Nya glykosider från Cistanche Salsa
Mar 11, 2022
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Li Leia, Yong Jiangaet al
Sex nyaglykosider, salsasidorna A – F (1–6, resp.), isolerades från stjälkarna påCistanche salsa, tillsammans med sju kända glykosidföreningar. Deras strukturer klargjordes med hjälp av esterhydrolys och kemisk derivatisering, djupgående NMR-spektroskopiska och masspektrometriska analyser och genom jämförelse med litteraturdata för besläktade föreningar. Den nyaglykosiderär baserade på bD-glukos (Glc) och aL-ramnos (Rha), bärande acetyl (Ac), bensyl (Bn), fenetyl, kumaroyl (Cou) och koffeoyl (Caf) substituenter.
Cistanche salsa har många effekter
Introduktion
– Cistanche salsa(CA MEY.) G. BECK, en av arterna av HerbaCistanche, är en kort parasitisk Orobanchaceae-växt med ursprung i nordvästra Kina. Som en viktig tonic inom traditionell kinesisk medicin (TCM) har stjälkarna från Herba Cistanche länge använts av kineser och japaner mot njurbrist, kvinnlig infertilitet, sjuklig leukorré, neurasteni och senil förstoppning på grund av kolontröghet, etc. [1 ]. Precis som i andra Cistanche-anläggningar, fenetylbaseradglykosiderär de huvudsakliga aktiva beståndsdelarna i C. salsa. Dessa föreningar rapporterades ha neuroprotektiv aktivitet mot 1-metyl-4-fenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP)-inducerad dopaminerg toxicitet i C57-möss [{{ 8}}]. Det finns bara ett fåtal fytokemiska studier om C. salsa, de första som går tillbaka ca. 20 år [5-8]. 1995, Moriya et al. [9] [10] rapporterade att växtmaterialet avCistanche salsahade identifierats felaktigt när han undersökte källorna till HerbaCistanchefrån en japansk medicinsk marknad [9] [10]. Därför är det nödvändigt att på nytt undersöka de kemiska beståndsdelarna i C. salsa.
I föreliggande arbete påCistanche salsa, rapporterar vi isoleringen och strukturbelysningen av sex nyaglykosider, salsasidor AF (1-6), med olika substituenter, inklusive acetyl (Ac), bensyl (Bn), caffeoyl (Caf) och kumaroyl (Cou) rester. Också isolerade från samma extrakt var följande sju kändaglykosider:tubulosid B [11], akteosid [6], isoakteosid [11], 2'-acetylakteosid [7], echinakosid [6], cistanosid C [7] och cistanosid D [7].
Resultat och diskussion
– Förening 1 isolerades som ett amorft pulver och dess molekylformel härleddes som C28H34O13 av HR-ESI-MS (m/z 596.2348)([M plus NH4] plus; beräkn. 596,2343). 1H-NMR-data för 1 (tabell 1) uppvisade karakteristiska signaler för en (E)-konfigurerad caffeoyl (Caf)-grupp, med aromatiska signaler av ABX-typ vid d(H) 7. 07 (br. s), 6,76 (br. d, J=8,5 Hz) och 7.03 (d, J=8,5 Hz), två olefiniska H-atomer vid d (H) 7,51 (d, J=16.0) och 6,34 (d, J=16,0 Hz), och en Bn-del med fem aromatiska resonanser och två icke-ekvivalenta H-atomer vid d(H) 4,59, 4,77 (2d, J=12},0 Hz vardera), vilket antydde att 1 var en Bn-substituerad förening [12].
Total syrahydrolys av 1 gav ramnos (Rha) och glukos (Glc). NMR-data för 1 liknade de för tubulosid B [11], förutom att signalerna från en 3,4-dihydroxifenyletanolenhet ersattes med signalerna från en Bn-grupp. I HMBC-spektrumet 1, korrelationer mellan de två icke-ekvivalenta H-atomerna vid d(H) 4,59, 4,77 (a-CH2 av aglykon) och d(C) 101,7 (C(1') av Glc), av båda d(H) ) 4,40 (br. d, J=11,5 Hz, 1 H av CH2(6')) och 4,23 (m, 1 H av CH2(6')) med d(C) 166,6 (C( a') av ester), och av d(H) 5,04 (br. s, HC(1'')) och d(C) 80,8 (C(3')) etablerade kopplingarna mellan aglykonen, estern och sockret delar.
