Del 2: Varför örtextrakt kan vara potentiell antioxidant, anti-aging, antiinflammatorisk och blekande kosmetisk ingrediens

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

KLICKA HÄR FÖR DEL 1

Slutsatser

Örtextraktfrån olika växtmaterial med olika yttre utseende, inklusive färg och smak. Bland 16 örtextrakt innehöll SR den mest signifikanta nivån av både fenoler och flavonoider, så SR hade de mest signifikanta antioxidantaktiviteterna i både DPPH- och FRAP-analyser (p < 0.05).="" dessutom="" ägde="" rd="" och="" pe="">antioxidant activities comparable to those of SR (p >0.05). Dessutom visade SR, RD och PE ett lovandeblekningeffekt med de mest signifikanta antityrosinasaktiviteterna jämfört med de andra (p < 0.05).="" örtextraktet="" med="" de="" mest="" signifikanta="" anti-aging-aktiviteterna="" var="" dock="" ep,="" som="" hämmade="" kollagenas-,="" elastas-="" och="" hyaluronidasaktiviteten="" med="" 78,5="" ±="" 0.0="" procent,="" 69.0="" ±="" 1,4="" procent="" respektive="" 64,2="" ±="" 0,3="" procent.="" dessutom="" hade="" ma="" och="" ms="" den="" mest="" signifikanta="" antiinflammatoriska="" aktiviteten,="" eftersom="" den="" hämmade="" il-6="" och="" tnf-sekretion="" (p="">< 0,05).="" därför="" de="">örtextraktsom nämns ovan har lovande gynnsamma effekter på huden och kan potentiellt användas i kosmetika/kosmetikaProdukter. Örtextrakt i form av vattenlösningar kan appliceras direkt på huden som flera former av kosmetiska produkter, såsom ansiktsvatten, ansiktsdimma och ansiktsserum. De kan också utvecklas till flera former av kosmetiska produkter, inklusive kräm, lotion och gel. För leverans av dessa föreslås dock nanoleveranssystemörtextraktin i ett djupare hudlager för att uppfylla sinakosmetikaegenskaper. Vidare föreslås lyofilisering eller avlägsnande av lösningsmedel som en ytterligare process för att framställa ett torkat extrakt som inte bara ger mer detaljer om mängden extraherat material utan också kan hållas under en längre tidsperiod.

cistanchetabletter

För mer information, klicka här

Experimentell sektion

Växtmaterial

G. extension och M. alba-löven samlades in från en lokal gård i Mae Rim-distriktet, Chiang Mai, Thailand, i oktober 2018. De färska bladen tvättades med kranvatten och fick torka vid rumstemperatur. Bladen skars i små bitar och ångades i cirka 5-10 min. Därefter rostades de strömmade bladen vid låg temperatur i 15 minuter och torkades slutligen i en ugn (UF110, Memert, Tyskland) inställd på en temperatur på 45 oC i 3 dagar. Dessutom framställdes torkade M. alba-blad utan ångnings- eller rostningsprocesser. Torkade E. purpurea-blommor köptes från en lokal gård i Chiang Mai, Thailand. Torkade blad av A. elatior och G. pentaphyllum köptes från Royal Project Foundation-butiken i Chiang Mai, Thailand. Torkade C. tinctorius, C. morifolium, C. ternatea, H. sabdarifa och J.sambac blommor, torkade P. amaryllifolius-blad, torkade R. Damascena-blommor, torkade S. rebaudiana-blad, torkat C. verum barkpulver och torkat P.emblica fruktpulver köptes från en lokal marknad i Chiang Mai, Thailand. Allt torkat växtmaterial maldes till ett fint pulver med en Moulinex-blandare (Moulinex, Paris, Frankrike) och förvarades i förseglade behållare såsom visas i figur 10 tills vidare användning.

