Den aktiva beståndsdelen i Cistanche: Echinacoside på antiinflammatorisk hämning och neuroprotektiv effekt

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com

Echinacoside, en Aktiva Konstituerande av Cistanche Herba, Utövar a Neuroskyddande Effekt i a Kainic Syra Råtta Modell förbi HämmandeInflammatorisk Processer och Aktiverar de Akt/GSK3 Väg

Cheng Wei Lu,a,b Hsi Lung Hsieh,c,d Tzu Yu Lin,a,b Ting Yang Hsieh,e Shu Kuei Huang,a och Su Jane Wang^*,f,g

Echinacosideär en huvudförening av Cistanche Herb och har glutamatfrisättningshämmande aktivitet i hjärnan. Med tanke på involveringen av excitotoxicitet orsakad av massivt glutamat i patofysiologin för epilepsi, undersökte vi den antiepileptiska effekten av echinakosid på kaininsyra-inducerade anfall hos råttor. Råttorna har administrerats intraperitonealtechinakosidunder 30 minuter före intraperitoneal injektion med kaininsyra. Resultaten visade att kaininsyra-inducerade anfallsliknande beteendemönster, ökade glutamatkoncentrationer, orsakade neuronal förlust och mikroglialaktivering och stimulerade proinflammatoriskt cytokingenuttryck i hippocampus. Dessa kaininsyra-inducerade växlingar visade sig vara försvagade avechinakosidförbehandling. Dessutom reverserades minskad Akt- och glykogensyntaskinas 3 (GSK3)-fosforylering, såväl som Bcl-2-uttryck i hippocampus, av echinakosidförbehandlingen. Dessa resultat visar att echinakosid utövar sina antiepileptiska och neuroprotektiva effekter i en kainsyraråttmodell genom att undertrycka inflammatoriskt svar och aktivera Akt/GSK3-signaleringen. Därför tyder den aktuella studien på att echinakosid är potentiellt användbar för att förebygga epilepsi.

Nyckelord:echinakosid; kainsyra; epilepsi; neuroprotektiv effekt; hippocampus

Echinacoside i cistanche

Epilepsi är en utbredd hjärnsjukdom över hela världen. Det påverkar mer än 65 miljoner människor, nästan 1 procent av världens befolkning.1) Syntetiska antiepileptika är allmänt tillgängliga på läkemedelsmarknaden; dessa läkemedel är dock bara effektiva hos 60–70 procent av patienterna och har negativa biverkningar.2–4) Det finns alltså ett otillfredsställt behov av att söka efter ett läkemedel som är mer effektivt och säkrare. Medicinalväxter utgör en potentiell källa till sådana föreningar.^5,6)

Inom traditionell kinesisk örtmedicin har Cistanche Herba länge använts för behandling av epilepsi.7,8)Echinacosideär en viktig komponent i Cistanche Herba9) och har många farmakologiska egenskaper, såsom antioxidant, antiinflammatorisk, antineoplastisk, leverskyddande och immunmodulerande aktivitet.10,11) Dessutom har det rapporterats attechinakosidkan komma in i hjärnan och framkalla neuroprotektion.12–16) Vi har tidigare visat att echinakosid minskar glutamatfrisättning i cerebrokortikala nervterminaler hos råtta.17) Eftersom glutamat är en viktig excitatorisk signalsubstans i däggdjurshjärnan och spelar en avgörande roll i epilepsis patofysiologi, 18,19) föreslog vi att echinakosid har antiepileptisk aktivitet. För att belysa denna hypotes användes en kainsyraråttmodell i denna studie.

Kaininsyra är ett glutamatderivat och dess enda systemiska injektion till gnagare resulterar i anfall, neuroinflammation och neuronal degeneration eller död på den selektiva populationen av neuroner i hjärnan.20–22) Dessa patologiska växlingar liknar human temporallobsepilepsi. ,24) Administrering av kaininsyra till gnagare anses allmänt inducera en adekvat modell av epilepsi. Hittills har ingen studie undersökt de antiepileptiska och neuroprotektiva egenskaperna hosechinakosidi en kaininsyra-injicerad djurmodell. Därför syftar vår studie till att utvärdera effekten och dess möjliga mekanism avechinakosidföradministrering hos kaininsyrabehandlade råttor.

