Studien av den neuroprotektiva mekanismen för Cistanche och Fomitopsis Pinicola på mesencephalon dopaminerga neuroner inducerade av MPP plus

Studien om den neuroprotektiva mekanismen av Cistanche och Fomitopsis Pinicola på mesencephala dopaminerga neuroner inducerade av MPP plus

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Höjdpunkter

Fomitopsis Pinicola kännetecknas av antioxidant, antiinflammation och immunstimulerande egenskaper. I den föreliggande studien användes primära dopaminerga cellkulturer framställda från embryonala mus-mesencefala för att bestämmaneuroprotektivaeffekter och de potentiella mekanismerna för vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på degenerationen av dopaminerga neuroner inducerad av MPP plus. Resultaten visade att vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola skyddade dopaminneuroner mot MPP plus. Vattenextraktet av Fomitopsis Pinicola visade antioxidant och antiinflammatoriska aktiviteter. Mekanismen förneuroprotektivaEffekten av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola kan vara relaterad till hämmande på mitokondriell oxidativ stress. Nyligen genomförda studier har visat attneuroprotektivaeffekten avCistanchegör det till en "idealisk kandidat" för att förbättra neurologiska sjukdomar.Cistancheär rik på echinacosider. Utdraget avcistanchehar visat sig inducera nervtillväxtfaktorsyntes in vivo och in vitro-experiment, främja utsöndringen av relaterade faktorer i hjärnan och förbättra en rad hjärnfunktioner relaterade till minne.

Cistancheharneuroprotektivaeffekter

Abstrakt

Mål: Att observeraneuroprotektivamekanism för vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på MPP'inducerad apoptos av mesencefaliska dopaminerga celler in vitro. Metoder: Antioxidantaktiviteten hos svampar bestämdes med FRAP-metoden. Den antiinflammatoriska aktiviteten hos svamparna detekterades med LPS-inducerad NO-frisättningsmetod. Mesencefalisk dopaminergneuronermärktes med TH-färgning för att observera överlevnaden av THirneuronerResultat: I analysen av antioxidantaktivitet bestämdes Trolox-ekvivalent antioxidantkapacitet (TEAC) för vattenextrakt från Fomitonsis Pinicola till (165,80±7,13) umol Trolox/g extrakt Vattenextrakt från Fomitopsis Pimicola-behandling (100,50,25) 12,5 ug/ml) minskade NO-bildningen signifikant. MPP* inducerade signifikant kromatinkondensation i kärnorna av mesencefalisk dopaminerganeuronermed nukleär lysering minskade mitokondriernas membranpotential anmärkningsvärt och ROS-produktionen ökade signifikant. Jämfört med MPPt-kontrollgruppen, reverserades de morfologiska förändringarna av cellkärnor efter apoptos med vattenextrakt av Fomtitonsis Pinicola. Vattenextrakt från Fomitopsis Pinicola-behandling (50,25,12,5 ug/ml) ökade dramatiskt den relativa mitokondriella membranpotentialen jämfört med respektive MPP'kontroll. Jämfört med MPPt-kontrollen minskade vattenextrakt av Fomitonsis Pimicola-behandling (50, 25 ug/ml) signifikant relativ ROS-bildning respektive, slutsatser∶Vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola visade en signifikantneuroprotektivaeffekt på mesencefaliska dopaminerga celler inducerade av MPpt. Vattenextraktet av Fomitopsis Pinicola visade antioxidant och antiinflammatoriska aktiviteter. Mekanismen förneuroprotektivaEffekten av vattenextrakt av Fomitopsis Pimicola kan vara relaterad till hämmande på mitokondriell oxidativ stress.Cistancheglykosider kan förbättra inlärnings- och minnesnivån hos patienter med Alzheimers sjukdom, minska halten malondialdehyd (MDA) i hjärnvävnad och öka glutationperoxidas (GSH). -Px), superoxiddismutas (superoxiddismutas, SOD) aktivitet, minska acetylkolinesteras (acetylkolinesteras, TChE) aktivitet, hjärncells apoptoshastighet och minska kalciumackumulering i hjärnvävnad.