Figur 10. Torkade örter (a) och torkade pulver (b) av olika växtmaterial

Mikroskopisk analys av torkat växtmaterial

Växtproverna identifierades och autentiserades av Wannaree Charoensup, en botaniker vid Herbarium, Institutionen för farmaceutisk vetenskap, Farmaceutiska fakulteten, Chiang Mai University. Torkat pulver av varje växtmaterial analyserades med ett Nikon ECLIPSE E200-mikroskop (Nikon Solutions Co., Ltd., Konan, Japan) kopplat till en Canon EOS750D-kamera (Canon Inc., Tochigi, Japan).[54] Montering av prover i utspädd glycerol användes för att förbereda objektglas. De mikroskopiska egenskaperna och cellkomponenterna för varje prov undersöktes och fotograferades med användning av ett mikroskop med 400× linsförstoringar.

cistanche växtblekningeffektpå huden tillantioxidation

Kemiska material

L-askorbinsyra, kojinsyra, gallussyra, quercetin, oleanolsyra, hyaluronsyra, Folin-Ciocalteu-reagens, lipopolysackarid (LPS), bovint serumalbumin (BSA), 2,4,6-Tris({{4 }}pyridyl)-s-triazin (TPTZ), 2,2'-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 3-(4,5-dimetyltiazolyl-2) { {15}},5-difenyltetrazoliumbromid (MTT), kollagenas från Clostridium histolyticum (EC 3.4.24.3), elastas från bukspottkörtel från svin (EC 3.4.4.7), hyaluronidas från bovin testikel (EC 3.2.1.35. ), N-[3-(2-Furyl)akryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), N-succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilid (AAAPVN), dihydroklorid svamptyrosinas (EC 1.14.18.1), L-3,4-dihydroxifenylalanin (L-DOPA) och L-tyrosin köptes från Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA). Tricine och Tris bas köptes från Fisher Chem Alert (Fair Lawn, NJ, USA). Dulbecco modifierat örnmedium (DMEM), L-glutamin, RPMI-1640, penicillin/streptomycin och trypanblått köptes från Invitrogen™ (Grand Island, NY, USA). Saltsyra och ättiksyra av AR-kvalitet köptes från Merck (Darmstadt, Tyskland). Aluminiumklorid (AlCl3), kalciumklorid (CaCl2), järn(II)klorid (FeCl2), järn(III)klorid (FeCl3), järn(II)sulfat (FeSO4), kaliumacetat (CH3CO2K), kaliumklorid (KCl), kaliumdivätefosfat (KH2PO4), persulfat (K2S2O8), natriumacetat (C2H3NaO2), natriumkarbonat (Na2CO3), natriumklorid (NaCl), natriumhydroxid (NaOH), mononatriumfosfat (NaH2PO4) och dinatriumfosfat (Na2HPO4) köptes från Fisherborough Chemicals, Storbritannien (Loughborough Chemicals, UK) ). Etanol och dimetylsulfoxid (DMSO) av AR-kvalitet köptes från Labscan (Dublin, Irland).

Örtextraktion

Växtbaserade växtmaterial extraherades genom infusion i kokt vatten. Kortfattat packades 1 g av varje torkat örtväxtpulver i en tepåse och nedsänktes i 50 ml kokt DI-vatten. Tepåsen avlägsnades sedan efter 1, 3, 5, 10 och 15 minuters infusion. Det infunderade extraktet lämnades kylande till rumstemperatur och användes i ytterligare undersökningar.

cistanche herbaextrahera

Bestämning av totalt fenolhalt med Folin-Ciocalteu-metoden

Det totala fenolhalten i varje örtextrakt utvärderades med Folin-Ciocalteu-metoden baserad på en metod av Chaiyana et al.,[55]som hade modifierats från metoden enligt Li et al.[56]Gallsyra användes för att fastställa en standardkurva. Nivåerna av fenolföreningar anges i milligram gallussyraekvivalent (GAE) per milliliterörtextrakt. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Bestämning av total flavonoidhalt med aluminiumkloridmetoden

