Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-post:audrey.hu@wecistanche.com

Klicka här för del 1

Diskussion

I denna studie har fenyletanoidglykosider erhållits frånCistanche tubulosa påverkade inte cellviabiliteten på RBL{{0}}}H3-celler och KU812-celler vid 1.0-10,0 µg/ml behandlingar. Men,akteosidvar cytotoxiskt vid 100,0 µg/ml behandlingar (Fig. 2B), såsom har rapporterats av Saracoglu et al. [30] som har visat detakteosidisolerad frånPhlomic Armeniacaoch Scutellaria salviifolia visade cytotoxiska effekter på dRLh-84, S-180, P-388/D1-cellinjer med IC₅₀30-221 µg/ml vid olika cellantal. Vårt resultat antydde att hämningseffekten avakteosidpå cellviabilitet vid 100 µg/ml behandling, kan påverkas av dess apoptotiska aktivitet.

Den omedelbara allergiska reaktionen är involverad i många allergiska sjukdomar som astma, allergisk rinit och bihåleinflammation. Mastceller spelar en avgörande roll i inflammatoriska och omedelbara allergiska reaktioner. Våra data visar att akteosiden har den högsta hämmande effekten på -hexosaminidasfrisättningen från IgE-sensibiliserade, antigenstimulerade RBL-2H3-celler jämfört med andra fenyletanoidglykosider vid 1,0 ug/mL behandling ( Fig. 3). Akteosids hämmande effekt på frisättning av -hexosaminidas vid 10.0 ug/mL behandling var lägre än den vid 1,0 ug/ml behandling. Som Sugisawa et al. [31] visat, kan detta ha bidragit till H₂O₂induktion vid höga koncentrationer av akteosid_,som kan vara reglerade kalciumsignaler och degranulering på RBL{0}}H3-cellerna [32], påverkad till -hexosaminidasfrisättning vid 10,0 ug/mLakteosidbehandling.

Cistanche deserticola har många effekter, klicka här för att veta mer

Degranuleringen av mastceller är nära besläktad med [Ca^{2 plus}]i. Hämningen av Ca^{2 plus}inflöde av anti-allergiska läkemedel spelar en avgörande roll i undertryckandet av degranulering i mastceller. [33-34]. Våra resultat indikerar att den intracellulära [Ca^{2 plus}]i nivån var lägre i de akteosidbehandlade, DNP-BSA-stimulerade RBL-2H3-cellerna (Fig. 4), vilket överensstämmer med andra rapporter [34-35], och dessa resultat överensstämmer med de i fig. 3. Vi anser utifrån dessa observationer att minskningen av intracellulär [Ca]^{2 plus}]i är involverad i den hämmande effekten avakteosidvid frisättning av -hexosaminidas. Kväveoxid (NO) och H₂O₂är två stora reaktiva syrearter (ROS) kända för reglering av kalciumsignaler och degranulering av mastceller. ROS är nödvändiga för utsöndring av -hexosaminidas och kalciuminflöde, och nikotinamidadenindinukleotidfosfat (NADPH)-oxidas är huvudsakligen ansvarig för ROS-produktion i de IgE-medierade RBL-2H3-cellerna [29, 32]. Den ihållande höjningen av cytosoliskt kalcium genom butiksopererat kalciuminträde avskaffades helt när ROS-produktionen blockerades. Dessutom har ROS ett visst samband med ß-hexosaminidas och histaminfrisättning genom aktivering av proteinkinas C (PKC) och IgE-stimulering i RBL-2H3-celler [34]. Vidare har Suzuki et al. [36] fann att det fanns en signifikant korrelation mellan hämmande effekter på histaminfrisättning och 1, 1-difenyl-2-piratkopiering l-hydroxyl (DPPH) eller superoxidanjonradikal-fångande aktiviteter av curcumin-relaterad antioxidant föreningar. Å andra sidan,akteosidhar fria radikaler som avlägsnar egenskaper på NO-radikaler och DPPH-radikaler [9, 37]. Akteosid har också visat renande aktivitet i aktiverade humana leukocyter [38]. En av möjligheterna är att inhiberingseffekten av akteosid på intracellulär kalciumfrisättning kan påverkas av dess fria radikalfångande aktiviteter av NADPH-oxidasaktiviteter.

Akteosid hämmade dosberoende histaminfrisättning på A23187 plus PMA-stimulerad KU812-cell (Fig. 4A).Akteosidhämmade glutamatinducerad intracellulär Ca^{2 plus}inflöden som resulterar i överproduktion av NO och minskad bildning av ROS [37]. Både PKC och Ca^{2 plus}signalvägar krävs för frisättning av histamin och leukotriener från mastceller såväl som gnagarsystem [39]. Vi antog detakteosidkan ha en hämmande effekt på histaminfrisättning genom Ca^{2 plus}tillströmning. För detta ändamål använde vi A21387 plus PMA för att stimulera KU812-celler och visade histaminfrisättningsinhiberingseffekten medakteosid. Detta resultat stödde vår hypotes att akteosid kan minska histaminfrisättningen från KU812-celler genom hämning av Ca^{2 plus}inflöde eller PKC-aktivering.