Cistanche salsa
På basis av ovanstående spektroskopiska bevis, i kombination med 2D-NMR-data, klargjordes strukturen av 1 som bensyl 6-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxi fenyl)-prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid1), och benämnd salsasida A.
Förening 2 isolerades som ett amorft pulver och dess molekylformel bestämdes som C28H34O13 med HR-ESI-MS (m/z 596,2345 ([M plus NH4] plus )). Den enda skillnaden mellan 1 och 2 var att Caf-delen var fäst vid 4'-position i 2 istället för vid 6'-position. Detta var uppenbart i HMBC-spektrumet av 2, där signalen vid d(H) 4,96 (t, J=9.0 Hz, HC(4')) var korrelerad med d(C) 167,3 ( C=O från Caf), och bekräftas ytterligare genom jämförelse med NMR-data för 2'-acetylakteosid [4]. Således identifierades förening 2 som bensyl 4-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-Oa-Lrhamnopyranosyl -bD-glukopyranosid, och heter salsa sida B.
Salsaside C(3) isolerades som ett amorft pulver och dess molekylformel klargjordes som C28H34O12 av HR-ESI-MS (m/z 561.1958 ([MH]; beräkn. 561.1972)). NMR-data för 3 liknade de för 2, förutom att signalerna från Caf-gruppen ersattes med de från en (E/Z)-kumaroyl (Cou)-del (se tabell 1). Närvaron av en (E/Z)-blandningen som indikeras av delade (2,38:1) NMR-resonanser såväl som genom toppfördubbling i HPLC-kromatogrammet, ett fenomen som tidigare rapporterats i en del fenetylglykosider[13] [14]. I HMBC-spektrumet 3, korrelationer mellan de två icke-ekvivalenta aglykon a-CH2-resonanserna vid d(H)4,62, 4,87 (2d, J{{10}},5 Hz vardera) och d(C) 103,2 ( C(1')), mellan d(H) 4,75/4,71 (t, J=7,5 Hz, HC(4')) och d(C) 168,3/166,0 (C=0 av Cou), och mellan d(H) 5,02 (br. s, HC(1'')) och d(C) 80,8 (C(3')) etablerade kopplingarna mellan aglykonen, estern och sockerdelarna . Således klargjordes strukturen av förening 3 som bensyl 4-O-[(E/Z)-3-(4-hydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3- OaL-rhamnopyranosyl-b-Dglucopyranoside, och benämnd salsasida C.
Salsaside D (4) erhölls som ett amorft pulver och dess molekylformel bestämdes som C31H38O15 med HR-ESI-MS (m/z 668.2563 ([M plus NH4] plus; beräknat 668.2554). 1H-NMR-spektrumet 4 (tabell 2) uppvisade signaler som är karakteristiska för en (E)-Caf-grupp och för en (4-hydroxifenyl)etoxigrupp [d(H) 2,65 (m, 2 H), 3,55 (m, 1 H), 3,9 0 (m, 1 H), 6,64 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 6,97 (d, J=8.{{58} } Hz, 2 H)] Total syrahydrolys av 4 gav Rha och Glc. Fragmentjontoppen observerades i det negativa FAB-masspektrat vid m/z 43, och NMR-signalerna vid d(H) 1,95 (s, 3 H) ), och vid d(C) 169,3 och 20,7, indikerade närvaron av en Ac-grupp. 1H- och 13C-NMR-data var mycket lika de för syringalid A 3'-aL-rhamnopyranosid, förutom en ytterligare Ac-signal [ 15]. I HMBC-spektrumet 4 var signalen vid d(H) 4,68 (t, J=9.0 Hz, HC(2')) korrelerad med d(C) 169,3 (C{{62} }O av Ac), vilket indikerade att Ac-delen var kopplad till C(2) i Glc. Således är strukturen e av förening 4 klargjordes som 2-(4-hydroxifenyl)etyl 2-O-acetyl-4-O-[(E)-3-(3,{{ 73}}dihydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-Oa-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid, och namngiven salsasida D.