Den totala flavonoidhalten i varje örtextrakt utvärderades med aluminiumkloridmetoden baserad på en metod av Do et al.[57]Quercetin användes för att upprätta en standardkurva. Flavonoidnivåer presenteras i termer av milligram quercetinekvivalent (QE) per milliliterörtextrakt. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

2,2'-difenyl-1-pikrylhydrazylreagens (DPPH) analys

Rengöringsaktiviteten mot DPPH-radikaler (DPPH) av varje örtextrakt utvärderades med användning av DPPH-analysen baserad på en metod av Chaiyana et al.[55] som hade modifierats från metoden från Blois.[58] Rensningsaktiviteten beräknades med användning av ekvationen

procent rensningsaktivitet={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (1)

där A är UV-absorbansen för DPPH-lösningen, B är UV-absorbansen för lösningsmedlen, C är UV-absorbansen för blandningen avörtextraktoch DPPH-lösning, och D är UV-absorbansen för örtextraktlösningen. Den positiva kontrollen var L-askorbinsyra. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Järnsyrareducerande antioxidantkraft (FRAP) analys

Den järnreducerandeantioxidantkraften hos varje örtextrakt utvärderades med hjälp av FRAP-analysen baserad på en metod av Chaiyana et al.[55]som hade modifierats från metoden enligt Saeio et al.[59]FeSO4 användes för att upprätta en standardkurva. Den järnreducerande effekten presenteras i termer av ekvivalent kapacitet (EC1), vilket var mängden FeSO4-ekvivalenter per milliliter av provet. Den positiva kontrollen var L-askorbinsyra. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Bestämning av antityrosinasaktivitet

Den hämmande aktiviteten mot tyrosinas-enzymet i varje örtextrakt utvärderades med en spektrofotometrisk analys baserad på en metod av Laosirisathian et al.[60] som hade modifierats från metoden enligt Pomerantz.[61] Antityrosinasaktiviteterna beräknades med användning av ekvationen

procent antityrosinasaktivitet={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (2)

där A är UV-absorbansen för ett tyrosinasenzym kombinerat med substratet, B är UV-absorbansen för lösningsmedlet, C är UV-absorbansen förörtextraktkombinerat med ett tyrosinasenzym och substratet är D UV-absorbansen för örtextraktlösningen. Den positiva kontrollen var kojinsyra. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Cistancheär entyrosinashämmare

Bestämning av kollagenashämmande aktivitet med spektrofotometrisk metod

Den kollagenashämmande aktiviteten av varje örtextrakt utvärderades med en spektrofotometrisk analys baserad på en metod av Chaiyana et al.[44] med små modifieringar. För det första var 0.16 enheter/ml kollagenaslösning en kombination av kollagenas från Clostridium histolyticum, 80 mM NaCl, 2 mM CaCl2 och 50 mM tricinbuffert, pH 7,5. Därefter applicerades 200 µL av den resulterande kollagenaslösningen på 20 µL av varje örtextrakt i en plattbottnad brunnsplatta (Costar, Corning Ltd., Sunderland, Storbritannien) och lämnades i 15 minuter. Därefter applicerades 80 µL av 1 mg/ml FALGPA i tricinbufferten, pH 7,5, som ett substrat till den enzymatiska reaktionen och lämnades ytterligare i 20 minuter. UV-absorbansen hos den resulterande blandningen mättes vid 340 nm med användning av en multimoddetektor (Beckman CoulterDTX880, Fullerton, CA, USA). De kollagenashämmande aktiviteterna beräknades med användning av ekvationen

procent antikollagenasaktivitet={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (3)

där A är UV-absorbansen för kollagenaslösningen kombinerad med FALGPA-lösningen, B är UV-absorbansen för lösningsmedlen, C är UV-absorbansen förörtextraktkombinerat med kollagenas- och FALGPA-lösningen, och D är UV-absorbansen av örtextraktlösningen. Den positiva kontrollen var EGCG. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Bestämning av elastashämmande aktivitet med den spektrofotometriska metoden