Man tror utan tvekan att stimulering av mastceller med förening 48/80 initierar aktiveringen av en signaltransduktionsväg, vilket leder till histaminfrisättning. Senyshyn et al. [40] identifierade rekombinant G-subenhet markant synergiserad fosfolipas D-aktivering av förening 48/80 i permeabiliserade basofila celler. Förening 48/80-inducerad sekretion är associerad med en övergående ökning av cytosoliskt Ca^{2 plus}. Denna utsöndring blockerades av kalciumkelatorn och PKC-hämmaren. I den aktuella studien observerade vi detakteosidhämmade föreningen 48/80-inducerad degranulering från basofila celler. Men den hämmande effekten av akteosid på histaminfrisättning vid 0.1 ug/mL behandling var högre än den 1.0-10.0 ug/ml behandling (Fig. 4B). Som Lau et al. [41] visat, den hämmande effekten avakteosidpå förening 48/80 kan inducerad histaminfrisättning vara involverad i antiinflammationseffekten av akteosid mot vaskulärt permeabilitetsassocierat ödem. Möjligenakteosidkan ha flera olika sätt att hämma frisättning av kemisk mediator från basofila celler, vilket tyder på komplexiteten i dess verkan. Men för att avslöja mekanismen för hämning av histaminfrisättning av detta recept, bör ytterligare studier utföras.

Bland cytokiner som produceras av basofila celler är TNF-, IL-4, IL-13 och IL-5 nyckelmolekylerna. Minskningen av pro-inflammatoriska cytokiner från mastceller eller basofila celler är en av nyckelindikatorerna för minskade allergiska symtom [42]. När det gäller TNF- regleras produktionen huvudsakligen av Ca^{2 plus}inflöde, men frisättningsprocessen regleras av ytterligare mekanismer som möjligen involverar aktivering av PKC i KU812-celler. Inhibering av [Ca^{2 plus}]i influx är involverat i uttrycket av cytokiner i mastceller och basofila celler [34, 43]. Vårt resultat visade att 1.0 och 10,0 µg/mLakteosidminskad TNF- och IL-4-produktion från A23187 plus PMA-stimulerade KU812-celler efter behandling i 16 timmar. Akteosid kan hämma TNF- och IL-4-produktion genom att minska [Ca^{2 plus}] I nivå i A23187 plus PMA-stimulerade KU812-celler. Dessutom antydde våra resultat attakteosidhar en antiallergisk effekt i sen fas. Bekräftelse av effekten av akteosid med användning av FcεRI-uttryckande mastceller eller basofila celler är nödvändig för framtiden.

Sammanfattningsvis rapporterar vi för första gången att akteosid, echinakosid ochcistanosidEtt utdraget urCistanche tubulosa kan hämma frisättningen av -hexosaminidas från IgE-sensibiliserade BSA-stimulerade RBL-2H3-celler. Dessutom kan akteosid hämma histaminfrisättningen, TNF- och IL-4-produktionen på ett dosberoende sätt på A23187 plus PMA-stimulerade KU812-celler. Dessa resultat tyder på detakteosidkan vara en bra kandidat för terapeutisk behandling av olika allergiska sjukdomar. Den detaljerade mekanismen bakom den antiallergiska effekten av akteosid är föremål för en framtida studie.

Referenser

1 Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Fenyletanoida aminoglykosider och acylerade oligosocker med vasorelaxerande aktivitet frånCistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475

2 Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, Miyase T, Ueno A, Usmanghani K, Ahmad M. Nya Phenylethanoid Glycosiders frånCistanche tubulosa (SCHRENK) KROK. f. I. Chem Pharm Bull 1987; 35: 3309–3314

3 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Effekten avCistanche tubulosa extrakt på olika hjärnsjukdomar. Matstil 21 2008; 12:24–26

4 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Anti-aging funktionerCistanche tubulosaextrahera. Matstil 21 2008; 12:27–29

5 Tanaka J, Kikuchi M, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Skönhet och hårväxt funktioner av Cistanche tubulosa extrakt. Matstil 21 2008; 12:29–32

6 Tanaka J, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Fettmetaboliserande effekt avCistanche tubulosa extrahera. Matstil 21 2008; 12:30–33

7 Yoshizawa F, Deyama T, Takizawa N, Usmanghani K, Ahmad M. Beståndsdelarna i Cistanche tubulosaSchrenk (krok) f. I I. Isolering och struktur av en ny fenyletanoidglykosid och en ny neolignanglykosid. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930