MATERIAL OCH METODER

Djur och beslagsaktivitet

Sprague-Dawley-hanråttor (BioLASCO, Taipei, Taiwan) som vägde 150–200 g användes under hela studien. Råttorna fördelades slumpmässigt till fyra grupper enligt följande: i) Grupp 1: dimetylsulfoxidbehandlad grupp (kontroll); ii) Grupp 2: kainsyrabehandlad grupp; iii) Grupp 3:echinakosid10 mg/kg plus kaininsyragrupp; iv) Grupp 4:echinakosid50 mg/kg plus kaininsyragrupp. Echinakosid (ChemFaces, Wuhan, Kina) injicerades (intraperitoneal administrering) 30 minuter före kaininsyra (15 mg/kg) intraperitoneal injektion. Anfallsaktiviteten bedömdes under en 4 timmars period efter kaininsyrainjektion enligt Racines skala.25) Dosen och administreringsschemat valdes på basis av tidigare studier.22,26,27) Försöken på djur godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee vid Fu Jen Catholic University och utförs i enlighet med de utfärdade protokollen, som följde National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory (NAC 2011).

Bestämning av glutamatnivåer

Fyra timmar efter kaininsyrabehandlingen avlivades råttorna genom halshuggning. Hela hjärnan dissekerades och hippocampus från varje råtta samlades in för analys. Glutamatkoncentrationen i hjärnans hippocampusvävnad bestämdes enligt de metoder som beskrivits av tidigare studier.28,29)

Neutral Red och Fluoro-Jade B färgning

Tre dagar efter kaininsyrainjektionen bedövades råttorna med användning av kloralhydrat (65 0 mg/kg) och perfuserades transkardialt med en fixativ lösning innehållande 4 procent paraformaldehyd i 0,1 M fosfatbuffertlösning (PBS, pH 7,4). Hjärnor togs bort omedelbart efter perfusion och lagrades i 4 procent paraformaldehyd över natten vid 4 grader. Efter efterfixering nedsänktes hjärnorna med 30 procent sackaros vid 4 grader i 24 timmar. Proverna frystes snabbt och 30-µm tjocka sektioner skars med hjälp av en frusen mikrotom. Fritt flytande sektioner färgades med neutralt rött (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) och Fluoro-Jade B (Millipore, CA, USA). Fluoro-Jade B-positiva celler i CA3-regionen av hippocampus bestämdes som tidigare beskrivits.^30,31)

Immunhistokemi

Sektionerna tvättades med {{0}},1 M PBS och blockerades med 0,5 procent normalt getserum i {{20}},1 M PBS under 1 timme vid rumstemperatur. Primär antikropp (mus monoklonal anti-OX-42 antikropp, 1:1000; AbD Serotec, Oxford, UK) inkubation utfördes två över natten vid 4 grader. Efter upprepade tvättar med PBS inkuberades sektionerna med biotinylerat anti-mus-immunoglobulin G (IgG) (1:200) under 90 minuter, behandlades med lösningen avidin-biotinkomplex (ABC) (1:1000) i 1 timme i rummet temperatur, och reagerade med 0,025 procent 3,3'-diaminobensidin och 0,0025 procent H2O2 tills den önskade färgningsintensiteten uppnåddes. Sektioner monterades på objektglas med användning av standardprotokoll. De färgade objektglasen undersöktes och avbildades under ett mikroskop (Olympus, Tokyo, Japan).31) Analys av en mikrogliacellskropp och processlängd utfördes med ImageJ.³²)

Transmissionselektronmikroskopi Transmissionselektronmikroskopi

utfördes som tidigare beskrivits.33) Kortfattat togs CA3-regionen av hippocampus bort och fixerades i en buffert innehållande 4 procent paraformaldehyd och 2,5 procent glutaraldehyd vid 4 grader i 24–36 timmar. Efter tvättar med PBS efterfixerades CA3-regioner i 1 procent osmiumtetroxid i 2 timmar, dehydrerades med etanol och bäddades in i epoxiharts. Ultratunna sektioner (70 nm) preparerades med användning av en ultramikrotom (EM UC7, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland). Sektionerna färgades med uranylacetat och blycitrat och observerades genom transmissionselektronmikroskopi (Model JEM-1400, JEOL Ltd., Tokyo, Japan).