Den elastashämmande aktiviteten av varje örtextrakt utvärderades med en spektrofotometrisk analys baserad på en metod av Chaiyana et al.[44] De elastashämmande aktiviteterna beräknades med användning av ekvationen

procent antielastasaktivitet={((AB)-(CD))/(AB)} x 100, (4)

där A är UV-absorbansen för elastaslösning och AAAPVN-lösning, B är UV-absorbansen för lösningsmedlen, C är UV-absorbansen förörtextraktkombinerat med elastas och AAAPVN-lösning, och D är UV-absorbansen för örtextraktlösningen. EGCG användes som en positiv kontroll. Den positiva kontrollen var EGCG. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Bestämning av hyaluronidashämmande aktivitet med spektrofotometrisk metod

Den hyaluronidashämmande aktiviteten av varje örtextrakt utvärderades med en spektrofotometrisk analys baserad på en metod av Chaiyana et al.[44] De hyaluronidashämmande aktiviteterna beräknades med användning av ekvationen

procent hyaluronidasaktivitet={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (5)

där A är UV-absorbansen för hyaluronidaslösningen i kombination med hyaluronsyralösningen, B är UV-absorbansen för lösningsmedlen, C är UV-absorbansen förörtextraktkombinerat med hyaluronidaslösningen och hyaluronsyralösningen, och D är UVabsorbansen för örtextraktlösningen. Den positiva kontrollen var oleanolsyra. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Bestämning av antiinflammatorisk aktivitet med enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA)

Den antiinflammatoriska aktiviteten av varje örtextrakt utvärderades med hjälp av hämmande aktiviteter mot IL-6 och TNF-sekretion baserat på en metod av Chaiyana et al.,[44] som hade modifierats från metoden enligt Mueller et al. al.[62]LPS användes för att stimulera den inflammatoriska processen i musmonocytmakrofag RAW 264.7-celler (American Type Culture Collection, ATCCTIB-71). Cellen inkuberad med LPS fungerade som vehikelkontroll, med 100 procent av cytokinerna utsöndrade, medan obehandlade RAW 264.7-celler fungerade som en negativ kontroll. MTT-analysen användes för att utvärdera RAW 264.7-cellviabilitet i samband med ELISA.[62]Hämning av IL-6 och TNF-sekretion beräknades med hjälp av ekvationen

procent cytokininhibering={((AB)-(CD))/(AB)} x 100 (6)

där A är den optiska densiteten förörtextraktfrån MTT-analysen, B är den optiska densiteten för den negativa kontrollen från MTT-analysen, C är den optiska densiteten för örtextrakten från ELISA och D är den optiska densiteten för vehikelkontrollen från ELISA. Den positiva kontrollen var dexametason. Alla experiment utfördes i tre exemplar.

Statistisk analys

Alla resultat presenteras i form av medelvärde ± standardavvikelse (SD). Envägsvariansanalysen (ANOVA) användes för att bestämma statistisk signifikans, följt av Turkiets post-hoc-tester med SPSS 17.0 för Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). P < 0.05="" ansågs="" vara="" statistiskt="">

Referenser

[1] M. Kong, XG Chen, DK Kweon, HJ Park, 'Undersökningar av hudgenomträngning av hyaluronsyrabaserad nanoemulsion som transdermal bärare', Carbohydr. Polym. 2011, 86, 837-843.

[2] H. Takigawa, H. Nakagawa, M. Kuzukawa, H. ori, G. Imokawa, "Bristproduktion av hexadekensyra i huden är delvis förknippad med sårbarheten hos patienter med atopisk dermatit för kolonisering av Staphylococcus aureus", Dermatologi. 2005, 211, 240-248.

[3] SH Lee, SK Jeong, SK Ahn, "En uppdatering av hudens defensiva barriärfunktion", Yonsei Med. J. 2006, 47, 293-306.

[4] F. Bonté, D. Girard, JC Archambault, A. Desmouliere, 'Skin Changes Under Ageing', In Biochemistry and Cell Biology of Ageing: Part II Clinical Science, Springer: Singapore, 2019, 249-280.