Nyckelord: Fomitopsis Pimicola, dopaminergneuronerapoptos, antioxidant, mitokondriell membranpotential, ROS-bildning,Cistanche, Neuroskyddande

Bakgrund

Parkinsons sjukdomär en neurodegenerativ sjukdom hos människor som allvarligt påverkar hälsan hos mer än 6,5 miljoner människor världen över. Prevalensen av äldre över 65 år är cirka 1 2 procent [1, 2]. Även om den exakta etiologin och patogenesen avParkinsons sjukdomförblir oklart, oxidativ stress har visat sig vara en nyckelfaktor i den selektiva degenereringen av dopaminerganeuroneri nigrostriatum striatum [3, 4]. Studier har visat att överdriven produktion av reaktiva syrearter (ROS) inducerar mitokondriell dysfunktion, inklusive minskad mitokondriell membranpotential (△Ψm) och aktiviteten hos respiratoriska kedjekomplexenzymer Ⅰ, såväl som onormalt mitokondrie-DNA [5, 6]. Dessutom kan känsligheten och selektiviteten hos den nigrostriatala vägen till oxidativ stress också leda till DNA-skada av dopaminerganeuronerhos patienter medParkinsons sjukdom [7].

Fenyletanoidglykosidextrakt iCistanchedeserticola kan avsevärt förbättra sammansättningen av 1-metyl-4-fenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin, MPTP)-inducerad PD modell C57 möss beteendeegenskaper, öka substantia nigra tyrosinhydroxylas (tyrosinhydroxylas, TH) upp till och DA-halt i striatum hos patienter medParkinsons sjukdom.Dessutom harcistanchefenyletanolglykosidextrakt har en bra hämmande effekt på minskningen av cerebellära granulas livsduglighet hos patienter medParkinsons sjukdomoch förhindrar MPP plus-inducerad cellapoptos av cerebellär granulneuronergenom att hämma aktiveringen av caspase-3 och caspase-8. Död, utöva sin anti-apoptotiska effekt.

Fomitopsis Pinicola är en medicinsk svamp som tillhör Polyporaceae och Pseudomonas. Den har en platt, lätt bitter smak och har farmakologiska effekter som antioxidation, antibakteriell, antitumör och immunförstärkning [8, 9]. Våra tidigare studier har bekräftat att vattenhaltiga extrakt av Fomitopsis Pinicola har en skyddande effekt på MPP plus-inducerad apoptos av dopaminerga celler i mellanhjärnan hos foster, vilket avsevärt kan öka antalet dopaminerganeuroneroch axonal längd, och Öka aktiviteten hos mitokondriella respiratoriska kedjekomplexenzym I[10].

I denna studie kommer vi att använda den Ferric-reducerande antioxidantkraftmetoden (FRAP) för att observera antioxidantkapaciteten hos vattenhaltiga extrakt av Fomitopsis Pinicola, och observera den antiinflammatoriska effekten av lipopolysackarid (LPS)-inducerad NO-frisättning i BV2 mikroglia. Effekterna av odlad mellanhjärna dopaminerganeuronerpå nukleär morfologi, mitokondriell membranpotential och ROS-produktion observerades in vitro, för att avslöja skyddsmekanismen för endomyceter på dopaminerganeuroner.

Material

Djur

14-Dagsgraviditetsmössen, OF1/SPF, från det österrikiska institutet för laboratoriedjur och veterinärgenetik, experimenterade med försöksdjur i enlighet med EU-kommissionens direktiv 86/609/EU.

Testprov

Fomitopsis Pinicola tillverkades i Österrike och identifierades av professor Wolf-Dieter Rausch som Footmitopsis Pinicola. Efter pulveriseringen av Fomitopsis Pinicola erhölls vattenextraktet genom extraktion med hett vatten, och innehållet av rå polysackarid var 8,95 procent.

cellinje

Musmikrogliomcellinje BV2, från Institutionen för biokemi, Wiens veterinäruniversitet, i DMEM-medium (Sigma) innehållande 10 procent fetalt bovint serum, 2 procent B27(Gibco), 2 procent glutamin, 37 grader 5 procent CO2-kultur.

cellodlingsmedium

BM(basmedium)medium till vilket DMEM-medium kompletterats med 10 procent fetalt bovint serum, 30 mM glukos, 2 mM glutamin, 1 procent streptomycin och 0,5 procent amfotericin.