Innehållet iCistanche salsa
Förening 5 isolerades som ett amorft pulver och dess molekylformel bestämdes som C32H40016 med HR-ESI-MS (m/z 679.2228 ([MH]; beräknat 679.2238). 1H- och 13C- NMR-data för 5 (tabell 2) liknade mycket de för 4, förutom signalerna för fenetyldelen. I IH-NMR-spektrumet på 5 fanns ett AMX-system [d(H) 6,63 (d, J{ {22}}.0 Hz, 1 H), 6,69 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 6,77 (br. s, 1 H)] och en MeO-signal vid d(H) 3,85 (s, 3 H). I HMBC-spektrumet var MeO-signalen korrelerad med d(C) 148,7 (C(3)), vilket i sin tur korrelerade med d(H) 6,69 ( d, J=8.0 Hz, HC(5)) och 6.77 (br. s, HC(2)). Därför var MeO-substituenten vid C(3) av fenetyldelen, vilket bekräftades genom jämförelse med litteraturdata [7]. Därför klargjordes strukturen av förening 5 som 2-(4-hydroxi-3-metoxifenyl)etyl2-O-acetyl-4- O-[(E)-3-(3,4-dihydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid och namngiven salsasida E.
Förening 6 isolerades som ett amorft pulver och dess molekylformel bestämdes som C31H38O15 genom HR-ESI-MS (m/z 668,2543 ([M plus NH4] plus; beräknat 668,2554)). signaler som är karakteristiska för en (E)-Cou-grupp [d(H)6,35 och 7,46 (2d, J{{20}}.0 Hz vardera, 1 H vardera), 6,69 (d, J=7,5 Hz, 2 H), 7,45 (d, J{{30}},5 Hz, 2 H)], av en (3,4-dihydroxifenyl) etoxidel [d(H) 6,31 (br. d, J=8.0 Hz, 1 H), 6.46 (br. s, 1 H), 6.49 (br. d, J=8. 0 Hz, 1 H), 2,49 (m,CH2), 3,41 och 3,72 (2m, 1H vardera)], och av två anomera resonanser [d(H) 4,45 (d, J=8,5 Hz, HC (1')), 4,55 (be.s, HC(1''))]. Liksom i 4 och 5 fanns det också en AcO-grupp närvarande i 6 [d(H) 1,88 (s, 3 H); d(C) 169,2, 20,6], vilket var vid C(2') av Glc-delen, såsom bestämt med HMBC-experiment. I HMBC-spektrumet observerades korrelationer mellan signalerna för CH2(6') och d(C) 166,6 (C=O för Cou), mellan d(H) 3,41, 3,72 (2m, a-CH2 av aglykon) och d(C) 99,5 (C(1')), och mellan d(H) 4,55 (br. s, HC(1'')) och d(C) 68,8 (C(3')), från som alla kopplingar upprättades. Således bestämdes strukturen för förening 6 som 2-(3,4-dihydroxifenyl)etyl 2-O-acetyl-6-O-[(E){{105} }(4-hydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid och namngiven salsasida F.
I föreningarna 1–6 härleddes konfigurationen vid det anomera mitten av Glc-resten till b från J-värden på 7,5 – 8,5 Hz. När det gäller Rha-resterna härleddes den anomera konfigurationen genom jämförelse av de relevanta 13C-NMR-data med de som ges i litteraturen [6]. De absoluta konfigurationerna av sockerarterna, DGlc och L-Rha, bestämdes genom GC-analys av kirala derivat (se experimentdel) i jämförelse med standardmonosackarider [16].