[5] AK Langton, HK Graham, CE Griffiths, REB Watson, "Åldrande påverkar avsevärt hudens biomekaniska funktion och strukturella sammansättning", Exp. Dermatol. 2019, 28, 981-984.

[6] T. Schikowski, A. Hüls, 'Air Pollution and Skin Aging', Curr. Environ. Health Rep. 2020, 1-7.

[7] N. Amberg, C. Fogarassy, ​​"Grönt konsumentbeteende på kosmetikamarknaden", Resurser. 2019, 8, 137.

[8] J. Azmir, ISM Zaidul, MM Rahman, 'Tekniker för extraktion av bioaktiva föreningar från växtmaterial: En recension, J. Food Eng. 2013, 117, 426-436.

[9] M. Gašperlin, M. Gosenca, "Huvudsakliga metoder för att tillföra antioxidantvitaminer genom huden för att förhindra hudens åldrande", Expert. Opin. Drug Deliv. 2011, 8, 905-919.

[10] SM Salavkar, RA Tamanekar, RB Athawale, 'Antioxidanter i hudens åldrande – Future of dermatology', Int. J. Green Pharm. 2011, 5(3). 161-168.

[11] J. Calleja-Agius, Y. Muscat-Baron, MP Brincat, 'Skin aging', Menopause Int. 2007,13, 60-64.

[12] GJ Fisher, T. Quan, T. Purohit, Y. Shao, MK Cho, T. He, J. Varani, S. Kang, JJ Voorhees, 'Kolagenfragmentering främjar oxidativ stress och höjer matrismetalloproteinas{{1} } i fibroblaster i åldrad mänsklig hud', Am. J. Pathol. 2009, 174, 101-114.

[13] AC Weihermann, M. Lorencini, CA Brohem, CM De Carvalho, 'Elastin structure and its involvement in skin photoaging, Int. J. Cosmet. Sci. 2017, 39, 241-247.

[14] S. Abhijit, D. Manjushree, 'Anti-hyaluronidas, anti-elastasaktiviteten hos Garcinia Indica, Int. J. Botanik. 2010, 6(3), 299-303.

[15] T. Pillaiyar, M. Manickam, V. Namasivayam, Skin whitening agents: medicinal chemistry perspective of tyrosinase inhibitors. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2017, 32, 403-425.

[16] M. Ashawat, M. Banchhor, S. Saraf, S. Saraf, "Herbal Cosmetics: Trends in Skin Care Formulation" Pharmacogn. Rev. 2009, 3, 82-89.

[17] FN Muanda, R. Soulimani, B. Diop, A. Dicko, "Studie om kemisk sammansättning och biologiska aktiviteter av eterisk olja och extrakt från Stevia rebaudiana Bertoni leave", LWT-Food Sci. Technol. 2011, 44, 1865-1872.

[18] NG Baydar, H. Baydar, "Fenoliska föreningar, antiradikal aktivitet och antioxidantkapacitet hos oljebärande rosextrakt (Rosa damascena Mill.)", Ind. Crops Prod. 2013, 41, 375-380.

[19] SM Ghoreishi, A. Hedayati, SO Mousavi, 'Quercetinextraktion från Rosa damascena Mill via superkritisk CO2: Neuralt nätverk och adaptiv neuro-fuzzy gränssnittssystemmodellering och responsytoroptimering, J. Supercrit. Vätskor. 2016, 112, 57-66.

[20] TEA Ardjani, JR Alvarez-Idaboy, "Radical scavenging aktivitet av askorbinsyraanaloger: Kinetik och mekanismer", Teor. Chem. Enl. 2018. 137, 69.

[21] L. Panzella, "Naturliga fenoliska föreningar för hälsa, mat och kosmetiska tillämpningar" Antioxidanter. 2020, 9, 427.