huvudreagenser och instrument

MPP plus är en sigma-produkt, renhet Större än eller lika med 98 procent; anti-tyrosinhydroxylas (TH)primära och sekundära antikroppar är alla produkter av American Vectastain.TPTZ(2.4.6-terpyridine triazin), FeCl3·6H2O, FeSO4·7H2O är produkter av amerikansk sigma-Aldrich.DAPI-torklösning. JC-1-färgningslösning och C-DCDHF-DA-färgningslösning är alla produkter från Invitrogen Molecular Probes. Den ursprungliga lösningskoncentrationen var 1 mg/ml, Img/ml respektive 1 M. Fluorescensmikroskop, tillverkat av Nikon-företaget i Japan, modell TS-100-F. Spektrofotometer för Tyskland Pharmacia Biotech-produkter, modeller för Novaspec ⅡI.

Cistanchekan förhindraParkinsons sjukdom

metod

Bestämning av extraktens antioxidantkapacitet med FRAP-metoden

Efter beredning av 30 ml FRAP-arbetsvätska (300 mmol/L acetatbuffert, 10 mmol/L TPTZ-lösning, 20 mmol/L FeCly-lösningar blandade jämnt i ett volymförhållande av 10:1:1), 450 mu L FRAP-arbetande vätska tillsattes med olika koncentrationer av 60 ul vattenhaltiga extrakt av Fomitopsis Pinicola och 45 ul dubbelt förångat vatten. Blandning 37 grader C undviker ljusreaktion efter 30 minuter och bestämmer sedan dess absorbansvärden vid 593 nm. Den totala antioxidantkapaciteten för varje extrakt kvantifierades med Trolox som standard. Tre parallella analyser utfördes för varje prov. Resultaten uttrycktes som Trolox-ekvivalent (TEAC) (mol TEAC/g) per gram extrakt.

NO-frisättningsanalys användes för att detektera den antiinflammatoriska effekten av extraktet

De logaritmiska BV2-cellerna inokulerades i 48-brunnsplattor i en koncentration av 1 x 10 graders celler/ml. Efter inkubation i 37 grader och 5 procent CO2 tillsattes lipopolysackariden (LPS) för stimulering, slutkoncentrationen var 1 ug/ml. Därefter tillsattes olika koncentrationer av extraktet, och cellerna odlades vid 37 grader under 5 procent CO, under 48 timmar, varefter koncentrationen av NO, mättes. Innan rättegången. Griess-reagens A och B togs ut ur kylskåpet vid 4 grader C och fick komma i jämvikt vid rumstemperatur under 30 minuter. Nitritstandarderna späddes i serie (20, 10, 5, 2,1 och 0,5 uM) för att producera standardkurvor. Tillsätt 50 μL av den utspädda standarden och supernatanten av provet som ska testas (4 replikat för varje koncentration), tillsätt till 96-brunnsplattan och tillsätt sedan 50

uL av A-lösningen, inkubera vid rumstemperatur i 10 minuter i mörker och tillsätt 50 uL av B-lösningen. Efter inkubation i 10 minuter vid rumstemperatur i mörker, mättes absorbansen vid 550 nm med en mikroplattläsare inom 30 minuter, och frisättningen av NO i supernatanten beräknades enligt standardkurvan [11]. Samtidigt sattes 10 ul MTT (5 mg/ml i PBS-lösning) till varje brunn på cellplattan och odlades vid 37 grader för 5 procent CO, under 4 timmar. Efter att supernatanten kasserats sattes 100 ul DMSO till varje brunn, och absorbansen mättes vid 570 nm efter fullständig upplösning för att observera cellöverlevnadshastigheten.