Denna studie fick ekonomiskt stöd av Kinas nationella naturvetenskapsfond (nr 30070887). Vi tackar vänligt Dr Haiming Shi för hjälp under manuskriptberedningen.
Cistanche salsaProdukter
Experimentell del
Allmän. Kiselgel (200–300 mesh; Qing Dao Hai Yang Chemical Group, Co.), Sephadex LH-20(Pharmacia), D101-harts (Tianjin Chemical, Co.) och ODS (100) – 200 mesh; Fuji Sylisia Chemical, Ltd.) användes för kolonnkromatografi (CC). Prep. HPLC utfördes på ett Waters-600-instrument med användning av en RP-C18-kolonn (10 M 250 mm id; Alltech) vid en flödeshastighet av 2,5 ml/min (UV-detektion vid 330 nm). GC-analys utfördes på en Agilent-6890N gaskromatograf, med användning av en HP-5 kapillärkolonn (28 m M 0,32 mm id), en FID-detektor vid 260 grader och en kolonntemperatur. på 180 grader, med en N2-bärargas och flödeshastighet på 40 ml/min. UV-spektra registrerades på en Shimadzu-spektrometer; λmax (log e) i nm. Optiska rotationer bestämdes på en Perkin-Elmer 243B digital polarimeter. IR-spektra registrerades på en Nicolet Avatar-360 FT-IR-spektrometer; i cm-1. NMR-spektra registrerades i CD3OD eller (D6)DMSO på en Bruker AM-500-spektrometer; d i ppm rel. till Me4Si, J i Hz. FAB- och HR-ESI-masspektra registrerades på KYKY-ZHP-5 och Bruker APEX-masspektrometrar, resp.
Växtmaterial. Stjälkarna avCistanche salsasamlades in från Yanchi, den autonoma regionen Ningxia Hui, Kina, i april. Anläggningen identifierades av Prof. Peng-Fei Tu, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University. Ett kupongexemplar deponerades på Herbarium vid Peking University Modern Research Centre for Traditional Chinese Medicine.
Extraktion och isolering. De torkade stjälkarna avCistanche salsa(8,0 kg) extraherades med 75 procent aq. EtOH (80l) vid rumstemperatur genom perkolering. Lösningsmedlet avlägsnades, återstoden suspenderades i H2O (4 1) och extraherades med petroleumeter (PE; 12 1), AcOEt (12 1) och BuOH (12 1) för att ge, efter avlägsnande av lösningsmedel, 1{{ 27}}0 g PE-, 99 g AcOEt- och 1{{60}}0 g BuOH-lösligt extrakt, resp. En del av det AcOEt-lösliga extraktet (90 g) utsattes för CC (Si02; CHCl3/MeOH 0:1→1:2) för att ge 75 fraktioner (Fr.). Fr. 51 – 53 (6,0 g) kombinerades (=Fr. A) och omkromatograferades (Sephadex LH-20; MeOH/H2O 1:1) för att ge elva subfraktioner (Fr. A1 –A11). Fr. A6 och Fr. A7 kombinerades (2,5 g; Fr. B) och återutsattes för CC (ODS; MeOH/H2O 1: 9 – 5: 5) för att ge 35 ytterligare fraktioner (Fr. B1 – B35). Fr. B16 – B25 kombinerades (0,5 g; Fr. C) och omkromatograferades (Sephadex LH-20; sedan förberedd HPLC, MeCN/MeOH/H2O 10 : 18 : 75) för att ge tubulosid B [11] (55 mg ). Fr. B26 – B32 (0,35 g) kombinerades (0,35 g, Fr. D) och omkromatograferades (Sephadex LH-20; 20 procent aq. MeOH) för att ge sju fraktioner (Fr. D1 – D7). Fr. Dl (70 mg) renades genom prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 26 : 72) för att ge 2 (23 mg), 3 (8 mg) och cistanosid C [7] (12 mg). Fr. D3 (45 mg) renades genom prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 20 : 70) för att ge 6 (22 mg). Fr. D4 (36 mg) renades genom prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 9 : 18 : 73) för att ge 5 (20 mg). Fr.D5 (55 mg) renades genom prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 24 : 66) för att ge 1 (28 mg). Fr. D7 (40 mg) renades genom prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 16 : 74) för att ge 4 (18 mg). Den ursprungliga Fr.54 och Fr. 55 kombinerades och renades genom upprepad CC (Sephadex LH-20) för att ge akteosid [6] (0,1 g) och 2'-acetylakteosid (8,9 mg) [10]. Fr. 56 – 58 kombinerades och renades genom upprepad CC (Sephadex LH-20 och ODS) för att ge isoacteosid (25 mg) [11] och cistanosid D (32 mg) [7]. Fr. 59 – 64 kombinerades och renades genom upprepad CC (Sephadex LH-20) och prep. HPLC (MeCN/MeOH/H2O 10 : 15 : 84) för att ge echinakosid (33 mg) [6].