Kvantitativ realtids-PCR

RNA-extraktion och kvantitativ PCR i realtid utfördes som tidigare beskrivits.34,35) Totalt RNA extraherades från hippocampus med hjälp av mirVana™ miRNA Isolation Kit (Life Technologies, Grand Island, NY, USA) enligt tillverkarens protokoll. Genomiskt DNA avlägsnades genom inkubation med deoxiribonukleas (DNas) I. cDNA:t syntetiserades av (NoScript omvänd transkriptionssystem kit; Promega, Madison, WI, USA) och användes för SYBR Green (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland) kvantitativa real- tids-PCR-amplifiering med specifika primrar med LightCycler 480-systemet (Roche Diagnostics). Protokollet bestod av ett initialt denatureringssteg vid 95 grader i 3 minuter, följt av 45 cykler av denaturering vid 95 grader i 10 s, glödgning vid 56 grader i 30 s. mRNA-nivåerna för varje målgen normaliserades till den för glyceraldehyd-3-fosfatdehydrogenas (GAPDH) mRNA. Vikningsinduktion beräknades med 2−ΔΔCT-metoden som beskrivits i en tidigare studie.³⁴)

Immunblotting

Tjugo mikrogram proteinextrakt från hippocampi separerades med 10 procent natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE) följt av elektroforetisk överföring till polyvinylidendifluorid (PVDF)-membran. Membranet blockerades med 5 procent skummjölk i 1 timme vid rumstemperatur och inkuberades med lämpliga antikroppar i 1 procent skummjölk över natten vid 4 grader, följt av inkubation med en sekundär antikropp i 1 timme. Primära antikroppar var monoklonala kaninantikroppar riktade mot Akt (1: 2000), pAktSer473 (1: 2000), glykogensyntaskinas 3 (GSK3) (1: 2000), pGSK3 Ser9 (1: 500), Bcl-2 1: 1000) och -aktin (1: 2000) erhållet från Cell Signaling Technology (MA, USA). Den sekundära peroxidaskonjugerade get-anti-kanin-antikroppen (1:5000) erhölls från Santa Cruz (CA, USA). Banden visualiserades med förbättrad kemiluminescens (Amersham, Buckinghamshire, Storbritannien) med användning av ett gelbildanalyssystem. Intensiteten för varje band mättes med användning av Syngene-mjukvaran (Synop tics, Cambridge, Storbritannien).

Statistisk analys

Data presenteras som medelvärdet ± standardfel för medelvärdet (SEM). Statistisk analys utfördes av det tvåsidiga Student's t-testet när man jämförde två grupper och genom envägs ANOVA med Tukeys multipla jämförelser post hoc-test när man jämförde fler än två grupper. Analysen slutfördes med SPSS-programvara (version 17.0; SPSS Inc., Chicago, IL, USA). sid<0.05 was="" considered="" statistically="">

RESULTAT

Effekt av Echinacoside på Kainic Acid-inducerade anfall och höjning av Hippocampus glutamatnivåer

För att utvärdera den neuroprotektiva effekten avechinakosidmot kaininsyra-inducerad excitotoxicitet förbehandlades råttor medechinakosid(5, 10 och 50 mg/kg, intraperitoneal administrering) i 30 minuter före intraperitoneal injektion av kaininsyra (15 mg/kg). Kaininsyra (15 mg/kg) intraperitoneal injektion resulterade i anfall med latens och poäng på 92,5 ± 5,3 min respektive 4,9 ± 0,1 (fig. lA, B). En signifikant ökning av anfallslatens[F(2, 43)=40.2, p<0.01; fig.="" 1a]="" and="" a="" significant="" decrease="" in="" seizure="" score="" [f(2,="" 40)="21.5,"><0.001; fig.="" 1b]="" were="" observed="" in="" echinacoside="" (10="" or="" 50="" mg/kg)-pretreated="" rats.="" however,="" echinacoside="" at="" 5="" mg/kg="" had="" no="" significant="" effect="" on="" seizure="" latency="" and="" score="" (p="">0.05; FIG. lA, B). Med tanke på den robusta dämpningen av anfallsaktivitet som sågs med 10 eller 50 mg/kg echinakosid, användes dessa två doser av echinakosid i efterföljande experiment för att utvärdera de mekanismer som ligger till grund för förmågan hos echinakosid att hämma kaininsyra-inducerade anfall. Figur 1C visar att förhöjning av hippocampus glutamatnivåer noterades hos kaininsyrabehandlade råttor vid 4 timmar jämfört med den dimetylsulfoxidbehandlade gruppen (kontroll; p<0.001). however,="" decreased="" hippocampal="" glutamate="" levels="" were="" obtained="" in="" the="" echinacoside="" group="" (10="" or="" 50="" mg/kg)="" [f(3,="" 16)="6.1,"><0.01; fig.="">