8 Xiong Q, Tezuka Y, Kaneko T, Li H, Tran LQ, Hase K, Namba T, Kadota S. Hämning av kväveoxid av fenyletanoider i aktiverade makrofager. Eur J Clin Pharmacol 2000; 14: 137–144

9 Sahpaz S, Garbacki N, Tits M, Bailleul F. Isolering och farmakologisk aktivitet av fenylpropanoidestrar från Marrubium vulgare. J Ethnopharmacol 2002; 79: 389-392

10 He WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ,tiPF. Echinakosid framkallar endotelberoende avslappning i aortaringar hos råtta via en NO-cGMP-väg. Planta Med 2009; 75: 1400–1404

11 Zhang HQ,WengXJ, Chen LL, Li X. Effekt av Cistanche tubulosa (Schenk) Whight-akteosid på telomerasaktivitet och immunitet hos åldrande möss. kinesiska J Pharmacol Toxicol 2008; 22: 270–273

12 Lee JH, Lee JY, Kang HS, Jeong H, Moon CH, Whang WK, Kim SS, Sim C. Effekten av akteosid på histaminfrisättning och arakidonsyrafrisättning i RBL-2H3-mastceller. J Arch Pharm Res 2006; 29: 508–513

13 Diaz AM, Abad MJ, Fernandez L, Silvan AM, Santos JD, Bermejo P. Fenylpropanoidglykosider från Scrophularia scorodonia: in vitroantiinflammatoriskaktivitet. Life Sci 2004; 74: 2515–2526

14 Beaven MA, Metzger H. Signaltransduktion av Fc-receptorer: FcεRI-fallet. Immunol Today 1993; 14: 222–226

15 Srivastava D, Arora N, Singh BP.Aktuella immunologiska metoder för hantering av allergisk rinit och bronkialastma. Inflamm Res 2009; 58: 523–536

16 Pelletier C, Guerin-Marchand B, Iannascoli F, Marchand B, David AW, Blank U. Specifika signalvägar i regleringen av TNF-mRNA-syntes och TNF-sekretion i RBL-2H3-mastceller stimulerade genom de höga -affinitets-IgE-receptor C. Inflamm Res 1998; 47: 493–500

17 Schiwartz LB, Lewis RA, Seldin D, Austen KF. Sura hydrolaser och tryptas från sekretoriska granuler av dispergerade mänskliga lungmastceller. J Immunol 1981; 126: 1290–1294

18 Cheong H, Choi EJ, Yoo GS, Kim KM, Ryu SY. Desacetylmatricarin, en antiallergisk komponent frånTaraxacum Platycerium. Planta Med 1998; 64: 577-578

19 Ortega E, Schweitzer-Stenner R, Pecht I. Möjliga orienteringsbegränsningar bestämmer sekretoriska signaler inducerade av aggregering av IgE-receptorer på mastceller. EMBO J 1988; 7: 4101–4109

20 Funaba M, Ikeda T, Abe M. Degranulering i RBL-2H3-celler: reglering genom kalmodulinväg. Cell Biol Int 2003; 27: 879–885

21 Ohno Y, Tanno K, Yamauchi K, Takishima T. Genuttryck och produktion av tumörnekrosfaktor av en basofil leukemicellinje från råtta (RBL-2H3) med IgE-receptorutlösande. Immunology 1990; 70: 88–93

22 Butterfield JH, Weiler D, Dewald G, Gleich GJ. Etablering av en omogen mastcellinje från en patient med mastcellsleukemi. Leuk Res 1988; 12: 345–355

23 Hosoda M,YamayaM, SuzukiT, YamadaN, Kamanaka M, Sekizawa K, Butterfield JH,Watanabe T, Nishimura H, Sasaki H. Effekter av rhinovirusinfektion på histamin- och cytokinproduktion av cellinjer från mänskliga mastceller och basofiler. J Immunol 2002; 169: 1482–1491

24 Galli SJ, Kalesnikoff J, Grimbaldeston MA, Piliponsky AM, Williams CM, Tsai M. Mastceller som "avstämbara" effektor- och immunreglerande celler: senaste framsteg. Annu Rev Immunol 2005; 23: 749–786

25 Galli SJ, Gordon JR, Wershil BK. Cytokinproduktion av mastceller och basofiler. Curr Opin Immunol 1991; 3: 865–872

26 YamadaP, Isoda H, Han J,TaloreteTP,AbeY. Hämmande effekt av fulvinsyra extraherad från kanadensiskVitmossatorv på kemisk mediator som frigörs av RBL-2H3- och KU812-celler. Biosci Biotechnol Biochem 2007; 71: 1294–1305

