Beredningsteknik för Wenyang Tongbian-granulat

Abstrakt:

MålFör att bestämma och optimera beredningstekniken för Wenyang Tongbiangranules.

MetoderVattenavkok extraherades. Innehållet av echinacea-glykosid i monarkdrogen och utbytesföreningen användes som index. L9 (34) ortogonala test användes för att optimera extraktionen av Wenyang Tongbian-granulat. Den bästa formningsprocessen optimerades baserat på granuleringssvårigheter, formbarhet och partikelutbyte. Resultat Den optimala extraktionen innefattade att lägga till 10 veck vatten och extrahera 3 gånger, 1 timme varje gång. Den bästa bildningsprocessen: typen av hjälpmaterial vardextrin, förhållandet av hjälpämnen var 1∶0,9 och det bästa vätmedlet var 85 % etanol. Slutsats Extraktions- och formningsprocessen är stabil och rimlig, enkel och genomförbar, med god reproducerbarhet, vilket kan ge en grund för industriell produktion av Wenyang Tongbian-granulat.

Nyckelord: Wenyang Tongbian granlue; ortogonalt test; extraktion; gjutning

NY ÄRTFORMULERING FÖR NJURAYANG-BRIST

Supporttjänst från Wecistanche

E-post:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Yang-brist förstoppningär vanligt hos äldre och kvinnor. Behandlingsmetoden bör inte vara enkel utrensning. Warming Yang-metoden kan ge goda resultat [1]. Wenyang Tongbian Granules är ett preparat på sjukhus som utvecklats baserat på den kliniska erfarenheten av professor Lin Aizhen vid Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine när det gäller behandling av funktionell förstoppning hos äldre. Den består av Cistanche deserticola, kanelbark, astragalus och Atractylodes macrocephala. I formeln har Cistanche deserticola funktionerna att tonifiera njurens yang och gynna essensen och blodet, och är den huvudsakliga medicinen som värmer yang; kanelbark har funktionerna att värma meridianer och frigöra blodkärl, fylla på eld och stödja yang; astragalus har funktionerna att höja yang och fylla på qi, dra ihop sår och främja vävnadsregenerering; och Atractylodes macrocephala har funktionerna att stärka mjälten och fylla på qi, torka fukt och främja diures.

Studier har visat att fenyletanolglykosider är de huvudsakliga aktiva ingredienserna i Cistanche deserticola [2]. Bland dem är echinacoside och verbascoside de karakteristiska ingredienserna för kvalitetskontroll av Cistanche deserticola enligt den kinesiska farmakopén. Liu Xianhong et al. [3] drog slutsatsen genom in vivo-försök på människor att Cistanche deserticola är lämplig för klinisk behandling av förstoppning och kan behandla både symtomen och grundorsaken. De viktigaste kemiska komponenterna i kanelbark inkluderar flyktiga oljor, polysackarider, flavonoider, etc. Moderna farmakologiska studier har visat att kanelbark har farmakologiska effekter såsom vasodilatation, anti-magsår och antibakteriella effekter [4]. Astragalus-polysackarider, flavonoider och astragalosid IV är de viktigaste kemiska komponenterna som utövar immunmodulerande effekter [5]. Atractylodes macrocephala har effekterna att stärka mjälten och reglera störningar av tarmfloran och kan användas kliniskt för att behandla gastrointestinal dysfunktion [6]. Det ursprungliga receptet används främst i avkok av kinesisk medicin, men det har nackdelar som besvär i avkok, stor dosering och besvär med att bära. För att göra denna kliniska erfarenhetsrecept allmänt använd i klinisk praxis utvecklades den till granulat. Detta experiment använde pastautbytet och innehållet av echinakosid, den huvudsakliga aktiva ingrediensen i huvudläkemedlet, som indikatorer, fortsatte att använda den traditionella vattenavkoksprocessen och använde den ortogonala testmetoden L9 (34) för att optimera mängden tillsatt vatten , avkokstid och avkokningstider i extraktionsprocessen för att erhålla den bästa extraktionsprocessen. Samtidigt undersöktes granulatformningsprocessen för att fastställa en stabil och rimlig formningsprocess, vilket gav en referens för pilotproduktion, kvalitetskontroll och klinisk tillämpning av preparatet [7-8].