[22] DS Menamo, DW Ayele, MT Ali, "Grön syntes, karakterisering och antibakteriell aktivitet av kopparnanopartiklar som använder L-askorbinsyra som reduktionsmedel", Etiop. j. sci. technol. 2017, 10, 209-220.

[23] NG Quilantang, SH Ryu, SH Park, JS Byun, JS Chun, JS Lee, J. p. Rodriguez, YS. Yun, SD Jacinto, S. Lee, "Hämmande aktivitet av metanolextrakt från olika färgade blommor på aldosreduktas och HPLC-UV-analys av quercetin", Hortic. Environ. Biotechnol. 2018, 59, 899-907.

[24] SM Sabir, RH Shah, AH Shah, "Totalt innehåll av fenol- och askorbinsyra och antioxidantaktiviteter för tolv olika ekotyper av Phyllanthus emblica från Pakistan", Chiang Mai J. Sci. 2017, 44, 904-911.

[25] JF Morton, 'The emblic (Phyllanthus emblica L.)', Econ. Bot. 1960, 14, 119-128.

[26] NN Barthakur, NP Arnold, "Kemisk analys av emblemet (Phyllanthus emblica L.) och dess potential som födokälla", Sci. Hortic. 1991, 47, 99-105.

[27] D. Huang, B. Ou, RL Prior, "Kemin bakom antioxidantkapacitetsanalyser", J. Agric. Food Chem. 2005, 53, 1841-1856.

[28] V. Bondet, W. Brand-Williams, CLWT Berset, "Kinetics and Mechanisms of Antioxidant Activity using the DPPH Free Radical Method", Food Sci. Technol.-Zürich. 1997, 30, 609-615.

[29] S. Nam, HW Jang, T. Shibamoto, "Antioxidantaktiviteter av extrakt från teer framställda från medicinalväxter, Morus alba L., Camellia sinensis L. och Cudrania tricuspidata, och deras flyktiga komponenter", J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 9097-9105.[30] J. Harrathi, H. Attia, M. Neffati, "Salteffekter på skotttillväxt och eterisk oljeutbyte och sammansättning i safflor (Carthamus tinctorius L.)", J. Essent. Oil Res. 2013, 25, 482-487.

[31] A. Mar, AA Mar, PP Thin, 'Study on the Phytochemical Constituents in Essential oil of Pandanus amaryllifolious Roxb. Blad och deras antibakteriella effekt', Yadanabon Univ. Res. J. 2019, 10, 1-9.

[32] M. Rinnerthaler, J. Bischof, MK Streubel, A. Trost, K. Richter, 'Oxidativ stress i åldrande mänsklig hud', Biomolecules. 2015, 5, 545-589.

[33] NR Perron, JL Brumaghim, "En översyn av antioxidantmekanismerna för polyfenolföreningar relaterade till järnbindning", Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.

[34] A. Karadag, B. Ozcelik, S. Saner, "Review of methods to determine antioxidant capacities", Food Anal. Metoder. 2009, 2, 41-60.

[35] RJ Wang, ML Hu, "Antioxidantkapacitet hos fruktextrakt av fem mullbärsgenotyper med olika analyser och principkomponentanalys, Int. J. Food Prop. 2011, 14, 1-8.

[36] S. Mirunalini, M. Krishnaveni, 'Therapeutic potential of Phyllanthus emblica (amla): the ayurvedic wonder', J. Basic Clin. Physiol. Pharmacol. 2010, 21, 93-105.

[37] R. Jakmatakul, R. Suttisri, P. Tengamnuay, "Utvärdering av antityrosinas- och antioxidantaktiviteter hos Raphanus sativus rot: jämförelse mellan frystorkad juice och metanoliskt extrakt", Thai J. Pharm. Sci. 2009, 33. 22-30.

[38] SJ Lee, WJ Lee, SE Chang, GY Lee, "Antimelanogen effekt av ginsenosid Rg3 genom extracellulär signalreglerad kinasmedierad hämning av mikroftalmiassocierad transkriptionsfaktor" J. Ginseng Res. 2015, 39, 238-242