Odling och identifiering av primära mellanhjärnans dopaminerga celler och läkemedelsbehandling

De gravida mössen avlivades och överfördes till en petriskål innehållande DPBS-buffert, musembryona dissekerades, mellanhjärnan isolerades, skars i små bitar och samlades upp i DPBS-buffert innehållande 2 ml 0 1 procent trypsin och 2 ml {{ 3}}.02 procent av DNase L Inkubera i 7 minuter i 37 graders vattenbad och tillsätt sedan 2 ml trypsinhämmare i en koncentration av 0.125 mg/ml, centrifugera vävnad vid 100 xg i 4 minuter och kassera supernatanten. Därefter tillsattes DMEM-medium innehållande 0,02 procent DNas I, och de separerade cellerna återsuspenderades i BM-cellodlingsmedium, ympades i polylysinbehandlade cellplattor och odlades vid 37 grader ,5 procent CO. På den 10:e odlingsdagen, 10 μM MPP* tillsattes till de odlade primära neuroncellerna för behandling, och sedan tillsattes 50.25.12.5 ug/ml vattenhaltigt extrakt av Fomitopsis Pinicola för behandling vid 37 grader, 5 procent CO, odlades i 48 timmar. På den 12:e odlingsdagen användes vissa celler för identifiering av dopaminerga neuroner, och cellerna fixerades med 4 procent paraformaldehyd vid 4 grader i 30 minuter och sedan permeabla i 30 minuter vid rumstemperatur med 0,4 procent Triton X{{ 33}}. Efter sköljning med PBS-buffert 3 gånger, blockerades den med hästserumblockerande lösning i 90 minuter, sedan tillsattes primär anti-TH-antikropp över natten, sedan tillsattes biotinylerad sekundär antikropp för rumstemperatur i 90 minuter, och slutligen 3,3 '-diaminobensidin (DAB, 5 mg/ml) utvecklades. Cellerna som var positiva för TH-färg observerades under mikroskopet som dopaminerga neuroner.

Observation av kärnmorfologi

MPP plus och läkemedelsbehandlade celler fixerades med 4 procent paraformaldehyd i 30 min, bröts sedan med 0,4 procent Triton X-100 i 30 minuter och tillsattes sedan med DAPI-färgningslösning vid en slutlig koncentration av 1 ug/ml i 5 min vid rumstemperatur. Morfologin hos kärnan observerades under ett fluorescensmikroskop. Excitationsvåglängden var 340 nm, och 4 fält valdes slumpmässigt ut för varje brunn.

Detektion av mitokondriell membranpotential

MPP plus och läkemedelsbehandlade celler sattes till JC-1 dve vid en slutlig koncentration av 10 ug/ml och inkuberades vid 37 grader i 15 minuter. Fluorescensintensitetsförändringarna observerades med fluorescensmikroskopi vid 488 nm respektive 568 nm excitationsljus. Förändringen i mitokondriell membranpotential mättes genom förhållandet mellan fluorescensintensiteten vid 568 nm och fluorescensintensiteten vid 488 nm.

ROS produktionstest

MPP plus och läkemedelsbehandlade celler sattes till C-DCDHF-DA dve vid en slutlig koncentration av 10 mM och efter inkubation vid 37 grader i 30 minuter kastades odlingslösningen och cellerna tvättades två gånger med ett färglöst DMEM-medium . Fluorescensmikroskopi användes för att observera förändringen av fluorescensintensiteten. Excitationsvåglängden var 488 nm, och 4 synfält valdes slumpmässigt ut för varje brunn. Tiden för exponering av cellerna för excitationsljuset var inte mer än 5 s.

Resultat

Antioxidantförmåga hos Fomitopsis Pinicola

Fomitopsis Pinicola har en uppenbar antioxidationseffekt, och dess vattenextrakt har en antioxidantkapacitet på （165,80±7,13）μmol TEACh-extrakt.

Antiinflammatorisk effekt av Fomitopsis Pinicola

Efter LPS-inducerade BV2-celler ökade frisättningen av NO signifikant, vilket var signifikant olikt det för den normala kontrollgruppen. Efter det vattenhaltiga extraktet av Fomitopsis Pinicola reducerades frisättningen av NO signifikant, bland vilka 100,50, 25, det fanns en signifikant skillnad mellan 12,5 ug/ml dosgruppen och LPS-gruppen (Fig. 1). Efter LPS-inducerade BV2-celler var cellöverlevnaden signifikant lägre än den för den normala kontrollgruppen. Efter verkan av det vattenhaltiga extraktet av Fomitopsis Pimicola hade 100 ug/ml dosgruppen en signifikant minskning av cellviabiliteten, och det fanns en signifikant skillnad jämfört med LPS-gruppen. Dosgruppen 50,25,12,5 ug/ml hade ingen signifikant effekt på cellviabiliteten (Figur 1, Figur 2).

