerad neurodegeneration genom att modulera proteostas. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]
10. Jimenez, C.; Riguera, R. Fenyletanoidglykosider i växter: Struktur och biologisk aktivitet. Nat. Driva. Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]
11. Georgiev, M.; Alipieva, K.; Orhan, I.; Abrashev, R.; Denev, P.; Angelova, M. Antioxidant- och kolinesterashämmande aktiviteter av Verbascum xanthophoeniceum Griseb. och dess fenyletanoidglykosider. Food Chem. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]
12. Li, N.; Wang, J.; Ma, J.; Gu, Z.; Jiang, C.; Yu, L.; Fu, X. Neuroprotektiva effekter avCistanches HerbaTerapi på patienter med måttlig Alzheimers sjukdom. Evid.-Baserat komplement. Altern. Med. 2015, 2015, 103985. [CrossRef] [PubMed]
13. Liu, YL; Han, WJ; Mo, L.; Shi, MF; Zhu, YY; Pan, S.; Li, XR; Xu, QM; Yang, SL Antimikrobiella, antiinflammatoriska aktiviteter och toxikologi av fenyletanoidglykosider från Monochasma savatieri Franch. ex Maxim. J. Etnopharmacol. 2013,149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]
14. Dong, Q.; Yao, J.; Fang, JN; Ding, K. Strukturell karakterisering och immunologisk aktivitet av två kallvattenextraherande polysackarider frånCistanche deserticola YC Ma. kolhydr. Res. 2007, 342,1343-1349. [CrossRef] [PubMed]
15. Xiong, L.; Mao, S.; Lu, B.; Yang, J.; Zhou, F.; Hu, Y.; Jiang, Y.; Shen, C.; Zhao, Y. Osmanthusfragrans blomextrakt och akteosid skyddar mot d-galaktosinducerat åldrande i en ICR-musmodell. J. Med. Mat 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]
16. Jiang, Y.; Mao, S.; Huang, W.; Lu, B.; Cai, Z.; Zhou, F.; Li, M.; Lou, T.; Zhao, Y. Phenylethanoid Glycoside Profiles and Antioxidant Activities of Osmanthusfragrans Lour. Blommor av UPLC/PDA/MS och simulerad digestion Model. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]
17. Li, X.; Ja, X.; Li, X; Sun, X.; Liang, Q.; Tao, L.; Kang, X.; Chen, J. Salidroside skyddar mot MPP plus-inducerad apoptos i PC12-celler genom att hämma NO-vägen. Brain Res. 2011,1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]
18. Zhang, L.; Ding, W.; Sun, H.; Zhou, Q.; Huang, J.; Li, X; Xie, Y.; Chen, J. Salidroside skyddar PC12-celler från MPP plus-inducerad apoptos via aktivering av PI3K/Akt-vägen. Food Chem. Toxicol. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]
19. Sheng, GQ; Zhang, JR; Pu, XP; Ma, J.; Li, CL Skyddseffekt av verbascoside på 1-metyl-4- fenylpyridiniumjoninducerad neurotoxicitet i PC12-celler. Eur. J. Pharmacol. 2002, 451,119-124. [CrossRef]
20. Wang, H.; Xu, Y.; Yan, J.; Zhao, X.; Sun, X.; Zhang, Y.; Guo, J.; Zhu, C. Acteoside skyddar humana neuroblastom SH-SY5Y-celler mot beta-amyloid-inducerad cellskada. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]
21. Min, D.; Jin, YZ; Yong, J.; Zheng, BL; Yao, HW Echinacoside räddar SHSY5Y neuronala celler från TNFa-inducerad apoptos. Haka. Pharmacol. Tjur. 2005, 505,11-18.