1 Instrument och reagens

1.1 Instrument

Alliansen e2695högpresterande vätskekromatograf, 2998 diode array detector (Waters, USA), ES225SMDR 1/100,000 analytisk balans (Precisa, Schweiz), UPT-11-10T ultrarent vattenmaskin (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dubbelfrekvens CNC ultraljudsrengörare (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Provläkemedel

Vin Cistanche skivor(batchnummer: 2322050113, tillverkad i Inre Mongoliet), kanelskivor (batchnummer: 2323020103, tillverkad i Guangxi), astragalusskivor (batchnummer: 2323020105, producerad i Gansu), Atractylodes macrocephala-skiva: 1023020102, producerad i ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., alla skivor har identifierats som autentiska av Chen Shuhe, chefsapotekare vid Institute ofTraditionell kinesisk medicinvid Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine och är kvalificerade enligt 2020 års upplaga avkinesiska Farmakopédel I). Echinakosid referensämne(batchnummer: 111670-201907, renhet: 91,8 %, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrin (batchnummer: 230102), majsstärkelse (batchnummer: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sackaros (batchnummer: TF28221205), mikrokristallin cellulosa (batchnummer: TF471211001), batchnummer: lactose (batchnummer: lactose) TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metoder och resultat

2.1 Bestämning av echinakosidhalt

2.1.1 Kromatografiska förhållanden: Agilent 5 TC-C18 (250 nm×4,6 mm, 5 μm) användes som den kromatografiska kolonnen; metanol användes som den mobila fasen A, 0,1% myrsyralösning användes som den mobila fasen B, gradienteluering (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 min,

29,5 %A, 54-55 min, 29,5 % → 26,5 %A; 55-60min, 26,5 %A); flödeshastighet 1.0 mL·min-1; kolonntemperatur 30 grader; diod array detektor, detekteringsvåglängd 330 nm; injektionsvolym 10μL; teoretiskt plåtnummer beräknat baserat på echinacoside-toppen bör inte vara mindre än 3000[9].

2.1.2 Beredning av referenslösning

Ta en lämplig mängd echinakosid, väg noggrant 9,65 mg, placera den i en 25 ml mätkolv, tillsätt 50 %

metanol för att lösas upp och späds till märket som referensstamlösning. Pipettera noggrant 1 ml echinakosid-stamlösning i en 25 ml mätkolv, tillsätt 50 % metanol för att späda till märket, skaka väl och förbered en referenslösning innehållande 14,17 ug per 1 ml [9].

2.1.3 Beredning av testlösning

Ta ungefär 0,5 g torrt pastapulver, mal det till pulver, väg det noggrant, lägg det i en brun propp konisk flaska, tillsätt 50 ml 50 % metanol noggrant, sätt till ordentligt, skaka det väl, väg den, ultraljudsbehandla den i 40 minuter (effekt 250 W, frekvens 45 kHz), låt den svalna, väg den igen, tillsätt 50 % metanol för att kompensera den förlorade vikten, skaka den väl, låt den stå, ta supernatanten, filtrera det och ta filtratet.

2.1.4 Beredning av negativ provlösning

Ta cirka 0,5 g av det torra pastapulvret med formeln utan vin Cistanche-läkemedel och förbered den negativa provlösningen enligt metoden under "2.1.3".

2.1.5 Specificitetstest

Pipettera testlösningen, referenslösningen och den negativa provlösningen exakt och mät enligt de kromatografiska förhållandena under "2.1.1". Spela in kromatogrammet. Resultaten visas i figur 1. Det finns ingen interferens med det negativa provet. Resultaten visar att metoden har god specificitet.

Fig 1 Specifikt kromatogram av Wenyang Tongbian-granulat

2.1.6 Linjär sambandsundersökning

Ta en lämplig mängd echinakosid, väg den noggrant till 10,11 mg, lägg den i en 25 ml mätkolv, tillsätt 50 % metanol för att späda ut den i en serie koncentrationer av referenslösning och injicera den enligt de kromatografiska förhållandena under "2.1 .1" för att bestämma toppareavärdet för echinakosid. Rita en standardkurva, med injektionsmängden av echinakosidreferens som den horisontella axeln (ug, X) och toppareans integralvärde som den vertikala axeln (Y), och utför linjär regression.

Regressionsekvationen är Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Resultaten visar att toppareans integralvärde för echinakosidinjektionsmängden är i ett bra linjärt förhållande mellan 1,4850 och 371,2392 ug.