Identifiering av mellanhjärnans dopaminerga neuroner hos fosterråttor

Efter den specifika TH-färgningen av de odlade mellanhjärnanuronerna från råttan, visade de dopaminerga neuronerna en tydlig brungul färg, och färgningen av cellkropparna och axonerna var tydligt synliga, vilket bevisade att de dopaminerga neuronerna odlades framgångsrikt (Figur 3) .

Figur 1 Effekter av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på frisättningen av NO i BV2-celler

inducerad av LPS

Obs: jämfört med den vanliga kontrollgruppen, **p < {{0}}.01;="" jämfört="" med="" lps-gruppen,="" ##p="">< 0,01,="" #p=""><>

Figur 2 påverkan av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på överlevnaden för BV2-celler

Obs: jämfört med den normala kontrollgruppen, **p < 0.01;="" jämfört="" med="" lps-gruppen,=""><>

Figur 3 TH - märkt mesencephalon DA-neuronfärgning

Effekt av Fomitopsis Pinicola på kärnmorfologi DAPI,4',6-diamidino-2-fenylindol, är ett fluorescerande dyk som penetrerar cellmembranet och binder konstigt till DNA. Resultaten av detta experiment visade att kärnorna hos dopaminerga neuroner i den normala kontrollgruppen förblev nästan intakt och kromatinet var enhetligt. MPP plus kontrollgruppen visade signifikant kromatinkondensation, nukleär membranlys och nukleär lysis. Efter verkan av det vattenhaltiga extraktet av Fomitopsis Pinicola var morfologin hos kärnan relativt intakt och egenskaperna hos apoptos reducerades (Figur 4).

Effekt av Fomitopsis Pinicola på mitokondriell membranpotential

Efter MPP plus induktion minskade den mitokondriella membranpotentialen för dopaminerga neuroner signifikant, vilket var signifikant olikt den för den normala kontrollgruppen (P<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" mitochondrial="" membrane="" potential="" decreased="" after="" mpp+="" induction.="" there="" was="" a="" significant="" increase="" in="" mitochondrial="" membrane="" potential="" in="" the="" 50,="" 25,="" and="" 12.5ug/ml="" dose="" groups="" compared="" with="" the="" mpp+="" control="" group=""><0.01,><0.05)(figure>

Effekt av Pseudomonas Sinensis på ROS-produktion

Efter MPP plus induktion ökade ROS-produktionen av dopaminerga neuroner signifikant. vilket skilde sig signifikant från den normala kontrollgruppen (P<0.01). after="" the="" action="" of="" the="" aqueous="" extract="" of="" fomitopsis="" pinicola,="" the="" ros="" increased="" after="" mpp+induction.="" the="" reduction="" of="" ros="" production="" in="" the="" 50="" and="" 25="" ug/ml="" dose="" groups="" was="" significantly="" different="" from="" the="" mpp+control="" group=""><0.01)(figure 6,="" figure="">

Figur 4. DAPI-fluorescensfärgningsavbildning av DA-neuroner i mesencefaliska

Figur 5 Effekten av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på MPP plus-inducerad mitokondrie

membranpotentialen hos mesencefaliska DA-neuroner

Obs: Jämfört med den normala kontrollgruppen, **P < {{0}}.01;="" jämfört="" med="" mpp="" plus="" kontrollgrupp,="" #="" #="" p="">< 0,01,="" #="">

0.05.

Figur 6. C-DCDHF-DA fluorescensfärgning av DA-neuroner i mesencefaliska

Figur 7 effekter av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på MPP plus-inducerad mesencefalisk DA

neuron ROS produktion

Obs: jämfört med den normala kontrollgruppen, **P < {{0}}.01;="" jämfört="" med="" mpp="" plus="" kontrollgrupp,="" #="" #="" p=""><>