SalsasideA(=bensyl6-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosylb -D-glukopyranosid; 1). Amorft pulver. UV (MeOH): 328 (3,50). [a]20D=35.6 (c=0.1, MeOH).IR (KBr): 3421, 1690, 1628, 1605, 1520. IH- och 13C-NMR: se tabell 1. FAB-MS: 577 ([MH]-). HRESI-MS: 596,2348 ([M plus NH4] plus, C28H38NO plus 13; beräknat 596,2343).
SalsasideB(=bensyl4-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosylb -D-glukopyranosid; 2). Amorft pulver. UV (MeOH): 332 (3,20). [a]20D=35.6 (c=0.1, MeOH).IR (KBr): 3411, 1692, 1630, 1600, 1514. IH- och 13C-NMR: se tabell 1. HR-ESI-MS: 596,2345 ([M plus NH4] plus, C28H38NO plus 13; beräknat 596,2343).
SalsasideC(=4-O-[(E/Z)-3-(4-Hydroxifenyl)prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid; 3 ). Amorft pulver. UV (MeOH): 315 (3,23), 225 (1,80). IR (KBr): 3432, 1689, 1628, 1609, 1519. IH- och 13C-NMR: se Tabell 1. HR-ESI-MS: 561,1958 (([MH]-), C28H33O-12; beräkn. 561.1972).
SalsasideD(=2-(4-Hydroxifenyl)etyl2-O-acetyl-4-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxifenyl) prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid;4). Amorft pulver. UV (MeOH): 328 (3,40). [a]20D=58.3 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3397, 1720, 1692, 1630, 1596, 1512. 'H- och 13C-NMR: se tabell 2. FAB-MS: 649 ([MH]-), 443 ([MH-Ac-Caf] -). HR-ESI-MS: 668,2563 ([M plus NH4] plus, C31H42NOþ15; beräknat 668,2554).
SalsasideE(=2-(4-Hydroxi-3-metoxifenyl)etyl2-O-Acetyl-4-O-[(E)-3-(3,{ {9}}dihydroxifenyl)-prop-2-enoyl]-3-OaL-ramnopyranosyl-bD-glukopyranosid;5). Amorft pulver. UV (MeOH): 330 (3,21). [a]20D=33.3 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3370, 1721, 1690, 1630, 1600, 1514. IH- och 13CNMR: se tabell 2. FAB-MS: 679 ([MH]-), 533 [MH-Rha]-). HR-ESI-MS: 679,2228 ([MH]-, C32H39O-16; beräknat 679,2238).
SalsasideF(=2-(3,4-dihydroxifenyl)etyl2-O-acetyl-6-O-[(E)-3-(4-hydroxifenyl) prop-2-enoyl]-3-OaL-rhamnopyranosyl-bD-glukopyranosid; 6). Amorft pulver. UV (MeOH): 315 (3,28). [a]20D=38.5 (c=0.1, MeOH). IR (KBr): 3416, 1725, 1690, 1630, 1600, 1510. IH- och 13C-NMR: se tabell 2. FAB-MS: 649 ([MH]-). HR-ESI-MS: 668,2543 ([M plus NH4] plus, C31H42NO plus 15; beräknat 668,2554).