Effekt av Echinacoside på Kainic Acid-inducerad neuronskada i CA3-regionen av Hippocampus

Graden av neuronal skada utvärderades 3 dagar efter kaininsyrainjektion genom neutral röd färgning eller Fluoro-Jade B för att detektera överlevande neuroner respektive degenererande neuroner. Neutral röd färgning avslöjade en uppenbar neuronförlust i CA3 hos kaininsyrainjicerade råttor, jämfört med dimetylsulfoxidbehandlade råttor (kontroll; p<0.001; figs.="" 2a,="" c).="" however,="">echinakosidförbehandling (10 eller 50 mg/kg) reducerade effektivt kaininsyra-inducerad neuronförlust i CA3 [F(2, 13)=11.6, p.<0.001; figs.="" 2a,="" c].="" similarly,="">echinakosid-behandlade djur uppvisade en minskad Fluoro-Jade B FL-fluorescens i CA3-regionerna i hippocampus efter kaininsyrainjektion (s.<0.001), compared="" with="" the="" strong="" damage="" observed="" in="" kainic="" acid-injected="" rats="" [f(2,="" 24)="6.9,"><0.001; figs.="" 2b,="" d].="" in="" addition,="" transmission="" electron="" microscopy="" shows="" that="" neuronal="" injury="" in="" ca3="" was="" not="" obvious="" in="" the="" dimethylsulfoxide-treated="" (control)="" group.="" however,="" in="" the="" kainic="" acid-treated="" group,="" nerve="" cells="" had="" ultrastructural="" changes.="" nerve="" cells="" exhibited="" autophagosome="" formations,="" deformed="" nuclei="" with="" the="" condensed,="" and="" disruptive="" cell="" plasma="" membrane.="" in="" contrast,="" the="" neuronal="" injury="" in="" the="" echinacoside-pretreated="" group="" was="" apparently="" attenuated="" compared="" with="" the="" kainic="" acid-injected="" rats="" (fig.="">

Effekt av Echinacoside på Kainic Acid-inducerad mikroglia-aktivering och genuttryck av proinflammatorisk

Cytokiner i Hippocampus I modellen för kainsyrainducerade anfall och hippocampus neuronal död ökas mikroglialaktivering och proinflammatorisk cytokinproduktion i hippocampus.36,37) För att undersöka om huruvidaechinakosidpåverkat inflammatoriskt svar i hippocampus hos kaininsyra-injicerade råttor, mikroglia-aktivering analyserades med användning av anti-OX42-antikroppen. Hos dimetylsulfoxidbehandlade råttor (kontrollgrupp) var mikrogliacellkropparna i CA3-regionerna små och deras processer var långa och tunna (Fig. 4A). Antalet aktiverade mikrogliaceller i CA3-området hos KA-injicerade råttor ökade dock signifikant, mikrogliacellkropparna förstorades (p<0.01; figs.="" 4a,="" b),="" and="" their="" cellular="" processes="" became="" shorter="" and="" thicker=""><0.001; figs.="" 4a,="" c).="" in="" the="" animals="" pretreated="" with="">echinakosid(10 eller 50 mg/kg) förbehandlade råttor, antalet aktiverade mikrogliaceller minskade signifikant och mikrogliacellkropparna var tunna [F(2, 13)=6.2, p<0.01; fig.="" 4b]="" and="" their="" cytoplasmic="" processes="" were="" ramified="" [f(2,="" 28)="47.5,"><0.001; fig.="" 4c].="" in="" addition,="" the="" expression="" levels="" of="" interleukin-1β,="" interleukin-6,="" and="" tumor="" necrosis="" factor-α="" mrna="" in="" the="" hippocampus="" were="" apparently="" elevated="" at="" 1="" d="" after="" kainic="" acid="" injection,="" compared="" to="" dimethylsulfoxideinjected="" animals="" (control)=""><0.001). however,="" decreased="" mrna="" levels="" for="" these="" pro-inflammatory="" cytokines="" were="" obtained="" in="" the="" echinacoside="" group="" [interleukin-1β,="" f(3,="" 18)="154.7,"><0.001; interleukin-6,="" f(3,="" 17)="17.9,"><0.001; tumor="" necrosis="" factor-α,="" f(3,="" 16)="31.1,"><0.001; figs.="">