27 Aase F, Arna, S. Dantrolen förhindrar glutamatcytotoxicitet och Ca^{plus 2}frisättning från intracellulära förråd i odlade cerebrala kortikala neuroner. J. Neurochem 1991; 56: 1075-1078

28 Yamada P, Zarrouk M, Kawasaki K, Isoda H, Hämmande effekt av olika tunisiska olivoljor på kemisk mediatorfrisättning och cytokinproduktion av basofila celler. J Ethnopharmacol 2008; 116: 279-287

29 Kim Y, Lee YS, Hahn JH, Choe J, Kwon HJ, Ro JY, Jeoung D.Hyaluronsyra riktar sig mot CD44 och hämmar FcεRI-signalering som involverar PKCδ, Rac1, ROS och MAPK för att utöva en anti-allergisk effekt. Mol Immunol 2008; 45: 2537–2547

30 Saracoglu I, Inoue M, Calis I, Ogiwara Y. Studier av beståndsdelar med cytotoxisk och cytostatisk aktivitet hos två turkiska medicinalväxterPhlomis ArmeniacaochScutellaria salviifolia. Biol Pharm Bull 1995; 18: 1396–1400

31 Sugisawa A, Umegaki K. Fysiologisk koncentration av (-)-epigallocatechin -3-O-gallat (EGCg) förhindrar kromosomskador inducerade av reaktiva syrearter i WIL2-NS-celler. J Nutr 2002; 132: 1836–1839

32 Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C. Fc epsilon RI-signalering av mastceller aktiverar intracellulär produktion av väteperoxid: roll i regleringen av kalciumsignaler. J Immunol 2003; 171: 6119–6127

33 Oka T, Sato K, Hori M, Ozaki H, Karaki H. FcεRI-tvärbindningsinducerad aktinsamling förmedlar kalciumsignalering i RBL-2H3-mastceller. Br J Pharmacol 2002; 136: 837–846 34Tasaka K, Mio M, Okamoto M. Intracellulär kalciumfrisättning inducerad av histaminfrisättare och dess hämning av vissa antiallergiska läkemedel. Ann Allergy 1986; 56: 464–469

35 Horiuti TM, Zaitsu M, Lambert KC, Grady JJ, Estes DM, Curran EM, Brooks T.EX, WatsonCS, Goldblum RM. Östrogener potentierar syntesen och frisättningen av mediatorer av allergi från mastceller genom att öka intracellulärt kalcium. J Allergy Clin Immunol 2005; 115:189

36 Suzuki M, NakamuraT, Iyoki S, Fujiwara A,WatanabeY, Mohri K. Isobe K, Ono K,Yano S. Belysande av anti-allergiska aktiviteter av curcumin-relaterade föreningar med en speciell hänvisning till deras antioxidativa aktiviteter. Biol Pharm Bull 2005; 28: 1438–1443

37 Koo KA, Kim SH, Oh TH, Kim YC. Akteosid och dess aglykoner skyddar primärkulturer av råttkortikala celler från glutamatinducerad excitotoxicitet. Life Sci 2006; 79: 709–716

38 Lin LC,WangYH, Hou YC, Chang S, LiouKT,Chou YC,WangWY,Shen YC. Den hämmande effekten av fenylpropanoidglykosider och iridoidglukosider på produktion av fria radikaler och uttryck av b2-integrin i humana leukocyter. J Pharm Pharmacol 2006; 58: 129–135

39 Kim M, Shichijo M, Miura T, Serizawa I, Inagaki N, Nagai H. Ca^{2 plus}och proteinkinas C-signalering för frisättning av histamin och sulfidoleukotriener från mänskliga odlade mastceller. Biochem Biophys Res Commun 1999; 257: 895–900

40 Senyshyn J, Baumgartner RA, Beaven MA. Quercetin sensibiliserar RBL-2H3-celler till polybasiska mastcellsekretagoger genom ökat uttryck av G_iGTP-bindande proteiner kopplade till en fosfolipas C-signalväg. J Immunol 1998; 160: 5136–5144

41 Lau CW, Chen ZY, Wong CM, Yao XQ, He ZD, Xu HX, Huang Y. Försvagad endotelmedierad avslappning av akteosid i råttaorta: Endotelets roll [Ca^{2 plus}] I och kväveoxid/cyklisk GMP-väg. Life Sci 2004; 75: 1149–1157

42 Paul WE, Seder RA, Plaut M. Lymfokin- och cytokinproduktion av FcεRI-celler. Adv Immunol 1993; 53: 1–29

43 Jeong HJ, Hong SH, Lee DJ, Park JH, Kim KS, Kim HM. Rollen för Ca^{2 plus}på TNF- och IL-6-utsöndring från RBL-2H3-mastceller. Cell Signal 2002; 14: 633–639

Cistanche tubulosa extrakt