Slutsats

Degenerationen av dopaminerga neuroner (DA-neuroner) i mellanhjärnan går förlorad och Lewy-kroppen i cytoplasman hos kvarvarande neuroner är huvuddraget iParkinsons sjukdom.De kliniska symtomen inkluderar främst statisk tremor, bradykinesi, hypermyotoni, hållningsinstabilitet, et al. För närvarande är behandlingen avParkinsons sjukdomdomineras fortfarande av dopaminersättningsterapi. Även om det kan förbättra symtomen hos patienter, förhindrar det inte utvecklingen av sjukdomen. Den långsiktiga applikationen kommer att orsaka många biverkningar [12], så studiet av nya terapeutiska metoder är absolut nödvändigt. Studier har visat att oxidativ stress och oxiderade dopaminnivåer är viktiga orsaker till selektiv skada på dopaminerga neuroner [13], och vissa naturliga antioxidanter som quercetin, curcumin, tepolyfenoler, et al har bekräftats vara dopamin orsakad av nervämnen. Neuronala skador har uppenbara skyddande effekter [14-16], så det är lovande att screena läkemedel för behandling avParkinsons sjukdomfrån traditionella kinesiska mediciner med antioxidant farmakologiska effekter.

I den här studien användes FRAP för att detektera antioxidantkapaciteten hos vattenhaltiga extrakt av Fomitopsis Trolox Pinicola med hjälp av (6-hydroxi-2,5,7,8-tetrametylkroman)2- karboxylsyra) visade sig ha betydande antioxidanteffekter. Den antiinflammatoriska effekten av vattenhaltiga extrakt som upptäckts är Pinicolawas Fomitopsis dby lipopolysackarid-inducerad BV2 mikroglia release NO-metod, och det fanns ingen signifikant effekt på cellviabiliteten vid koncentrationer under 100 ug/ml, vilket indikerar att det fanns i gliaceller som har signifikant anti- inflammatoriska effekter och har ingen signifikant effekt på cellöverlevnad.

Oxidativ stress hänvisar till obalansen mellan produktion och eliminering av syrefria radikaler i kroppen. Det är en tidig händelse i processen av neuronal degeneration-apoptos. Studier har visat att hjärnvävnad är rik på fosfolipider och omättade fettsyror, som båda är mottagliga för oxidativ stress. Hos patienter medParkinsons sjukdom, Malondialdehyd, lipidperoxidationsindex, i striatum är signifikant ökad, medan koncentrationen av fleromättade. fettsyror minskade signifikant [17], halten av glutation (GSH) minskade och funktionen av mitokondriella respiratoriska kedjekomplex enzym I var nedsatt [18,19]. MPP plus är en metabolit av det neurotoxiska medlet MPTP i kroppen, som kan generera fria radikaler i kroppen, hämma mitokondriell funktion, förstöra DA-neuroner i substantia nigra och utveckla symtom påParkinsons sjukdomi djurmodeller. NO är också involverat i skademekanismen för MPP plus. Överdriven NO diffunderar in i DA-neuroner, vilket kan nitrosera med enzymets sulfhydrylställe och hämma mitokondriella respiratoriska kedjas komplex enzym I-aktivitet [20,21].

Resultaten av denna studie visade att efter MPP plus inducerade primärodlade DA-neuroner, visade kärnan uppenbar apoptos, mitokondriell membranpotential minskade och ROS-produktionen ökade signifikant, vilket indikerar att MPP plus kan inducera apoptos av DA-neuroner genom att hämma mitokondriell oxidativ stress. vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola a kan förbättra morfologin hos dopaminerga neuroner efter MPP plus induktion, öka mitokondriell membranpotential och minska ROS-produktion, vilket indikerar att vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola hämmar skadan på mellanhjärnans DA-neuroner skadade av nervämnen, vilket kan vara relaterat till dess antioxidation och hämning av NO-produktion, och skyddar neuroner genom att hämma mitokondriell oxidativ stress.

Referenser

1. Khan AU, Akram M, Daniyal M, et al. Medvetenhet och aktuell kunskap om Parkinsons sjukdom: En neurodegenerativ störning. Int J Neurosci 2018, 8: 1-64.

2. Klingelhoefer L, Reichmann H. Parkinsons sjukdom som en multisystemstörning. J Neural Transm (Wien) 2017, 124: 709-713.