Effekt av Echinacoside på Kainic Acid-inducerad minskning av nivåerna av Hippocampal Phospho-Akt, Phospho-Glycogen Synthase Kinase 3 och Bcl-2

Nivåerna av fosforylerad Akt (pAkt) (Ser473), fosforylerad GSK3 (pGSK3) (Ser9) och Bcl-2 analyserades i hippocampus (fig. 6). En avsevärd sänkning av uttrycket pAkt, pGSK-3 och Bcl-2 i hippocampus observerades hos kaininsyrabehandlade råttor vid 4 timmar jämfört med dimetylsulfoxidbehandlade råttor (kontroll) (p<0.001). however,="" pretreatment="" with="">echinakosid(10 eller 50 mg/kg) ökade signifikant nivåerna av pAkt, pGSK3 och Bcl-2 jämfört med enbart kaininsyrabehandling [pAkt, F(3, 19)=69.5, p<0.001; pgsk3β,="" f(3,="" 17)="60.3,"><0.001; bcl-2,="" f(3,="" 18)="26.1,"><0.001; figs.="">

DISKUSSION

Bevis visade att glutamat spelar en avgörande roll i epilepsis patofysiologi.^17,18) Den glutamaterga hypotesen om epilepsi tyder på att den epileptogena processen är relaterad till en ökad glutamatkoncentration i hjärnan och en minskning av koncentrationen av denna neurotransmittor kan ge antiepileptisk verkan.^38–40) Studie från vårt laboratorium visade detechinakosidkan minska glutamatfrisättningen från nervterminalerna och antydde att echinakosid sannolikt har en antiepileptisk effekt.17) Detta förslag bekräftades i den aktuella studien med en kaininsyrainjicerad råttmodell. Kaininsyra, ett glutamatderivat, används i stor utsträckning för att framkalla epilepsi i djurstudier eftersom dess neuropatologiska och biokemiska egenskaper liknar dem hos människor.^23,24)

Intraperitoneal injektion av kaininsyra i råttor orsakar anfall och neuronal skada, särskilt i CA3-regionerna i hippocampus.^41–43Dessutom är dessa patologiska växlingar producerade av kaininsyra relaterade till den massiva frisättningen av glutamat.^41,44,45) I överensstämmelse med dessa fynd observerade vi att intraperitoneal administrering av kaininsyra (15 mg/kg) inducerade anfallsbeteende, ökade glutamatnivåer i hippocampus och orsakade pyramidal cellförlust i hippocampus CA3-regionen. Dessa kainsyra-inducerade patologiska växlingar försvagades genom intraperitoneal förbehandling medechinakosid(10 eller 50 mg/kg). Dessutom lindrades den hippocampus CA3 nervcellsskadan utvärderad genom ultrastrukturell alternering med transmissionselektronmikroskopi avechinakosidhos kainsyraråttorna. Dessutom observerades ett ökat antal autofagosomer i CA3-celler efter administrering av kaininsyra. Förbehandling med echinakosid undertryckte den ökade bildningen av autofagosomer. Tidigare studier har föreslagit att autofagiaktivering är involverad i kaininsyra-inducerad neuronal död och hämning av autofagiprocessen verkar vara neuroprotektiv.^46,47) Även om mekanismen bakom den antiepileptiska effekten avechinakosidkräver ytterligare utforskning, kan den neuroprotektiva effekten av echinacoside i kaininsyra-djurmodellen ha resulterat från antiepileptisk aktivitet genom hämning av glutamatexitotoxicitet och autofagiaktivering.

Neuroinflammation bidrar avsevärt till fördröjd hjärnskada efter akut skada och utövar en skadlig effekt på ett neurologiskt utfall.²⁷) Inflammatoriska svar, såsom mikrogliaaktivering och inflammatorisk cytokinproduktion, har beskrivits i human epilepsi och i experimentella modeller av epilepsi.^36,48Dessutom främjar frisättningen av dessa pro-inflammatoriska cytokiner från de aktiverade mikrogliacellerna kaininsyra-inducerad neuronskada i hippocampus.^36,37) Vi visade att även om kaininsyra ökade aktiveringen av mikroglia och genuttryck av proinflammatoriska cytokiner (interleukin-1, interleukin-6 och tumörnekrosfaktor-) i hippocampus, undertrycktes dessa effekter avechinakosidförbehandling. Därför föreslår vi detechinakosidgenom att undertrycka inflammatoriska processer kan bidra till dess antiepileptiska och neuroprotektiva effekter i kaininsyra-djurmodellen. Som redan observerats av våra tidigare studier utövar flera läkemedel och naturliga produkter också antiepileptiska effekter och neuroprotektion mot kaininsyra-inducerade anfall, genom sin antiinflammatoriska effekt.^31,33,35)