22. Zhao, Q.; Gao, JP; Li, WW; Cai, DF Neurotrofiska och neuroräddande effekter av Echinacoside i den subakuta MPTP-musmodellen av Parkinsons sjukdom. Brain Res. 2010,1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]
23. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC In vitro neuroprotektiva aktiviteter av fenyletanoidglykosider från Callicarpa dichotoma. Planta Med. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]
24. Liu, YG; Li, X; Xiong, C.; Yu, B.; Pu, X; Ye, XS Syntetiska fenyletanoidglykosidderivat som potentiella neuroprotektiva medel. Eur. J. Med. Chem. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]
25. Fu, G.; Pang, H.; Wong, YH Naturligt förekommande fenyletanoidglykosider: Potentiella ledningar för nya terapier. Curr. Med. Chem. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]
26. Greene, LA; Tischler, AS Etablering av en noradrenerg klonal linje av adrenal feokromocytomceller från råtta som svarar på nervtillväxtfaktor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]
27. Liang, QN; Sheng, YC; Jiang, P.; Ji, LL; Xia, YY; Min, Y.; Wang, ZT Skillnaden mellan glutation-antioxidantsystem i nyavvanda och unga mösslever och dess inblandning i isolin-inducerad levertoxicitet. Båge. Toxicol. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]
28. Kobayashi, A.; Kang, M.; Okawa, H.; Ohtsuji, M.; Zenke, Y; Chiba, T.; Igarashi, K.; Yamamoto, M. Oxidativ stresssensor Keap1 Fungerar som en adapter för Cul3-baserat E3-ligas för att reglera proteasomal nedbrytning av Nrf2. Mol. Cell. Biol. 2004,24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]
29. Cornelius, C.; Crupi, R.; Calabrese, V; Graziano, A.; Milone, P.; Pennisi, G.; Radak, Z.; Calabrese, EJ; Cuzzocrea, S. Traumatisk hjärnskada: Oxidativ stress och neuroskydd. Antioxid. Redoxsignal. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]
30. Hou, Z.; Luo, W.; Sun, X.; Hao, S.; Zhang, Y.; Xu, F.; Wang, Z.; Liu, B. Väterik koksaltlösning skyddar mot oxidativ skada och kognitiva underskott efter mild traumatisk hjärnskada. Brain Res. Tjur. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]
31. Ansari, MA; Roberts, KN; Scheff, SW Ett tidsförlopp av kontusionsinducerad oxidativ stress och synaptiska proteiner i cortex i en råttmodell av TBI. J. Neurotrauma 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]
32. Kuang, R.; Sun, Y.; Yuan, W.; Lei, L.; Zheng, X. Skyddseffekter av echinakosid, en av fenyletanoidglykosiderna, på H2O2-inducerad cytotoxicitet i PC12-celler. Planta Med. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]
33. Scapagnini, G.; Vasto, S.; Abraham, NG; Caruso, C.; Zella, D.; Fabio, G. Modulering av Nrf2/ARE-väg genom matpolyfenoler: En näringsmässig neuroprotektiv strategi för kognitiva och neurodegenerativa störningar. Mol. Neurobiol. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]
34. Kerr, F.; Sofolaadesakin, O.; Ivanov, DK; Gatliff, J.; Gomez, PB; Bertrand, HC; Martinez, P.; Callard, R.; Snoeren, I.; Cochem, HM Direct Keap1-Nrf2-störning som ett potentiellt terapeutiskt mål för Alzheimers/s sjukdom. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]
35. Hansen, MB; Nielsen, SE; Berg, K. Omprövning och vidareutveckling av en exakt och snabb färgmetod för att mäta celltillväxt/celldöd. J. Immunol. Methods 1989, 119, 203-210. [CrossRef]
36. Press, C. Virtuell screening vid upptäckt av droger; Crc Press: Boca Raton, FL, USA, 2005.
37. Muegge, I.; Martin, YC; Hajduk, PJ; Fesik, SW Utvärdering av PMF-poäng vid dockning av svaga ligander till det FK506-bindande proteinet. J. Med. Chem. 1999, 42, 2498—2503. [CrossRef] [PubMed]
38. Kuntz, ID; Blaney, JM; Oatley, SJ; Langridge, R.; Ferrin, TE En geometrisk metod för interaktioner mellan makromolekyl och ligand. J. Mol. Biol. 1982,161, 269-288. [CrossRef]
39. MD, E.; Murray, CW; Auton, TR; Paolini, GV; Mee, RP Empiriska poängfunktioner: I. Utvecklingen av en snabb empirisk poängfunktion för att uppskatta bindningsaffiniteten för ligander i receptorkomplex. J. Comput.-Aided Mol. Des. 1997,11,425-445.
© 2018 av författarna. Licenstagare MDPI, Basel, Schweiz. Den här artikeln är en artikel med öppen tillgång som distribueras under villkoren för Creative Commons Attribution (CC BY)-licensen (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