2.1.7 Precisionstest

Aspirera noggrant 10 μL av referenslösningen (masskoncentration på 37,12 ug·mL－ 1) under "2.1.6", injicera 6 gånger, registrera toppareavärdet för respektive echinakosid och beräkna RSD-värdet till 1,1 %, vilket indikerar att instrumentet har bra precision.

2.1.8 Repeterbarhetstest

Ta samma torra pasta, mal den till pulver, väg noggrant 6 portioner, som var och en är cirka 0,5 g, och placera dem i en konisk flaska med brun propp. Extrahera enligt metoden under "2.1.3", bestäm innehållet och beräkna. Resultaten visar att den genomsnittliga halten av echinakosid i provet är 1,46 mg·g–1, och RSD-värdet är 2,7 %, vilket indikerar att denna metods repeterbarhet är god.

2.1.9 Stabilitetstest

Ta samma provlösning, dra noggrant 10 μL och injicera den inom 0, 2, 4, 8, 12, 18 respektive 24 timmar. RSD-värdet för topparean är 0,71 %, vilket indikerar att provlösningen har god stabilitet inom 24 timmar.

2.1.10 Provåterställningstest

Väg noggrant 6 portioner av samma sats av testprover, 0,24 g vardera, och placera dem i en konisk flaska med brun propp. Enligt massförhållandet 1:1 av komponenterna i testprovet, tillsätt noggrant 0,9 mL av echinakosid-referensämnet (masskoncentrationen är 371,24 ug·mL－ 1) under "2.1.6", förbered testlösningen enligt metoden under "2.1.3", bestäm den kromatografiska topparean för echinakosid och beräkna innehållet. Resultaten visar att den genomsnittliga återhämtningsgraden för echinakosid är 101,09 % och RSD-värdet är 1,6 %.

2.2 Experimentplan och utvärderingsindikatorer

Mängden tillsatt vatten (A), extraktionstid (B) och antal extraktioner (D) valdes ut som faktorer som skulle undersökas. Tre faktornivåer sattes enligt resultaten från den tidigare enfaktorutredningen, se tabell 1. Den ortogonala testtabellen L9 (34) användes i experimentet, se tabell 2. Testet använde pastautbytet och innehållet av echinakosid som utvärderingsindikatorer för att undersöka den optimala vattenutvinningsprocessen.

Tab 1 Faktor och nivå för det ortogonala testet

2.2.1 Ortogonalt test

Väg enligt receptförhållandet 18 portioner av varje medicinsk smak, 55 g vardera, och utför vattenavkoksextraktion enligt det ortogonala designschemat i Tabell 2. Varje grupp har 2 parallella portioner. Avkoket filtreras genom en 80-nätsikt, filtratet kombineras, kyls, avkoksvolymen mäts, 50 mL pipetteras noggrant i en avdunstningsskål som har vägts konstant, indunstat till torrhet och torkas under reducerat tryck vid 60 grader för att erhålla den ortogonala experimentella torrpastan. Beräkna pastautbytet (pastautbyte=(torr pastavikt × läkemedelsvätskevolym) / (50 × dekokt styckevikt) × 100 %). Enligt de kromatografiska förhållandena under "2.1.1" och metoden under "2.1.3" bestämdes extraktionsmängden av echinakosid i de 9 grupperna av ortogonala testextrakt respektive. Echinakosidextraktionsmängd=torr pastavikt × echinakosidinnehåll/vin Cistanche-avkok styckevikt. Omfattande poäng=echinacoside-innehåll ÷ maximalt innehåll × 0,5 × 100 % + pastautbyte ÷ maximalt pastautbyte × 0,5 × 100 % [10]. Resultaten visas i tabell 2.

Som visas i tabell 3, med pastautbytet och echinakosidinnehållet omfattande poäng som utvärderingsindikatorer, visar intervallet R-värdet i tabellen att de primära och sekundära effekterna av varje faktor är D > B > A; variansanalysresultaten visar att D-faktorn (avkokningstider) är statistiskt signifikant (P < 0.05), och D3-nivån är vald; A-faktorn (vattentillsats) och B-faktorn (avkokstid) är inte statistiskt signifikanta (P > 0,05). Med tanke på att vattenabsorptionshastigheten för de medicinska materialen i denna beredning är relativt hög (155 %), och i kombination med faktorer som faktiska produktionsbehov, väljs de optimala extraktionsförhållandena som A2B1D3, det vill säga att tillsätta 10 gånger vatten, avkoka 3 gånger, varje gång i 1 timme.