Många proteinkinassignaleringskaskader är kända för att aktiveras av kaininsyra som spelar en viktig roll i neuroskydd. Bland dem som synes ha särskilt betydande deltagande märks Akt.^49,50,) Akt förmedlar dess neuroprotektiva effekter genom att aktivera olika nedströmssubstrat, inklusive GSK-3 och Bcl-2. Akt fosforylerar GSK-3 vid Ser9, vilket leder till dess inaktivering och förstärkning av neuronal cellöverlevnad51), eftersom den aktiva formen av GSK-3 aktiverar mitokondriernas dödsväg.^52,53) Bcl-2 är en nyckelmedlem i den anti-apoptotiska Bcl-2-familjen och spelar en nyckelroll för att undertrycka mitokondriemedierad apoptotisk celldöd. Till exempel kan Bcl-2 skydda det mitokondriella membranets integritet och blockera cytokrom C-frisättning från mitokondrier, vilket leder till cellöverlevnad och hämning av apoptos.⁵⁴) Det har också rapporterats att överuttrycket av Bcl-2 skyddar neuroner mot excitotoxiska förolämpningar in vitro och in vivo. 54,55) Den föreliggande studien observerade en minskad Akt (Ser473) och GSK3 (Ser9) fosforylering såväl som Bcl-2 uttryck i hippocampus hos råttor efter exponering för kaininsyra, vilket är i enlighet med tidigare studier.^56,57) Vidare räddade echinakosidförbehandling kaininsyrainducerad minskning av pAkt och pGSK3 såväl som Bcl-2-uttryck. Således, de neuroprotektiva effekterna avechinakosidi kaininsyra-djurmodellen kan delvis förmedlas genom att förhindra nedreglering av Akt/GSK-3 /Bcl-2-vägen, vilket ökar neuronernas överlevnad.

Echinacosideär en potentiell ny terapeutisk kandidat. Det här är för attechinakosidkan komma in i hjärnan och uppvisar många fördelar.⁵⁸) Många studier har visat detechinakosiddämpar hjärnskador och lindrar motorisk eller minnesnedsättning i flera experimentella modeller in vivo.^12,14,15,59) Även om de mekanismer som ligger till grund för de neuroprotektiva effekterna avechinakosidi hjärnan kräver förklaring, inhiberad neuroinflammation, antioxidation, syrefri radikal rensning och ökad neurogenes har varit inblandade.^14–16) Förutom dessa möjliga mekanismer, vår tidigare¹⁷) och nuvarande resultat tyder på att hämningen av glutamatmedierad överexcitation delvis kan bidra till de neuroprotektiva och antiepileptiska effekterna avechinakosidi hjärnan. Detta stöds av det faktum att kaininsyra-inducerad anfallsaktivitet, neuroinflammation och hjärnskada är associerade med överdriven frisättning av glutamat och aktivering av glutamatreceptorer.^44,45) Dessutom har flera kliniskt använda antiepileptika visat sig dämpa anfallsaktiviteten inducerad av kaininsyra60,61) och minska glutamatfrisättningen i hjärnvävnader hos människor och råttor.^62,63) Dessa fynd påpekade att reducerade glutamatnivåer är viktiga för farmakoterapeutiska effekter av antiepileptika.

Sammanfattningsvis visar våra resultat detechinakosid, genom att undertrycka inflammatoriska processer, minska glutamatmedierad överexcitation, samt ökande Akt/GSK-3-aktivering och Bcl-2-uttryck, har en signifikant antiepileptisk och neuroprotektiv effekt i kaininsyrainjicerade råttor. Även om rollen somechinakosidpå patienter med epilepsi kräver ytterligare utvärdering, våra resultat tyder på att det kan vara ett värdefullt tillvägagångssätt i epilepsiterapi.

Erkännanden

Författarna vill tacka Yen-Sheng Wu från elektronmikroskoplaboratoriet vid Tzong Jwo Jang, College of Medicine, Fu Jen Catholic University. Detta arbete stöddes av ministeriet för vetenskap och teknik (MOST 103-2320-B-030-001 MY3).

Intressekonflikt

Författarna förklarar ingen intressekonflikt.