3. Choi DH, Cristóvão AC, Guhathakurta S, et al. NADPH-oxidas 1-medierad oxidativ stress leder till dopaminneurondöd vid Parkinsons sjukdom. Antioxid Redox Signal 2012, 16: 1033-1045.

4. Asaithambi A, Ay M, Jin H, et al. Proteinkinas D1 (PKD1)-fosforylering främjar dopaminerg neuronal överlevnad under 6-OHDA-inducerad oxidativ stress. PLoS One, 2014, 9: e96947.

5. Berndt N, Bulik S, Holzhütter HG. Kinetisk modellering av den mitokondriella energimetabolismen hos neuronala celler: Inverkan av reducerade -ketoglutaratdehydrogenasaktiviteter på ATP-produktion och generering av reaktiva syrearter. Int J Cell Biol 2012, 2012: 757594.

6. Yan MH, Wang X, Zhu X. Mitokondriella defekter och oxidativ stress vid Alzheimers sjukdom och Parkinsons sjukdom. Free Radic Biol Med 2013, 62: 90-101.

7. Guo C, Sun L, Chen X, Zhang D. Oxidativ stress, mitokondriell skada och neurodegenerativa sjukdomar. Neural Regen Res 2013, 8: 2003-2014.

8. Hao L, Sheng Z, Lu J, et al. Karakterisering och antioxidantaktiviteter av extracellulära och intracellulära polysackarider från Fomitopsis Pinicola. Carbohydr Polym, 2016, 141: 54-59.

9. Shah F, Mali T, Lundell TK. Polyporales Brown Rot Art Fomitopsis Pinicola: Enzyme Activity Profiles, Oxalic Acid Production, and Fe3 plus -Reducing Metabolite Secretion.Appl Environ Microbiol, 2018, 84: e02662-17.

10. Guo SS, Wolf D. Studie om neuroprotektiva effekter av vattenextrakt av Fomitopsis Pinicola på dopaminerga neuroner in vitro. Chin J Pharmacovigil 2018, 15: 582-586.

11. Khaled Radad, Rudolf Moldzio, Wolf-Dieter Rausch. Toxicitet Minocyklin skyddar dopaminerga neuroner mot långvarigt rotenon. Can J Neurol Sci 2010, 37: 81-85.

12. Rizek P, Kumar N, Jog MS. En uppdatering om diagnos och behandling av Parkinsons sjukdom. MAJ 2016, 188: 1157-1165.

13. Crotty GF, Ascherio A, Schwarzschild MA. Inriktning på urat för att minska oxidativ stress vid Parkinsons sjukdom. Exp Neurol 2017, 298: 210-224.

14. Ay M, Luo J, Langley M, et al. Molekylära mekanismer som ligger bakom skyddande effekter av quercetin mot mitokondriell dysfunktion och progressiv dopaminerg neurodegeneration i cellkultur och MitoPark transgena musmodeller av Parkinsons sjukdom. J Neurochem 2017, 141: 766-782.

15. Wang MS, Boddapati S, Emadi S, et al. Curcumin minskar alfa-synuklein-inducerad cytotoxicitet i cellmodellen för Parkinsons sjukdom. BMC Neurosci 2010, 11:57.

16. Weinreb O, Amit T, Mandel S, et al. Neuroprotektiva molekylära mekanismer för (-)-epigallocatechin-3-gallat: ett reflekterande resultat av dess antioxidant, järnkelaterande och neuritogena egenskaper. Genes Nutr 2009, 4: 283-296.

17. Dawson TM, Ko HS, Dawson VL. Genetiska djurmodeller av Parkinsons sjukdom. Neuron 2010, 66:646-61.

18. Bodis-Wollner. Retinopati vid Parkinsons sjukdom. J Neural Transm (Wien) 2009, 116: 1493-1501.

19. Hisahara S, Shimohama S. Toxin-inducerade och genetiska djurmodeller av Parkinsons sjukdom. Parkinsons Dis. 2010, 2011: 951709.

20. Yang S, Liu T, Li S, et al. Jämförande proteomisk analys av hjärnor hos naturligt åldrande möss. Neuroscience 2008, 154: 1107-1120.

21. Gautier CA, Corti O, Brice A. Mitokondriella dysfunktioner vid Parkinsons sjukdom. Rev Neurol (Paris) 2014, 170:339-343.