Syrahydrolys och bestämning av absolut sockerkonfiguration. Föreningen (3 mg) placerades i ett förseglat rör och hydrolyserades med 2N aq. CF3COOH (5 ml) genom att värma på ett vattenbad i 3 timmar [16]. Efter nedkylning späddes blandningen med H2O (15 ml) och extraherades med CHCI2 (3 M 5 ml). Den aq. skiktet indunstades upprepade gånger till torrhet med MeOH tills det var neutralt. Sockerarterna identifierades genom sam-TLC med autentiska prover, eluering med BuOH/AcOH/H2O4 : 2:1, och detekterades genom sprayning med anisaldehyd/H2SO4, följt av upphettning. Rf-värdena för glukos (Glc) och ramnos (Rha) var 0.54 och 0.69, resp.
Magen. sockerkonfigurationer bestämdes enligt följande. Till en soln. av sockerresten i pyridin (60 ml), erhållen från hydrolysen, tillsattes L-cysteinmetylesterhydroklorid och hexametyldisilazan/Me3SiCl 3:1. Blandningen omrördes vid 608°C i 30 min. Den resulterande fällningen avlägsnades genom centrifugering och supernatanten koncentrerades och fördelades mellan hexan och H2O. org. skiktet analyserades sedan med GC. Genom jämförelse med standardmonosackarider identifierades D-Glc (tR 12,45 min) och L-Rha (5,32 min) för 1–6.
Cistanche salsaextrahera
Från: 'NyGlykosiderfrånCistanche salsa' av Li Leia, Yong Jiangaet al ---2007 Verlag Helvetica Chimica Acta AG, ZIrich
--- Helvetica Chimica Acta – Vol. 90 (2007)
REFERENSER
[1] Pharmacopoeia Editing Committee, 'Chinese Pharmacopoeia', Chemical Industry Publisher, Beijing, 2000, Vol. 1, sid. 103.
[2] XC. Geng, LW. Låt, XP. Pu, PF. Tu, Biol. Pharm. Tjur. 2004, 27, 797.
[3] XP. Pu, ZH. Sång, YY. Li, PF. Tu, HN. Li, Planta Med. 2003, 69, 65.
[4] GQ. Sheng, XP. Pu, L. Lei, PF. Tu, CL. Li, Planta Med. 2002, 68, 966.
[5] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Tjur. 1984, 32, 1729.
[6] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Tjur. 1984, 32, 3009.
[7] H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase, S. Fukushima, Chem. Pharm. Tjur. 1984, 32, 3880.
[8] H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase, S. Fukushima, Yakugaku Zasshi 1986, 106, 721.
[9] A. Moriya, PF. Tu, D. Karasawa, H. Arima, T. Deyama, K. Kegasawa, Nat. Med. 1995, 49, 383.
[10] A. Moriya, PF. Tu, D. Karasawa, H. Arima, T. Deyama, K. Hayashi, Nat. Med. 1995, 49, 394.
[11] H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani, M. Ahmad, Chem.
Pharm. Tjur. 1987, 35, 3309.
[12] N.-D. Tommasi, L. Rastrelli, J. Cumanda, G. Speranza, C. Pizza, Phytochemistry 1996, 42, 163.
[13] T. Miyase, R. Yamamoto, A. Ueno, Phytochemistry 1996, 43, 475.
[14] ZJ. Jia, JJ. Gao, ZM. Liu, Indian J. Chem., Sect. B 1994, 33, 460.
[15] F. Yoshizawa, T. Deyama, N. Takizawa, Chem. Pharm. Tjur. 1990, 38, 1927.
[16] M. Haddad, T. Miyamoto, V. Laurens, M.-A. Lacaille-Dubois, J. Nat. Driva. 2003, 66, 372.
